柴胡皂苷A调节MLCK/MLC2信号通路对SAP大鼠肠损伤的影响

目的探讨柴胡皂苷A调节肌球蛋白轻链激酶(MLCK)/肌球蛋白轻链2(MLC2)信号通路对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠损伤的影响。方法随机选择10只大鼠作为假手术组,其余大鼠注射牛磺胆酸钠溶液构建SAP大鼠模型。将造模成功的SAP大鼠模型随机平分为SAP组、柴胡皂苷A组(腹腔注射10.0 mg/kg的柴胡皂苷A)、iE-DAP组(腹腔注射3.5 mg/kg MLCK/MLC2通路激活剂iE-DAP)、柴胡皂苷A+iE-DAP组(腹腔注射10.0 mg/kg柴胡皂苷A+3.5 mg/kg iE-DAP),每组均10只大鼠,每天1次,连续注射1周,假手术组和SAP组注射等量生理盐水。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)、二胺氧化酶(DAO)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色检测各组大鼠回肠组织病理形态变化。ELISA检测各组大鼠回肠组织中氧化应激指标水平。蛋白质免疫印迹检测肠道屏障相关蛋白及MLCK/MLC2通路相关蛋白表达。结果与SAP组相比,柴胡皂苷A组AMY、LIP、DAO、IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著降低,而iE-DAP组AMY、LIP、DAO、IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与SAP组相比,柴胡皂苷A组大鼠回肠组织结构得到改善,回肠组织病理评分显著降低(P<0.05)。与SAP组相比,柴胡皂苷A组谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平显著升高,丙二醛水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与SAP组相比,柴胡皂苷A组MLCK、p-MLC2/MLC2蛋白水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论柴胡皂苷A可能通过下调MLCK/MLC2信号通路对SAP大鼠肠损伤起到改善作用。

饲粮中添加不同水平双歧杆菌对脂多糖应激雏鹅回肠损伤的缓解效果

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平双歧杆菌对脂多糖(LPS)应激雏鹅回肠损伤的缓解效果。选取288只1日龄江南白鹅公雏,随机分为6组,每组6个重复,每个重复8只。采用3×2两因素设计,两因素分别为双歧杆菌添加水平(分别添加0、300和600 mg/kg双歧杆菌冻干粉,有效活菌数为1.7×1010CFU/g)和LPS应激与否(腹腔注射LPS生理盐水溶液或生理盐水,LPS生理盐水溶液浓度为0.5 mg/mL)。试验期共28 d,分别于试验第15、17和19天对雏鹅进行1次腹腔注射,注射量均为1 mL/kg BW。结果表明:1)LPS应激显著提高了雏鹅血清中二胺氧化酶(DAO)活性和D-乳酸(D-LA)含量(P<0.05);饲粮中添加双歧杆菌显著降低了雏鹅血清中DAO活性和D-LA含量(P<0.05)。2)LPS应激显著提高了雏鹅回肠损伤评分(P<0.05),并对回肠黏蛋白2(MUC2)含量产生显著影响(P<0.05);饲粮中添加双歧杆菌显著降低了雏鹅回肠损伤评分(P<0.05),且显著提高了回肠MUC2含量(P<0.05)。3)与饲粮中添加300 mg/kg双歧杆菌相比,饲粮中添加双歧杆菌600 mg/kg双歧杆菌除28日龄时显著降低雏鹅血清中D-LA含量且显著提高回肠MUC2含量(P<0.05)外,其余日龄及指标均无显著差异(P>0.05)。4)LPS应激会造成雏鹅回肠上皮细胞严重损伤,胞质水肿明显,细胞核近似不规则椭圆形,高尔基体囊膜扩张,微绒毛出现整体结构损伤,细胞间紧密连接及中间连接结构模糊。饲粮中添加双歧杆菌通过诱导细胞自噬参与缓解上述现象,并且有助于保护线粒体结构,尤其以添加300 mg/kg双歧杆菌冻干粉可以明显缓解胞质水肿和粗面内质网扩张。综上所述,1~28日龄雏鹅LPS应激会对回肠及回肠上皮细胞造成损伤,致使MUC2分泌异常并增大肠道通透性。饲粮中添加双歧杆菌能通过促进MUC2分泌缓解回肠损伤并改善肠道通透性,并通过诱导细胞自噬参与缓解回肠上皮细胞损伤。在本试验条件下,饲粮中添加600 mg/kg双歧杆菌冻干粉未能取得更好的缓解效果,因此建议添加300 mg/kg。

整蛋白型肠内营养制剂改善脓毒症肠损伤代谢紊乱的机制研究

目的:利用代谢组学方法研究脓毒症中整蛋白营养制剂引起的代谢紊乱,为脓毒症的临床治疗提供了新的理论和实验基础。方法:8~12周龄雄性小鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)和脓毒症+整蛋白组(CLP+IPEN组),每组6只小鼠。CLP组采用盲肠结扎和穿刺诱导脓毒症,而Sham组仅行剖腹手术,未行结扎穿刺。CLP+IPEN组术后接受额外的整蛋白肠内营养制剂。每天监测体质量变化7 d,并在建模和喂养3 d后采集样本。染色观察回肠组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR)检测不同目的基因mRNA的表达。根据特定的标准,筛选整蛋白营养制剂治疗脓毒症的差异代谢物。结果:CLP组与CLP+IPEN组进行比较,发现有15种差异代谢物。在CLP+IPEN组中,3-甲基-1,3,5-戊三醇(dimethyl 3-hydroxy-3-methylpentane-1,5-dioate)、丙二酸(malonic acid)、苯酰胺(l-Serine,n-methoxycarbonylmethyl ester)等5种代谢物的含量比CLP组有所增加(P<0.05)。在整个实验过程中,3组小鼠的体质量均逐渐减轻,其中CLP组在4 d的体质量减轻最为明显(P<0.05)。这表明,整蛋白营养制剂可以减轻脓毒症小鼠的体质量减轻。CLP+IPEN组的Chiu评分明显低于CLP组(P<0.05),提示肠黏膜损伤明显减少。CLP组和Sham组中闭合蛋白(occludin)、紧密连接蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)和结肠黏蛋白(recombinant mucin 2,MUC2)的表达均升高,提示脓毒症导致肠道屏障功能受损。与CLP组相比,CLP+IPEN组中Occludin、ZO-1和MUC2的表达明显降低(P<0.05)。结论:本研究通过代谢组学方法深入研究整蛋白营养制剂中脓毒症引起的代谢紊乱。整蛋白肠内营养制剂可以通过调节亚油酸代谢、不饱和脂肪酸生物合成、脂肪酸生物合成和细胞色素P450物质的代谢来改善脓毒症相关肠道损伤的代谢紊乱。此外,这些制剂在增强肠道屏障功能、减轻小鼠体质量减轻和减轻肠道损伤严重程度方面具有潜力,从而为增强脓毒症治疗功效奠定了基础。

基于气质联用技术的黄芩素防治放射性肠损伤小鼠血清代谢组学分析

目的通过基于气质联用(GC-MS)技术的代谢组学方法,考察黄芩素干预下放射性肠损伤小鼠血清代谢产物变化,以及黄芩素参与放射性肠损伤防治过程中,内源性生物小分子的变化特征,探讨黄芩素潜在的调控机制。方法建立小鼠放射性肠损伤模型,并随机分为正常对照组、模型组、低剂量黄芩素组和高剂量黄芩素组。黄芩素以灌胃方式给予,采用GC-MS技术,对各组小鼠血清样本进行分析,通过偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)筛选差异性代谢物,利用MetaboAnalyst分析潜在的代谢通路。结果小鼠肠组织病理切片显示,黄芩素高剂量组和低剂量组对放射性肠损伤有一定的防护作用。代谢组学分析表明,空白组、模型组、低剂量和高剂量黄芩素给药组代谢谱存在显著差异。黄芩素灌胃给药后,放射性肠损伤小鼠的内源性代谢物有正常化趋势。研究共筛选出11个潜在代谢标志物,以及与此相关的5条代谢通路,其中糖代谢、谷胱甘肽通路、氨代谢相关通路尤为显著。结论黄芩素对放射性肠损伤有一定的防治作用。黄芩素参与糖代谢和谷胱甘肽代谢,改善放射导致的内源性物质紊乱是其潜在作用机制。

抗肿瘤药物对慢性放射性肠损伤影响的病理学研究

目的从病理学角度探讨抗肿瘤药物对宫颈癌慢性放射性肠损伤组织的影响。方法回顾性分析2016年8月至2023年4月期间安徽医科大学第一附属医院宫颈癌慢性放射性肠损伤患者的临床病理资料。根据RTOG/EORTC评分标准对49例患者的放射性肠损伤临床症状进行评分和严重程度分级。根据药物治疗方案分为抗血管生成药物治疗组和无抗血管生成药物治疗组,紫杉类药物化疗组和无紫杉类药物化疗组。采用病理学半定量评分系统评估患者的慢性放射性肠损伤程度,分别比较对应亚组间微血管计数、狭窄血管计数、狭窄血管比例、病理总分、溃疡、炎症、水肿、坏死和纤维化指标的差异。并使用Cox分析慢性放射性肠损伤患者发生严重并发症的独立危险因素。结果抗血管生成药物治疗组的狭窄血管计数、狭窄血管比例、溃疡和炎症程度均高于无抗血管生成药物治疗组,差异有统计学意义(P均<0.05);而抗血管生成药物治疗组的微血管计数和纤维化程度均低于无抗血管生成药物治疗组,差异有统计学意义(P均<0.05)。紫杉类药物化疗组与无紫杉类药物化疗组间的病理学指标比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。Cox多因素分析显示,抗血管生成药物不是慢性放射性肠损伤患者发生严重并发症的独立危险因素(P>0.05)。结论抗血管生成药物加重了宫颈癌慢性放射性肠损伤组织的血管狭窄、溃疡和炎症,但减轻了纤维化。紫杉类药物对宫颈癌慢性放射性肠损伤组织无明显影响。

中药抗休克合剂对严重烫伤大鼠早期肠损伤的影响

目的观察在高渗盐溶液(HS)补液基础上应用中药抗休克合剂对严重烫伤大鼠早期肠损伤的影响。方法选取32只8周龄SD大鼠,按照随机数表法将其随机分为假伤组、LR组、HS600组、HS600+中药组,每组8只。假伤组大鼠建立假伤模型以及LR组、HS600组、HS600+中药组大鼠建立烫伤模型后,LR组大鼠采用乳酸钠林格注射液(LR)补液,HS600组大鼠采用600 mmol/L HS补液,HS600+中药组大鼠采用600 mmol/L HS补液+中药抗休克合剂灌胃。对比观察模型建立24 h后各组大鼠血Na^(+)浓度,血清炎症因子水平以及小肠组织氧化应激水平与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路活化程度。结果LR组大鼠血Na^(+)浓度明显低于假伤组、HS600组及HS600+中药组(q=14910、32211、30010,P均<0001),且HS600组与HS600+中药组无明显差异(q=2198,P=0130)。LR组、HS600组及HS600+中药组大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-10、白细胞介素-18水平以及小肠组织中丙二醛水平和磷酸化p38MAPK与p38MAPK比值均明显高于假伤组(肿瘤坏死因子-α:q=16070、10810、7579,P均<0001;白细胞介素-10:q=15920、20210、23850,P均<0001;白细胞介素-18:q=12750、7562、3897,P<0001、P<0001、P=0049;丙二醛:q=28450、20320、10160,P均<0001;磷酸化p38MAPK与p38MAPK比值:q=54310、15090、9196,P均<0001),且HS600+中药组大鼠血清肿瘤坏死因子-α与白细胞介素-18水平以及小肠组织中丙二醛水平和磷酸化p38MAPK与p38MAPK比值均明显低于LR组与HS600组、白细胞介素-10水平明显高于LR组与HS600组(肿瘤坏死因子-α:q=8494、3932,P<0001、P=0048;白细胞介素-18:q=9357、4165,P<0001、P=0031;丙二醛:q=18290、10160,P均<0001;磷酸化p38MAPK与p38MAPK比值:q=45110、5899,P<0001、P=0001;白细胞介素-10:q=7929、3939,P<0001、P=0047)。LR组、HS600组及HS600+中药组大鼠小肠组织中超氧化物歧化酶水平均明显低于假伤组(q=20880、14120、11110,P均<0001),且HS600+中药组明显高于LR组与HS600组(q=9772、4008,P<0001、P=0043)。结论与单独应用LR或HS补液相比,在HS补液基础上加用中药抗休克合剂可有效降低严重烫伤大鼠机体炎症反应及氧化应激反应程度、抑制p38MAPK通路过度活化,从而减轻早期肠损伤。

纳米制剂用于放射性肠损伤防护的研究进展

[背景]辐射引起的急、慢性肠道损伤是腹部/盆腔实体肿瘤放疗常见的并发症,发病机制主要与肠上皮细胞、血管内皮细胞、微生物屏障和免疫屏障的损伤以及肠壁组织纤维化有关.目前,氨磷汀被认为是预防放射性肠损伤的有效药物,然而半衰期短、副作用大等缺点限制了其临床应用,因此,开发低毒、高效的放射性肠损伤防护药物具有十分重要的意义.[进展]药物防护是放射性肠损伤的研究重点,但合成小分子化合物、天然植物化合物仍存在溶解性差、生物利用度低等缺点.随着载体材料和制剂技术的快速发展,纳米制剂在减轻药物毒副作用、延长药物半衰期和提高药物生物利用度上发挥了重要作用,一些具有本征放射性的纳米材料和药物递送载体在减轻放射引起的肠损伤方面显现出巨大潜力,成为具有广泛应用前景的替代策略.[展望]本文从放射性肠损伤的发病机制出发,综述化学药物和纳米制剂在放射性肠损伤中的应用和研究进展,以期为开发新型的放射性肠损伤防护制剂提供思路.从材料选择上需考虑生物安全性良好的天然材料,从保护效果和病人用药依从性上可优先考虑口服药物递送策略.

罂粟碱在创伤休克大鼠肠损伤保护作用研究

目的研究罂粟碱对创伤休克大鼠肠损伤保护作用。方法选择SD大鼠20只,随机分成2组,对照组采用股骨创伤法建立创伤性休克大鼠模型,建模后常规液体复苏。实验组在对照组基础上予罂粟碱1.5 mg/kg加入50 mL生理盐水微量泵24小时持续注入。24小时后分别抽血检测血清肠型脂肪酸结合蛋白(IFABP)、二胺氧化酶(DAO)、炎症因子TNF-α、IL-6浓度。结果(1)创伤休克24小时大鼠血清IFABP、DAO及血清炎症因子TNF-α、IL-6浓度明显升高。(2)加用罂粟碱干预后大鼠血清IFABP、DAO及血清炎症因子TNF-α、IL-6浓度较对照组明显降低。结论罂粟碱能减轻创伤休克大鼠肠道损伤,降低全身炎症反应。

番茄红素对玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和黄曲霉毒素B_1联合暴露小鼠回肠损伤的保护作用

本试验旨在探究番茄红素(LYC)对玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)和黄曲霉毒素B1(AFB1)联合暴露小鼠回肠损伤的保护作用及机制。选用80只6周龄无特异病原体(SPF)的ICR雄性小鼠[体重为(31.01±0.29) g],随机分为4组(每组20只),分别为:对照组、LYC组、霉菌毒素组和LYC+霉菌毒素组。将小鼠适应性饲养10 d后,连续灌胃10 mg/kg LYC或等量其溶剂14 d,随后腹腔注射10 mg/kg ZEN+1 mg/kg DON+0.5 mg/kg AFB1或等量溶剂。在处理结束时,小鼠禁食24 h后称重并处死,立即收集回肠样本待测。结果表明:1)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠隐窝深度极显著提高(P<0.01),回肠绒毛高度/隐窝深度值显著降低(P<0.05);与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠绒毛高度有提高趋势(P>0.05),回肠隐窝深度有降低趋势(P>0.05)。2)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠封闭蛋白-1(claudin-1)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和闭合蛋白(occludin)的分布减少;与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠claudin-1、ZO-1和occludin的分布增加。3)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠上皮细胞紧密连接模糊化,线粒体膜溶解,嵴断裂,且线粒体肿胀、空泡化严重;与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠上皮细胞紧密连接完整清晰,线粒体出现轻微的肿胀、空泡化。4)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠受体相互作用蛋白3 (RIP3)和混合系列蛋白激酶结构域样蛋白(MLKL)蛋白表达量显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠RIP3蛋白表达量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠受体相互作用蛋白1(RIP1)、RIP3和MLKL的mRNA表达量极显著提高(P<0.01);与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠RIP1和RIP3的mRNA表达量极显著降低(P<0.01)。综上所述,LYC可通过维持肠道黏膜屏障及线粒体结构的完整性,抑制回肠程序性坏死信号通路,以减轻ZEN、DON和AFB1联合暴露引起的小鼠回肠损伤。

人乳寡糖对放射性肠损伤保护作用机制

目的探究人乳寡糖对放射性肠损伤保护作用机制。方法构建小鼠放射性肠损伤模型,使用人乳寡糖灌胃对小鼠进行治疗。HE染色检测小鼠肠道绒毛长度和隐窝深度,分光光度法检测小鼠血清D-乳酸及D-木糖的变化以判断肠道通透性。髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性试剂盒检测肠道组织中性粒细胞浸润,酶联免疫吸附测定试剂盒检测小鼠肠道组织炎症因子的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应技术(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测肠道组织Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)mRNA表达水平。结果与IR组相比,IR+HMOs组促使上皮厚度[(413.21±37.04)μm]及隐窝数量[(65.11±8.23)个]显著增加(P<0.05),血清D-乳酸水平[(1.80±0.16)μg/L]显著下降,D-木糖水平[(76.82±12.21)mg/L]显著升高(P<0.05)。并且,IR+HMOs组小鼠肠组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)[(42.00±5.86)ng/L]和白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)[(38.84±4.02)ng/L]的水平、中性粒细胞的浸润[(4.02±0.42)U/L]显著降低,抗炎症因子白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)水平[(24.39±2.99)ng/L]显著上升。另外,与Sham组(1.00±0.09)相比,IR组小鼠肠道组织TLR4表达(3.22±0.53)上升,而IR+HMOs组TLR4 mRNA的表达水平显著高于IR组。结论人乳寡糖介导TLR4对放射性肠损伤发挥保护作用。

雷帕霉素对慢性放射性肠损伤肠道纤维化的保护机制研究

目的观察慢性放射性肠损伤(chronic radiation intestinal injury,CRII)肠道纤维化的进程以及研究自噬激动剂雷帕霉素对其保护机制。方法选取30只C57/B6雄性小鼠,将其随机分为对照组(CO组)、单纯放射组(SR组)和雷帕霉素干预组(RI组)。其中CO组不做处理;SR组先建立CRII模型(单次9Gy剂量放射),3个月后取材;RI组建模后连续1周给予雷帕霉素(2mg/kg,腹腔注射),余同SR组。使用苏木精-伊红染色和Masson染色评估肠道黏膜损伤及肠道纤维化程度;酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;免疫组化法检测肠道α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;Western blot法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及自噬相关蛋白(p62、LC3)水平。结果组织病理染色显示,与CO组比较,SR组肠道黏膜损伤加重(P<0.05),肠道纤维化程度明显增加(P<0.01),而RI组较SR组肠道黏膜损伤(P<0.05)及肠道纤维化程度减轻(P<0.01)。与CO组比较,SR组IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.01),RI组较SR组显著下降(P<0.01)。免疫组化法及Western blot法检测结果显示,SR组α-SMA、TGF-β1、CTGF表达水平较CO组明显升高(P<0.05),RI组上述指标则较SR组明显减少(P<0.05);SR组自噬表达较CO组降低(P<0.05);RI组自噬表达较SR组明显升高(P<0.05)。结论雷帕霉素诱导自噬可改善CRII肠道纤维化的进程,其机制可能与自噬抑制肠道肌成纤维细胞的分化与功能及减轻肠道炎症相关。

隐丹参酮调节Rac1/AKT/NF-κB信号通路对脓毒症大鼠肠损伤的影响

目的:探究隐丹参酮(CRY)调节Ras相关C3肉毒素底物1(Racl)/丝氨酸-苏氨酸蛋白酶(AKT)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对脓毒症大鼠肠损伤的影响。方法:建立脓毒症大鼠模型。大鼠分为Control组、Model组、隐丹参酮高、中、低剂量组(7.0mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-H组、14.0mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-M组、28.0mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-L组)和隐丹参酮高剂量+NF-κB通路激活剂组(28mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-H+5 mg·kg^(-1)·d^(-1)PMA组),每组12只,Control组与Model组使用同等剂量生理盐水进行处理,每天1次,连续21d。用试剂盒检测脓毒症大鼠血清炎症因子、氧化应激、肠黏膜屏障指标水平;HE染色观察大鼠肠组织病理形态;免疫组化和免疫印迹法分别检测大鼠肠组织中ZO-1、occludin和通路蛋白表达。结果:与Control组比较,Model组黏膜绒毛排列紊乱,部分黏膜脱落、坏死,大量炎细胞浸润,组织病理评分较高,血清TNF-α、IL-1β、MDA、内毒素、D-乳酸水平上升,SOD水平降低,Rac1、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB表达上调,ZO-1、occludin下调表达(P<0.05);与Model组比较,CRY-L、CRY-M、CRY-H组肠黏膜绒毛相对完整,炎细胞浸润减轻,组织病理评分降低,血清TNF-α、IL-1β、MDA、内毒素、D-乳酸水平降低,SOD水平上升,Rac1、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB表达下调,ZO-1、occludin上调表达(P<0.05);与CRY-H组相比,CRY-H+PMA组肠黏膜细胞有较多炎细胞浸润,组织病理评分升高,血清TNF-α、IL-1β、MDA、内毒素、D-乳酸水平升高,SOD水平降低,Rac1、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB表达上调,ZO-1、occludin下调表达(P<0.05)。结论:隐丹参酮抑制Rac1/AKT/NF-κB信号通路改善脓毒症大鼠肠损伤。

右美托咪定防治妇科腹腔镜手术气腹致肠损伤的应用研究

目的:观察右美托咪定防治妇科腹腔镜手术气腹所致肠损伤的临床应用效果。方法:选择120例妇科腹腔镜手术患者为研究对象,随机分为常规组(60例)和观察组(60例),常规组实施常规麻醉,观察组采用右美托咪定辅助麻醉,比较2组患者手术情况、围手术期基础体征变化情况、肠道屏障功能变化情况和胃肠动力变化情况。结果:在不同麻醉方案下,观察组的手术时间、术中出血量、术中尿量、术中低血压发生率、术中心动过缓发生率略高于常规组,差异无统计学意义(P>0.05);观察组气管插管时(T2)、气腹建立时(T3)、气腹释放后(T4)的心率(HR)和平均动脉压(MAP)均低于常规组(P<0.05);观察组T3、T4时的紧密连接蛋白claudin-1均高于常规组,二胺氧化酶(DAO)均低于常规组(P<0.05);观察组术后(T5)胃泌素(GAS)、胃动素(MLT)均高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:右美托咪定辅助妇科腹腔镜手术全麻能稳定患者围术期基础体征,可在不影响手术操作、不增加手术风险同时,有效避免气腹所致肠损伤和促进患者术后肠道功能恢复。

脓毒症诱导的肠损伤及其防治措施的研究进展

脓毒症是一种由感染引起的全身炎症反应综合征,是目前住院患者最大的威胁之一。而肠道在脓毒症的发病机制中起着至关重要的作用,肠道既是脓毒症受累的重要器官之一,又是加重脓毒症反应的器官。正常情况下,肠道细菌及其产物与肠道黏膜屏障存在动态平衡,肠道黏膜屏障可以防止水分和电解质的丢失,阻止抗原和微生物进入体内,同时又可以使人体和环境实现分子交换。

间充质干细胞移植对放射性肠损伤修复作用的实验研究

探讨了人间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对NOD/SCID小鼠放射性肠损伤的修复作用.将雄性NOD/SCID小鼠随机分为3组,每组6只,即A组为空白对照组,B组为模型组,C组为治疗组.B组和C组小鼠全腹接受5 Gy60Coγ射线单次照射,剂量率为100 cGy/min.照射后B组小鼠经尾静脉注射生理盐水,C组小鼠移植MSCs.于移植后第15天取小鼠空肠标本,通过免疫荧光方法检测MSCs在受损肠道的定植和分化情况.结果表明,治疗组小鼠的生存状况明显好于模型组小鼠,病理切片显示小肠黏膜得到修复,免疫荧光结果显示MSCs可定植于辐射损伤的肠道,并表达波形蛋白(vimentin)和α-SMA.MSCs移植入肠损伤的小鼠体内后可在受损肠道定植,并向间质细胞分化,参与辐射损伤的修复.

肠功能障碍的新概念:急性肠损伤与急性肠伤害综合征

从肠衰竭到肠功能障碍,人们对肠功能的认识不断深入。急性肠损伤与急性肠伤害综合征是肠功能障碍的两个新概念,主要描述了肠功能障碍发生前,肠道内环境出现的特征性病理改变。这一概念的提出,丰富了肠功能障碍的内涵,推进了人们对肠功能的认识。本文主要综述急性肠损伤与急性肠伤害综合征的概念、病因和病理学基础。

严重腹部创伤休克时肠损伤后不同手术方式对肠黏膜屏障的影响

目的:对照研究严重腹部创伤休克时肠道损伤后不同手术方法对术后肠黏膜屏障的影响。方法:雌性杂种猪麻醉后,建立多发肠管损伤并发酸中毒、低体温、凝血障碍"致死三联征"的严重腹部创伤实验模型,随机分为三组,每组7只。即①对照组:手术修补(修补)组行肠管损伤修补吻合术,7号线双层关闭腹腔;②肠道结扎(结扎)组行肠管损伤段丝线结扎;③肠道造口(造口)组行损伤段肠道内置入肛管,荷包缝合固定后,经切口旁引出。监测术后0、6、12和24 h二胺氧化酶(DAO)活力。术后24 h行门静脉和外周血细菌培养,观察空肠和末端回肠黏膜屏障组织变化。结果:DAO活力造口组较结扎组和修补组低,门静脉和外周血细菌培养阳性率亦低。病理学观察结扎组肠黏膜组织损伤最重,修补组次之,造口组损伤最轻。结论:肠道造口符合损伤控制手术要求,优于肠道结扎和传统手术,能避免进一步加重肠黏膜屏障破坏,减轻细菌易位和全身炎症反应的发生。

白藜芦醇通过保护线粒体和减少氧化应激改善失血性休克大鼠肠损伤

目的:探讨白藜芦醇是否能够减轻失血性休克大鼠肠损伤及其作用机制。方法:24只无特定病原体级Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组(n=8)、白藜芦醇治疗组(SR组,n=8)和溶剂组(SS组,n=8),记录平均动脉压。失血性休克2 h后分别给予15 mg/kg的白藜芦醇或0.3 m L等体积的溶剂(70%乙醇)并回输自体血。治疗2 h后采集小肠标本行HE染色后,再行肠黏膜的病理学观察和评分,免疫组织化学法检测超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase2,SOD2)表达,Western印迹测定SOD2和细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)蛋白含量。取部分肠组织匀浆检查ATP、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GXH-px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、总SOD活性。结果:自体血回输2 h后,SR组平均动脉血压高于SS组,两组间差异有统计学意义(P<0.01);SR组较SS组病理损伤减轻,且病理学评分明显下降(P<0.05);SR组小肠组织匀浆GXH-px,CAT和SOD活性以及ATP水平均高于SS组(均P<0.01);SR组SOD2蛋白水平高于SS组,胞质Cyt C水平明显低于SS组,组间比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:白藜芦醇减轻了失血性休克大鼠的肠损伤,其机制可能与减少氧化应激和保护线粒体有关。

肢体缺血再灌注致肠损伤及甘露醇的保护作用

目的 通过动物实验观察甘露醇对肢体缺血再灌注所致肠损伤的保护作用。方法 80只Wistar大白鼠随机分成正常对照组 ,缺血 3小时和缺血 3小时用甘露醇 3个组。实验组于缺血、再灌注 1、2、3和 2 4小时取材光镜对比观察和组织学评估。结果 肢体缺血和再灌注后 ,实验组肠粘膜固有层毛细血管扩张、充血、大量多核白细胞浸润。大肠和小肠粘膜厚度和隐窝深度明显减少 (P <0 0 1) ,小肠绒毛高度相对增加 (P <0 0 1) ,隐窝细胞有变性坏死 ,用甘露醇组的病变明显轻于未用甘露醇组。结论 甘露醇能有效地减轻肢体缺血再灌注所致的肠损伤。

右美托咪定通过Akt/mTOR自噬通路介导NLRP3炎症小体失活而减轻脓毒症大鼠肠损伤

目的:探讨右美托咪定(DEX)是否通过蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)自噬通路介导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体失活从而减轻脓毒症大鼠肠损伤。方法:随机数字法对50只大鼠分组:假手术组、模型组、DEX组(0、3和6 h腹腔注射10μg/kg DEX)、DEX+NVP-BEZ235组(在DEX组基础上腹腔注射30 mg/kg NVP-BEZ235)及DEX+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(在DEX组基础上腹腔注射15 mg/kg 3-MA),每组10只。除假手术组外,其余各组盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症大鼠模型,建模后给药。HE染色观察肠道组织形态,对结肠标本进行结肠大体形态损伤指数(CMDI)评分;ELISA检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫组化检测肠道组织中自噬相关蛋白beclin-1和LC3-II蛋白水平;Western blot检测肠道组织中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1及其前体pro-caspase-1的蛋白水平。结果:模型组大鼠肠道组织完整性被破坏,细胞脱落和炎症浸润现象明显;DEX组大鼠肠道组织完整,仅出现部分细胞脱落和炎症浸润现象;DEX+NVP-BEZ235组和DEX+3-MA组大鼠肠道完整性被破坏,细胞脱落和炎症浸润明显。与假手术组相比,模型组大鼠CMDI评分,血清中IL-1β和TNF-α水平,肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率,p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平升高(P<0.05);与模型组相比,DEX组大鼠CMDI评分,血清中IL-1β和TNF-α水平,肠道组织中NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平降低(P<0.05),肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率及p-Akt/Akt和pmTOR/mTOR蛋白水平升高(P<0.05);与DEX组相比,DEX+NVP-BEZ235组和DEX+3-MA组血清中IL-1β和TNF-α水平及肠道组织中NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平升高(P<0.05),肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率及p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR蛋白水平降低(P<0.05)。结论:DEX能够通过激活Akt/mTOR通路促进自噬而介导NLRP3炎症小体失活,从而减轻脓毒症大鼠肠损伤。