考马斯亮蓝法测定苹果组织微量可溶性蛋白含量的条件优化

以红星苹果果肉为试材,探讨不同提取缓冲液(磷酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液和水)、缓冲液pH值、浓度、外源添加物和料液比等因素对苹果果肉可溶性蛋白提取效率的影响。结果表明:外源添加PVP和EDTA以及料液比是苹果可溶性蛋白提取率的主要影响因素。实验最终确定的提取条件为0.1mol/L pH9.0 Tris-HCl提取缓冲液(内含1mmol/L EDTA和1%PVP)、料液比1:25,此条件下苹果果实可溶性蛋白的有效测定含量为0.544%,为水提组(0.073%)的7.45倍。

考马斯亮蓝法检测活性污泥中蛋白质含量优化

采用考马斯亮蓝法对活性污泥中蛋白质的含量进行测定,并从污泥洗涤、蛋白质提取到蛋白质检测,对该方法用于活性污泥蛋白质含量检测进行优化。试验结果表明：采用Tris-HCl缓冲液洗涤、碱提取法法提取、5~10 min水浴、中性或弱酸、弱碱条件下检测,蛋白质浓度在10~180μg/m L内与吸光度具有良好的线性关系（R2=0.995 7）;该方法的精密度（相对标准偏差（RSD）=3.80%）较高,重复性较好（RSD=2.09%）,加样回收率（n=6）范围为96.99%~109.14%。该方法通过优化后具有快速、精确、可靠的优点,可用于活性污泥蛋白质含量的检测。

考马斯亮蓝法快速测定乳品中蛋白质含量

采用考马斯亮蓝G-250染料染色法对市售乳品中蛋白质进行测定,在595 nm波长处测定溶液的吸光度。实验结果表明,标准蛋白质在10～80μg/mL之间呈现良好的线性关系。该法简便快速、灵敏度高、重现性好,是测定乳品中蛋白质的有效方法。

考马斯亮蓝法测定茶籽多糖中蛋白质含量条件的优化

为建立高效、快速测定茶籽多糖中蛋白质含量的方法,以吸光度为考察指标,通过单因素和正交试验,对采用考马斯亮蓝法测定茶籽多糖溶液中蛋白质含量的试验条件(考马斯亮蓝G-250用量、反应时间、反应温度)进行了优化。结果表明,优化后的方法为:精确吸取茶籽多糖溶液1.0mL,加入考马斯亮蓝G-250溶液(0.01%)4.0mL,以蒸馏水补至总体积为10.0mL,混匀,25℃条件下放置35min,于595nm处测定其吸光度。该方法的精密度RSD为0.506%;稳定性RSD为0.836%;重现性RSD为1.57%;样品的平均加标回收率为99.19%,RSD为0.86%,表明该方法是测定茶籽多糖溶液中蛋白质含量的有效方法。

温度对考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的影响

[目的]研究温度在考马斯亮蓝法测定蛋白质过程中的影响,为准确测定蛋白质浓度提供建议和指导。[方法]通过考马斯亮蓝法测定在不同温度和孵育时间下对已知不同浓度的牛血清蛋白的影响。[结果]在0-100 mg/ml蛋白质浓度标准曲线测定范围内,室温20℃孵育20-30 min时测定的蛋白质浓度比较稳定。同时蛋白质浓度越高,考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度过程中对各种因素影响的抵御能力越强。[结论]采用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度时,环境温度、待测样品浓度以及染料与蛋白质孵育时间等是决定实验结果准确性的重要因子。

考马斯亮蓝法对烟草薄片涂布液中蛋白质含量的测定

采用考马斯亮蓝法对烟草薄片涂布液中的蛋白质含量进行了测定,建立了快速、灵敏的蛋白质检测方法。结果表明,蛋白质含量在14~140μg/m L与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 5),样品平均回收率为101.5%,RSD为1.4%。该方法简便、快速、准确度高、重现性好,可以作为烟草薄片涂布液及烟草料液中蛋白质测定的有效方法。

考马斯亮蓝法在茶汤可溶性蛋白含量分析中的应用和改良

对考马斯亮蓝 (Coomassie brilliantblue,CBB)染色测定茶汤蛋白含量的方法进行了改良 ,并以牛血清白蛋白 (Bovine serum albumin,BSA)为标准蛋白 ,对影响蛋白分析效果的重要参数进行了研究。结果表明 ,BSA-CBB复合物与茶汤可溶性蛋白 -CBB复合物具有相似的紫外可见吸收图谱 ,分别在 2 0 5 nm、2 60 nm、3 0 5 nm和5 90 nm处出现了 4个吸收峰 ;在茶汤用量 2 .5～ 5 .0 ml、40℃染色 3 0 min、转溶液体用量 1 4.4ml试验条件下 ,可获得良好的分析效果。应用本方法 ,炒青绿茶和红碎茶茶汤 (茶水比为 1 .5 g/ 2 5 0 ml)可溶性蛋白含量分别为 1 9.3 7μg/ ml和 1 8.45 μg/ ml,分析结果的变异系数分别为 0 .5 4%和 1 .0 5 %。

考马斯亮蓝法测定乳与乳制品中蛋白质含量

建立了一种测定乳与乳制品中蛋白质含量的方法。利用6份乳与乳制品作为试验材料，通过考马斯亮蓝比色法测定其蛋白质含量。结果表明，工作曲线在0～0．18g／100mL范围内线性关系良好，线性相关系数为0．9993，平均加标回收率为98．13％，相对标准偏差小于5％，方法的检出限为0．02g／100mL，该方法具有操作简便、重现性好、准确可靠等特点。

考马斯亮蓝法在啤酒泡沫蛋白测定中的应用

通过研究考马斯亮蓝G-250染液与蛋白质的结合反应,确定最佳反应条件:反应时间10 min,反应温度恒定室温,pH值在3～7范围内。在该条件下,制作标准曲线测定啤酒样品泡沫蛋白含量。结果表明,蛋白质浓度在20～125μg/mL时与吸光值有良好的线性关系(R2=0.9964),检出限1.0656μg/mL,该方法重复性良好(RSD值小于5%),测得的啤酒泡沫蛋白含量与其泡持值有显著相关性,且方法简单、快捷。

考马斯亮蓝法测定天花粉饮片水煎剂中蛋白质含量

目的:测定治疗脑卒中及其后遗症的经典方栝楼桂枝汤中的君药天花粉饮片水煎剂中蛋白质的含量。方法:采用考马斯亮蓝法,利用考马斯亮蓝染料与蛋白质中的碱性基团相结合的原理,通过分光光度计测量待测溶液吸光度,得出其蛋白浓度。结果:浓度分别为0.5g/mL和1.0g/mL的天花粉饮片水煎剂,其蛋白质含量分别为106.6μg/mL和132.6μg/mL。结论:该测定方法快捷、方便、灵敏度高,为后续研究奠定了基础。

双缩脲法与考马斯亮蓝法测定母乳总蛋白的应用比较

双缩脲法与考马斯亮蓝法测定母乳总蛋白的应用比较宋景秋王以立（南京鼓楼医院检验科，南京２１０００８）关键词双缩脲考马斯亮蓝消化定氮母乳总蛋白母乳喂养已被广泛认同，其中蛋白质是主要营养成份，因此母乳总蛋白的测定显得非常重要。母乳中乳糖浓度较高，实验发现乳...

考马斯亮蓝法测定微量蛋白的条件探讨

目的探讨测定微量蛋白的最佳方法。方法用考马斯亮蓝试验,不同浓度的定值样本吸取不同的量,以不同波长测定吸光度值,且选择不同浓度作标准液计算测定值进行分析。结果590nm波长时,样本吸光度变化最大;10μl样本量,以1.0g/L作标准液时,测定值与定值最相近,直线回归方程:Y=0.9549X+0.0386,r=0.9989,t=0.134,P>0.1。测定值与定值无差别。结论考马斯亮蓝试验测定微量蛋白,用试剂2.0ml,样本量10μl,以1.0g/L作标准及选590nm波长测定,是一种可行的理想方法。

考马斯亮蓝法测定青霉素发酵液中可溶性蛋白质含量

以青霉素发酵液为原料,利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理,测定发酵液中蛋白质含量,并对检测方法进行验证,检测波长为595 nm。蛋白质含量在0～30μg/mL时与吸光度有良好的线性关系,测定所需标准曲线方程为y=0.003 9 x+0.048 8。采用考马斯亮蓝法测定青霉素发酵液中蛋白含量具有速度快、精确度高、重现性好等特点。

考马斯亮蓝法快速测定菜籽粕中可溶性蛋白质的含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对菜籽粕中可溶性蛋白质含量进行测定,在波长595 nm处测定其吸光度.实验表明,可溶性蛋白质含量在10～ 100 μg/mL之间呈现良好的线性关系,通过此法测得菜籽粕中可溶性蛋白的平均含量为5.30％.方法简便快速、灵敏度高、重现性好,是测定菜籽粕中可溶性蛋白质的一种有效方法.

考马斯亮蓝法测定大豆水溶性蛋白提取方法的优化

为提高考马斯亮蓝法提取大豆水溶性蛋白的效率,本研究以河北省优质高蛋白大豆品种冀豆12号为材料,对考马斯亮蓝法测定大豆水溶性蛋白质含量的提取条件进行了优化。在单因素试验的基础上,通过正交试验方法分析料液比、提取温度、提取时间和转速4种因素对大豆水溶性蛋白质含量的影响,筛选出适合河北省大豆品种鉴定的精确、高效、可重复性强的方法体系,并采用优化后的提取方法测定河北省29份大豆材料的水溶性蛋白含量。结果表明:通过正交试验最终确定的优化提取条件为料液比1∶400、提取温度30℃、提取时间90 min、转速220 r·min^(-1);采用优化体系测定了2020年秋季收获的29份河北省大豆新材料的水溶性蛋白含量,其中3份材料水溶性蛋白含量为15%~20%,7份材料水溶性蛋白质含量为20%~25%,5份材料蛋白质含量为25%~30%,14份材料的水溶性蛋白质含量超过30%。

考马斯亮蓝法定量评估绿茶涩味强度

苦涩味是构成绿茶滋味的重要因子,但缺乏客观的评价方法。文中对121个绿茶样品中主要化学成分进行主成分和因子分析,得到了F1:苦、F2:鲜、F3:涩、F4:酸和F5:爽5个滋味复合因子,并筛选出36个茶样进行定量感官涩味评估和考马斯亮蓝法测定。结果表明:5个滋味复合因子能很好地解释绿茶"苦涩、鲜爽"的呈味特点;唾液淀粉酶沉淀指数与鲜味因子得分呈显著负相关(P<0.05),定量感官涩味得分与EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯)呈显著正相关(P<0.01),而唾液淀粉酶沉淀指数、定量感官涩味得分及涩味因子得分间相关性未达到显著水平,绿茶茶汤涩味的产生不仅与酚类物质对唾液蛋白的沉淀有关,可能还存在其他的影响因素。

考马斯亮蓝法检测不同乳中乳清蛋白含量

目的建立考马斯亮蓝法(coomassie brilliant blue method, CCB)检测乳品中蛋白质的方法,并对几种常见乳中总蛋白质含量及乳清蛋白含量进行检测比较。方法用考马斯亮蓝G-250显色,以牛血清蛋白为对照品,采用可见分光光度法在检测波长595nm处测定各种乳中蛋白质的含量。结果该方法在0.005～0.1 mg/mL范围内与吸光度呈现良好的线性关系(r=0.9995),回收率为99.45%、相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为2.03%;不同种类乳中蛋白质含量存在差别,乳清蛋白占比也有很大的不同。结论考马斯亮蓝法检测蛋白,显色灵敏,具有简便,快捷,成本低等特点。各种乳蛋白检测比较中,马乳的乳清蛋白占比最接近母乳,这为马乳的进一步开发提供了新的理论基础。

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量中的细节问题

蛋白质含量测定是生物学实验的一项重要内容。测定蛋白质含量的方法有很多种,其中实验室最常用的方法是考马斯亮蓝法。该方法的原理和实验步骤虽然简单,但实验过程中有很多技术细节相关教材和文献中并没有介绍,忽视任何一个细节都可能导致实验失败。该文以测定植物中可溶性蛋白质含量为例,介绍了考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理、试剂、仪器设备和操作步骤等,着重介绍了实验操作过程中应注意的细节问题,分享了实验室积累的经验,以提高学生的操作技能和实验成功率。

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量中的细节问题

蛋白质含量测定是生物学实验的一项重要内容。该文采用考马斯亮蓝法测定了植物中可溶性蛋白质含量,介绍了考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理、试剂、仪器设备和操作步骤,着重介绍了实验操作过程中应注意的细节,分享了本实验室积累的经验。实践表明,该实验使得蛋白质含量测定结果的准确性和稳定性大大提高,拓展了学生的专业知识,提高了学生的实验技能。