左氧氟沙星联合万古霉素缩小金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的初步研究

目的:在体外初步探讨联合用药可缩小单药对细菌的耐药突变选择窗(MSW),为临床合理使用现有抗菌药物,防止细菌耐药产生提供理论依据。方法:应用肉汤法富集1010CFU/mL细菌,琼脂平板二倍稀释法测定左氧氟沙星、万古霉素单药和两药联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最低药物浓度(MPC)和MSW。结果:左氧氟沙星、万古霉素单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW分别为16和64。万古霉素和左氧氟沙星联合用药(1MIC+8MIC,2MIC+4MIC)使左氧氟沙星单药对ATCC29213的MSW缩小2～4倍。左氧氟沙星联合万古霉素用药(1MIC+16MIC,2MIC+8MIC)使万古霉素对ATCC29213的MSW缩小4～8倍。结论:万古霉素和左氧氟沙星联合用药可缩小各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW。

酒石酸泰乐菌素联合阿莫西林钠缩小猪链球菌耐药突变选择窗的研究

为了使临床合理使用抗菌药物,防止细菌耐药性的产生提供理论依据。本研究探讨了在体外初步联合用药缩小猪链球菌(S.suis)的耐药突变选择窗(MSW)。应用肉汤法富集1010CFU/mL细菌,琼脂平板二倍稀释法分别测定酒石酸泰乐菌素(TLST)、阿莫西林(Amoxil)钠及两药联用后对S.suis分离株D10的防突变浓度(MPC)和MSW。TLST、Amoxil钠单药和两药联用对S.suis分离株D10的MSW分别为9.71、5.16和2.81。TLST和Amoxil钠联合用药使TLST对D10的MSW缩小3.5倍;TLST和Amoxil钠联合用药使Amoxil钠对D10的MSW缩小1.8倍。TLST和Amoxil钠联合用药可缩小各自单药对S.suis分离株D10的MSW。

氟喹诺酮药物对金黄色葡萄球菌同源耐药突变株的耐药突变选择窗研究

目的通过测定不同氟喹诺酮(FQ)药物对同源金黄色葡萄球菌耐药突变株的MIC和防耐药突变浓度(mutant prevention concentration,M PC),分析不同药物的抗菌活性及限制耐药突变株选择的能力。方法分别采用环丙沙星和加替沙星琼脂平板筛选金黄色葡萄球菌ATCC25923同源的第一步和第二步耐药突变株。采用琼脂平板稀释法测定各耐药突变株的M IC和M PC,计算选择指数(MPCM/IC)。结果加替沙星和莫西沙星对金黄色葡萄球菌ATCC25923第一步耐药突变的M PC值(1～2μg/m l)明显低于环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星(4～16μg/ml),以上5种FQ药物对第一步耐药突变的M PC值和选择指数分别为ATCC25923的2～8倍和1～4倍。加替沙星和莫西沙星对第二步耐药突变的M PC值为8～16μgm/l。结论对于金黄色葡萄球菌ATCC25923同源的第一步耐药突变株,加替沙星和莫西沙星限制下一步耐药突变株选择的能力强于环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星,结合药动学参数,环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星很容易选择出下一步耐药突变株;而加替沙星和莫西沙星则能够限制下一步耐药突变株的选择。对于第二步耐药突变株,加替沙星和莫西沙星则很容易筛选出对这两种药物也耐药的菌株。临床上为延长加替沙星和莫西沙星的应用时间,对于已对左氧氟沙星耐药的菌株应避免应用加替沙星和莫西沙星单药治疗。

环丙沙星联合用药缩小鸡沙门氏菌耐药突变选择窗的研究

为研究环丙沙星联合用药对鸡沙门氏菌耐药突变选择窗(MSW)的影响,本研究采用琼脂二倍稀释法测定环丙沙星、阿米卡星、多西环素3种药物单独使用及联合用药对鸡沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)、防耐药变异浓度(MPC)和MSW。结果显示,环丙沙星联合阿米卡星和多西环素后鸡沙门氏菌MPC分别降低了8倍和16倍;环丙沙星和16 MIC多西环素联合时,能完全关闭环丙沙星的MSW。本研究表明环丙沙星联合阿米卡星和多西环素能够有效缩小鸡沙门氏菌的MSW,并且联合多西环素能关闭MSW,防止耐药突变株的富集。

氨基糖苷类药物在联合用药时缩小抗菌药物对鲍曼不动杆菌耐药突变选择窗中的作用

目的探讨氨基糖苷类药物与其他抗鲍曼不动杆菌药物联合应用时,在缩小抗菌药物对鲍曼不动杆菌的耐药突变选择窗的作用。方法选择阿米卡星、妥布霉素及奈替米星3种氨基糖苷类药物,同时选择4种临床常用的抗鲍曼不动杆菌药物:头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南-西司他丁、环丙沙星及左氧氟沙星进行试验。应用E试验法测定4种抗鲍曼不动杆菌药物和3种氨基糖苷类药物对鲍曼不动杆菌ATCC19606的MIC;琼脂平皿稀释法测定4种抗鲍曼不动杆菌药物单药及联合3种氨基糖苷类药物后对鲍曼不动杆菌ATCC19606的防耐药突变浓度,计算选择指数,根据联合前后选择指数的变化,观察氨基糖苷类药物和其他抗菌药物联合后对其耐药突变选择窗的影响。结果头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南-西司他丁、环丙沙星、左氧氟沙星单药对鲍曼不动杆菌ATCC19606的选择指数分别为:16、>32、16、32;联合阿米卡星后其选择指数分别为:1、2、4、4;联合妥布霉素后其选择指数分别为:2、2、8、8;联合奈替米星后其选择指数分别为:2、4、8、16。结论 4种抗鲍曼不动杆菌药物在分别联合3种氨基糖苷类药物后,对鲍曼不动杆菌的耐药突变选择窗明显缩小,可以有效减少耐药突变株产生,以联合阿米卡星后的作用最为明显。

耐药突变选择窗与细菌耐药的动物体内研究

目的探讨耐药突变选择窗(MSW)与体内细菌耐药发生的相关性。方法建立兔组织笼金黄色葡萄球菌感染模型,给予不同剂量的左氧氟沙星灌胃治疗。抽取组织笼内组织液进行药物浓度测定,同时监测组织笼内细菌药物敏感性变化。结果当左氧氟沙星浓度位于MSW内时,导致金黄色葡萄球菌耐药突变体的选择富集,引起耐药。当药物浓度低于抑制菌群中99%细胞生长的最低药浓度或高于防耐药变异浓度时,无耐药出现。当左氧氟沙星浓度在MSW内的下部时,最容易选择出耐药突变体,且耐药出现最快。结论MSW在体内存在,保持抗菌药物浓度在MSW以上可以限制耐药突变体的选择富集。

防耐药突变体选择浓度和耐药突变选择窗理论的研究进展

目的:阐述防耐药突变体选择浓度和耐药突变选择窗理论的最新研究进展。方法:查阅近年来国内外相关文献资料进行整理归纳。结果与结论:体外MPC测定、体外药效学研究、动物感染模型、人体内研究验证了MSW理论,防耐药突变体选择浓度和耐药突变选择窗理论为评价细菌耐药新的重要指标。

联合用药缩小凡纳滨对虾斑点气单胞菌耐药突变选择窗的研究

通过测定斑点气单胞菌单药和双药抗生素最低抑菌浓度(MIC)、防突变浓度(MPC)和耐药突变选择窗(MSW),探索合理使用抗菌药物,防止细菌耐药性产生的用药方案。利用药物敏感性实验测定斑点气单胞菌对10种抗生素的抗性,筛选出6种不同机制的敏感性抗菌药物,应用琼脂平板稀释法对斑点气单胞菌测定单药以及双药的最低抑菌浓度(MIC)和防突变浓度(MPC),计算选择指数(SI)和联合指数(CI),测定联合用药对耐药突变选择窗(MSW)的影响。结果显示:6种药物氯霉素、土霉素、利福平、红霉素、盐酸四环素、头孢霉素的MIC分别为0.512、0.416、6.272、2.048、0.386和0.512μg/m L;MPC分别为524.288、1 277.952、802.816、1 024.000、1 185.792和10.880μg/m L;SI值分别为1 024.000、3 072.000、128.000、500.000、3 072.000和21.250。土霉素与红霉素、盐酸四环素与红霉素、盐酸四环素与头孢霉素、土霉素与头孢霉素、盐酸四环素与土霉素、氯霉素与土霉素、氯霉素与盐酸四环素、利福平与氯霉素、利福平与头孢霉素、利福平与盐酸四环素、利福平与土霉素、红霉素与头孢霉素双药联合后的联合指数分别为1.000、1.000、1.000、1.000、0.834、1.500、1.500、0.834、2.000、2.000、1.000和2.000。双药联合明显降低了药物SI值,有效缩小了斑点气单胞菌耐药突变选择窗,其中利福平与盐酸四环素双药联合后SI值由128.000,3 072.000均降低至1.000,完全关闭了耐药突变选择窗,有效抑制斑点气单胞菌的耐药生长。

夫西地酸联合头孢类抗生素缩小金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的研究

目的:体外研究夫西地酸联合头孢类抗生素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的影响,为使用临床抗菌药物和防止细菌耐药现象提供指导和理论依据。方法:肉汤法富集浓度为1010cfu/m L的金黄色葡萄球菌ATCC29213,采用琼脂二倍稀释法测定夫西地酸单用及夫西地酸联用三种头孢类抗生素时的防耐药突变浓度(MPC)和防耐药突变选择窗(MSW)。结果:夫西地酸、头孢唑林、头孢丙烯、头孢曲松对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC分别是128、1、4、8 mg/L,MSW分别为128、4、8、4。夫西地酸联合头孢唑林后,MPC下降至32 mg/L;夫西地酸联合头孢丙烯后,MPC下降至8 mg/L;夫西地酸联合头孢曲松后,MPC下降至8 mg/L。结论:夫西地酸单独应用时,MSW较宽易产生耐药菌,与三种头孢类抗生素联合应用后夫西地酸的MSW可明显缩窄。

头孢噻肟-恩诺沙星联合用药对携带F17毒力基因牛源大肠埃希氏菌耐药突变选择窗的影响

为研究头孢噻肟-恩诺沙星联合用药对携带F17毒力基因牛源性大肠埃希氏菌(E.coli)耐药突变选择窗的影响,采用琼脂二倍稀释法测定头孢噻肟(CTX)和恩诺沙星(ENR)对11株携带F17毒力基因E.coli分离株单独用药及联合用药的最低抑菌浓度(MIC)、耐药突变度(MPC),计算耐药指数(SI)。结果显示,CTX和ENR联合用药后,CTX的MPC_(90)降至256 mg/L,SI下降了4倍,MPC_(90)/MIC_(90)为1,即联合ENR后能使CTX的耐药突变选择窗(MSW)完全关闭;同样联合用药后ENR的MPC_(90)降至256 mg/L,SI下降了2倍,MPC_(90)/MIC_(90)为2,MSW变窄,即联合CTX后能使ENR的MSW减小。结果表明,CTX联合ENR能够缩小甚至关闭其单药的MSW,有效防止耐药的产生。本研究为E.coli的耐药性防止提供了新思路,同时也为指导临床用药提供了新的思路。

2种喹诺酮药物单用及联合氨苄西林或卡那霉素对猪源沙门菌耐药突变选择窗的研究

为探讨联合用药对猪沙门菌耐药突变选择窗的影响,采用琼脂二倍稀释法测定环丙沙星、左氧沙星及其联合氨苄西林和卡那霉素对56株临床分离的猪源沙门菌的最低抑菌浓度(MIC)、耐药变异浓度(MPC)、耐药指数(SI),并进行统计学分析。结果显示,环丙沙星联合氨苄西林和卡那霉素后其耐药变异浓度(MPC)降低到2mg/L和1mg/L,SI分别下降了4倍和8倍;左氧沙星联合氨苄西林和卡那霉素MPC降低到1mg/L和0.5mg/L,SI分别下降了2倍和4倍;且两种药物与卡那霉素联合能完全关闭其突变选择窗(MSW)。本研究表明,环丙沙星、左氧沙星联合氨苄西林和卡那霉素能够缩小甚至关闭其单药的MSW,防止耐药的产生。

联合用药对奶牛源乳房链球菌耐药突变选择窗的影响

为了探讨体外阿米卡星(AK)与头孢噻呋(EFT)、红霉素(E)以及马波沙星(MBF)单独及联合应用对奶牛乳房链球菌耐药突变选择窗(MSW)的影响,试验对临床采集的奶样进行乳房链球菌的分离鉴定,采用微量肉汤稀释法和棋盘法测定AK、EFT、E、MBF单用及联用后对分离的乳房链球菌的最小抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌浓度(FIC)指数,判断药物联用后的相互作用;采用琼脂二倍稀释法测定药物单用及联用后对乳房链球菌的的防耐药突变浓度(MPC),计算选择指数SI(MPC/MIC),判定能否缩小MSW,筛选出最佳联合用药方案。结果表明:分离得到7株乳房链球菌,单用时,AK、EFT、E、MBF对分离的7株乳房链球菌的MIC分别为8~64、0.5~8、0.125~16、1~16μg/mL;联用后,AK与EFT、E、MBF的FIC指数分别为0.5~1、0.3125~0.75、0.3125~0.75。单用时,AK、EFT、E、MBF对分离的7株乳房链球菌的MPC分别为128~512、64~512、16~256、64~512μg/mL;AK与EFT、E、MBF联用后,SI分别为原来的50%~100%、25%~100%、12.5%~100%。说明AK与其他三种药物联用后,对乳房链球菌均具有协同或相加作用,且AK与其他三种药物联用后均可以缩小MSW,其中AK与MBF联用后效果较为明显。

氨苄西林和安普霉素对禽源沙门菌的体外联合效果和耐药突变选择窗的研究

目的探讨氨苄西林(ampicillin,AMP)和安普霉素(apramycin,APR)联合是否能增强对禽源沙门菌的抗菌效果,以及能否缩小甚至关闭AMP对沙门菌的耐药突变选择窗(mutant selection window,MSW)。方法以ATCC 25922为质控菌,对22株禽源沙门菌用棋盘稀释法进行AMP和APR的联合药敏试验,并以部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)评价联合效果,挑选其中2株菌用试管法进行杀菌动力学试验并绘制时间-杀菌曲线;挑选6株菌进行不同加药顺序的联合药敏试验;对其中10株用琼脂稀释法进行AMP单药和联合用药的防耐药突变浓度(Mutation Preventive Concentration,MPC)测定,以选择指数(selection index,SI)和MSW范围来评价防突变效果。结果22株菌的联合药敏试验中相加效应占56.52%,协同效应占43.48%;杀菌动力学试验的2株菌在第4小时的联合用药组菌落对数值较最有效的单药组分别减少了3.10和1.94 lgCFU/mL;不同加药顺序试验的配对t检验结果为P>0.05,无显著性差异;MPC的测定试验中,SI值≥1的菌株的MSW范围明显缩小甚至关闭。结论AMP和APR对禽源沙门菌的体外联合效果较好,且能有效缩小AMP对沙门菌的耐药突变选择窗,不同加药顺序对联合用药效果无影响。

耐药突变选择窗理论的研究与意义

随着抗菌药的广泛应用，细菌的耐药性问题变得越来越严重。现在几乎每一种有效的抗菌药物都发现了相应的耐药菌，其耐药水平越来越高，甚至出现了多重耐药菌株。传统的基于最小抑菌浓度（MIC）的治疗策略是通过抗菌药物杀死或抑制敏感细菌而控制感染，再通过宿主防御系统清除耐药变异菌。

中药影响左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的耐药突变选择窗的初步研究

目的:研究中药在左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗(MSW)上的影响。方法:采用琼脂平板稀释法测定几种中药制剂的最低抑菌浓度(MIC)、防突变浓度(MPC),得出其选择指数(SI)。选择SI值较低的中药制剂双黄连与大蒜素分别与左氧氟沙星联用,琼脂平板稀释法测定不同浓度下双黄连/大蒜素与左氧氟沙星联用对金黄色葡萄球菌MSW上的影响。结果:双黄连和左氧氟沙星联用(2MIC+8MIC,4MIC+4MIC)可使左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的MSW缩小至0.4～0.8倍;而不同浓度大蒜素与左氧氟沙星联用,则未见明显作用。结论:双黄连注射剂与左氧氟沙星联用可缩小左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的MSW,从而降低金黄色葡萄球菌对左氧氟沙星的耐药性。

氟苯尼考联合多西环素缩小猪源大肠杆菌耐药突变选择窗

为使临床合理使用抗菌药物,防止细菌耐药性的产生提供理论依据。本研究探讨在体外初步联合氟苯尼考和多西环素缩小猪源大肠杆菌耐药突变选择窗(MSW)。应用琼脂二倍稀释法,肉汤法富集1011 CFU/mL细菌分别测定了氟苯尼考、多西环素对15株猪源大肠杆菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)、防耐药突变浓度(MPC),并计算出它们各自的MSW,对于2种药物MSW均比较大的菌株S8、S11、S12进行氟苯尼考联合多西环素用药,测定其MPC和MSW。结果显示,从吉林省分离的15株猪源大肠杆菌对氟苯尼考、多西环素耐药率分别为33.3%和46.7%;MPC大于100mg/L的分别占到40%和13.3%;MSW大于50的分别占40%和0.067%。对于S8、S11、S12氟苯尼考联合多西环素用药,联合指数分别为0.75、0.09、0.438,均呈现相加或协同作用。联合用药可使氟本尼考对S8、S11、S12菌株的MPC分别由原来的256.0、128.0、460.8mg/L,变为8.0、8.0、16.0mg/L,均关闭了MSW。结果表明,氟苯尼考联合多西环素可以缩小或关闭猪源大肠杆菌耐药选择突变窗。

3种氟喹诺酮类药物联合苦豆子碱对牛源致病性粪肠球菌耐药突变选择窗的影响

目的研究苦豆子碱与3种氟喹诺酮类药物（环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星）联用对粪肠球菌耐药突变选择窗（MSW）的影响。方法采用二倍稀释法测定环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星对粪肠球菌标准株ATCCA29212、牛源分离株的最小抑菌浓度（MIC）;采用平板诱导法,用环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星筛选粪肠球菌标准株及牛源分离株的第一步耐药突变体,用环丙沙星筛选得到第二步耐药突变体;采用二倍稀释法检测环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星对耐药突变体的MIC、最小防突变浓度（MPC）,计算突变选择指数（SI）并确定MSW,观察苦豆子碱和3种氟喹诺酮类药物联用对粪肠球菌MSW的影响。结果3种氟喹诺酮类药物对2株分离的粪肠球菌的MIC均〉 1. 6μg·mL（-1）,MPC均〉 20μg·mL（-1）,SI为3. 4～13. 7;与原菌株比较,经不同氟喹诺酮类药物筛选的粪肠球菌的MIC升高了3～7倍,MPC升高了2～7倍;苦豆子碱和3种氟喹诺酮类药物联用（4MIC＋2MIC）可使抗菌药物对粪肠球菌的MSW缩小2～4倍。结论连续使用同一类型的抗菌药物能快速、加宽粪肠球菌的MSW,从而诱导耐药菌的产生;苦豆子碱和3种氟喹诺酮类药物联用有利于杀灭致病性粪肠球菌,防止耐药菌出现。

万古霉素单用及联合利福平或磷霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的研究

目的在体外探讨万古霉素单用及其分别与利福平、磷霉素联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)防耐药突变浓度的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为1010 CFU.ml-1细菌,琼脂平板倍比稀释法测定上述抗菌药物单用及联合使用对10株MRSA临床分离株的防耐药突变浓度,并计算相应的选择指数和耐药频率。结果万古霉素单用对上述10株MRSA的选择指数为16～64;分别与利福平、磷霉素联合使用选择指数下降为2～16和1～8,联合用药较单独用药选择指数下降2～32倍,其耐药频率也大幅下降。结论万古霉素分别与利福平、磷霉素联合使用均可降低其单用对MRSA的防耐药突变浓度,缩小耐药突变选择窗,防止耐药突变菌的产生。

亚胺培南或美罗培南联合利福平降低不动杆菌防耐药突变浓度的体外研究

目的在体外探讨亚胺培南(IMP)和美罗培南(MER)单用及其分别与利福平(RFP)联用对不动杆菌的防耐药突变浓度(MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法采用琼脂二倍稀释法,测定IMP或MER与RFP在体外单独以及联合应用的最低抑菌浓度(MIC)、计算部分抑菌浓度(FIC)指数。用肉汤法富集浓度为1010CFU/ml不动杆菌,采用琼脂平板二倍稀释法测定IMP和MER单药以及分别与RFP联用时对16株临床分离不动杆菌的MPC,并计算相应的选择指数(SI)。结果 IMP或MER分别与RFP联合应用后均以无关作用为主,未见拮抗作用,存在一定比例协同作用。IMP和MER单用对上述16株不动杆菌的SI均为16～128;分别与RFP联合使用SI均下降为1～32,联合用药较单独用药SI下降2～32倍。结论 IMP或MER分别与RFP联合使用均可降低其单用对不动杆菌的MPC,缩小MSW,防止耐药突变菌的产生。