雷诺嗪对大鼠肝微粒体蛋白质及细胞色素P450的影响

目的研究雷诺嗪对大鼠肝重、肝微粒体蛋白质及细胞色素P450含量的影响。方法将大鼠分成空白对照组和雷诺嗪组各8只,雷诺嗪组连续给予雷诺嗪为50 mg.kg-1.d-1,连续灌胃给药7 d后,测定大鼠的肝重、肝微粒体蛋白质及细胞色素P450含量,氨基比林-N-脱甲基酶、红霉素脱甲基转移酶和7-乙氧基-3-异吩噁唑酮脱烃酶的活性。结果雷诺嗪灌胃7 d后,大鼠肝重、肝微粒体蛋白含量与对照组比较差异无显著性;雷诺嗪组肝微粒体细胞色素P450含量与对照组比较明显减少(P<0.01)。雷诺嗪对大鼠肝微粒体中红霉素脱甲基酶和7-乙氧基-3-异吩噁唑酮脱烃酶的活性基本无影响,对氨基比林-N-脱甲基酶有明显的抑制作用(P<0.05)。结论雷诺嗪可能引起肝药酶对某些药物代谢的改变。

左旋氧氟沙星对大鼠肝重肝微粒体蛋白质及细胞色素P_(450)的影响

目的 研究和比较不同剂量给予左旋氧氟沙星后对大鼠肝重、肝微粒体蛋白质及细胞色素P450 含量的影响。方法 将大鼠分成空白对照组和给药组。采用连续给予不同剂量左旋氧氟沙星后 ,测定大鼠的肝重、肝微粒体蛋白质及细胞色素P450 含量。给药方案为每组 80、16 0、2 4 0mg·kg-1,腹腔注射给药 ,qd ,连续给药 7d。结果 研究结果显示 ,给予不同剂量的左旋氧氟沙星后 ,大鼠的肝重及细胞色素P450 含量均明显降低 ,中剂量组及高剂量组分别与对照组及低剂量组比较有极显著性差异 (P <0 .0 1)。微粒体蛋白质含量各组间比较无差异 (P >0 .0 5 )。

呋吗唑酮对小鸡肝微粒体蛋白的影响

本文通过实验数据证明药物呋吗唑酮(Furaltadone)对肝微粒体蛋白含量影响不大,但对苯丙胺羟化酶的活性和对细胞色素 P—450的含量有所增加,且随着药物浓度的增高而增加。本科研以苯巴比妥钠为阳性对照进行研究。

抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体细胞系的建立及鉴定

目的初步建立抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体规模化制备技术平台,为制备抗人细胞色素P450(CYP450)亚型蛋白的单克隆抗体奠定基础。方法按常规方法进行细胞融合,以酶联免疫吸附测定法(ELISA)筛选杂交瘤,以ELISA、免疫组化(IH)、免疫印迹(Western Blot)、免疫沉淀(IP)对单克隆抗体加以鉴定。结果融合后筛出杂交瘤,其分泌抗体类型为IgG1I、gG2a、IgG2b及IgM。免疫组化(IH)图片上,人肝细胞浆内均可见阳性颗粒。免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WesternBlot)结果显示,所制备抗体与人肝微粒体蛋白有特异性结合。结论筛选制备的单克隆抗体杂交瘤能分泌特异性较强的抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体。

反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷对大鼠肝微粒体蛋白质及细胞色素P450的影响

目的:研究反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷对大鼠肝质量、肝微粒体蛋白质及细胞色素P450的影响。方法:大鼠分为空白对照组、反式白藜芦醇组及反式白藜芦醇苷组,分别连续给予等摩尔量的反式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷(116.69、200 mg/(kg.d)),连续灌胃给药7 d后,分光光度法测定大鼠肝质量、肝微粒体蛋白质浓度及细胞色素P450质量分数,氨基比林-N-脱甲基酶、红霉素脱甲基酶和7-乙氧基-3-异吩哐恶唑酮脱烃酶的活性。结果:反式白藜芦醇组及反式白藜芦醇苷组大鼠肝质量、肝微粒体蛋白浓度与空白对照组比无统计学意义;而2个剂量组大鼠肝微粒体中细胞色素P450、氨基比林-N-脱甲基酶、红霉素-N-脱甲基酶和7-乙氧基-3-异吩哐恶唑酮脱烃酶的活性与空白对照组比有统计学意义(P<0.05),对细胞色素P450酶有抑制作用,但剂量组间无统计学意义。结论:反式白藜芦醇与反式白藜芦醇苷可引起肝药酶对某些药物代谢的改变。

抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体细胞系的建立及鉴定

目的初步建立抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体规模化制备技术平台,为制备抗人细胞色素P450(CYP450)亚型蛋白的单克隆抗体奠定基础。方法按常规方法进行细胞融合,以酶联免疫吸附测定法(ELISA)筛选杂交瘤,以ELISA、免疫组化(IH)、免疫印迹(Western Blot)、免疫沉淀(IP)对单克隆抗体加以鉴定。结果进行6次融合,共筛出216株杂交瘤,其分泌抗体类型为IgG1I、gG2aI、gG2b、及IgM。免疫组化(IH)图片上,人肝细胞浆内均可见阳性颗粒。免疫沉淀(IP)和免疫印迹(Western Blot)结果显示,所制备抗体与人肝微粒体蛋白有特异性结合。结论筛选制备的单克隆抗体杂交瘤能分泌抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体,并且有较强特异性,为下一步研究提供了基础与技术平台。

单株抗人肝脏微粒体蛋白及细胞色素P450单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的:制备抗正常人肝脏微粒体(HLM)及细胞色素P450蛋白的单克隆抗体。方法:采用人肝脏微粒体蛋白作为免疫原免疫Balb/C小鼠,按常规方法融合、克隆,经间接ELISA法筛选抗体阳性杂交瘤细胞株,通过单抗亚类、Western blot对抗体进行初步鉴定。结果:成功地制备了一株抗肝微粒体蛋白的单克隆抗体(MAb),命名为MAb 10C7。用鼠单抗亚类快速鉴定纸条鉴定10C7为IgG2b。Western blot分析显示,MAb 10C7可特异识别相对分子量为46kD的人肝脏微粒体蛋白。结论:MAb 10C7抗正常人肝脏微粒或细胞色素P450蛋白的特异性强,对相关蛋白质的功能研究有较好的应用前景。

人工感染猪链球菌对小鼠肝脏药物代谢酶的抑制作用

【目的】评价猪链球菌感染对小鼠肝脏药物代谢酶活性的影响。【方法】120只雄性ICR小鼠,随机分为对照组和2个感染组,后者分别人工感染猪链球菌2型强毒力株HA9801和弱毒力株SS2-H,于感染不同时间测定小鼠体内肝脏药物代谢酶活性的变化。【结果】感染HA9801菌株的小鼠,细胞色素P450(CytP450)、细胞色素b5(Cytb5)、NADP-细胞色素C还原酶(NCCD)活性从第3日开始极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)降低,第10日时降至最低(NCCD于第5天时最低),第15日时活性有所增强,但仍显著低于对照组;红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性从第5日开始极显著地降低(P<0.01),变化趋势与CytP450、Cytb5相似;氨基比林-N-脱甲基酶(AND)活性虽有变化,但与对照组比较,差异不显著(P>0.05);苯胺-4-羟化酶(AH)活性在第10日时开始极显著地下降(P<0.01),第15日时稍有上升。感染SS2-H的小鼠,CytP450、Cytb5的活性从第5日开始显著降低(P<0.05),第10日降至最低;NCCD、ERND和AH活性第10日时显著降低(P<0.05),而AND活性在感染期间未发生显著变化(P>0.05)。HA9801感染组与SS2-H感染组小鼠的谷胱甘肽巯基转移酶(-GSH-S-T)活性从感染后第3日开始即显著(P<0.05)降低。HA9801感染组与SS2-H感染组比较,CytP450、Cytb5活性在感染前期均有极显著(第3日、第5日)差异(P<0.01),而在感染后期,差异不显著(P>0.05)。微粒体蛋白浓度各组差异不显著(P>0.05)。【结论】猪链球菌感染可调节小鼠肝脏药物代谢酶CytP450、Cytb5、NCCD、ERND、AH和GSH-S-T活性,故在感染期间选择药物进行治疗时,应制定合理的给药方案,避免药物毒性反应产生,加重病情。

恩诺沙星对2种鲟细胞色素P450活性影响的比较研究

将恩诺沙星按照0、20、40、60、80、100mg/kg浓度,对小体鲟及史氏鲟口服给药5天,停药2天后对其肝脏组织中微粒体蛋白浓度及细胞色素P450(cytochrome P450,CYPP450)酶活性进行测定。试验结果表明:2种鲟体内均含有一定量的P450酶,且史氏鲟体内微粒体蛋白浓度5.029mg/g肝重及P450酶活性0.102nmol/(mg·min)均高于小体鲟相应的4.833mg/g肝重和0.088nmol/(mg·min)。而恩诺沙星对史氏鲟及小体鲟体内的细胞色素P450酶活性均有一定抑制作用,随着给药浓度从0mg/kg到100mg/kg的增加,2种鲟体内的酶活性均逐渐降低,且史氏鲟体内P450酶活性降低幅度明显大于小体鲟,至100mg/kg给药组,两者差值仅为0.003nmol/(mg·min)。对于探讨恩诺沙星在2种鲟体内的药物代谢及其与细胞色素P450酶之间相互作用的机制提供一定的理论依据。