3%过氧化氢溶液+柠檬酸盐缓冲液在脱黑色素中的应用

目的探讨3%过氧化氢溶液+柠檬酸盐缓冲液在脱黑色素中的应用。方法取7例含黑色素的黑色素瘤组织切片,每例组织标本均连续切取4μm切片20张,均分别经3种方法脱黑色素处理,一组不经脱色素处理,分别命名为A组、B组、C组、D组,A组采用3%过氧化氢溶液微波加热法,B组用3%过氧化氢溶液+柠檬酸盐缓冲液微波加热法,C组用酸化高锰酸钾室温法,D组不进行脱黑素处理。对比4组HE和免疫组化染色结果。结果富含黑色素的组织标本经3%过氧化氢溶液+柠檬酸盐缓冲液微波加热法处理后,脱片率最低,HE中未观察到明显的细胞结构及形态的变化,细胞核、胞质染色正常,核浆对比明显,对HE染色结果影响最小。免疫组化结果中,A组阳性强度和阳性率均较B组偏弱,细胞结构破坏明显。B组组织阳性强度及阳性率较D组一致。C组掉片严重,少见阳性表达。D组不经脱色素处理,判读易受色素影响。免疫组化指标HMB45、Melan A、S-100、Ki-67中,符合率最高的为B组。结论富含黑色素的组织标本经3%过氧化氢溶液+柠檬酸盐缓冲液微波加热法处理后,对HE和免疫组化染色结果的影响最小,效果最佳,值得在临床病理中广泛推广使用。

一种新型血清蛋白电泳缓冲液的替代研究

目的探究可替代巴比妥缓冲液的新型血清蛋白电泳缓冲液。方法通过不同电压、电泳时间梯度的电泳,筛选新型电泳缓冲液的最佳试验条件;比较新型电泳缓冲液与巴比妥缓冲液分离血清蛋白的图谱效果、蛋白区带分散程度及各组蛋白质相对含量。结果新型电泳缓冲液在电压为70V、电泳时间为50min时,电泳图谱稳定且重复性更好,其图谱出现5条区带的比率比巴比妥缓冲液高23.14%、蛋白区带分散程度适中。新型缓冲液膜条扩展的总距离、最远区带与最近区带的距离均短于巴比妥缓冲液,差异有统计学意义(P<0.05)。新型缓冲液与巴比妥缓冲液点样区距第一条带远端的距离比较差异无统计学意义。两种缓冲液分离的各组蛋白相对含量比较差异无统计学意义。结论新型电泳缓冲液分离血清蛋白图谱区带清晰、重复性好、结果稳定,电泳图谱效果、蛋白区带分散程度优于巴比妥缓冲液,且在电压为70V、电泳时间为50min试验条件下,与巴比妥缓冲液分离的各种蛋白含量差异不显著,可替代其用于血清蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳实验中。

不同pH磷酸缓冲液对茶饮料中茶多酚含量的影响

为了探究国标《茶饮料》(GB/T 21733—2008)附录A检测方法中磷酸缓冲液pH值对茶饮料(透明状)中茶多酚含量的影响,试验在不同pH磷酸缓冲液条件下对3个茶饮料样品中的茶多酚含量进行检测。结果表明,磷酸缓冲液pH值越大,茶饮料(透明状)中茶多酚含量越大。实验人员在依照GB/T 21733—2008附录A检测方法对茶饮料(透明状)中茶多酚含量检测时,应调节磷酸缓冲液pH至7.5,否则,测定结果将不准确。

Pfu-sso7d DNA聚合酶的制备及反应缓冲液的研究

目的:制备有高效扩增长片段以及复杂片段能力的Pfu DNA聚合酶。方法:运用基因工程学方法构建重组质粒pET-28a-Pfu-sso7d,采用优化后的诱导条件对pET-28a-Pfu-sso7d实行诱导表达,将菌液超声破碎并提取上清液,应用镍亲和层析洗脱纯化取得较纯Pfu-sso7d DNA聚合酶。采用qPCR方法对酶进行酶活力单位定量、确定反应缓冲液组分最佳浓度及检测自制Pfu-sso7d DNA聚合酶酶活性。结果:在1 mmol·L^(-1) IPTG、16℃条件下诱导Pfu-sso7d DNA聚合酶菌液16 h,Pfu-sso7d DNA聚合酶高效表达;用20~100 mmol·L^(-1)咪唑可将蛋白洗脱。Pfu-sso7d DNA聚合酶最终活力单位定量为1 U·μL^(-1)。PCR最佳反应缓冲液为pH9.0、20 mmol·L^(-1) Tris-HCl、0.6 mmol·L^(-1) MgSO_(4)、50 mmol·L^(-1) KCl、5 mmol·L^(-1)(NH_(4))_(2)SO_(4)、0.1%Triton X-100,添加剂组分为3%DMSO、1 mol·L^(-1)甜菜碱。Pfu-sso7d DNA聚合酶能高效扩增3000 bp的目的条带,活性达到商用高保真DNA聚合酶水平。结论:基于基因重组制备的Pfu-sso7d DNA聚合酶可进行高效的PCR反应,节省了实验室PCR成本,为进一步提高Pfu DNA聚合酶活性提供一定技术参考。

柠檬酸缓冲液对蒸谷米色泽及品质特性的影响

采用不同pH的柠檬酸缓冲液浸泡稻谷,以纯水浸泡的蒸谷米为对照组,考察了不同处理组蒸谷米的色差、加工品质、感官评价、体外消化、热力学特性和质构特性的变化,并进行了相关性分析。结果表明:低pH浸泡液预处理后,蒸谷米色差有显著变化,其中pH 4浸泡液颜色最浅,相对纯水浸泡的蒸谷米,其L*值增加了5.27;消化结果显示,样品淀粉消化率随pH降低而降低,其中pH 3组淀粉消化率最低,其eGI值降低了11.83%,抗性淀粉增加了29.06%;加工品质结果显示,pH对出米率无显著影响,但随着浸泡液pH降低整精米率有所降低、爆腰率有所上升;感官评价和质构特性结果表明,蒸谷米的食用品质随着pH的降低先上升后下降。综合结果表明,适当低pH浸泡液预处理对蒸谷米的色泽、体外消化特性、感官品质具有一定的改善作用。

缓冲液种类对土壤酸性磷酸酶活性的影响

土壤酸性磷酸酶影响土壤有机磷矿化。选择不同的缓冲液种类和不同p H值测定土壤酸性磷酸酶活性,可影响数据的可比性。为明确缓冲液及p H值对不同土壤磷酸酶活性的影响程度,选取p H值4～8的土壤样本,测定了在醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和MUB缓冲液3种不同培养条件下酸性磷酸酶活性变化。结果表明,采用MUB缓冲液条件可获得较稳定的土样区分序列,且与缓冲液的p H值的变化无关。在醋酸盐缓冲液和柠檬酸盐缓冲液条件下,不同p H值范围的不同土样之间土壤酸性磷酸酶活性变异系数变化剧烈,而采用MUB缓冲液获得的变异系数较其他缓冲液大,且趋势平稳。综合考虑,进行土壤酸性磷酸酶活性测定,可优先选用MUB缓冲溶液。

TAE缓冲液应用于对流免疫电泳的实验效果分析

为了研究可用于对流免疫电泳的新型缓冲液来替代传统巴比妥-巴比妥钠缓冲液,本实验分别以巴比妥-巴比妥钠缓冲液、TAE缓冲液为电泳介质,电泳后观察抗原抗体复合物白色沉淀线情况。比较这两种缓冲液的电泳结果基本相当,但TAE缓冲溶液电泳沉淀线更为明显,试剂的安全性较高,实验成本较低。因此开展对流免疫电泳实验,TAE缓冲液完全可以替代巴比妥-巴比妥钠缓冲液。

缓冲液对碳酸钙含氟牙膏可溶氟稳定性的影响

研究了几种不同缓冲体系对碳酸钙牙膏中可溶氟含量稳定性的影响,并对实验结果进行了分析。试验结果表明:焦磷酸钠用量为0.3%~1.0%时,12周45℃高温稳定性考察,可溶氟含量为600ppm;焦磷酸钠用量为0.3%~1.0%时,磷酸钠用量为0.1%~0.3%时,12周45℃高温稳定性考察,可溶氟含量为649ppm;碳酸钠用量为0.1%~0.3%,碳酸氢钠用量为0.6%~1.0%时,3个月45℃高温稳定性考察,可溶氟含量为1221ppm。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳几种缓冲液的效果分析

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是医学院校生物化学实验中的重要实验,传统巴比妥缓冲液具有毒性且不经济,本文通过对几种新型缓冲液的电泳效果研究得出,硼酸缓冲液完全可以替代巴比妥,无毒且经济,值得推广应用。

硼酸缓冲液用于醋酸纤维薄膜电泳的分离效果以及在实验教学中的应用

目的比较硼酸缓冲液和巴比妥缓冲液在醋酸纤维薄膜电泳中的分离效果,评定硼酸缓冲液是否可以替代巴比妥缓冲液用于实验教学。方法选取健康家兔血清,分别在两种缓冲液环境中进行醋酸纤维薄膜电泳。巴比妥缓冲液:pH 8.6,电压110 V,电泳时间60 min;硼酸缓冲液:pH 8.6,电压120 V,电泳时间70 min。比较两种缓冲液的分离效果。结果两种缓冲液的电泳分离血清蛋白效果相当。结论硼酸缓冲液可替代巴比妥缓冲液用于实验教学。

不同缓冲液添加大豆蛋白冷冻奶牛精子试验效果研究

本文为解决奶牛冻精稀释液添加卵黄易污染、易将异源动物体内微生物传染给输精母畜等弊端,进行了两个方面的试验研究:(1)选择含蛋白量高的大豆粉溶液添加Tris缓冲液制成蛋白Tris稀释液,添加磷酸盐缓冲液制成蛋白PBS稀释液,及传统使用的卵黄Tris稀释液,分别冷冻奶牛鲜精,观察解冻后活力;(2)观察蛋白Tris稀释液、蛋白PBS稀释液与卵黄Tris稀释液超低温冷冻奶牛精子解冻后在4℃环境中存活时间。结果表明,蛋白Tris稀释液、蛋白PBS稀释液与卵黄Tris稀释液超低温冷冻的奶牛,细管冻精质量都能符合国家标准,但冷冻效果最佳的是蛋白Tris稀释液。在冷藏4℃下,蛋白Tris稀释液、卵黄Tris稀释液第5天精子活力仍能达到国家标准,蛋白Tris稀释液显微镜下的观察视野要比卵黄Tris稀释液清晰,不易滋长细菌。因此,添加大豆粉溶液制成的蛋白Tris稀释液冷冻奶牛精子的效果最佳,试验证明,植物源稀释液可以替代动物源稀释液。

硼酸缓冲液应用于电泳实验的效果分析

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是医学院校生物化学实验中的重要实验,传统巴比妥缓冲液具有毒性且不经济,该文旨在研究硼酸缓冲液的效果。采用DY—l型电泳仪配套水平电泳槽进行醋酸纤维薄膜电泳,控制电流时间和室内温度。显示硼酸缓冲液电泳可以分离出5条清晰的蛋白区带,并且电泳10次后仍然效果良好。由此得出离子强度为0.08的硼酸缓冲液完全可以替代巴比妥,无毒且经济,值得推广应用。

2种缓冲液对血清蛋白醋酸纤维膜电泳效果对比研究

目的在血清蛋白醋酸纤维膜电泳巴比妥缓冲液可以分离出5条区带的实验条件下,研究硼酸-硼酸盐缓冲液是否能够达到相同甚至更好的实验效果,是否可替代巴比妥缓冲液。方法采用DYY-8C型电泳仪进行醋酸纤维膜电泳,选择不同电压和电泳时间,观察巴比妥缓冲液与硼酸-硼酸盐缓冲液分离兔血清蛋白的效果,并分析2组蛋白质相对含量测定值有无差异。结果在相同的实验条件下,硼酸盐缓冲液的分离效果好于巴比妥缓冲液,2组蛋白质相对含量无明显差异。结论在血清蛋白醋酸纤维膜电泳实验中,与巴比妥缓冲液相比,硼酸缓冲液的实验结果更稳定且重复性更好,可以替代巴比妥缓冲液。

两种缓冲液条件下人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳结果的比较

设定相同的实验条件,对巴比妥缓冲液和硼酸盐缓冲液两种电泳结果进行比较.巴比妥缓冲液条件下,样液扩展的总长度为3.5 cm,可以清晰显示4条色带;硼酸盐缓冲液条件下,样液扩展的总长度为4.5 cm,可以清晰显示5条色带.另外,在实验成本及对环境的污染方面,硼酸盐缓冲液也优于巴比妥缓冲液.因此,开展人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验,硼酸盐缓冲液完全可以替代巴比妥缓冲液.

柠檬酸——磷酸氢二钠缓冲液法提取紫甘薯花青素的工艺研究

【目的】探索一种更好的紫甘薯花青素提取方法,为提高青花素的开发利用奠定基础。【方法】采用柠檬酸—磷酸氢二钠缓冲液法提取4个不同品种(系)紫甘薯(万紫56、宁紫甘薯1号、1024-20、0929-115)的花青素,并通过采用单因素试验及正交试验,从材料状态(鲜样/干样)、提取温度、提取次数等3个影响因素对其提取工艺进行优化。【结果】各因素对紫甘薯花青素提取量的响应主次顺序为:提取温度>材料状态>提取次数;综合考虑提取效率及生产成本,柠檬酸—磷酸氢二钠缓冲液法提取紫甘薯花青素的最佳工艺条件:以鲜样为提取材料,提取温度控制在60℃,提取1次,在最佳工艺条件下,花青素提取量为25.72mg/100g。【结论】以柠檬酸—磷酸氢二钠缓冲液法提取紫甘薯花青素具有经济、高效、方便、快捷等特点,值得推广应用。

柠檬酸盐和EDTA缓冲液对弥漫性大B细胞淋巴瘤Ki-67和bcl-2抗原修复的比较

目的探讨柠檬酸盐和EDTA缓冲液对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphomas,DLBCL)中Ki-67和bcl-2抗原修复的比较。方法运用高压锅热抗原修复法,选择柠檬酸盐和EDTA两种缓冲液同时进行抗原修复,比较了78例弥漫性大B细胞淋巴瘤Ki-67和43例DLBCL bcl-2的免疫组化染色应用效果。结果免疫组化染色采用EDTA与柠檬酸盐缓冲液相比,Ki-67指数78例中有76例明显提高,两者差异有统计学意义(P<0·01);bcl-2染色43例中有13例表达明显提高,两者差异有统计学意义(P<0·01)。结论在实际免疫组化染色中,EDTA缓冲液较柠檬酸盐缓冲液能极大地提高弥漫性大B细胞淋巴瘤的Ki-67和bcl-2抗原的表达。

超声波辅助酸性缓冲液浸提木枣多糖的工艺优化

以木枣多糖的提取率为响应值,柠檬酸盐缓冲溶液作为溶剂,利用单因素试验和响应面设计对超声波辅助提取木枣多糖工艺进行优化。结果表明:木枣多糖的最佳提取条件为以pH为5.6的柠檬酸盐缓冲溶液为提取剂,液料比23.1︰1(V︰m),提取温度68℃,超声波功率420 W,提取时间30 min。该条件验证多糖提取率达到(67.38±0.16)%,接近于预测值67.63%。说明该优化方法可行,可为木枣多糖的提取提供参考数据。

分离缓冲液对水稻细胞核悬液DNA分辨率效应的比较

为制备高纯度水稻细胞核悬液供FACSCalibur流式细胞仪使用,选用6种细胞核分离缓冲液制备样品,对其DNA分辨率效果进行比较,Otto buffers和Marie’s nuclearisolation buffer表现分辨率较高,细胞G0/1峰产生的变异系数较低(CV分别为3.57%和3.41%);其中Otto buffers的组分较Marie’s nuclear isolation buffer简单、成本低,且能在正常室温条件下分析和保存。虽然在细胞核悬液中Tris-MgCl2buffer显示最低的CV值(3.19%),但产生较多的背景碎片。而其余3种缓冲液(Lysis buffer LB01,Galbraith’s buffer和Arumuganathan’sbuffer)的变异系数均较高(分别为4.75%,6.28%和6.73%)。结果表明采用Otto buffers分离缓冲液制备细胞核悬浮液,能实现苗期对水稻花粉植株的不同倍性(单倍体、二倍体、三倍体等)快速鉴定。