基于肠道干细胞探讨肠神经系统调节肠道炎症的机制研究进展

肠道干细胞受到肠神经系统调控,肠道干细胞与肠神经系统均与肠道炎症存在密切联系。相关研究表明肠道炎症中存在肠神经功能障碍,本文通过总结肠道干细胞、肠神经系统与肠道炎症三者之间的关系,探讨肠道炎症相关的肠神经系统损伤可能是肠道功能持续改变的基础,而肠神经元等为改善肠道炎症性疾病中出现的肠神经功能障碍提供了可行靶点,以期将多种类型干细胞用于改善肠道炎症中出现的肠神经功能障碍。

大黄对大鼠结肠动力及肠神经系统的影响

目的:探讨长期应用大黄对结肠肌电、肠神经系统的影响.方法:建立大鼠“泻剂结肠”模型,应用电生理、组化及免疫组化技术研究大黄对大鼠结肠动力、ENS多种神经递质及Cajal间质细胞(ICC)的影响.结果:大鼠饲养大黄3mo后,结肠慢波频率减慢;结肠肌间丛NADPH阳性神经细胞数目增多,AchE阳性神经细胞数目减少;NOS免疫反应性增强,SOM免疫反应性减弱;肌间丛ICC分布不均匀,突起连接杂乱.结论:长期应用大黄对结肠动力和ENS有损害作用,在临床治疗顽固性便秘时应避免长期应用大黄等刺激性泻剂.

肠易激综合征大鼠模型肠神经系统神经递质表达的初步研究

目的 利用我们以往建立的便秘型肠易激综合征(C-IBS)大鼠模型,对该模型中SP、VIP、GABA、Ach、NE在肠神经系统的分布及表达进行研究,探讨这些物质在IBS发病机制中的可能作用。方法 采用以往本研究小组建立的C-IBS大鼠模型,取模型组及正常对照组大鼠的回盲部、结肠标本,进行常规组织固定、包埋、切片。分别应用抗SP、VIP、GABA、乙酰胆碱酯酶(AchE)、酪氨酸羟化酶(TH)抗体进行免疫组织化学染色,结果应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的面积、不透光率密度值进行半定量分析。结果 C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中SP表达的不透光率密度明显增高(P<0.05),阳性面积与正常对照组无显著差异(P>0.05);C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中VIP表达的阳性面积、不透光率密度均明显增高(P<0.05);C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中GABA表达的不透光率密度明显降低(P<0.05),阳性面积与正常对照组无显著差异(P>0.05);C-IBS大鼠模型回盲部、结肠肌层中AchE、TH表达的阳性面积、不透光率密度与正常对照组尤显著差异(P>0.05)。结论 C-IBS大鼠模型中肠神经系统SP、VIP、GABA表达具有改变,提示这些神经递质在肠道可能参与C-IBS的病理生理过程。

腹部外科手术操作对大鼠肠道运动功能和肠神经系统的影响

目的观察不同的腹部外科手术操作对大鼠肠道运动功能以及肠神经系统内乙酰胆碱酯酶(AchE)神经元和一氧化氮合酶(NOS)神经元的影响,探讨腹部外科手术对肠道运动功能影响的神经机制。方法48只SD大鼠随机分为单纯开腹组、肠道按摩组、肠道手术组和正常对照组(n=12),各组术后灌服炭末,测定小肠炭末推进率,同时取各组相同部位的小肠和大肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色观察AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况。结果炭末推进率(%)肠道手术组、肠道按摩组低于单纯开腹组和正常对照组(P<0.01),肠道手术组低于肠道按摩组(P<0.05),单纯开腹组与对照组比较降低不明显(P>0.05);与正常对照组比较,肠道手术组、肠道按摩组的小肠和大肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量(个/200倍视野)减少(P<0.01),阳性表达减弱,NOS阳性神经元数量增多(P<0.01),阳性表达增强,节间束纤维粗大,而单纯开腹组的变化不明显;与肠道按摩组比较,肠道手术组小肠和大肠肌间神经丛内的NOS阳性神经元数量较多(P<0.01),胞体大而染色深,节间束纤维较粗大,而AchE阳性神经元数量和染色的差异不明显。结论腹部外科手术在一定程度上会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是腹部外科手术后发生肠道运动功能障碍的神经机制之一。

肠淤血大鼠肠神经系统内胆碱能和氮能神经的改变

目的研究肠淤血大鼠肠神经系统内乙酰胆碱酯酶(AchE)神经元和一氧化氮合酶(NOS)神经元的改变,以探讨肠淤血影响肠道运动功能的神经机制。方法SD大鼠分成实验组(依据肠道淤血时间分为肠淤血20min组、60min组)和对照组,取各组相同部位的回肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色,观察比较各组AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况。结果与对照组比较,实验组大鼠的回肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量减少(P<0·01),阳性表达减弱,而NOS阳性神经元数量增多(P<0·01),阳性表达增强;与肠淤血20min组比较,60min组AchE阳性神经元较少(P<0·01),胞体染色较浅,而NOS阳性神经元数量较多(P<0·01),胞体大而染色深,但节间束NOS阳性神经纤维稀少。结论肠淤血会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是肠淤血后肠道运动功能障碍发生的神经机制。

胃化学性炎性痛时幽门括约肌肠神经系统内一些神经活性物质的变化

采用组织化学和免疫组织化学技术 ,研究大鼠幽门括约肌内NOS ,AChE ,VIP和CGRP阳性神经元成分的分布及其在甲醛致胃炎性痛时的变化 ,拟阐明括约肌内肠神经系统 (ENS)中一些神经成分与胃肠运动功能的相互关系。结果发现 :①正常括约肌黏膜下层有散在的含AChE和NOS神经元胞体。括约肌肌层有含NOS和AChE神经丛 ,内含数个神经元胞体 ;也可见个别CGRP和VIP免疫反应性神经元胞体。肌层内四种阳性纤维丰富。在肌纤维增厚的括约肌部位这些神经元成分特别丰富。②甲醛致胃炎性痛鼠 ,括约肌黏膜下神经丛及肌间神经丛NOS ,AChE ,VIP神经元阳性反应产物 (平均光密度 )均比对照组显著降低 (P <0 .0 1) ,但CGRP较对照组升高 (P <0 .0 1)。结果提示 :ENS中上述这些神经元成分可能参与幽门括约肌活动和胃肠运动的调控机制。

Sox10和EDNRB在人胚胎肠神经系统发育中的表达

目的动物实验和先天性巨结肠患儿狭窄段肠管的相关实验已经证实EDNRB与Sox10在肠神经系统发育中发挥重要作用。而对人胚胎肠神经发育的研究较少，我们通过检测Sox10、EDNRB在人胚胎后肠的表达情况，探讨二者与肠神经系统发育的关系，从而为进一步探讨先天性巨结肠病因提供基础性研究。方法应用免疫组化sP方法检测32例7—12周人胚胎后肠Sox10、EDNRB的表达情况，并以神经营养因子p75NTR标记肠神经嵴细胞。结果Sox10：7-8周，仅在浆膜层有很弱的阳性表达；9～10周，阳性表达明显增强，表达于肠道外缘的浆膜层和环肌层，黏膜下的肠道间质中也有少许表达。11—12周，表达较前稍减弱。EDNRB：7-8周，浆膜层有很弱的阳性表达；9～10周，阳性表达明显增强，表达于肠道环肌层和浆膜层，黏膜下也有少许表达；11，12周表达模式与9～10周相似，仍表达于肠道环肌层和浆膜层。同一标本，经连续切片，免疫组化染色显示p75NTR标记的神经嵴细胞阳性表达几乎与Sox10、EDNRB表达成一致性。结论Sox10、EDNRB的阳性表达说明二者参与了人胚胎后肠肠神经系统的发育过程。

肠神经系统退行性变的研究进展

肠神经系统(enteric nervous system,ENS)可独立调节胃肠道感觉、分泌和运动功能,ENS退行性变可导致胃肠道功能的异常,引起一系列的临床症状,其与胃肠动力性疾病和功能性胃肠病的发病有关。本文就导致ENS退行性变的原因、肠神经元退行性变引起的功能异常及其与临床症状的关联性、可能的治疗靶点等方面的研究进展作一概述。

肠神经系统与慢传输型便秘

慢传输型便秘(STC)病因未明,多因素与其发病相关。肠神经系统(ENS)可独立调节肠道功能,其在慢传输型便秘中的改变具有重要意义。此文就此予以阐述,为STC临床治疗提供依据。

神经生长因子及其受体在人胚胎结肠神经系统中的表达与分布

目的:研究人胚胎结肠神经系统的发育过程中神经生长因子(NGF)与其两个受体TrkA、P75NTR在结肠神经系统中的分布及与结肠神经系统发育的关系。方法:采用一抗为PGP9.5、NGF、TrkA、P75NTR的免疫组织化学技术,显示结肠神经系统中的神经元。结果:随着胚胎结肠神经系统的发育,P75NTR表达水平不断下降,而NGF、TrkA表达水平不断上升,P75NTR与NGF、TrkA的比例在不断变化。结论:NGF、TrkA、P75NTR参与了结肠神经系统的发育。

肠易激综合征大鼠肠神经系统内γ-氨基丁酸及其受体的表达

目的通过研究γ-氨基丁酸(GABA)及其受体在便秘型肠易激综合征(C-IBS)大鼠模型肠神经系统中表达的变化,探讨GABA在肠易激综合征(IBS)发病机制中的可能作用。方法通过0～4℃冰水灌胃方法建立C-IBS大鼠模型,分别取模型组和正常对照组大鼠的回盲部以及距肛门3cm处结肠的标本,进行灌注、固定、切片。用抗谷氨酸脱羧酶(GAD)、GABAA受体、GABAB受体抗体进行免疫组织化学染色,应用病理图像分析系统对不透光率密度值进行半定量分析。结果与正常大鼠相比,C-IBS大鼠模型回盲部及距肛门3cm处结肠肌层中GAD免疫反应性明显降低(P<0.05),GABAA受体免疫反应性无明显变化(P>0.05),GABAB受体免疫反应性明显降低(P<0.05)。结论 GABA可能通过其受体间接地参与IBS的病理生理过程。

急进高原胃动力紊乱大鼠胃电起搏区肠神经系统—Cajal间质细胞—消化道平滑肌网络微观结构及功能的变化

目的探讨急进高原胃动力紊乱大鼠胃电起搏区肠神经系统(enteric nervous system,ENS)-Cajal间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)-消化道平滑肌(smooth muscle cell,SMC)网络微观结构及功能的变化,及其作用机制。方法 50只SD大鼠以低海拔地区(海拔400 m)为对照组,并以进入高原地区(海拔4 300 m)后的时间节点依次分为1 d、3 d、7 d和14 d组,每组10只。透射电镜观察胃电起搏区ICC细胞的微观结构变化。以双重免疫荧光组织化学染色法,将ICC与胆碱能神经元及氮能神经元双标记,并观察其表达变化。结果电镜下可见,急进高原后大鼠胃电起搏区ICC细胞之间、ICC与SMC之间的缝隙连接明显减少,ICC内细胞器减少并出现凋亡小体等,尤以高海拔地区3 d组最显著。免疫荧光双标记结果显示,ICC及胆碱能神经元的表达量在高海拔3 d组降到最低(P<0.05),而此时氮能神经元的表达量则显著上升到最高(P<0.05)。结论急进高原环境下,大鼠ENS中胆碱能/氮能神经元的兴奋性发生改变,使ICC细胞功能受到抑制,导致平滑肌运动障碍,可能是胃动力紊乱发生的作用机制之一。

胃肠道肥大细胞与肠神经系统的相互作用

作为胃肠道免疫系统重要成员的肥大细胞与肠神经系统（ENS）间存在复杂的相互作用,其对胃肠道正常功能的维持至关重要,并与一些疾病的发生密切相关.本文综述了肥大细胞与ENS相互作用的解剖学基础和分子生物学机制及其在胃肠道疾病病理生理学机制中的作用,为探讨相关疾病新的治疗靶点提供了线索.

快速进入高海拔地区对大鼠小肠肠神经系统-Cajal间质细胞——消化道平滑肌网络超微结构的影响

目的探讨快速进入高海拔地区大鼠小肠动力紊乱发生过程中,肠神经系统(enteric nervous system,ENS)-Cajal间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)-消化道平滑肌(smooth muscle cell,SMC)网络超微结构的改变,及其作用机制。方法选取50只SD大鼠,以低海拔地区(海拔400 m)为对照组(10只),并以进入高海拔地区(海拔4 300 m)后的时间节点依次分为1 d、3 d、7 d和14 d组,每组10只。应用电子显微镜观察小肠ICC细胞的微观结构变化,以双重免疫荧光组织化学染色法,用c-kit标记ICC,将其与胆碱乙酰转移酶抗体(Ch AT)及神经型一氧化氮合酶抗体(n NOS)双标记观察其表达变化。结果电镜下可见急进高原后,大鼠小肠ICC细胞之间,ICC与SMC之间的缝隙连接明显减少,ICC内细胞器减少并出现凋亡小体等,尤以3 d组最显著。免疫荧光双标记结果显示,大鼠氮能神经元表达量于3 d组显著上升(P<0.05),而胆碱能神经元表达量则显著下降(P<0.05),ICC网络围绕着胆碱能/氮能神经网络,受兴奋性/抑制性神经元支配,呈对应变化,同样在3 d组表达量降到最低(P<0.05)。结论 ENS-ICCSMC网络结构在快速进入高海拔地区小肠动力紊乱过程中发挥重要作用,胆碱能/氮能神经元的兴奋性发生对应性改变,并通过对ICC细胞功能的干预调控胃肠动力。

慢传输性便秘与正常乙状结肠神经系统研究

目的:通过慢传输型便秘(STC)患者乙状结肠及正常乙状结肠CAD及S-100蛋白进行免疫组化检测,观察慢传输型便秘乙状结肠组织神经丛内神经节细胞数量变化以及神经纤维改变,探寻慢传输型便秘患者的肠神经系统病理学改变。方法:选取结直肠癌手术标本乙状结肠段20例作为正常对照组,慢传输型便秘手术标本乙状结肠段20例为研究组,应用CAD和S-100行免疫组化检测,计数肠壁神经丛内神经节细胞数目。结果:CAD和S-100两组免疫组化染色均显示STC组结肠壁内肌间和粘膜下神经节细胞数目减少,神经纤维呈增生扭曲改变。结论:慢传输型便秘发病机制可能与结肠壁内神经节细胞数量减少、神经纤维增生紊乱有关。

钙敏感受体在肠神经系统中的表达

目的观察与探讨G-蛋白耦联受体(CASR)在豚鼠肠神经系统中的表达。方法以豚鼠为试验对象,先进行RT-PCR设计,然后采用Western blotting来检测豚鼠肠神经系统中CASR蛋白,并且应用间接法双重免疫荧光标记对肠神经系统整体、肠神经系统中的肌间神经丛黏膜下神经丛中的CASR分布及数量等进行测定,荧光标记物采用FITC和Cy3。结果无论是肠神经系统中的肌间神经丛还是黏膜下神经丛,不同的肠神经细胞中含有不同的神经元标记物,即均存在CASR。结论豚鼠肠神经系统存在钙敏感受体的表达,因此,关于CASR在肠神经系统中的相关研究具有重要的临床意义,可能为将来研究CASR在肠道神经系统中的功能及肠炎症中的作用奠定基础。

食管肠神经系统调控的研究进展

食管受到各级神经系统及体液的调控,而完成蠕动与收缩功能.食管的活动有赖于肠神经系统(enteric nervous system,ENS)的调控协调作用.食管存在着兴奋性神经元和抑制性神经元两种,他们通过多种神经递质相互作用而决定食管的紧张度、蠕动与收缩.对食管神经机制的理解及研发新型药物治疗食管功能紊乱和胃食管反流有重要意义.本文综述近十年来食管脑神经系统的研究进展.

应激对大鼠结肠神经系统nNOS表达的影响

目的:探讨应激对大鼠结肠神经系统nNOS表达的影响. 方法:SD大鼠30只随机分为对照组,应激组和L-NAME 组,采用水浸-束缚应激(WRS)动物模型,用免疫组织化学ABC法检测nNOS在大鼠结肠黏膜下神经丛和肌间神经丛的表达,应用计算机图像分析系统对其表达进行定量分析．结果:与对照组比较,应激组黏膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元的灰度值明显减少(P=0．02或P =0．005),阳性神经元细胞数的平均密度增加(P=0．04 或P=0．01),表达增强,且在黏膜上皮细胞、固有层淋巴细胞也有nNOS表达．L-NAME组黏膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元的灰度值较应激组增加 (P=0．04),平均密度下降(P=0．04或P=0．03),表达减弱,而与对照组比较均无明显差异(P>0．05)．结论:应激可引起大鼠结肠神经系统nNOS表达增强, 提示一氧化氮(NO)在应激所致的结肠功能失调中可能起重要作用．