基于肠道菌群结构特征及5-HT探究枳术汤改善功能性便秘大鼠肠道传输功能的作用机制

目的 探讨枳术汤调节肠道菌群及5-羟色胺(HT)对功能性便秘大鼠肠道传输功能的影响。方法 取12只大鼠分为模型组、莫沙比利组和枳术汤组,每组4只,建立功能性便秘模型,另取4只为对照组。建模成功后,莫沙比利组和枳术汤组分别灌服莫沙比利剂和枳术汤,模型组和对照组灌服等体积生理盐水。观察大鼠排便情况,计算胃肠排空时间及粪便含水率。采用生物电记录仪检测大鼠结肠肌电振幅和频率。计算肠道各类菌门相对丰度,分析肠道菌群结构特征。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清5-HT含量,Western印迹法检测结肠组织5-HT3R、5-HT4R蛋白表达。结果 与对照组比较,建模各组胃肠排空时间明显延长,粪便含水率明显降低,结肠肌电振幅明显增高,频率明显降低,血清5-HT含量明显升高,结肠组织5-HT3R、5-HT4R蛋白相对表达量明显降低。与模型组比较,莫沙必利组和枳术汤组胃肠排空时间明显缩短,粪便含水率明显增高,结肠肌电振幅明显降低,频率明显升高,血清5-HT含量明显降低,结肠组织5-HT3R、5-HT4R蛋白相对表达量明显升高(均P<0.05)。与模型组比较,对照组、莫沙必利组和枳术汤组变形菌门相对丰度明显降低(P<0.05)。结论 枳术汤促进肠道菌群平衡,抑制5-HT表达,改善大鼠功能性便秘症状。

嗜酸乳杆菌对3种弧菌的拮抗效果及对凡纳滨对虾肠道菌群结构的影响

使用益生菌是预防和控制水产养殖细菌感染的非抗生素方法之一。嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)可在机体内分泌抗菌物质,具有抑制有害菌生长、调节肠道微生态平衡和增强抗毒抗病能力等功能。研究了不同氧环境和不同培养基条件下嗜酸乳杆菌、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、溶珊瑚弧菌(V.coral-liilyticus)的生长情况,并通过牛津杯法和液体培养法结合PCR荧光定量技术、高通量测序技术,系统评价了嗜酸乳杆菌对上述弧菌的拮抗效果及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道菌群的组成和变化的影响。结果显示,在厌氧条件下,哈维氏弧菌的菌量显著高于在好氧环境培养后的菌量(P<0.05)。不同培养基配比对4种细菌的生长均具有显著性影响(P<0.05)。嗜酸乳杆菌对3种弧菌的生长均有良好的抑制效果。在对虾肠道菌群背景下,嗜酸乳杆菌对副溶血弧菌的生长有显著抑制作用(P<0.05)。处理组的弧菌属比例较对照组显著减少,高菌量组的有益菌属均显著增加。研究表明,嗜酸乳杆菌对上述3种弧菌的生长有良好的抑制效果,在对虾肠道菌群背景下对副溶血弧菌的生长也有良好的抑制效果,且能够优化菌群结构。

不同产蛋水平五龙鹅肠道形态、肠道菌群结构及养分利用率比较分析

本试验通过研究不同产蛋水平五龙鹅在肠道形态、肠道菌群结构及养分利用率的差异,旨在为五龙鹅高产性状的筛选及探究其调控机制提供理论依据。试验选择300只体况相近的34周龄五龙鹅种鹅饲喂相同饲粮,采用单笼饲养连续记录产蛋高峰期70 d产蛋量,根据产蛋水平不同选取高、中、低产蛋量五龙鹅共150只,每组各50只。结果表明:1)在肠道形态方面,高产组肠道重量、空肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度、回肠绒毛高度/隐窝深度显著高于低产组(P<0.05),十二指肠隐窝深度显著低于低产组(P<0.05)。2)在肠道菌群结构方面,高产组肠道中脱硫弧菌属相对丰度较低产组富集,低产组盲肠中未分类丹毒丝菌科、未分类毛螺菌科、艾诺玛菌属和史雷克氏菌属相对丰度较高产组富集。3)在养分利用率方面,高产组钙利用率显著高于低产组(P<0.05)。由此可见,不同产蛋水平五龙鹅在肠道发育、肠道菌群结构及养分利用率上存在明显差异,上述研究结果为鹅高产性状调控机制探究及高产性状精准选育提供了理论依据。

裸藻β-1,3-葡聚糖对断奶仔猪生长性能、血清炎症细胞因子含量及肠道菌群结构的影响

本试验旨在研究裸藻β-1,3-葡聚糖对仔猪生长性能、血清炎症细胞因子含量及肠道菌群结构的影响,为裸藻β-1,3-葡聚糖的开发和应用提供依据。选取150头40日龄左右、体重[(13.06±0.26)kg]相近的“杜洛克×长白×大白猪”三元杂断奶仔猪,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复6头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加50、100、150 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖及100 mg/kg的酵母β-1,3-葡聚糖。预试期3 d,正试期28 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加100 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖显著提高了断奶仔猪平均日采食量和平均日增重(P<0.05),显著降低了料重比(P<0.05)。2)与对照组相比,饲粮中添加50、100、150 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖及100 mg/kg的酵母β-1,3-葡聚糖显著提高了血清白细胞介素-1、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α含量(P<0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加50 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖显著提高了软壁菌门(Tenericutes)相对丰度(P<0.05),饲粮中添加50和100 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖显著提高了乳杆菌科(Lactoba⁃cillaceae)相对丰度(P<0.05),饲粮中添加50和150 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖显著降低了瘤胃球菌属(Ruminococcus)相对丰度(P<0.05)。4)与对照组相比,饲粮中添加100 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖显著提高了Chao1指数(P<0.05),饲粮中添加150 mg/kg的裸藻β-1,3-葡聚糖显著降低了Simpson指数(P<0.05)。Beta多样性分析发现,饲粮中添加100 mg/kg裸藻β-1,3-葡聚糖组与对照组物种相似性最高。由此可见,饲粮中添加适量裸藻β-1,3-葡聚糖能提高断奶仔猪生长性能,降低炎症反应,改善肠道菌群多样性和结构。本试验条件下,饲粮中添加100 mg/kg裸藻β-1,3-葡聚糖效果最好。

黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能、血清生化指标及肠道菌群结构的影响

【目的】探究饲料中添加不同水平的黄芪多糖对黄喉拟水龟(Mauremys mutica)生长性能、血清生化指标和肠道菌群结构的影响,以期为黄芪多糖在黄喉拟水龟饲料中的应用及黄喉拟水龟的健康养殖提供理论依据。【方法】将初始平均体重为128.36±1.80g的黄喉拟水龟随机分为5组,分别投喂黄芪多糖含量为0(M0,对照组)、0.25%(M25)、0.50%(M50)、0.75%(M75)和1.00%(M100)的等氮等脂饲料,每组设3个重复,每重复10只龟,投喂60 d后测定其生长性能指标和血清生化指标,以高通量测序分析肠道菌群结构。【结果】生长性能分析结果显示,M25、M50和M75组的黄喉拟水龟的增重率和特定生长率显著高于M0组(P<0.05,下同),饲料系数显著低于M0组,其中M50组的增重率和特定生长率最高、饲料系数最低。M25、M50、M75和M100组黄喉拟水龟背甲长、背甲宽和背甲高的日增长与M0组比较均无显著差异(P>0.05,下同)。血清生化指标检测结果显示,M25、M50和M75组的碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性显著高于M0组,M50、M75和M100组的过氧化氢酶活性显著高于M0组;M25、M50和M75组的丙二醛含量显著降低。肠道菌群分析结果显示,M25组群落丰富度指数(Sobs指数和ACE指数)显著高于M0组,群落多样性指数(Shannon指数和Simpson指数)与M0组无显著差异。M50、M75和M100组的Sobs指数、Chao1指数、ACE指数、Shannon指数和Simpson指数与M0组差异均不显著。在门分类水平上,各组丰度占比排名前3的菌群均为厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门,0.25%~1.00%的黄芪多糖对门分类水平的肠道菌群组成无显著影响。在属分类水平上,M50组的瘤胃球菌属1和M75组的汉氏盐单胞菌属相对丰度显著提高;添加0.25%和1.00%的黄芪多糖对属分类水平的肠道菌群组成均无显著影响。【结论】饲料中添加适量的黄芪多糖能有效地促进黄喉拟水龟生长、提高抗氧化能力并改善肠道菌群结构。综合分析,建议饲料中黄芪多糖添加量为0.50%。

高糖饲料对黄颡鱼生长及肠道菌群结构的影响

研究以淀粉为主要糖源制备高糖饲料对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)生长和肠道菌群结构的影响。选用初始体重(4.13±0.11)g的黄颡鱼180尾,随机分为2组,每组设3个重复,每个重复30尾,对照组(CG)投喂糖水平23.25%的基础饲料;高糖组(HG)投喂糖水平31.11%的高糖饲料,两组实验料等氮等能(粗蛋白36.5%,能量16.1 kJ/g)。56 d的养殖实验表明:HG特定生长率和增重率显著低于CG(P<0.05);HG饲料系数高于CG,但与CG相比差异不显著(P>0.05)。HG肠道菌群系统发育多样性指数显著高于CG(P<0.05);OUT数量和Chao1指数低于CG,但差异不显著(P>0.05);Shannon和Simpson指数未体现显著差异(P>0.05)。变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为黄颡鱼的肠道优势菌门,HG肠道厚壁菌门相对丰度低于CG,拟杆菌门相对丰度高于CG,螺旋体门(Spirochaetes)相对丰度显著高于CG(P<0.05);HG梭菌属(Clostridium)和分节丝状菌属(Candidatus Arthromitus)菌群相对丰度显著低于CG(P<0.05),HG别样棒菌属(Allo-baculum)、普雷沃菌属(Prevotella)、棒状杆菌属(Corynebacterium)和密螺旋体属(Treponema)菌群相对丰度高于CG(P<0.05)。因此,长期摄入高糖饲料抑制了黄颡鱼生长,降低了饲料利用,同时改变了肠道菌群组成和结构,增加易感染疾病风险。

基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响

目的:基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响。方法:从36只SD大鼠中随机选取6只作为对照组,其余大鼠给予高脂饲料联合1%链脲佐菌素(30 mg·kg^(-1))建立糖尿病模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、黄连解毒汤高剂量组(6.25 g·kg^(-1))、黄连解毒汤中剂量组(3.13 g·kg^(-1))、黄连解毒汤低剂量组(1.56 g·kg^(-1))及二甲双胍组(100 mg·kg^(-1)),每组各6只。各药物组按照相应剂量灌胃给药,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续21 d。第7天、第14天及第21天灌胃后,收集大鼠粪便,提取肠道菌群DNA。利用ERIC-PCR技术和Sanger测序检测大鼠肠道菌群结构与DNA同源性。结果:灌胃第7天,对照组条带较多集中在100~750 bp;与对照组比较,模型组条带在1 000~2 000 bp的亮度增强,在300~750 bp的亮度减弱;与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在750 bp的亮度增强。灌胃第14天,与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在1 000 bp以上的亮度减弱。灌胃第21天,与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在300~750 bp的亮度增强。DNA测序结果显示,灌胃第21天,对照组500 bp条带的优势菌群为拟杆菌属、杜氏邓氏菌和金黄杆菌属;模型组400 bp和1 000 bp条带的优势菌群为梭菌目细菌、普拉梭菌、铜绿假单胞菌和杆菌属。灌胃第7天,黄连解毒汤高剂量组750 bp条带的优势菌群为布劳特菌和拟杆菌属;黄连解毒汤中剂量组200 bp条带的优势菌群为脆弱拟杆菌和拟杆菌属;黄连解毒汤低剂量组1 200 bp条带的优势菌群为双发酵副梭菌;二甲双胍组1 000 bp条带的优势菌群为大肠埃希杆菌。灌胃第14天,黄连解毒汤高剂量组700 bp条带的优势菌群为拟杆菌目细菌和假单胞菌;黄连解毒汤中剂量组550 bp条带的优势菌群为假锁杆菌属和链霉菌属;黄连解毒汤低剂量组350 bp条带的优势菌群为Muribaculum gordoncarteri、肠杆菌、杜氏邓氏菌和杆菌科细菌;二甲双胍组290 bp条带的优势菌群为弗格森埃希菌和大肠埃希杆菌。灌胃第21天,黄连解毒汤高剂量组1 000 bp条带的优势菌群为普雷沃氏菌属;黄连解毒汤中剂量组600 bp条带的优势菌群为Muribaculum gordoncarteri、杜氏邓氏菌和拟杆菌属;二甲双胍组400 bp条带的优势菌属为Muribaculum gordoncarteri、肠杆菌、普雷沃氏菌属、杆菌科细菌和杆菌属。结论:黄连解毒汤对T2DM大鼠的肠道菌群结构具有调节作用,菌群调节效果受药物剂量和治疗时间的影响。

基于中医痰湿理论自拟健脾降浊方对老年MS患者代谢水平、血管内皮功能及肠道菌群结构的影响

目的:探究老年代谢综合征(MS)应用基于中医痰湿理论的自拟健脾降浊方对肠道菌群结构、代谢水平及血管内皮功能的影响。方法:选取我科2020年3月—2022年2月127例老年MS患者作为研究对象,对照组63例给予西医常规治疗,观察组64例联合基于中医痰湿理论的自拟健脾降浊方治疗,对比两组代谢指标、血管内皮功能、肠道菌群结构。结果:治疗后,观察组PBG、TG、TC、LDL-C、FBG水平均低于对照组(P<0.05),HDL-C水平高于对照组(P<0.05);观察组ET-1水平低于对照组(P<0.05),NO、SOD、FMD水平高于对照组(P<0.05);观察组乳酸杆菌、双歧杆菌水平高于对照组(P<0.05),肠杆菌属、硫酸盐还原酶水平低于对照组(P<0.05)。结论:联合自拟健脾降浊方对MS进行治疗,可有效改善肠道菌群结构及血管内皮功能,调节代谢指标。

结直肠息肉患者饮食结构和肠道菌群结构分析

目的调查结直肠息肉(CP)患者饮食结构和肠道菌群结构。方法选取276例CP患者为观察组,另选取276例同期结肠镜检查阴性的健康体检者为对照组,再根据脂肪供能比例分为高脂组(高脂观察组162例、高脂对照组102例)和低脂组(低脂观察组114例、低脂对照组174例)。采用人口特征学调查问卷和食物频率问卷法评估人口学特征及膳食模式;分析各组属水平上肠道菌群结构;Logistic回归分析CP发病的危险因素。结果观察组与对照组碳水化合物、脂肪和蛋白质平均每日摄入量差异有显著性(P<0.05);高脂观察组、低脂观察组、高脂对照组、低脂对照组的巨单胞菌属、洋葱伯克霍尔德菌属和粪杆菌属的检出情况差异有显著性(P<0.05);体质指数、进食肉类和进食蔬菜类次数、高脂饮食为影响CP发病的相关因素。结论CP患者中高脂饮食占比升高,肠道菌群构成以拟杆菌属、粪杆菌属、普雷沃氏菌属-9和洋葱伯克霍尔德菌属为主。

类风湿关节炎肠道菌群结构特征及其临床意义分析

目的分析类风湿关节炎(RA)肠道菌群结构特征及其临床意义。方法选取2020年8月至2021年10月江西中医药高等专科学校附属医院收治的25例类风湿关节炎患者作为观察组,另选取同期25名健康体检者作为对照组。两者均进行类风湿因子(RF)水平、肠道菌群、炎症指标检测,比较两组RF水平、炎症指标[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)],分析肠道微生物群与RA炎症指标(CRP、IL-6、TNF-α)的相关性。结果观察组RF水平高于对照组,双歧杆菌、类杆菌数量均少于对照组,CRP、IL-6、TNF-α水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组乳杆菌、梭菌、肠杆菌、肠球菌数量比较差异无统计学意义。Spearman相关性分析结果显示,类杆菌、双歧杆菌与CRP、IL-6、TNF-α均呈负相关(r<0,P<0.05)。结论RA与类杆菌、双歧杆菌呈负相关,为预防及治疗RA提供新思路。

基于16S rRNA探究应激条件下娟姗牛肠道菌群结构的调控机制

为了探究娟姗牛应激条件下肠道菌群结构的调控机制,本研究选择非应激期(JR1)和应激期(JR2)各6头牛作为实验组进行测定,2组间肠道微生物多样性采用微生物16S r RNA基因测序技术对差异微生物功能进行初步预测。结果显示:Alpha多样性对2组样品6种指数检测结果均明显降低(P>0.05),说明夏季高温高湿的环境对肠道微生物的丰富度无明显影响,但可降低其物种多样性。厚壁菌门和拟杆菌门为门水平上的2个优势菌门,属水平上有瘤胃球菌属UCG-005、理研菌科-RC9菌属和瘤胃球菌属UCG-010为3个优势菌属。组间差异性分析得出,在属水平上JR2组粪便微生物中的Christensenellaceae R-7 group、Lachnospiraceae AC2044 group、Ruminococcus 2、普雷沃氏菌属Prevotellaceae UCG-004的丰度高于JR1组(P<0.05)。代谢通路富集预测分析显示,主要参与氨基酸代谢、碳水化合物代谢、消化系统、内分泌系统、环境改变、能量代谢、代谢疾病、免疫系统等。采用STAMP差异分析比较2组样品之间功能的丰度,JR2组的消化系统丰度比例显著高于JR1组(P<0.05),说明应激对娟姗牛的消化系统影响较大。本研究结果得出的差异微生物可能作为娟姗牛应激条件下影响代谢调控的潜在微生物标记物,为广西等亚热带地区奶牛及肉牛肠道微生物菌群结构机制的阐明提供了数据基础,为下一步开发抗应激饲料、改善家畜肠道菌群结构、提高生产性能提供参考。

T细胞亚群中Ki-67的表达及与自闭症儿童肠道菌群结构、核心症状的关联及价值研究

目的分析自闭症儿童T细胞亚群中Ki-67的表达及与肠道菌群结构、核心症状的关联及价值研究。方法选取惠州市中心人民医院2020年4月-2021年4月收治的50例自闭症儿童为研究对象,作为研究组,另外选取来院体检的50例典型发育儿童作为对照组,检测T细胞表面受体细胞、CXCR4、CXCR7细胞、CD45R、HLA-DR、GATA3、Helios、FOXP3中Ki-67表达水平、肠道菌群α多样性、肠道菌群门水平、ABC、SRS、CARS评分。结果与对照组相比,研究组患儿CD3+、CD4+、CD8+、CXCR4、CXCR7、CD45R、HLA-DR、GATA3细胞产生的Ki-67表达水平较高,Helios、FOXP3细胞产生的Ki-67较低,具有统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,研究组患儿Chao1指数、Ace指数、Shannon指数、拟杆菌门、放线菌门水平降低,Simpson指数、厚壁菌门、变形菌门水平升高,具有统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,研究组患儿ABC、SRS、CARS评分升高,具有统计学差异(P<0.05)。与Ki-67非异常组相比,调整其混杂因素,发现Chao1指数、Ace指数、Shannon指数、Simpson指数、拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门、放线菌门为造成患儿Ki-67异常的危险因素,Ki-67异常组患儿Chao1指数、Ace指数、Shannon指数、拟杆菌门、放线菌门低于Ki-67非异常组,Simpson指数、厚壁菌门、变形菌门高于Ki-67非异常组,具有统计学差异(P<0.05)。与Ki-67非异常组相比,调整其混杂因素,发现ABC、SRS、CARS为影响患儿Ki-67异常的危险因素,Ki-67异常组患儿ABC、SRS、CARS评分高于Ki-67非异常组,具有统计学差异(P<0.05)。结论自闭症儿童体内Ki-67表达水平较高,且与自闭症儿童肠道菌群结构、核心症状具有一定相关性,检测Ki-67表达水平,可对患儿进行早期干预。

有氧运动联合抗阻运动对溃疡性结肠炎患者的应用效果及对肠道菌群结构的影响

目的探讨有氧运动联合抗阻运动对溃疡性结肠炎患者的应用效果及对肠道菌群结构的影响。方法选取2020年5月—2022年11月江苏省中医院接受治疗的98例溃疡性结肠炎患者作为研究对象,根据抛币法将患者随机分为对照组和观察组,每组49例。对照组患者接受常规对症治疗,观察组患者在对照组基础上接受有氧运动联合抗阻运动训练,比较两组肠道菌群结构改变情况、不良反应发生情况、复发情况、生活质量改变情况、满意度。结果两组干预前肠道菌群结构比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组干预后乳酸杆菌、双歧杆菌数量均升高,且观察组高于对照组,两组干预后肠球菌、大肠杆菌数量均降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。两组口干、腹泻、胃痛、食欲不振等不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组复发率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组生活质量评分升高,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者满意度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论有氧运动联合抗阻运动可改善溃疡性结肠炎患者肠道菌群结构,降低复发率,提升患者生活质量和满意率,不会增加不良反应发生率,值得临床应用。

肠易激综合征血清炎症因子表达与肠道菌群结构变化的相关性研究

分析肠易激综合征血清炎症因子表达与肠道菌群结构变化的相关性。方法 对肠易激综合征患者80例分析,作为观察组;选取同一时期健康人49例,作为对照组。采血测定血清白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采集粪便标本检测各肠道菌属的表达。对比血清炎症因子和肠道菌群的分布。使用Pearson相关分析IBS中血清炎症因子与肠道菌群的相关性。结果 观察组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平和肠杆菌、场球菌分布高于对照组,双歧杆菌、乳酸杆菌分布低于对照组(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平和肠杆菌、场球菌分布逐渐增多,双歧杆菌、乳酸杆菌分布逐渐下降,两两比较有差异(P<0.05)。IBS患者中血清IL-6、IL-8、TNF-α水平与双歧杆菌、乳酸杆菌呈负相关(P<0.05),与肠杆菌、肠球菌呈正相关(P<0.05)。结论 肠易激综合征患者血清炎症因子和肠道菌群结构发生变化,二者存在密切相关。临床上可根据肠道菌群和炎症表达,明确病情,制定针对性的治疗方案。

池塘和工厂化养殖牙鲆肠道菌群结构的比较分析

为研究池塘和工厂化养殖条件下牙鲆肠道菌群结构差异及其与饵料、水环境及底质等的关系,采用Mi Seq高通量测序技术和生物信息学分析手段,构建牙鲆肠道、养殖水体、饵料和池塘底泥等7个样品的16S rRNA基因测序文库,分析不同样品中的菌群组成和生物多样性。结果表明:池塘养殖牙鲆肠道(B1)中以厚壁菌门(30.49%)、变形菌门(19.16%)和梭杆菌门(11.11%)为主,其中芽孢杆菌属(27.66%)占绝对优势,弧菌属(0.16%)丰度最小;工厂化养殖牙鲆肠道(B5)中以变形菌门(44.31%)、厚壁菌门(11.57%)和放线菌门(4.79%)为主,其中不动杆菌属(10.37%)丰度最大,弧菌属(4.05%)相对B1丰度较高。牙鲆肠道优势菌群主要与营养代谢调节相关,同时有益微生物和有害微生物也是肠道菌群的重要组成部分。差异性和系统进化分析表明两种养殖条件下牙鲆肠道菌群结构与饵料中菌群关系密切,此外受养殖水环境中菌群影响较大。研究结果为今后牙鲆养殖专用高效微生态制剂的研制和养殖环境微生态调控技术构建提供理论依据。

饲料中添加枯草芽孢杆菌对团头鲂幼鱼生长性能、肝脏抗氧化指标、肠道菌群结构和抗病力的影响

本试验旨在研究饲料中添加枯草芽孢杆菌对团头鲂幼鱼生长性能、肝脏抗氧化指标、肠道菌群结构和抗病力的影响。选取初始体重为（1.81±0.01）g的团头鲂幼鱼360尾,随机分为4组（每组3个重复,每个重复30尾）,分别饲喂添加0（T0组,作为对照组）、2×10^7（T1组）、2×10^8（T2组）、2×10^9CFU/g枯草芽孢杆菌（T3组）的等氮等脂饲料。试验期为8周。结果表明：1）与对照组相比,T1组和T2组团头鲂幼鱼的增重率、特定生长率显著升高（P〈0.05）,且T1组的饲料系数显著降低（P〈0.05）。2）与对照组相比,T1组团头鲂幼鱼的肝脏抗氧化酶（超氧化歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶）活性显著升高（P〈0.05）,同时该组肝脏丙二醛含量显著降低（P〈0.05）。3）各组全鱼水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量均无显著差异（P〉0.05）。4）变性梯度凝胶电泳（DGGE）图谱显示摄食不同添加量枯草芽孢杆菌饲料的团头鲂幼鱼的肠道菌群结构发生了改变。5）采用嗜水气单胞菌对鱼体进行攻毒,各组96 h后的累积死亡率未产生显著差异（P〉0.05）,但T1组和T2组的累积死亡率低于对照组和T3组。由此可见,饲料中添加2×10^7CFU/g的枯草芽孢杆菌能够提高团头鲂幼鱼的生长性能、抗氧化能力,并改变肠道菌群结构,但对其体成分和抗病力没有显著影响。

怡情止泻汤对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎肠道菌群结构的影响

目的探究怡情止泻汤对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者的肠道菌群结构的影响,旨在提升临床治疗效果。方法研究共计纳入60例肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者,入组患者均由医院2017年5月—2018年12月收治,采取随机数字表法将所有患者分为观察组和对照组,对照组患者(30例)口服美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组患者(30例)则采取怡情止泻汤治疗,比较两组患者临床治疗效果、治疗前后患者腹泻、脓血便、腹痛症状积分及结肠镜下黏膜病变积分、患者血清炎性因子水平变化情况、肠道菌群变化情况、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)及抑郁量表(HAMD)评分、生活质量评分(IBDQ)、不良反应及患者治疗满意率。结果观察组患者治疗有效率93.33%(28/30)高于对照组患者73.33%(22/30)(P<0.05);治疗前,两组患者腹泻、脓血便、腹痛症状积分及结肠镜下黏膜病变积分、HAMA及HAMD评分、IBDQ评分相当(P>0.05),治疗后观察组及对照组患者腹泻、脓血便、腹痛症状积分及结肠镜下黏膜病变积分、HAMA及HAMD评分、IBDQ评分均改善,观察组患者腹泻、脓血便、腹痛症状积分及结肠镜下黏膜病变积分、HAMA及HAMD评分、IBDQ评分优于对照组(P<0.05);治疗前,两组患者血清炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平相当,治疗后各组患者IL-6、IL-8、TNF-α水平下降,观察组患者指标水平优于对照组(P<0.05);治疗前,两组患者肠道菌群数量相当(P>0.05),治疗后两组患者双歧杆菌及乳酸杆菌数量升高,而粪肠球菌、大肠杆菌数量下降,较对照组患者治疗后,观察组患者双歧杆菌及乳酸杆菌、粪肠球菌、大肠杆菌数量均优于对照组(P<0.05);观察组患者不良反应发生率(3.33%)低于对照组(23.33%)(P<0.05);观察组患者满意率(96.67%)高于对照组(70.00%)(P<0.05)。结论怡情止泻汤可显著提升肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者临床治疗效果,炎性因子水平降低,肠道菌群数量改善,不良反应率低,安全性高,且患者症状好转,心理状态佳,生活质量提升,患者满意率高,值得推广及应用。

鸭疫里默氏菌感染对鸭肠道菌群结构的影响

试验旨在分析鸭疫里默氏菌(RA)感染不同时期鸭肠道菌群结构变化规律,探讨鸭疫里默氏菌对鸭肠道微生物的影响及引起鸭致病的可能机制。采用细菌16S V4-V5区扩增通用引物,扩增鸭疫里默氏菌未感染组(鸭疫里默氏菌感染0 d组),鸭疫里默氏菌感染后1、2、3、5、9和14 d的鸭直肠内容物样本DNA,将扩增得到的产物进行DNA建库后基于Ion S5TMXL测序平台测序。测序得到的Raw Reads数据总量为4710688条序列,平均每个样本84119条序列。共注释到数据库的操作分类单元(OTUs)数目为4528。Alpha多样性分析结果表明,菌群多样性指数Shannon和Simpson在鸭疫里默氏菌感染组和未感染组间差异不显著(P>0.05),菌群丰富度指数Chao1、Ace、Observed-species和PD-whole-tree在鸭疫里默氏菌感染后0~5 d逐渐降低,从5~14 d又逐渐增加,尤其在鸭疫里默氏菌感染后3和5 d均显著低于未感染组(P<0.05)。Beta多样性分析表明,未感染组与6个时间点的感染组间菌群差异均显著(P<0.05),其中,未感染组与感染后3 d的物种差异最大,之后依次为感染后2、5、9、1和14 d。物种丰度聚类热图显示,在未感染组和不同时间感染组,物种丰度相对较高的微生物菌属均不同。在门水平,鸭疫里默氏菌感染组主要以厚壁菌门(Firmicutes)、unidentified-Bacteria、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)及变形菌门(Proteobacteria)为主;在属水平,Bacteroides在感染组和未感染组均为优势菌属,感染组中弯曲杆菌属(Campylobacter)和梭杆菌属(Fusobacterium)明显增加。本试验分析了鸭疫里默氏菌未感染组和感染不同时间组肠道菌群的差异,寻找到一些特征菌属,可为鸭疫里默氏菌的致病性研究提供理论依据。

温肾健脾法对结肠癌癌前病变大鼠肠道菌群结构的影响及作用机制研究

目的探讨温肾健脾法在结肠癌癌前病变大鼠中的作用机制及对肠道菌群结构的影响。方法购置Wistar大鼠75只,随机取Wistar大鼠15只设为对照组;剩余60只Wistar大鼠腹腔注射DMH制备大鼠结肠癌癌前病变(异常肠腺病灶,ACF)模型,建模成功后随机数字表法分为模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组15只。模型组和对照组予等体积生理盐水灌胃,高剂量组(3.10 g/kg灌胃)、中剂量组(1.55 g/kg灌胃)和低剂量组(0.775 g/kg灌胃)给予温肾健脾法干预,比较各组肠道菌群结构、HE染色及分泌型免疫球蛋白(sIgA)、血清D乳酸、白细胞介素-17(IL-17)水平。结果中剂量组造模第2、6、17周ACF水平均低于低剂量组和高剂量组(P<0.05);HE染色结果表明:低剂量组黏膜轻到中度慢性炎,局灶淋巴细胞聚集伴挤压,淋巴组织增生,局灶腺体轻度异型增生,个别黏膜腺癌形成。中剂量组黏膜轻度慢性炎,淋巴滤泡形成,未见异型增生及癌形成。高剂量组:黏膜轻-中度慢性炎,伴有轻到中度异型增生;中剂量组sIgA水平高于低剂量组与高剂量组(P<0.05);血清D乳酸、IL-17水平低于低剂量组与高剂量组(P<0.05)。结论中剂量温肾健脾法用于结肠癌癌前病变大鼠中能改善肠道菌群结构,可调节sIgA、血清D乳酸、IL-17水平,减轻肠黏膜结构损伤及异型增生。

加味黄芩汤对TNBS诱导的结肠炎大鼠肠道菌群结构及IL-6/STAT3信号通路的影响

目的:通过监测加味黄芩汤干预炎症性肠病大鼠模型肠道局部IL-6/STAT3信号通路的活性状态及大鼠肠道菌群改变情况,明确IL-6/STAT3信号通路与炎症性肠病肠道菌群平衡之间的关系。方法:将SPF级大鼠40只随机分成对照组、模型组、美沙拉嗪治疗组、加味黄芩汤治疗组、黄芩汤治疗组,每组8只。TNBS诱导结肠炎大鼠模型,分组进行药物干预。实验结束后取结肠组织做病理切片;放射免疫检测血清IL-6含量;酶联免疫分析法检测sIL-6Rα、gp130;RTPCR方法检测STAT3、IL-6mRNA含量,采用日本光冈知足法并通过细菌三级鉴定法将细菌鉴定到属的水平。结果:加味黄芩汤治疗组大鼠进食量及排便情况,肠黏膜炎性病变程度,与模型组、美沙拉嗪治疗组比较具有显著差异(P<0.05)。在血清IL-6、血清sIL-6Rα、gp130含量,STAT3、IL-6mRNA的表达水平等方面,加味黄芩汤治疗组与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。加味黄芩汤治疗组大鼠肠道菌群与对照组之间在属水平上存在统计学差异。结论:加味黄芩汤通过影响溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群失调状态,进而降低大鼠血清IL-6、sIL-6Rα、gp130含量,缓解sIL-6Rα与IL-6形成复合物所引起的炎症反应;进一步影响IL-6/STAT3信号通路下调大鼠肠组织STAT3、IL-6mRNA的表达水平,达到缓解肠道局部炎症的目的。