血清缺氧诱导因子1α与IgA肾病肾间质病变及其预后关系的研究

目的探讨血清缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与原发性IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)肾间质病变及其预后的关系。方法回顾性分析宁夏回族自治区人民医院(宁夏医科大学附属自治区人民医院)2017年8月至2021年8月明确诊断为IgAN的142例患者临床资料,依据血清HIF-1α水平,以肾间质病变的严重程度分为两组,肾小管间质病变比例≤25%为肾间质病变轻组,>25%为肾间质病变重组。比较两组患者的指标差异,并将两组差异有统计学意义的指标进行多因素分析;将血清HIF-1α与肾病进展的危险因素指标进行相关分析。结果两组患者性别、24 h尿蛋白定量、体重指数、血清白蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、高血压等资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05);肾间质病变重组患者年龄[(44.45±9.65)岁比(38.36±11.09)岁]、血肌酐[(116.28±44.75)μmol/L比(84.82±42.06)μmol/L]、血尿酸[(389.03±104.57)μmol/L比(353.39±90.01)μmol/L]、血清HIF-1α[(213.53±68.86)pg/L比(141.13±60.61)pg/L]高于肾间质病变轻组(P<0.05),而血红蛋白[(124.11±28.24)g/L比(134.18±22.07)g/L]低于肾间质病变轻组(P<0.05)。多因素分析提示血清HIF^(-1)α与年龄是肾间质病变的危险因素。血清HIF-1α与血肌酐呈正相关(r=0.465,P<0.05),与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=-0.420,P<0.05),与血尿酸呈正相关(r=-0.217,P<0.05),与血红蛋白呈负相关(r=-0.284,P=0.003)。血清HIF-1α的受试者工作特征曲线分析提示曲线下面积为0.760(P<0.001),血清HIF-1α诊断肾功能异常的临界点为201.50 pg/L,尤登指数为0.44。结论血清HIF-1α与IgAN肾间质病变相关,同时与IgAN进展的危险因素有相关性,临床上可以关注血清HIF-1α水平以判断IgAN的预后。

腔隙性脑梗死患者脑白质病变情况与缺氧诱导因子1α相关性研究

目的:探究腔隙性脑梗死(LACI)患者脑白质病变情况与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的相关性。方法:收集196例LACI患者为研究对象,患者均完成MRI检查,并采用Fazekas量表评估纳入者脑白质病变情况;同时留取患者入院确诊时静脉血样,用于测定血清HIF-1α、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3);分析血清HIF-1α与脑白质病变情况的关系。结果:纳入者中72.45%出现脑白质病变,其中42.96%轻度病变,33.80%中度病变、23.24%重度病变。与非脑白质病变组相比,病变组患者年龄和高血压占比明显增大,血清HIF-1α和Caspase-3水平明显升高(均P<0.05)。脑白质不同程度病变者收缩压和血清HIF-1α和Caspase-3水平比较差异具有统计学意义(均P<0.01),重度病变者明显高于中度病变者,中度病变者高于轻度病变者(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,收缩压和血清HIF-1α、Caspase-3水平均是影响LACI患者脑白质病变程度的危险因素(均P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清HIF-1α对LACI患者脑白质病变发生及重度脑白质病变均具有一定预测价值(AUC=0.840、0.874)。结论:LACI伴有脑白质病变患者体内HIF-1α呈高表达状态,且其表达水平升高与脑白质病变加重有关。

缺氧诱导因子1α在肝细胞癌靶点治疗中的研究进展

肝细胞癌(HCC)关键基因和调控分子为靶点的新型治疗方案逐步在临床中开展。缺氧诱导因子(HIF)作为肝癌细胞适应缺氧微环境的关键因子,其介导改变了许多基因的转录。HIF拥有广泛的靶基因,可通过调控各种信号通路促使癌细胞发生代谢重编程、血管生成、侵袭转移、免疫逃逸等。缺氧诱导因子1α(HIF-1α)作为HIF家族的主要成员,可为HCC的治疗挖掘潜在靶点提供新思路和新见解。

慢性缺氧通过激活缺氧诱导因子1α/microRNA-96通路诱导小管上皮细胞自噬异常参与肾间质纤维化

目的:研究慢性缺氧诱导肾脏纤维化的机制。方法:缺氧诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2),Western Blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)和p62的表达及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测microRNA-96(miR-96)的表达。采用siRNA-HIF-1α(siHIF-1α)和pcDNA-HIF-1α处理缺氧诱导的肾小管上皮细胞,利用RT-qPCR检测miR-96的表达,探讨过表达和干扰HIF-1α对miR-96表达的影响。miR-96mimic处理常氧肾小管上皮细胞,Western Blot检测促纤维化因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白1(COL4A1)蛋白的变化,RT-qPCR检测自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ和p62的表达。小鼠腹腔注射miR-96 inhibitor的病毒载体,通过Masson染色检测各模型肾脏纤维化的程度及纤维化因子COL4A1的表达。结果:在缺氧诱导的肾小管上皮细胞中HIF-1α和miR-96表达均增加(P<0.05),与纤维化程度呈正相关性,自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ水平升高p62水平降低(P<0.05),表明缺氧诱导HK-2细胞自噬。pcDNA-HIF-1α处理常氧培养的HK-2,发现HIF-1α促进miR-96的表达,siHIF-1α处理缺氧诱导的HK-2细胞,发现沉默HIF-1α可降低由缺氧引起的miR-96的增加,常氧条件下过表达miR-96诱导HK-2的纤维化因子α-SMA和COL4A1的增加,同时自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ水平升高p62水平降低(P<0.05)。缺氧条件下抑制miR-96可降低自噬关键分子的LC3Ⅰ/Ⅱ表达水平,恢复p62的表达(P<0.05)。小鼠腹腔注射miR-96 inhibitor的病毒载体,与注射了对照病毒的小鼠相比可以抑制单侧输尿管梗阻(UUO)引起的肾脏纤维化,减低纤维化因子COL4A1的表达。结论:缺氧通过激活HIF-1α/miR-96信号通路诱导肾小管上皮细胞自噬异常、促纤维化因子增加,促进了肾脏纤维化。

基于线粒体乙酰化酶3-缺氧诱导因子1α通路探讨毓麟珠改善自然衰老大鼠卵巢氧化应激的作用机制

目的基于线粒体乙酰化酶3(mitochondrial acetylase 3,Sirt3)-缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF1α)通路探讨毓麟珠改善自然衰老大鼠卵巢氧化应激的作用机制。方法12只雌性SD老年大鼠,随机分为衰老未灌胃组与衰老灌胃组,每组6只,6只雌性正常育龄期SD大鼠作为空白对照组,衰老灌胃组予毓麟珠中剂量10.08 g/kg,衰老未灌胃组予等量生理盐水,空白对照组正常饲养,连续灌胃6周(休1天/周)。酶联免疫法测定大鼠血清激素雌二醇(estradiol,E 2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)水平;苏木精-伊红(hematoxylin eosin stain,HE)染色观察卵巢形态学变化;化学发光法测定卵巢组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;化学发光法测定卵母细胞线粒体ATP含量;蛋白免疫印记法检测卵巢组织Sirt3、HIF1α蛋白表达;实时荧光定量PCR检测卵巢组织Sirt3、HIF1αmRNA表达。结果与衰老未灌胃组相比较,衰老灌胃组卵泡发育改善,表现为颗粒细胞层排列整齐、卵母细胞形态较规则;E 2、AMH水平升高,FSH水平降低(P<0.01);卵巢组织中SOD、GSH水平升高,MDA水平降低(P<0.01);ATP水平升高(P<0.05);Sirt3蛋白及基因表达均上调,HIF1α蛋白及基因表达均下调(P<0.05)。结论毓麟珠通过调控Sirt3、HIF1α的蛋白及基因表达,改善卵巢组织抗氧化能力进而达到延缓卵巢衰老的目的。

利拉鲁肽通过抑制线粒体依赖性凋亡及缺氧诱导因子1α表达对脊髓损伤的保护作用

探究利拉鲁对脊髓损伤的保护作用及其相关机制。方法 选取18只SD大鼠,分为三组,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组,分别为对照组、应用等量生理盐水及利拉鲁肽组,每组6只,检测大鼠的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、凋亡相关因子配体(FASL)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、细胞色素c(Cyt-c)、Caspase3、Smac/Diablo,以及凋亡相关蛋白指标,对大鼠的下肢运动功能进行评估。结果 检测结果显示,利拉鲁肽对Caspase3、TNF-α、FASL、HIF-1α、P53、Cyt-c、Smac/Diablo有明显的抑制作用,并且能够逆转凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达。利拉鲁肽应用14d后,大鼠的下肢运功功能出现明显改善。结论 利拉鲁肽对脊髓损伤有保护作用,可以抑制线粒体依赖性凋亡,以及缺氧诱导因子1α表达,从而发挥显著的效果。

Hepatology|肠源性IL-33双重调控缺氧诱导因子1α信号促进三甲胺-N-氧化物生成并加重代谢相关脂肪性肝病进展

代谢相关脂肪性肝病(MASLD)是一种以肝脂质异常沉积为特征,同时伴随心脏代谢危险因素的代谢性疾病,现已成为全世界最常见的慢性肝病。MASLD的发展与肠道稳态的失衡紧密相连,紊乱的肠道菌群及其代谢物通过受损的肠道屏障到达肝脏,引起肝脏的代谢紊乱和炎症。

缺氧诱导因子1α、Bcl-2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3在儿童创伤性脑损伤中的表达及意义

目的动态观察缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、Bcl-2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B19kDa-interacting protein 3,BNIP3)在儿童创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)中的变化,并评估其预测儿童TBI病情轻重及预后的临床价值。方法前瞻性纳入2021年1月—2023年7月47例中重度TBI患儿为研究对象,根据格拉斯哥昏迷评分分为中度亚组(9~12分)和重度亚组(3~8分);以同期因腹股沟斜疝诊治且无基础疾病的30例患儿为对照组。比较各组HIF-1α、BNIP3、自噬相关蛋白Beclin-1及S100B水平的差异,采用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评估HIF-1α、BNIP3、Beclin-1及S100B对TBI病情轻重及预后的预测价值。结果TBI组患儿血清HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、S100B水平高于对照组(P<0.05);TBI患儿中,重度亚组HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、S100B水平高于中度亚组(P<0.05)。相关性分析显示,血清HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、S100B水平与格拉斯哥昏迷评分呈负相关(P<0.05)。治疗7 d后,非手术TBI和手术TBI患儿的血清HIF-1α、BNIP3、Beclin-1及S100B水平均较治疗前下降(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、S100B水平预测重度TBI的曲线下面积分别为0.782、0.835、0.872、0.880(P<0.05),预测TBI预后不良的曲线下面积分别为0.749、0.775、0.814、0.751(P<0.05)。结论TBI患儿血清HIF-1α、BNIP3及Beclin-1水平显著升高,检测其水平有助于临床判断TBI患儿的病情轻重及预后。

急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2、血红素加氧酶-1、脂肪酸结合蛋白4、缺氧诱导因子1α表达意义及其与肝功能指标相关性研究

目的:探讨急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达意义及其与肝功能指标的相关性。方法:回顾性选取62例急性药物性肝损伤患者的临床资料作为病例组,另选80例健康体检者的临床资料作为对照组。比较两组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及肝功能指标水平,用Pearson相关性分析急性药物性肝损伤患者血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平与肝功能的相关性,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值。结果:病例组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)水平高于对照组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,急性药物性肝损伤患者血清Nrf2水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.763、-0.741、-0.685,均P<0.05);血清HO-1水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.489、-0.524、-0.568,均P<0.05);血清FABP4水平与血清AST、TBIL水平呈正相关(r=0.509、0.512,均P<0.05);血清HIF-1α水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈正相关(r=0.527、0.486、0.542,均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测诊断急性药物性肝损伤的曲线下面积(AUC)值为0.919,高于血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平单独检测(0.787、0.822、0.824、0.772,均P<0.05)。结论:血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α在急性药物性肝损伤患者中呈高表达,其表达水平与患者肝功能损伤有关,且四者联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值更高。

高血压脑出血患者血浆中脂蛋白相关磷脂酶A2、缺氧诱导因子1α表达水平与预后的关系

目的观察高血压脑出血患者血浆中脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达水平及其与患者预后的关系。方法选取2019年4月至2021年3月间在梁平区人民医院治疗的高血压脑出血患者65例作为观察组,同时选取同期在本院进行治疗的未发生脑出血的高血压患者68例作为对照组,检测所有患者血浆中Lp-PLA2、HIF-1α表达水平,并分析Lp-PLA2、HIF-1α与高血压脑出血患者预后的关系。根据患者临床资料分析影响高血压脑出血患者预后的因素;多因素Logistic回归分析高血压脑出血患者预后的影响因素。结果观察组患者的血浆中Lp-PLA2、HIF-1α表达水平高于对照组,预后不良组患者血浆中Lp-PLA2、HIF-1α表达水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(t=15.314、14.580、4.086、3.495,均P<0.05)。预后不良组高血压脑出血患者年龄、高血压病程、发病至入院时间、初始血肿量及合并糖尿病与预后良好组比较,差异均有统计学意义(χ^(2)/t=2.480、2.580、2.307、5.101、5.532,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示患者血浆中Lp-PLA2、HIF-1α高表达水平是高血压脑出血的影响因素(OR=2.498、2.635,均P<0.05)。结论高血压脑出血患者血浆中Lp-PLA2、HIF-1α表达水平均显著升高,是患者预后不良的影响因素。

缺氧诱导因子1α及其相关基因在腹主动脉瘤中的表达

为了研究缺氧诱导因子1α及其相关基因在腹主动脉瘤中的表达,选取腹主动脉瘤标本22例,以5例正常腹主动脉作对照,检测缺氧诱导因子1αmRNA及蛋白的表达,检测血管内皮生长因子及促红细胞生成素的表达及微血管密度。结果发现,腹主动脉瘤组织中缺氧诱导因子1αmRNA及蛋白表达明显高于正常腹主动脉(P<0.01);血管内皮生长因子和促红细胞生成素表达亦明显增强(P<0.01)。缺氧诱导因子1α表达主要分布在腹主动脉瘤中层血管平滑肌细胞及外膜处,与血管内皮生长因子和促红细胞生成素的分布部位基本一致。腹主动脉瘤中微血管密度明显增加(P<0.01)。结果提示,缺氧诱导因子1α在腹主动脉瘤发病过程中可能发挥重要作用。

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中缺氧诱导因子1α的表达变化

目的:检测缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1αHIF-1α)在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者肺组织标本中的表达及其在COPD发病过程中的作用。方法:COPD病例组和对照组均16例,2组人群性别、年龄相匹配,均为因肺部占位病变行肺叶切除术患者,取材尽量远离病变组织,利用Western blotting和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2组人群肺组织标本中HIF-1α蛋白的表达。结果:ELISA检测结果显示COPD患者与对照组肺叶组织标本中HIF-1α蛋白表达水平分别为(0.16±0.07)μg/L与(0.96±0.43)μg/L,Western blotting检测结果显示COPD患者与对照组肺叶组织标本中HIF-1α蛋白表达水平分别为0.53±0.15和0.71±0.22,COPD病例组肺叶组织标本中HIF-1α蛋白表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。依据COPD疾病的严重程度将病例组人群分组,结果发现轻、中度COPD和重度COPD患者肺叶组织标本中HIF-1α蛋白水平分别为0.78±0.06和0.39±0.10;重度COPD患者肺叶组织标本中HIF-1α蛋白表达水平明显低于轻中度COPD患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HIF-1α在慢性阻塞性肺疾病的进展过程中表达减少,可能与疾病的发展相关。

新生鼠缺氧缺血性脑损伤时三磷酸肌醇激酶信号通路与缺氧诱导因子1α的调节

目的探讨在体神经元缺氧缺血条件下缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)蛋白的表达及三磷酸肌醇激酶(phosphoinositid 3-kinase/Akt,PI3K/Akt)信号通路的激活,推测PI3K/Akt信号通路与神经元HIF-1α表达调节的关系,以期更确切地阐明PI3K/Akt在发育期脑缺氧缺血性损伤(hypoxia ischemia brain damage,HIBD)神经元HIF-1α表达中的作用。方法10d龄SD大鼠56只,分为正常对照组(n=12)、假手术组(n=12)、实验组(n=24)、wortmannin干预组(n=4)和溶剂干预组(n=4)。实验组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气(92%N2、8%O2)缺氧2.5h,即为HIBD模型;假手术组不结扎颈总动脉,不作缺氧处理;正常对照组不作任何处理。wortmannin干预组和溶剂干预组分别在侧脑室内注射wortmannin和DMSO、PBS3μL,30min后制备HIBD模型。分别于建模后4、8及24h处死动物取脑组织,应用免疫组织化学法检测HIF-1α、Akt蛋白的分布和表达,Western blot检测HIF-1α、Akt及p-Akt蛋白含量。结果实验组HIF-1α蛋白表达在术后4h明显升高,8h达高峰,24h后下降;p-Akt蛋白于术后4h明显升高,8h后下降。正常对照组各时间点HIF-1α和p-Akt均有极少量弱阳性表达。实验组各时间点HIF-1α蛋白表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);实验组p-Akt于4h和8h明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Akt蛋白表达随术后时间的延长无明显变化,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后4h wortmannin干预组的HIF-1α蛋白的表达明显下降,与溶剂干预组及实验组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论发育期HIBD时,可激活PI3K/Akt信号通路,并诱导HIF-1α表达增加,可针对PI3K/Akt信号通路和HIF-1α寻找新生儿HIBD新的治疗靶点。

新生鼠缺氧缺血性脑损伤缺氧诱导因子1α表达与神经元凋亡

目的探讨缺氧缺血性脑损伤(hypoxia ischem ia brain damage,HIBD)时缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)表达与神经元凋亡的相关性,探索HIF-1α在神经元凋亡中的作用及对损伤神经修复重建的意义。方法新生10dSD大鼠40只,随机分为对照组和实验组,每组20只。实验组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气(92%氮气、8%氧气)缺氧2.5h,即为HIBD模型;对照组分离颈总动脉,不结扎,不作缺氧处理。分别于术后4、8、24、48及72h处死两组动物取脑组织,应用免疫组织化学法检测HIF-1α、活化的半胱天冬氨酸酶3(cleavedcaspase3,CC3)的表达,应用TUNEL检测凋亡细胞。结果实验组HIF-1α蛋白表达在术后4h明显升高,8h达高峰,24h后下降;CC3蛋白于术后4h开始表达,8h有少量表达,24h明显升高,48h及72h维持较高水平。对照组各时间点HIF-1α和CC3均有极少量弱阳性表达。实验组HIF-1α和CC3蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL染色显示实验组术后随时间延长阳性细胞数逐渐增多,72h达高峰;但对照组TUNEL阳性细胞极少。两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论HIF-1α与促凋亡蛋白CC3表达趋势相反,HIF-1α对新生儿HIBD神经元可能具有保护作用,可望对缺氧缺血神经的修复重建发挥一定作用。

百草枯中毒小鼠肺组织转化生长因子β和缺氧诱导因子1α的表达

目的探讨百草枯中毒小鼠肺组织转化生长因子β(TGF-β)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达变化。方法将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(n=10)和百草枯组(n=20)。百草枯组腹腔注射百草枯20 mg/kg,对照组腹腔注射等体积生理盐水。在染毒后第7天处死10只百草枯组小鼠,第28天处死其余小鼠。通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色进行肺组织病理学观察;免疫组织化学法检测肺组织TGF-β和HIF-1α蛋白的表达。采用Pearson相关分析法分析TGF-β蛋白与HIF-1α蛋白表达的相关性。结果 HE染色和Masson染色结果均显示:在染毒后第7天,百草枯组可见肺纤维化表现;染毒后第28天,肺纤维化程度加重。染毒后第7天百草枯组小鼠肺组织TGF-β蛋白的表达明显高于对照组,染毒后第28天TGF-β蛋白的表达高于染毒后第7天,差异均有统计学意义(P<0.05)。染毒后第7天和第28天,百草枯组小鼠肺组织HIF-1α蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.05);染毒后第28天的HIF-1α蛋白的表达高于第7天,但差异无统计学意义(P>0.05)。在染毒后第7天和第28天,百草枯组TGF-β蛋白与HIF-1α蛋白的表达均无相关性(r=0.295,P=0.630;r=0.218,P=0.725)。结论百草枯中毒可上调小鼠肺组织的TGF-β和HIF-1α蛋白,TGF-β和HIF-1α可能通过不同途径参与了肺纤维化的形成。

缺氧诱导因子1α参与大脑中动脉闭塞模型大鼠的脑损伤与脑保护

背景:急性脑梗死是脑组织缺氧缺血性坏死,在中国已经成为各种死亡原因中的第一位。缺氧诱导因子1α在脑梗死的发生发展过程中发挥双重作用,因此其抑制剂在临床中最佳应用时间的确定尤为重要。目的:探讨缺氧诱导因子1α调控急性脑梗死大鼠脑损伤/脑保护作用研究。方法:雄性SD大鼠随机被分为3组:假手术组(仅分离颈总动脉)、术后24 h组、术后72 h组,后2组采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。利用TTC、尼氏染色、IHC和Western-blot检测大鼠脑组织梗死体积、小胶质细胞形态、缺氧诱导因子1α、caspase3、白细胞介素1β和p-NF-κBp65蛋白表达水平,ELISA方法检测各组大鼠外周血中白细胞素6和肿瘤坏死因子α的分泌水平。实验方案经佳木斯大学附属第一医院实验动物伦理委员会批准(批准号:JMSU-210)。结果与结论:①与假手术组相比,大脑中动脉闭塞模型大鼠脑梗死面积明显增加,脑神经细胞损伤严重,排列紊乱且数量明显减少;但术后24 h组与术后72 h组之间无明显差异;②与假手术组相比,术后24 h组与术后72 h组大鼠脑组织中缺氧诱导因子1α、caspase 3、p-NF-κBp65和白细胞介素1β的表达均明显升高(P<0.05,P<0.01),外周血中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的分泌水平明显升高(P<0.01);但与术后24 h组相比,术后72 h组仅caspase 3蛋白表达显著下降,而白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的分泌水平则显著升高;③结果说明,缺氧诱导因子1α参与了急性脑梗死发生后的脑损伤/脑保护过程,且二者之间具有明确的时间靶点:大脑中动脉闭塞后24-72 h。此时间靶点的确定可为临床缺氧诱导因子1α抑制剂的最佳使用时间提供充分的理论依据和治疗策略。

六味地黄汤通过缺氧诱导因子1α途径对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的探讨六味地黄汤对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在慢性肾间质纤维化中的表达及作用。方法选择清洁级雄性SD大鼠30只,随机分为分假手术组、模型组和六味地黄汤组各10只。假手术组打开腹腔暴露肾脏,但不切除肾脏。模型组、六味地黄汤组大鼠均在无菌条件下进行5/6肾切除术复制慢性肾间质纤维化模型,术后8周,比较3组肾脏组织病理变化,HIF-1α、结缔组织生长因子(CTGF)在肾组织中的蛋白表达水平。结果与六味地黄汤组比较,模型组肾组织中HIF-1α、CTGF蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论 HIF-1α通过调节CTGF的表达促进肾间质纤维化,而六味地黄汤可降低HIF-1α的表达,从而减轻肾间质纤维化。

富集自体骨髓干细胞移植与髓芯减压治疗缺血性股骨头坏死患者血清成纤维细胞生长因子2、缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的变化

背景:缺血性股骨头坏死以股骨头血液供应不足为主要病因。髓芯减压术属于临床常用治疗手段,有研究发现采用自体骨髓干细胞移植能较好地改善髋关节功能,二者联合应用可促使患者尽早恢复。目的:观察自体骨髓干细胞移植联合髓芯减压治疗早期缺血性股骨头坏死的疗效以及血清成纤维细胞生长因子2、缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子水平。方法:选取2016年1月至2018年1月收治的62例早期缺血性股骨头坏死患者进行研究,参照随机数字表法分为研究组(n=31)和对照组(n=31),对照组给予细针多孔道髓芯减压术治疗,研究组在对照组基础上联合自体骨髓干细胞移植治疗,观察两组患者治疗前后Harris评分、目测类比评分、血清成纤维细胞生长因子2、缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子水平及不良反应发生情况。结果与结论:①两组患者治疗后3,6,12个月Harris评分均高于治疗前(P<0.05),研究组高于对照组(P<0.05);②两组患者治疗后3,6,12个月目测类比评分均低于治疗前(P<0.05),研究组治疗后3,6个月目测类比评分低于对照组(P<0.05);③两组患者治疗后3,6,12个月血清成纤维细胞生长因子2水平高于治疗前(P<0.05),研究组高于对照组(P<0.05);缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子水平明显低于治疗前(P<0.05),研究组低于对照组(P<0.05);④两组患者治疗后不良反应发生率比较差异无显著性意义(P>0.05);⑤结果表明自体骨髓干细胞移植联合髓芯减压治疗早期缺血性股骨头坏死,可有效改善髋关节功能,促进股骨头坏死区修复,减轻患者疼痛,提高成纤维细胞生长因子2水平,降低缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子水平。

六味地黄汤对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织缺氧诱导因子1α及相关因子表达的影响

目的探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α、血小板源性生长因子(PDGF)-A及PDGF-B在慢性肾功能衰竭大鼠肾组织中的表达及作用,观察六味地黄汤对其表达的影响。方法用5/6肾切除法复制慢性肾功能衰竭模型,分假手术组,模型组和六味地黄汤组。造模后12周,检测各组肾功能指标,HE染色法观察肾组织病理变化,Masson染色法观察肾组织胶原的沉积,免疫组化法和RT-PCR法分别检测HIF-1α、PDGF-A和PDGF-B在肾组织中的表达。结果 24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐在模型组明显升高(P<0.01),六味地黄汤组则明显降低(P<0.01)。模型组肾间质纤维化明显,大量胶原纤维沉积;六味地黄汤组肾间质纤维化程度明显减轻,少量胶原纤维沉积。与假手术组比较,模型组肾组织中HIF-1α、PDGF-A及PDGF-B蛋白水平和基因表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,六味地黄汤组肾组织中HIF-1α、PDGF-A及PDGF-B蛋白水平和基因表达均明显降低(P<0.01),且PDGF-A和PDGF-B的表达与HIF-1α均呈正相关(P<0.01)。结论 HIF-1α可能通过上调PDGF-A和PDGF-B的表达促进肾间质纤维化,六味地黄汤可下调HIF-1α的表达,从而抑制肾间质纤维化。

白藜芦醇通过下调缺氧诱导因子1α(HIF-1α)减少小鼠RAW264.7巨噬细胞的凋亡

目的研究白藜芦醇(Res)对氯化钴(CoCl2)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞损伤的保护作用及其分子机制。方法巨噬细胞分为对照组、 CoCl2组和Res预处理组, CoCl2组给予500μmol/L CoCl2干预8 h, Res预处理组先用40μmol/L Res预处理2 h,再给予500μmol/L的CoCl2干预8 h。采用CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例;免疫荧光细胞化学染色法观察胱天蛋白酶3(caspase-3)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的分布及CoCl2和Res对其表达的影响;相应试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测各组细胞Bcl2、 BAX、裂解型caspase-3(c-caspase-3)及HIF-1α蛋白水平。结果与CoCl2组相比, Res预处理能提高细胞活力,减少细胞凋亡并增加SOD活性、降低MDA含量;caspase-3主要分布在细胞质中,而HIF-1α主要分布在细胞核;与CoCl2组相比, Res能上调Bcl2的表达,下调BAX、 c-caspase-3及HIF-1α的蛋白水平。结论 Res可减少巨噬细胞凋亡,其机制可能与Res可减少细胞内氧自由基的堆积、增强细胞抗氧化能力以及下调细胞上HIF-1α的表达有关。