决明子脐贴对慢传输型便秘大鼠的治疗作用及谱效关系

目的研究决明子脐贴对慢传输型便秘(STC)大鼠的治疗作用及谱效关系。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、便秘贴阳性对照组和决明子脐贴低、中、高剂量组,6只/组。以复方地芬诺酯混悬液连续灌胃14d建立STC大鼠模型。造模成功后,将决明子脐贴按低、中、高剂量(41.75、125.25、375.75 mg/kg)固定于大鼠腹部神阙穴处,连续给药14 d,以便秘贴(13.33mg/kg)为阳性对照组,空白对照组与模型组给予等体积的纯水灌胃。观察大鼠的一般情况,计算大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察大鼠结肠病理改变,测定大鼠血清中NO、NOS水平以及结肠组织中总蛋白含量、NO、NOS、AChE水平。建立决明子脐贴的HPLC指纹图谱,采用均值法和灰色关联度分析法研究决明子脐贴共有峰与对STC大鼠治疗作用的谱效关系。结果决明子脐贴能提高大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察未发现结肠组织有病理学改变。与空白对照组比较,模型组大鼠血清与结肠中的NO、NOS水平上升(P<0.05,P<0.01),AChE水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清与结肠中NO、NOS水平下降(P<0.05,P<0.01),AChE水平上升(P<0.05,P<0.01)。6批决明子脐贴共确认28个共有峰,根据谱效关系得到的关联度与关联序结果显示,决明子脐贴中各成分对STC大鼠的治疗作用贡献度不同,其中橙黄决明素的贡献最大。结论决明子脐贴通过不同给药剂量的多种活性成分协同发挥对STC大鼠的治疗作用,其中橙黄决明素、大黄酸、黄决明素、决明素、美决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚是决明子脐贴治疗STC的主要药效成分群。

不同年龄大鼠消化道Cajal细胞c-kit受体表达的变化及意义

目的通过检测不同年龄组SD大鼠的肠道推进率及胃肠肌间Cajal间质细胞(ICC)的c-kit受体表达,探讨生理性衰老过程中大鼠胃肠运动、感觉和分泌等生理功能变化的规律与机制。方法 90只健康成年SD大鼠按不同年龄分为3、9、18、24及30月龄5组,每组各16只。以印度墨汁为标记物,检测并计算每组8只大鼠的肠道推进率。采用免疫组化SABC法染色,检测每组各8只大鼠胃体、空肠、回肠、结肠和乙状结肠与直肠交界的肌间ICC的c-kit受体表达,比较这些指标在不同年龄组的变化规律。结果①大鼠肠道推进率从3月龄的(67.2±13.5)%逐渐减少到30月龄的(52.1±9.8)%(P<0.01);②与3月龄组、9月龄组和18月龄组大鼠相比,老年大鼠(24月龄和30月龄)肌间ICC c-kit受体表达显著下调,其中以乙状结肠与直肠交界处变化最为显著(P<0.05)。结论在大鼠生理性衰老过程中,胃肠运动功能及肌间ICC的功能均随之显著下调,并且随年龄的增加这种变化更为明显。在生理性衰老过程中,这些变化可能参与了老年人胃肠功能紊乱性疾病的发病。

结肠慢传输运动小鼠模型建立的初步探讨

目的:建立结肠慢传输运动实验动物模型,为探讨慢传输型便秘发病学提供基础。方法:小鼠皮下注射吗啡建立结肠慢传输运动实验模型,比较各组小鼠日平均粪便重量、粪便性状及活性炭悬液推进试验。结果:①日平均粪便重量:a吗啡组比对照组减少(P<0.05);b停吗啡组仍较对照组减少(P<0.01),纳洛酮阻断后各组与对照组无差异,但大剂量吗啡组恢复较慢;②粪便性状:吗啡组较对照组明显干硬;停吗啡组无改善,纳洛酮阻断后粪便性状改善;③肠道推进率:a吗啡组比对照组减少(P<0.01);b停用吗啡组仍较对照组减低(P<0.01),纳洛酮阻断后各组较对照组无差异,但大剂量吗啡组恢复不理想。结论:吗啡诱导的小鼠结肠慢传输运动模型日平均粪便重量减少、粪便性状变干硬、肠道推进率明显减慢。停药后未使肠道运动逆转;而纳洛酮阻断后可以使肠道运动功能基本恢复。该模型基本符合慢传输型便秘临床特征。

脾虚证慢传输型便秘小鼠模型构建方法的比较研究

目的比较不同脾虚证慢传输型便秘(STC)小鼠模型的建立方法 ,优化其模型及评价方法。方法分别采用番泻叶+限水+控制饮食致STC小鼠模型(下称模型Ⅰ组)、游泳结合饥饱失常所致STC小鼠模型(下称模型Ⅱ组)及盐酸洛哌丁胺混悬液所致STC小鼠模型(下称模型Ⅲ组),比较各组小鼠一般行为学特征、首粒黑便传出时间、6 h排便数量及质量、肠道推进率、血清D-木糖含量及结肠黏膜组织病理学特征。结果与正常组相比,3种模型小鼠的粪便干结、质硬、数少、颗粒细小,首粒黑便传出时间显著延长(P<0.01),模型Ⅰ、Ⅲ组6 h排便数量和质量减少(P<0.01),模型Ⅰ、Ⅱ组血清D-木糖含量显著降低(P<0.01);但3种模型小鼠肠道推进率变化无统计学差异(P>0.05),其结肠黏膜正常或呈轻度炎症改变。结论模型Ⅰ组的一般行为学、首粒黑便传出时间、6 h排便数量和质量、血清D-木糖含量、结肠黏膜组织病理学检测可以作为评价脾虚证STC小鼠模型成功的客观指标。

石榴皮止泻散水煎液对小鼠肠运动的影响研究

为评价石榴皮止泻散水煎液对小鼠肠运动的影响,用0.50 g/kg、1.00 g/kg和2.00 g/kg剂量的石榴皮止泻散水煎液分别灌胃正常小鼠和番泻叶致泻小鼠,阴性对照组小鼠灌胃同体积生理盐水,观察并比较石榴皮止泻散对正常小鼠和番泻叶致泻小鼠小肠推进运动的影响。结果显示,石榴皮止泻散水煎液对正常小鼠的肠道炭末推进率无显著影响;与阴性对照组比较,石榴皮止泻散水煎液(1.00 g/kg和2.00 g/kg)可极显著降低(P<0.01)番泻叶致泻小鼠肠道炭末推进率。结果表明,石榴皮止泻散水煎液可以抑制泄泻小鼠的肠道运动而降低肠道炭末推进率。

肠制大黄对便秘模型小鼠排便功能及结肠组织病理变化的影响

目的观察采用猪大肠炮制大黄(简称肠制大黄)对便秘模型小鼠排便功能的影响及可能作用机制。方法将50只昆明小鼠随机分成空白组10只和造模组40只,造模组小鼠连续4天给予洛哌丁胺混悬液8 mg/(kg·d)灌胃建立便秘小鼠模型。造模成功的24只小鼠再随机分为模型组、肠制大黄组、乳果糖组、生大黄组各6只,随机选取6只空白组小鼠作为对照。第5天开始模型组、肠制大黄组、生大黄组、乳果糖组仍予洛哌丁胺混悬液8 mg/(kg·d)灌胃4天,每日灌胃2 h后肠制大黄组再给予肠制大黄混悬液0.6 g/(kg·d)灌胃,生大黄组予生大黄混悬液0.6 g/(kg·d)灌胃,乳果糖组予乳果糖混悬液6 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组小鼠予0.2 ml/10 g蒸馏水灌胃,各组均连续干预4天。观察各组小鼠一般情况,最后一次灌胃后检测体质量;记录6 h内粪便粒数、粪便湿重,计算粪便含水比例;采用小肠推进运动实验计算小肠肠道推进率;进行HE染色观察结肠组织病理变化。结果生大黄组小鼠体质量较其余各组均明显减轻(P<0.05或P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠粪便粒数、粪便湿重、肠道推进率均降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,肠制大黄组、乳果糖组、生大黄组粪便粒数、粪便湿重均升高,生大黄组粪便含水比例升高(P<0.05或P<0.01)。与肠制大黄组比较,生大黄组粪便粒数、粪便湿重降低,粪便含水比例升高(P<0.05或P<0.01),乳果糖组粪便含水比例亦升高(P<0.05)。肠制大黄组小鼠肠道推进率高于模型组、乳果糖组、生大黄组(P<0.05或P<0.01)。结肠组织病理结果显示,空白组小鼠的结肠隐窝及杯状细胞形态正常清晰,结肠肌层较厚;模型组小鼠的结肠隐窝出现损伤,杯状细胞不同程度减少,结肠肌层变薄;乳果糖组和生大黄组小鼠部分隐窝形态破坏,杯状细胞均有不同程度的损伤;而肠制大黄组的小鼠结肠组织结构仍相对清晰,结肠隐窝及杯状细胞相对正常,结肠肌层增厚。结论猪大肠炮制大黄后能够提高便秘模型小鼠的排便功能,减轻生大黄峻下的作用,其机制可能与保护结肠组织病理损伤有关。

运脾柔肝方对便秘型肠易激综合征大鼠Cajal间质细胞的影响

目的探讨运脾柔肝方对便秘型肠易激综合征(IBS-C)大鼠肠道推进率及Cajal间质细胞(ICC)的影响。方法Wistar大鼠被随机均分为正常对照组,IBS-C模型组,低、中、高剂量运脾柔肝方组和莫沙必利组。通过冰水灌胃建立大鼠IBS-C模型,运脾柔肝方组和莫沙必利组分别给予低、中、高浓度的运脾柔肝方(12.2g·kg-1,24.4g·kg-1,48.8g·kg-1)灌胃,正常对照组和IBS-C模型组给予等容积的蒸馏水灌胃,用墨水推进实验测定肠道推进率,用免疫组化法测定结肠组织c-kit蛋白含量和ICC的形态。结果与正常对照组比较,IBS-C模型组大鼠的大鼠粪便粒数和含水量明显减少,肠道推进率明显降低,c-kit表达含量降低(P<0.05),ICC形态结构发生改变。而运脾柔肝方组和莫沙必利组大鼠粪便粒数和含水量、肠道推进率、c-kit表达含量均高于IBS-C模型组((P<0.05),ICC形态结构也趋于正常。结论运脾柔肝方通过改善IBS-C大鼠ICC形态和数量来改善其排便和肠道推进率。

朴实方对功能性便秘小鼠排便、结肠动力及结肠组织学特征的影响

目的 探讨朴实方对功能性便秘小鼠模型排便及结肠动力的影响。方法 将50只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常组,模型组,朴实方高、低剂量组,阳性对照组,每组各10只。除正常组外,其余4组小鼠均以复方地芬诺酯混悬液10mg/(kg·d)连续灌胃2周建立小鼠功能性便秘模型。造模成功后,朴实方高、低剂量组分别按照18.2、9.1 g/(kg·d)的中药剂量进行灌胃,阳性对照组以普卢卡必利混悬液(每天0.3 mg/kg)灌胃,正常组、模型组则以等体积生理盐水灌胃,疗程2周。观察、记录各组小鼠排便次数、大便形态变化、肠道碳推进率等,采用免疫组化法观察、测量各组小鼠结肠黏液细胞数量及肌层厚度等指标变化。结果 与正常组比较,模型组小鼠的粪便粒数和含水率明显减少(P<0.01),肠道推进率降低(P<0.01),结肠黏液细胞数量显著减少(P<0.01),结肠肌层厚度降低(P<0.01);与模型组比较,中药两组及阳性对照组小鼠粪便粒数和含水率、肠道推进率均升高(P<0.01),结肠组织学特征也趋于正常;中药两组组间比较,小鼠的粪便粒数、含水率及肠道推进率差异无统计学意义(P>0.05);与阳性对照组比较,中药两组小鼠各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 朴实方通过改善结肠结构、促进结肠运动达到改善排便的作用。