羊肚菌多糖的提取分离纯化及保健功效研究

为研究羊肚菌多糖的提取分离纯化及保健功效,本文采用理论结合实践的方法,立足羊肚菌多糖的相关概述,分析羊肚菌多糖的提取分离纯化的方法,以及羊肚菌多糖的保健功效。研究表明,羊肚菌多糖具有多种保健功效,而对其提取分离纯化及保健功效的研究则需结合羊肚菌多糖的特点,选择合适的方法,才能研发出更多具有保健功效的羊肚菌产品,满足市场需求。

富硒羊肚菌多糖的制备及其体外抗肿瘤活性探究

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试验、集落形成试验、划痕试验和Transwell试验来评价Se-MPS的抗肿瘤活性。采用RT-qPCR法、Western blot法和免疫荧光法评价Se-MPS的潜在抗肿瘤机制。单因素和响应面试验结果显示,富硒羊肚菌粗多糖提取的最佳工艺参数为:提取时间2.5 h、液料比45:1(mL/g)、提取温度82℃,得率为7.95%。纯化后,Se-MPS的总糖含量达到95.86%,硒含量高达76.07±0.32 mg/g。此外,Se-MPS显著降低了HepG2细胞的集落形成效率、细胞迁移率和侵袭细胞数目(P<0.05)。同时,Se-MPS抑制了PI3K/Akt通路传导,下调了葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA表达,并降低了细胞的葡萄糖摄取量。研究结果表明,通过对提取时间、液料比及提取温度的优化,可改善富硒羊肚菌粗多糖得率。此外,通过调控PI3K/Akt通路,富硒羊肚菌多糖可发挥出较强的抗肿瘤活性。这项研究为富硒羊肚菌多糖的抗肿瘤活性提供了证据,并为相关功能性食品的开发提供了参考。

超声辅助离子液体和酶解法提取羊肚菌多糖及其抗氧化活性研究

分别采用超声辅助离子液体法(L法)和酶解法(M法)提取羊肚菌多糖。以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化提取工艺,并研究羊肚菌多糖的抗氧化活性。结果表明:L法最佳提取工艺为料液比1∶26(g/mL)、超声温度55℃、离子液体体积1.6 mL、超声时间32 min,多糖得率为18.10%±0.25%;M法最佳提取工艺为料液比1∶21(g/mL)、酶解时间71 min、超声时间21 min、纤维素酶添加量0.85%(以提取液质量为基准),多糖得率为7.86%±0.13%。抗氧化活性试验表明,羊肚菌多糖具有较好地清除DPPH·和·OH的能力,抗氧化活性较好。

响应面法优化羊肚菌多糖的提取工艺

针对羊肚菌多糖的提取,通过单因素实验,根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,确定各工艺条件的影响因子,以羊肚菌多糖提取率为响应值作响应面和等高线图。结果表明,羊肚菌多糖水浸提的最佳工艺条件为提取温度85.03℃,浸提时间147.75min,水料比30.58:1,浸提1次时,羊肚菌多糖的提取率为5.305%。

硒、锌元素对羊肚菌多糖抗氧化性的影响

为提高羊肚菌多糖的抗氧化活性,外源加入硒(Se)、锌(Zn)微量元素。通过单因素实验选择Se、Zn在羊肚菌发酵培养基中的适宜添加浓度,Se添加质量浓度为0.2 g/L,Zn元素添加质量浓度为0.15 g/L;以VC做参照,采用普鲁士蓝体系,Fenton体系和邻苯三酚自氧化的方法测定羊肚菌多糖的抗氧化活性,结果表明:Se、Zn微量元素的添加使羊肚菌多糖对O2-·的清除率提高了50%,对·OH的清除率提高了20%,当多糖浓度为3mg/m L时,胞内硒多糖(IPS-Se)、胞内锌多糖(IPS-Zn)、普通胞内多糖(IPS)对O2-·的清除率分别为98.46%、96.7%、48.5%;对·OH的清除率分别为50.64%、40%、30.35%,但均低于相同浓度VC的清除率;比较IC50的大小判断抗氧化的能力,硒多糖的抗氧化性强于普通多糖,Zn添加使胞内多糖对O2-·的清除率增加了3倍。

过氧化氢法改性羊肚菌多糖研究

为提高羊肚菌多糖体外降血糖能力,本试验在筛选羊肚菌多糖改性方法的基础上,以α-淀粉酶抑制率为参数,运用单因素试验结合响应面分析法建立了羊肚菌多糖改性产物对α-淀粉酶抑制率的多元二次回归方程模型,优化了羊肚菌多糖过氧化氢氧化降解工艺条件。试验表明料液比为1∶8.55、pH为7.09、温度为47.8℃、时间为3.02 h的条件下的改性效果最好,在该条件下重复测定三次所得羊肚菌多糖过氧化氢氧化改性产物的α-淀粉酶抑制率为16.30%±1.22%,与模型预测结果的相对误差为0.11%,是改性前的17.16倍。同时,蔗糖酶抑制率为78.13%±5.09%,麦芽糖酶抑制率为16.48%±3.27%,α-葡萄糖苷酶抑制率为21.40%±3.81%,分别比改性前提高了1.07倍、1.64倍、1.22倍。与常用的降糖药阿卡波糖相比,羊肚菌多糖改性产物的α-淀粉酶抑制率、麦芽糖酶抑制率、α-葡萄糖苷酶抑制率分别提高了1.44、1.63和1.88倍,蔗糖酶抑制率与阿卡波糖差异不显著(P>0.05)。羊肚菌多糖经过氧化氢氧化改性的产物呈现明显的多糖红外吸收特征,对糖苷酶抑制效果显著提升,提高了其体外降血糖能力。

羊肚菌多糖对小鼠抗运动疲劳及耐缺氧的影响

为探讨羊肚菌(Morchella esculenta)抗运动疲劳作用,以小鼠为对象进行相关试验。分别将小鼠分为低、中、高3个不同剂量的小组及对照组进行试验,并严格按照剂量规定标准,连续30 d对小鼠进行灌胃羊肚菌多糖的试验。试验后对小鼠抗运动疲劳相关指标进行分析,并研究小鼠运动后其体内血乳酸、肝糖原等含量变化情况。研究结果显示,羊肚菌多糖的使用可有效提高小鼠抗运动疲劳效果,尿素氮含量由对照组的(8.76±0.21) mmol·L^-1提高到高剂量组的(4.49±0.36) mmol·L^-1,增强其耐缺氧时间,使得试验小鼠在机体运动过程中体内肝糖原储量提升,表明羊肚菌多糖对小鼠抗运动疲劳具有促进作用。

羊肚菌多糖药用价值研究进展

本文对羊肚菌多糖的药用价值进行了综述,说明了羊肚菌多糖具有抗疲劳、提高免疫力、抗肿瘤、抗菌等活性。

转录组分析探讨揭示羊肚菌多糖ME-X抗S180肿瘤的分子机制

【目的】为探究羊肚菌多糖(ME-X)对S180肿瘤细胞抑制作用及其基因表达的影响,探索ME-X抑制小鼠S180肿瘤表型下潜在的作用分子及主要信号通路。【方法】以S180肿瘤小鼠为模型,先进行ME-X体内抑制小鼠S180肿瘤试验,再结合RNA-Seq测序技术对体内试验组中小鼠的S180肿瘤细胞进行测序并对得到的数据进行生物信息学分析。【结果】羊肚菌多糖(ME-X)和甘露聚糖肽(mannatide)一样能够极显著(P<0.01)抑制小鼠S180肿瘤的生长,其抑瘤率可达53.81%。差异表达基因(differential expressed genes,DEGs)分析结果显示羊肚菌多糖抑制S180肿瘤的关键基因主要富集在PI3K-AKT信号通路中,该通路中的成纤维细胞生长因子(Fgf10)、成纤维细胞生长因子受体(Fgfr2)、细胞因子受体(Prlr、Ghr、I12rb)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Pck1)等多个基因显著上调。【结论】羊肚菌多糖(ME-X)可能通过PI3K-AKT信号通路调控S180肿瘤细胞代谢、迁移、细胞周期等进程达到抑制S180肿瘤的目的,为羊肚菌多糖抑制肿瘤分子机制研究提供可参考的理论依据。

羊肚菌多糖应急性抗疲劳成分的初步分离与鉴定

通过葡聚糖凝胶G-100柱分离羊肚菌粗多糖。对液体培养经提取获得的羊肚菌胞外粗多糖、胞内粗多糖,经葡聚糖凝胶柱分离获得羊肚菌多糖分离组分,通过小鼠应急性灌胃处理后的负重游泳时间确定分离组分的抗疲劳作用。结果显示:胞内2组和胞外1组与对照组相比P<0.01,胞内5组和胞外3组与对照组比较P<0.05,说明胞内2组和胞外1组、胞内5组和胞外3组有显著的抗疲劳作用,对这四个组分进行红外光谱初步分析,这些组分可能存在吡喃糖环的醚键-C-O-C-,脂肪醚或芳香醚结构。研究结果可为以羊肚菌多糖为原料的抗疲劳保健品的开发提供参考与帮助。

羊肚菌多糖硫酸化衍生物的制备、结构分析及体外抗肿瘤活性

该研究采用氯磺酸-吡啶法对羊肚菌多糖MSP-SII进行硫酸化修饰,得到了硫酸化衍生物.利用傅里叶红外光谱对其结构进行测定,结果显示硫酸化衍生物在多糖MSP-SII的结构基础上增加了S=O的吸收峰,表明羊肚菌多糖经硫酸化修饰后添加上了硫酸基团.采用MTT法检测硫酸化修饰后多糖对肿瘤细胞Hela的抑制作用,实验结果显示硫酸化多糖对正常细胞无毒性,但是却可以抑制Hela细胞增殖.利用采用流式细胞仪检测硫酸化多糖的抗肿瘤活性,进行了细胞凋亡、细胞周期和线粒体膜电位的实验,结果进一步表明硫酸化多糖能促进Hela细胞凋亡.

响应面法优化羊肚菌多糖提取工艺研究

利用Box-Benhnken响应面法对热水浸提羊肚菌多糖工艺进行优化,在单因素实验基础上,选择水料比、提取温度、提取时间为自变量,以羊肚菌多糖提取率为响应值,采用三因素三水平的响应面分析法优化羊肚菌多糖提取工艺.结果表明,影响热水浸提羊肚菌多糖提取率的大小顺序为:提取温度>提取时间>水料比.羊肚菌多糖提取的最佳工艺条件为:水料比51∶1(mL/g)、提取温度46℃、提取时间3.5 h,平均提取率为7.39%(n=3),与预测值7.311%接近.

深层发酵羊肚菌多糖的提取、分离及纯化研究

以深层发酵产生的羊肚菌菌丝体和发酵液为主要原料提取羊肚菌多糖，对影响多糖提取率的几个因素分别进行了对比实验，并对多糖进行了纯化及组分测定。

羊肚菌多糖的提取优化及抗氧化活性研究

目的 对羊肚菌多糖(Morchella esculenta polysaccharides,MEP)的提取工艺进行筛选优化,获得最佳工艺和最佳活性组分。方法 采用热水浸提(hot water extraction,HWE)法、柠檬酸提取(citric acid extraction,CAE)法、碱提(alkaline solution extraction,ASE)法、低共熔溶剂(deep eutectic solvents,DESs)提取法获得4种多糖(MEP-W、MEP-S、MEP-A和MEP-D),筛选最佳提取方法,在单因素试验基础上通过响应面设计优化最佳工艺,采用分级醇沉法分离纯化MEP-W获得3个组分MEP30、MEP60和MEP80,通过自由基清除试验和还原力测定评估其抗氧化活性。结果 HWE法为最佳提取方法,最佳提取工艺为:提取时间3.0 h、液料比44:1 (mL/g)、温度83.6℃,此时的提取得率为(8.13±0.38)%。MEP80在3个组分中清除·OH能力和还原力最强,半数效应浓度(median effective concentration,EC50)和RP0.5AU分别为0.44和1.52 mg/mL,高于其前体物MEP-W。结论 热水浸提为最佳方法,MEP80为抗氧化活性的最佳组分,在开发功能性食品和医药行业应用中值得进一步研究。

羊肚菌多糖含片的研制及其体外抗氧化活性研究

以羊肚菌子实体为主要原料,经纤维素酶、木瓜蛋白酶复合酶解,超声辅助提取获得羊肚菌多糖后,进一步通过辅料添加研制羊肚菌多糖含片。单因素和响应面试验优化获得最佳的羊肚菌多糖提取最佳条件为液料比29:1 mL/g、酶解pH5.1、酶解时间2 h、酶用量1.4%、超声时间20 min,提取得率达到最高为9.21%;单因素实验和正交试验确定了羊肚菌多糖含片最佳的填充剂种类为甘露醇:山梨糖醇=1:1、配料组成为填充剂与多糖浸膏比值为8:1、维生素C的添加量为5 mg/g、硬脂酸镁的添加量为0.8%,此条件下得到含片综合评分为86.4分。当含片浓度为10 mg/mL时,抗氧化活性结果为:羟自由基的清除率为46.78%、DPPH自由基的清除率为75.38%,具有良好的抗氧化活性。

响应面法优化羊肚菌多糖-葡萄糖胺共聚物的制备工艺

目的:研究羊肚菌多糖-葡萄糖胺共聚物的制备工艺。方法:以总抗氧化活性为指标,在单因素实验基础上,通过响应面法法优化羊肚菌多糖-葡萄糖胺共聚物的制备工艺。结果:最佳的共聚物的制备工艺为:反应体系的pH值11.50,葡萄糖胺与羊肚菌多糖质量比4.5∶1,反应时间5.5 h;在该优化条件下制备的羊肚菌多糖-葡萄糖胺共聚物的总抗氧化活性,较原羊肚菌多糖显著增强。结论:与葡萄糖胺共聚是提高羊肚菌多糖抗氧化活性的有效方法。

羊肚菌多糖提取物对运动员体液免疫及补体系统的影响

探究羊肚菌多糖对足球运动员体液免疫与补体系统的影响。选取足球运动员80人,随机分为安静组、安静服药组、训练组、训练服药组,每组20人。安静组、安静服药组不训练,训练组、训练服药组进行为期4周的足球训练中,安静服药组、训练服药组服用剂量为1 g·d^-1羊肚菌多糖,其他组给予同剂量安慰剂,时间均为4周。试验结束后第2天,静脉抽血测定IgG、IgA、IgM、C3、C4、CH50含量。试验结果表明,训练组、训练服药组IgG、IgA、IgM、C3、C4、CH50含量,与安静组相比,含量均降低,差异显著(P<0.05);安静服药组IgG、IgA、IgM、C3、C4、CH50含量,与安静组相比,含量均升高,差异显著(P<0.05);训练组、训练服药组与安静服药组相比,IgG、IgA、IgM、C3、C4、CH50含量均显著升高,差异显著(P<0.05);训练服药组与训练组相比,IgG、IgA、IgM、C3、C4、CH50含量均显著升高,差异显著(P<0.05)。羊肚菌多糖能提升足球运动员训练期间的体液免疫功能、补体系统水平,抑制大强度运动期间的免疫功能降低。

羊肚菌多糖对人结肠癌细胞SW620体外增殖的抑制作用

目的:研究羊肚菌多糖对人结肠癌细胞SW620体外增殖的抑制作用。方法:采用mtt法、划线法和集落生成分析法检测羊肚菌多糖对人结肠癌细胞SW620的体外增殖抑制作用,采用流式细胞技术检测羊肚菌多糖对人结肠癌细胞SW620的凋亡作用,采用western blotting技术检测相关凋亡蛋白的表达情况。结果:1) 羊肚菌多糖对人结肠癌细胞SW620的体外增殖、细胞迁移、细胞集落形成具有抑制作用,其作用24 h的IC50为1220 &#177;50 μg/mL,48 h的IC50为968 &#177;63 μg/mL;2) 羊肚菌多糖通过凋亡途径抑制SW620细胞的增殖;3) 在羊肚菌多糖的作用下抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降,而凋亡蛋白Bax和caspase-3的表达上升。结论:羊肚菌多糖能显著抑制人结肠癌细胞SW620的增殖,并通过上调Bax和caspaes-3的表达和下调Bcl-2的表达诱导SW620细胞凋亡。

山西农业大学食用菌团队在羊肚菌多糖的高效提取方面取得进展

羊肚菌(Morchella importuna)是富含蛋白质、多糖、甾醇等多种生物活性物质。其中,羊肚菌多糖具有抗肿瘤、提高机体免疫力、降血脂、抗氧化、抗疲劳等生理活性,且无毒副作用。但羊肚菌多糖提取效率较低,提取方式多采用传统热水抽提,存在费时、能耗高、活性组分易损失、得率低等缺点;而深共熔溶剂(DESs)作为一类新型绿色介质,不仅具有离子液体的良好性质,如热稳定性优异,与水和有机溶剂混溶,对各种有机化合物具有优异的溶解性和萃取性,而且原料易得,成本较低,制备简单,无污染。