炎调方调节RhoA/ROCK信号通路对急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的影响

目的观察炎调方调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶(ROCK)信号通路对急性胰腺炎(AP)大鼠肠屏障损伤的影响。方法将84只大鼠随机分为对照组、模型组、炎调方低剂量组、炎调方高剂量组、乌司他丁组、溶血磷脂酸(LPA)组、炎调方+LPA组,每组12只。除对照组外,其他组构建AP大鼠模型。造模成功后立即进行给药处理,每6小时给药1次,共4次。ELISA法检测大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)水平;HE染色检测大鼠胰腺组织和回肠组织病理变化;免疫组化染色检测大鼠回肠组织中ZO-1、Occludin蛋白平均光密度;Western blotting检测回肠组织中RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠胰腺组织和回肠组织病理损伤严重,淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、D-乳酸、DAO水平及RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高,ZO-1、Occludin蛋白平均光密度降低(P<0.05);与模型组比较,炎调方低剂量组、炎调方高剂量组、乌司他丁组大鼠胰腺组织和回肠组织病理损伤减轻,淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、D-乳酸、DAO水平及RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达降低,ZO-1、Occludin蛋白平均光密度升高,LPA组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);与炎调方高剂量组比较,炎调方+LPA组大鼠胰腺组织和回肠组织病理损伤加剧,淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、D-乳酸、DAO水平及RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高,ZO-1、Occludin蛋白平均光密度降低(P<0.05)。结论炎调方可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路改善AP大鼠炎症反应及肠屏障损伤。

PGE_(2)在环氧合酶-2抑制剂保护脓毒症肠屏障功能中的作用

目的探讨PGE_(2)在环氧合酶-2抑制剂保护脓毒症肠屏障功能中的作用及机制。方法按随机数字表法将大鼠分为六组,假手术组、帕瑞昔布钠对照组、脓毒症组、帕瑞昔布钠治疗组、COX-2抑制剂组和帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组,每组8只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,ELISA检测大鼠血清和肠组织中TNF-α、IL-6水平和抗炎细胞因子IL-10水平,蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测前列腺素E_(2)(PGE_(2))、前列腺素合酶-1(mPGES-1)和前列腺素受体EP4的蛋白表达,于假手术或CLP术后24 h取四组大鼠肠组织,RT-PCR法检测PGE_(2)、mPGES-1、EP4的mRNA表达水平。结果与假手术组比较,脓毒症大鼠血清和肠组织中TNF-α、IL-6和IL-10增加(P<0.05),帕瑞昔布钠治疗后能够降低TNF-α、IL-6水平(P<0.05),IL-10水平增加(P<0.05);术后24 h时脓毒症组大鼠肠组织PGE_(2)、mPGES-1、EP4和EP2 mRNA表达水平比假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与脓毒症组比较,帕瑞昔布钠治疗脓毒症大鼠后,肠组织PGE_(2)、mPGES-1、EP4的mRNA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肠组织前列腺素E_(2)(PGE_(2))、前列腺素合酶-1(mPGES-1)和前列腺素受体EP4的蛋白表达水平比假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),帕瑞昔布钠治疗后,肠组织前列腺素E_(2)(PGE_(2))、前列腺素合酶-1(mPGES-1)和前列腺素受体EP4的蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);术后24h时,与假手术组比较,脓毒症组、帕瑞昔布钠治疗组、COX-2抑制剂组及帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组肠组织TNF-α、IL-10和IL-6的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与脓毒症组比较,帕瑞昔布钠治疗组、COX-2抑制剂组及帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组肠组织TNF-α、IL-6的水平明显降低,IL-10的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与帕瑞昔布钠治疗组比较,COX-2抑制剂组及帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组肠组织TNF-α、IL-6的水平降低,IL-10的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论帕瑞昔布钠可通过抑制炎症反应来减轻脓毒症时肠屏障功能的损伤,其机制可能通过COX-2-mPGES-1-PGE_(2)-EP4通路发挥抗炎的作用。

不同入路腹腔镜手术对右半结肠癌患者肠屏障功能和红细胞免疫的影响

目的探讨不同入路腹腔镜手术对右半结肠癌患者肠屏障功能、红细胞免疫及预后的影响。方法选取2019年4月至2021年4月我院收治的110例右半结肠癌患者,简单随机化法分为A组(n=55)和B组(n=55),治疗期间,A组失访2例,B组失访3例,最终A组和B组分别纳入53例和52例。2组均行腹腔镜手术,A组采取头侧入路,B组采取中间入路。统计2组围手术期指标、并发症、预后及手术前后肠屏障功能(内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶)、红细胞免疫[红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)、红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)、红细胞黏附肿瘤细胞花环率(TRR)]。结果与B组相比,A组术中出血量较少,中央淋巴结清扫时间、手术时间较短,并发症发生率较低(P<0.05);术后3 d 2组内毒素、二胺氧化酶、D-乳酸水平均高于术前(P<0.05);术后3 d 2组RBC-ICR高于术前,TRR、RBC-C3bRR低于术前(P<0.05);术后1年随访,2组远处转移、局部复发、生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论2种入路方案在右半结肠癌中效果相当,其中头侧入路腹腔镜手术可缩短手术时间,降低并发症发生率。

通腑理肺汤对脓毒症肠屏障损伤大鼠肠黏膜组织闭锁小带蛋白-1、闭合蛋白mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨通腑理肺汤(TFL)对脓毒症肠屏障损伤大鼠肠黏膜组织闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)mRNA及蛋白表达影响的实验研究。方法:随机抽取纯种SD大鼠40只,依次分为假手术组、模型组、TFL低剂量组和TFL高剂量组,共四组,每组10只。应用盲肠结扎穿孔(CLP)的造模方式制作脓毒症肠屏障损伤大鼠模型;假手术组只暴露盲肠,不做穿孔处理。TFL低剂量组造模成功后给予3.6 g/kg体重TFL灌胃;TFL高剂量组采用相同方法造模后,按7.2 g/kg体重TFL进行灌胃处理;模型组和假手术组按蒸馏水10 ml/kg体重灌胃,以上各组均每天干预1次,共7 d。7 d后处死各组大鼠,分离肠黏膜组织,采用RT-qPCR法检测肠黏膜组织ZO-1、Occludin mRNA基因,Western blot检测ZO-1、Occludin蛋白表达;同时取出各组相同部位的肠黏膜组织,光镜及透射电镜下观察肠黏膜组织病理及超微结构变化。结果:模型组大鼠肠黏膜组织中ZO-1、Occludin mRNA基因及蛋白表达对比假手术组均显著降低(P<0.05)。TFL低剂量组、高剂量组大鼠肠黏膜组织中ZO-1、Occludin mRNA基因及蛋白表达对比模型组均显著升高(P<0.05)。光镜下观察肠黏膜组织病理显示TFL低剂量组及高剂量组肠黏膜上皮细胞水肿、肠黏膜绒毛受损以及基底层、固有层水肿、淋巴细胞及中性粒细胞浸润明显减轻。透射电镜下肠黏膜组织超微结构亦显示TFL低剂量组及高剂量组微绒毛密集且规则,肠细胞间呈锯齿状和互锁模式,线粒体清晰,紧密连接轻微受损。结论:脓毒症肠屏障损伤大鼠模型病理损害的减轻,可能是TFL上调了肠黏膜组织紧密连接ZO-1、Occludin mRNA基因及蛋白的表达,改善肠上皮细胞间的紧密连接作用来实现的。

血必净注射液口服给药改善脓毒症肠屏障的作用机制研究

目的:探讨血必净注射液口服给药对脓毒症小鼠肠屏障功能的保护作用,分析血必净灌胃给药改善肠屏障的潜在作用机制。方法:将雄性ICR小鼠按随机区组法分为对照组(NC)、模型组(M)、血必净灌胃组(XBJ-ig)和血必净静脉注射组(XBJ-iv);以脂多糖(LPS)阴茎背静脉注射构建脓毒症小鼠肠屏障损伤模型,以生存率、血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素1β(IL-1β)的含量、小鼠回肠组织中病理学变化、小鼠肠通透性变化、回肠组织中紧密连接蛋白1(Claudin-1)、小鼠紧密连接蛋白1(ZO-1)的表达进行评价。结果:与模型组比较,血必净灌胃组能够改善脓毒症小鼠死亡率;与对照组比较,模型组小鼠血清中炎症介质TNF-α、IL-1β含量显著升高(P<0.01);肠通透性显著升高(P<0.01);Claudin-1、ZO-1蛋白表达量显著下调(P<0.05)。与模型组比较,血必净灌胃组血清中炎症介质TNF-α、IL-1β的水平显著降低(P<0.05);造模6 h后XBJ-ig组小鼠肠黏膜通透性开始出现显著改善(P<0.05),显著上调Claudin-1、ZO-1蛋白表达(P<0.05)。结论:血必净灌胃给药能够通过改善肠紧密连接蛋白表达,改善脓毒症小鼠的肠屏障功能。

从“玄府-隐窝”视域辨治溃疡性结肠炎肠屏障受损

“玄府”作为中医藏象理论的微观结构遍布于人体各部,急性溃疡性结肠炎微观病变表现为结肠隐窝脓肿甚至结构紊乱。其湿热蕴结大肠,肠道因实而闭的发病特点与“玄府”贵开忌阖、贵通忌闭的理念契合。肠道隐窝机械屏障与黏液屏障功能与“玄府”推陈出新、气液宣通的特点有共通之处,可为肠“玄府”理论提供形态学依据。清开玄府法能够抑制湿热郁腐之物蕴结、肠道郁闭不通导致的肠“玄府闭阖”状态,推动“玄府-隐窝”学说在治疗溃疡性结肠炎早期隐窝病变的指导作用和理论支撑。

TBI后应激性肠屏障损害的研究进展

创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害增加了患者的死亡风险,严重影响疾病预后,目前其发病机制和治疗策略仍不完全清楚。本文旨在总结创伤性脑损伤应激性肠屏障损害的病理机制和保护策略等关键问题的研究进展,发现肠上皮细胞通透性增加、紧密连接、内质网应激、细胞自噬、缺血再灌注损伤可能是创伤性脑损伤应激后肠屏障损害的主要机制。此外,本文还综述了迷走神经刺激、益生菌、外源性补充饥饿素、氧疗等对创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害的保护作用。本文将为探索精准有效的创伤性脑损伤后应激性肠屏障损害防治提供新视角和干预靶点。

基于P2X7R/NF-κB通路探讨清解化攻方对重症急性胰腺炎肠屏障的保护作用机制

目的研究清解化攻方基于P2X7R/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜屏障的保护作用及潜在作用机制。方法制备SAP大鼠模型,使用乌司他丁和清解化攻方干预后,采集各组大鼠血清、胰腺和回肠组织。HE染色观察胰腺和回肠组织病理变化;ELISA检测血清内毒素、D-乳酸含量;Western Blot法检测回肠组织P2X7R、p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达情况;IHC检测回肠组织MUC-2和Claudin-1蛋白表达;透射电境观察回肠组织线粒体自噬情况。结果与正常组相比,模型组胰腺及回肠组织出现明显的病理改变,血清内毒素、D-乳酸含量明显升高(P<0.05),P2X7R、p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平上调(P<0.05),Muc-2和Claudin-1蛋白表达明显降低(P<0.05);回肠组织线粒体数量减少,膜厚度增加,结构空洞,自噬小体减少;与模型组比较,清解化攻方各组和乌司他丁组大鼠胰腺及回肠组织病理损伤均缓解,血清内毒素、D-乳酸含量降低(P<0.05);P2X7R、p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平下调(P<0.05);MUC-2和Claudin-1蛋白表达量升高(P<0.05);回肠组织线粒体数量增多,结构较完整,自噬小体增多。结论清解化攻方可以调控P2X7R/NF-κB信号通路,减轻炎症反应,起到改善SAP大鼠肠黏膜屏障损伤作用。

不同剂量新型复合益生菌制剂治疗严重烧伤大鼠肠屏障损伤效果的对比性探究

目的研究通过对比不同剂量新型复合益生菌制剂对严重烧伤大鼠肠屏障损伤的治疗效果。方法使用94℃水浴造模50%Ⅲ度烧伤大鼠,使用三个剂量(0.5×10^(9)CFU/d、1.5×10^(9)CFU/d和4.5×10^(9)CFU/d)益生菌制剂干预。运用ELISA、HE染色和肠屏障评价等来分别观察不同剂量益生菌对大鼠烧伤的改善作用。结果与假伤组(Sham组)相比,烧伤组(Burn组)大鼠肠绒毛及隐窝结构毁损较为严重,肠绒毛高度显著降低(P<0.05),而益生菌治疗的低、中、高剂量组(P-L、P-M、P-H)则具有不同程度的改善,其中以P-M组最佳。同时P-M组的IL-1β、IL-6、LPS水平则均显著降低以及IL-10水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肠屏障功能评价显示,与Burn组相比,P-L、P-M、P-H组小肠中的二胺氧化酶(DAO)和细菌内毒素水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),不同剂量组中P-M组内毒素水平下降效果最为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论该复合益生菌制剂可显著改善和治疗严重烧伤大鼠肠屏障损伤,其最佳剂量为1.5×10^(9)CFU/d。

右美托咪定对腹腔镜气腹大鼠肠屏障功能及肠道菌群的影响

【目的】探究右美托咪定(dexmedetomidine, DEX)对腹腔镜气腹大鼠肠屏障功能及肠道菌群的影响。【方法】试验将30只SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)(n=6)、CO_(2)气腹组(CO_(2))(n=12)、DEX组(n=12)。CO_(2)和DEX组大鼠在气腹前30 min分别腹腔注射1 mL/kg生理盐水和50μg/kg右美托咪定,随后在15 mmHg气腹压力下维持90 min建立气腹模型。Sham组不通气腹,其余操作同CO_(2)组。气腹结束后12、24 h采集大鼠回肠组织,观察其组织病理形态学变化,并通过试剂盒测定大鼠回肠组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量以及髓过氧化物酶(MPO)活性;利用实时荧光定量PCR检测闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、封闭蛋白1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)的mRNA相对表达量;采集回肠组织内容物,通过高通量双端测序检测大鼠回肠菌群的变化。【结果】与Sham组相比,CO_(2)组大鼠回肠组织结构紊乱,肠绒毛变形,出现炎性细胞浸润等现象;结肠中MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α含量及MPO活性均极显著升高(P<0.01),GSH含量以及ZO-1、Occludin、Claudin-1基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01);肠道菌群多样性减少,门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度有降低趋势(P>0.05),放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)相对丰度有增加趋势(P>0.05)。属水平上,乳杆菌属(Lactobacillus)和异杆菌属(Allobaculum)相对丰度有降低趋势(P>0.05),而双歧杆菌属(Bifidobacterium)相对丰度有增加趋势(P>0.05)。与CO_(2)组相比,DEX组大鼠回肠组织结构紊乱及肠绒毛变形情况缓解,炎性细胞浸润减少。结肠中GSH含量及ZO-1、Claudin-1、Occludin基因mRNA表达量均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α含量及MPO活性均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);肠道菌群多样性增加,门水平上,厚壁菌门相对丰度有增加趋势(P>0.05),放线菌门、变形菌门相对丰度有降低趋势(P>0.05)。属水平上,乳杆菌属相对丰度有增加趋势(P>0.05),双歧杆菌属和异杆菌属相对丰度有降低趋势(P>0.05)。【结论】DEX可以通过改善机体氧化应激、炎症因子的释放、肠道菌群结构等,增加肠道菌群丰度及多样性,从而缓解腹腔镜气腹所致的肠损伤。

基于RNA⁃Seq探讨清解化攻方干预重症急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的潜在作用机制

目的:采用高通量RNA⁃Seq探讨清解化攻方干预重症急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的潜在作用机制。方法:采用逆行胰胆管注射牛黄胆酸钠方法建立SAP模型,HE观察空白组、模型组、中药组大鼠胰腺和回肠组织病理改变情况,ELISA法检测大鼠血清血淀粉酶、脂肪酶、DAO、内毒素水平;RNA⁃seq测序检测各组大鼠回肠组织差异性表达基因,筛选清解化攻方干预重症急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的核心基因、生物学功能及信号通路。结果:与空白组比较,模型组大鼠胰腺和回肠组织均有明显的病理改变,经清解化攻方干预得到显著改善;ELISA结果提示清解化攻方能够显著改善SAP大鼠血清淀粉酶、脂肪酶、DAO、内毒素含量(P<0.05)。RNA⁃Seq结果显示SAP组与BG组差异基因有2623个,经QJHGD处理后表达明显下调的基因有175个,主要有Tnip3、Lpo等,而上调的基因有320个,主要有aicda、Tnn等,参与调节氧化应激等生物过程,并干预TJ、细胞凋亡、Toll样受体、NOD样受体、NF⁃κB等多条信号通路而发挥作用。结论:清解化攻方可能通过调节Tnip3、aicda等关键基因及调控TJ、细胞凋亡、Toll样受体等多条信号通路起到抑制重症急性胰腺炎肠屏障损伤作用。

蟛蜞菊内酯在重症急性胰腺炎肠屏障功能中的作用及机制

目的:探讨蟛蜞菊内酯(Wedelolactone)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠屏障损伤中的作用及机制。方法:选取SPF级健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组:假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、蟛蜞菊内酯25 mg/kg治疗组(Wed-L)和蟛蜞菊内酯50 mg/kg治疗组(Wed-H)。采用逆行胆胰管穿刺法,向胆胰管内注入5%牛黄胆酸钠溶液(1 ml/kg)诱导SAP模型。假手术组给予等量的生理盐水。Wed-L组和Wed-H组在SAP模型建立后在1小时和6小时后给予腹腔注射25和50mg/kg的蟛蜞菊内酯。制模24 h后,再次麻醉大鼠。使用自动生化分析仪检测血液中的血清淀粉酶和脂肪酶水平及血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6,白细胞介素-18和白细胞介素-1β均使用标准诊断试剂盒进行检测;HE用于评估胰腺、肠道病理变化,并进行病理评分;通过用Western blot技术测定肠组织中细胞焦亡相关蛋白GSDMD、Caspase-11和紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudins-1的表达;RT-PCR检测细胞焦亡相关基因GSDMD和Caspase-11的表达情况。使用免疫荧光染色法测定肠上皮细胞细胞焦亡相关蛋白GSDMD、Caspase-11和紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudins-1的分布情况。结果:HE染色结果示,与SO组相比,SAP组出现明显肠道病理损伤(P < 0.01),而Wed-H组肠道损伤明显低于SAP组(P < 0.01);同样,SAP组胰腺损伤明显高于SO组(P < 0.01),Wed-H组的损伤较于SAP组的胰腺损伤减轻(P < 0.05),Wed-L和Wed-H之间的差异无统计学意义。SAP组的血清淀粉酶和脂肪酶水平明显高于SO组(P < 0.01),Wed-L和Wed-H组明显低于SAP组(P < 0.01)。SAP组TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平明显高于SO组(P < 0.01),Wed-L和Wed-H组明显低于SAP组(P < 0.01)。RT-PCR结果显示SAP组肠道组织GSDMD和Caspase-11的表达水平较SO组明显升高(P < 0.01),Wed-H组的表达水平明显低于SAP组(P < 0.01)。Western blot显示,SAP组肠道组织GSDMD和Caspase-11蛋白表达水平较SO组升高(P < 0.05)。与SAP组相比较,Wed-H组肠道组织GSDMD和Caspase-11蛋白表达水平明显下降(P < 0.05)。SAP组肠道组织ZO-1、Claudin-1、Occludin蛋白表达水平较SO组降低(P < 0.01)。与SAP组相比较,Wed-H组肠道组织ZO-1、Claudin-1、Occludin蛋白表达水平明显升高(P < 0.01)。免疫荧光结果显示SAP组GSDMD明显高于SO组和Wed-H组,而紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1显示较SO组弱,Wed-H组较SAP明显改善。结论:蟛蜞菊内酯通过抑制Caspase-11下调GSDMD表达,减少其介导的细胞焦亡炎性因子的释放,减轻肠粘膜损伤。

大黄素改善肠屏障机制研究进展

肠屏障功能是维持机体内环境稳定的重要因素,它可以防御和调节肠道对外界刺激的反应。肠屏障功能失调会导致肠道通透性增加,炎症反应加剧,从而引发或加重多种胃肠道疾病。大黄素是从大黄中提取的一种天然化合物,具有抗菌、抗炎、抗氧化和调节免疫等多种药理作用。大黄素能够通过以下几个途径改善肠屏障功能:促进肠机械屏障的修复,包括促进肠上皮细胞的增殖、分化和迁移,保护肠上皮细胞间的紧密连接;抑制肠黏膜的氧化应激,清除活性氧自由基,增强抗氧化系统;促进肠道黏膜的自噬,清除受损的细胞器和蛋白质,调节自噬相关的信号通路;抑制肠道黏膜的细胞凋亡,抑制促凋亡因子的表达和活性,阻止细胞凋亡程序的启动;抑制肠道黏膜的炎症反应,抑制核因子κB(nu-clear factor kappa-B,NF-κB)、Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)等信号通路,下调炎症因子的释放。调节肠道菌群的结构和功能,增加有益菌,抑制有害菌,影响肠道菌群的代谢物水平。综述大黄素改善肠屏障功能的作用机制,为其在胃肠道疾病的预防和治疗中提供了新的思路和依据。

基于“肺合大肠”理论探讨流感病毒与肠屏障损伤相关性

现代医学理论中肺与大肠在分化发育、生理病理、功能协作、物质联系上有结构、功能、菌群基础作为支撑依据,这与《黄帝内经》藏象篇中脏腑相关理论不谋而合。在外感热病的疾病传变中,肺与大肠相关联以及反馈调节机制的“肺病从肠论治”“肠病从肺论治”论述成为近年来的研究热点。基于此,从肠屏障的角度系统归纳总结梳理近年来国内外学者探求流感病毒诱导肺系疾病的作用机制,并通过阐述肺经药以及肺肠同治验方作为工具药验证以肺-肠表里理论为指导的药物对流感病毒诱导的肺系疾病的保护机制,揭示流感病毒中肺与肠在疾病传变中的反馈及药物干预机制,阐明肺-肠表里理论的现代内涵,以期为中医药在病毒性疾病中广谱治疗提供现代依据。

基于色氨酸-芳香烃受体代谢通路探讨溃疡性结肠炎肠屏障修复的研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是结肠黏膜的一种特发性慢性炎症性疾病,近年来UC的发病率在各国逐渐增加,其发病与肠屏障功能受损密切相关,色氨酸通过多种代谢途径产生芳香烃受体(AhR)的配体,这些配体可以与AhR结合并刺激下游靶基因的表达,从而修复肠屏障的功能。调节Trp-AhR通路可能成为治疗UC的有效途径。该研究就该通路在修复UC肠屏障的研究进展作一综述。

基于“短链脂肪酸-肠屏障”途径探讨中药在腹泻型肠易激综合征中的干预研究进展

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是一种临床常见的功能性胃肠病,“短链脂肪酸-肠屏障”途径在IBS-D发病中起重要作用。中药单体/化合物或复方可通过多通路、多靶点调控“短链脂肪酸-肠屏障”治疗IBS-D。本文以短链脂肪酸与肠道四大屏障的关系及介导IBS-D发病为切入点,对中药单体/化合物和复方靶向调控“短链脂肪酸-肠屏障”治疗IBS-D的相关文献进行了系统回顾与梳理;从“大肠主津”角度探讨“短链脂肪酸-肠屏障”导致IBS-D的理论依据,以期为建立具有中医药特色的精准治疗体系提供思路与借鉴。

α7nAChR抑制MyD88依赖性Zonulin释放改善脑梗死大鼠肠道炎症和肠屏障损伤

目的:观察α7型烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂PNU282987对脑梗死大鼠肠道炎症和肠屏障损伤的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、中脑动脉栓塞(MCAO)组和PNU282987组。MCAO组和PNU282987组采用Longa改良线栓法制备MCAO模型,PNU282987组腹腔注射1 mg/kg PNU282987,连续7 d。苏木精—伊红(HE)染色观察肠道黏膜病理改变,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)水平及血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(DLA)、内毒素(ET)水平,免疫组化法检测结肠组织Toll样受体2(TLR2)蛋白表达,western blotting法检测结肠组织紧密连接关键蛋白咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白(Claudin-1)、连蛋白(Zonulin)、带状闭合蛋白(ZO-1)、TLR2、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果:与sham组比较,MCAO组大鼠肠上皮脱落、肠绒毛排列紊乱及黏膜下层炎性浸润,血清DAO、DLA、ET水平及结肠组织TNF-α、IL-6含量显著增高,结肠组织Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达显著下调,Zonulin、TLR2、MyD88、p-NF-κB蛋白表达显著上调(均P<0.05)。与MCAO组比较,PNU282987组大鼠肠上皮损伤减轻,血清DAO、DLA、ET水平及结肠组织TNF-α、IL-6含量显著降低,结肠组织Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达显著上调,Zonulin、TLR2、MyD88、p-NF-κB蛋白表达显著下调(均P<0.05)。结论:PNU282987可以显著改善脑梗死大鼠肠道炎症及肠屏障损伤,其机制可能与抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路有关。

miR-506对急性胰腺炎大鼠巨噬细胞迁移抑制因子及肠屏障功能影响

目的探讨微小RNA-506(miR-506)对急性胰腺炎大鼠(AP)巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)及肠屏障功能的影响。方法将SPF级SD大鼠50只随机均分为对照组、模型组、miR-506组、MIF组、miR-506+MIF组。观察各组胰腺组织病理学变化、观察胰腺组织病理学变化、肠屏障功能[血清淀粉酶、内毒素、血浆D-乳酸、乳果糖/甘露醇排除率(L/M)、细菌移位率]及MIF水平变化。。结果HE染色显示,对照组胰腺组织形态结构正常,无明显的病理改变;模型组、MIF组、miR-506组及miR-506+MIF组均有不同程度胰腺坏死,MIF组病变最为严重;miR-506组病变最轻。miR-506组胰腺病理评分、血清淀粉酶、内毒素、MIF、血浆D-乳酸水平、L/M、细菌移位率及MIF mRNA相对表达量较其他干预组降低,miR-506相对表达量则升高(P<0.05);miR-506+MIF组血清淀粉酶、内毒素、MIF、血浆D-乳酸水平、L/M、细菌移位率及MIF mRNA相对表达量较miR-506组升高,miR-506相对表达量较miR-506组下降(P<0.05)。结论miR-506的高表达减轻AP大鼠病变,改善肠屏障功能,其作用可能与抑制MIF有关。

清毒汤保护肠屏障治疗慢加急性肝衰竭内毒素血症的机制研究

目的研究清毒汤对肠屏障的保护作用,探讨清毒汤保护肠屏障治疗慢加急性肝衰竭内毒素血症的机制。方法不同浓度的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理正常人肠上皮细胞(human intestinal epithelial cells-6,HIEC-6),通过细胞毒性法(cell counting kit-8,CCK-8)检测LPS对HIEC-6细胞存活率的影响。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的mRNA表达情况,在体外构建肠屏障损伤的模型。通过蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测清毒汤对肠屏障紧密连接蛋白ZO-1、Occludin表达水平的影响。利用qRT-PCR法检测通路蛋白表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、Zonulin及miRNA122a的mRNA表达情况。结果CCK-8法、qRT-PCR法的检测结果显示120μg/mL的LPS作为构建肠屏障损伤模型的浓度较为合适。qRT-PCR的结果表明,5%清毒汤含药血清能显著改善LPS对肠上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的mRNA的下调作用,因此后续实验中选取5%清毒汤作为实验条件。WB的结果表明清毒汤能明显改善LPS对肠上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的下调作用。qRT-PCR的结果表明,清毒汤能明显降低通路蛋白EGFR、Zonulin及miRNA122a的表达。结论清毒汤可能通过miR122a靶向EGFR调控Zonulin蛋白从而调节肠道紧密连接的表达,保护肠屏障,治疗慢加急性肝衰竭内毒素血症。

基于“肺与大肠相表里”理论探讨肠屏障损伤与慢性阻塞性肺疾病的关系

在中西医不同的理论里,肺与大肠均存在密切的联系,在西医的理论里,肺与大肠在分化发育、生理病理、功能协作、物质联系上有结构、功能、菌群基础作为支撑依据,而这种联系与中医经典《黄帝内经》中所讲“肺与大肠相表里”不谋而合,在中医的“肺与大肠相表里”理论里肺与大肠通过经脉相络属,生理相协调以达到相互联系的目的,在汗牛充栋的历代医案中,也不乏肺病从肠论治,肠病从肺论治的治疗策略,现代医学研究发现,肠屏障的损伤与慢性阻塞性肺疾病之间可相互影响彼此的疾病病理发展进程,其中微生物屏障(主要为肠道菌群)可能是将肺与大肠进行动态联系的重要活性基础,其调节方式主要通过肠道菌群代谢产物实现,如维生素、短链脂肪酸等,因此维持肠道菌群的动态平衡及修复受损的肠屏障可能成为慢性阻塞性肺疾病的一种潜在治疗策略。文章通过系统归纳总结梳理了目前国内外学者对于肺与大肠在肠屏障损伤与慢性阻塞性肺疾病之间的潜在联系及最新的研究进展,综述了有关于肺与大肠在分化发育、生理病理、功能协作及物质联系之间的相互关系,阐释肠屏障损伤与慢性阻塞性肺疾病之间相互影响的联系,以期对该理论有进一步的认识并为临床上对肺肠疾病的治疗提供新思路。