人参皂苷CK对人肺腺癌A549细胞株的增殖抑制作用及其机制

目的:探讨人参皂苷CK对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制。方法:不同浓度的人参皂苷CK作用于人肺腺癌A549细胞株,MTT比色法测定细胞增殖抑制率;倒置显微镜观察细胞形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡;ELISA法检测细胞内源性VEGF含量的变化。结果:人参皂苷CK对A549细胞增殖有抑制作用,其抑制作用呈浓度和时间依赖关系;倒置显微镜下可观察到细胞明显的形态学改变;流式细胞仪可检测到实验组细胞出现明显的凋亡峰,且细胞周期被阻滞在G0/G1期;实验组细胞培养液中的VEGF低于对照组(P<0.05),且随着人参皂苷CK浓度增加和作用时间的延长,VEGF的含量降低(P<0.05)。结论:人参皂苷CK可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖并诱导其凋亡,并能抑制其内源性分泌VEGF。

西妥昔单抗对肺腺癌A549细胞株辐射增敏作用的研究

目的探讨西妥昔单抗（Cetuximab，C225）对人肺腺癌A549细胞株的辐射增敏作用及其机制。方法体外培养人肺腺癌A549细胞株，经不同浓度的C225作用后，使用CCK-8法测定细胞增殖抑制率，计算mC225的半数抑制浓度（Ic50），并将Ic50的1／5作为后续实验的浓度。采用克隆形成方法观察C225对细胞辐射敏感性的影响，按多靶单击模型拟合细胞存活曲线，计算辐射增敏比（SER）。流式细胞仪检测细胞凋亡以及细胞周期情况。结果C225均抑制了细胞的增殖，并呈现明显的量-效关系，其IC50为18．24μg／mL。与单独照射组相比，加药照射组的sF2、D3D4均下降（P〈0．05），SERoo为1．40。C225联合x线照射明显增强了辐射诱导的细胞凋亡（P〈0．05）。C225使细胞阻滞于G0／G1期（P〈0．05），单独照射组G：／M期细胞比例增加（P〈0．05），C225＋照射组同时出现G0／G1、G2／M期细胞阻滞（P〈0．05）；与对照组相比，C225组、单独照射组以及C225＋照射组s期细胞比例均下降（P〈0．05）。结论C225对A549细胞株具有辐射增敏作用，其机制可能与C225抑制细胞的生长增殖和受照射后亚致死性损伤的修复，增加细胞凋亡以及诱导细胞G0／G1期阻滞有关。

白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法测定不同浓度白花蛇舌草乙醇提取物对A549细胞增殖的影响；Hoechst 33258检测白花蛇舌草乙醇提取物作用后细胞凋亡情况；流式细胞仪检测药物作用后的细胞周期和凋亡率；Western Blot检测药物作用后的Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果白花蛇舌草乙醇提取物抑制A549细胞增殖呈时-效和量-效关系；Hoechst33258检测白花蛇舌草乙醇提取物作用A549细胞后可见凋亡细胞；40 mg/ml白花蛇舌草乙醇提取物作用A549细胞12，24，36，48h，药物组G1-G0期细胞百分比分别为（42.82±3.95）%，（51.84±6.37）%，（54.76±8.85）%和（64.94±7.56）%，药物组细胞凋亡率分别为（5.72±0.98）%，（7.10±2.08）%，（19.89±4.25）%，（32.55±6.51）%，均高于对照组（P均（0.05），且G1-G0期细胞百分比和凋亡率随药物作用时间增加而增加；Western Blot显示，白花蛇舌草乙醇提取物作用A549细胞，Bax的表达随作用时间增加而增加，Bcl-2的表达随作用时间增加而减低。结论白花蛇舌草乙醇提取物随着药物浓度和作用时间的增加对肺腺癌A549细胞的体外抑制效应增加；其抑制作用可能通过将细胞周期阻滞于G1-G0期和通过上调Bax和下调Bcl-2的表达而诱导细胞凋亡来实现的。

榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株凋亡蛋白表达的影响。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株,四甲基偶氮唑蓝比色试验法(MTT法)测定不同浓度榄香烯乳在不同作用时间下对A549细胞株的生长抑制作用。IC软件计算10%的细胞抑制浓度(IC10)。免疫细胞化学染色观察榄香烯乳作用24h后A549细胞的Bcl-2、Bax、Survivin及VEGF蛋白的表达变化。结果:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性。榄香烯乳作用24h后IC10为43.49μg/ml,Bax蛋白表达增加,细胞质着色增强;Bcl-2蛋白表达下降,细胞质着色减弱;增殖蛋白Survivin和VEGF的表达下降,且具有药物浓度相关性。结论:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株有明显的抑制作用,榄香烯乳可上调凋亡相关蛋白表达、诱导凋亡。

昆明山海棠总生物碱对肺腺癌A549细胞株增殖抑制作用的实验研究

目的观察昆明山海棠总生物碱(alkaloidsfromtripterygiumhypoglaucumhutch,THHa)对人肺腺癌细胞系A549体外生长的影响。方法采用MTT比色法检测THHa对A549细胞生长的抑制作用,测定其吸光度D(490)值;用倒置和荧光显微镜观察药物作用后A549细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果随着THHa浓度的增加和作用时间的延长,A549细胞增殖受到抑制,抑制率逐渐升高,具有浓度和时间依赖性。流式细胞仪结果显示,随着处理浓度和作用时间的增加,细胞的凋亡率逐渐升高。结论THHa能明显抑制A549细胞增殖,并可诱导A549细胞凋亡。

榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株细胞周期及凋亡的影响

目的:探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株细胞周期及凋亡的作用。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株,四甲基偶氮唑蓝比色法测定不同浓度榄香烯乳在不同作用时间下对A549细胞株的生长抑制作用。用流式细胞术检测榄香烯乳作用24h后A549细胞株的周期及凋亡变化。结果:榄香烯乳作用后人肺腺癌A549细胞株增殖明显受抑制,呈时间和剂量依赖性。作用24h后G2/M期比例明显升高,S期细胞比例显著下降,凋亡率增加。结论:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株有明显的增殖抑制作用,可引起A549细胞G2/M期阻滞及诱导其凋亡。

肺腺癌A549细胞株细胞活力变化及GDNF表达

目的探讨GDNF在肺腺癌A549细胞株的表达及细胞活力变化.方法体外培养肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取第1代培养后1 d,5 d两个时间点分别计数细胞;MTT检测两时间点细胞活力变化;用免疫组化检测两时间点GDNF免疫阳性细胞数量变化.并进行统计学分析.结果培养5 d组肺腺癌A549细胞株的细胞数量与1 d组相比,明显增加(P<0.05);5 d组的细胞活力较1d组明显下降(P<0.05);GDNF的表达百分数比较显示;5 d组亦较1 d组明显下降(P<0.05).结论体外培养肺腺癌A549细胞株随细胞增殖过程,活力逐渐下降,同时GDNF表达明显下调,提示细胞增殖和细胞活力不一定完全一致,GDNF减少可能与活力减少有关.

宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力的比较研究

目的比较宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力.方法体外培养宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取传代培养后1 d、3 d、5 d 3个时间点分别计数细胞,MTT检测3时间点细胞活力变化,并进行统计学分析比较.结果宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株各时间点比较,培养1 d、3 d、5 d组的细胞数量逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);同时,宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株3 d组细胞活力较1 d组增加,而5 d组的细胞活力较3 d组下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论不同肺腺癌细胞株体外增殖和细胞活力不完全一致.

阿帕替尼联合大剂量丹参酮IIA对肺腺癌A549细胞株凋亡及Bim异构体的影响

目的:观察阿帕替尼与丹参酮IIA单药及不同时序联合用药方案对人肺腺癌细胞A549凋亡的影响,并探究其作用机制。方法:培养肺癌A549细胞,用梯度浓度的阿帕替尼(0、5、10、20、40、80μmol/L)及丹参酮IIA(0、5、10、20、40、80μmol/L)分别处理A549细胞,应用CCK8法检测其对细胞增殖的抑制作用;流式细胞技术(Annexin V/PI双染法)检测不同用药组作用48 h后的细胞凋亡率;半定量RT-PCR检测凋亡相关基因Bim异构体的表达情况。结果:阿帕替尼及丹参酮IIA单药对A549细胞的增殖均有抑制作用,且呈现浓度依赖性。两种药物联合使用时,联合用药组增殖抑制和凋亡率优于单药组和改变药物顺序的序贯组。结论:阿帕替尼与丹参酮IIA单药以及联合用药均可抑制A549细胞的增殖并促进凋亡;最佳联合方案为阿帕替尼联合丹参酮IIA同时使用,细胞凋亡率最高;其作用机制之一可能是联合用药通过转录和mRNA选择性剪接来上调Bim L基因的表达,从而促进细胞凋亡。

肺腺癌A549细胞株GDNF、BDNF、NT3和NT4的表达

目的探讨神经营养因子在肺腺癌细胞株A549中的表达及临床意义.方法体外培养肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取代培养后3 d的A549细胞,用免疫组化检测神经营养因子GDNF、BD-NF、NT3和NT4在肺腺癌细胞株A549的表达.结果神经营养因子GDNF、BDNF、NT3和NT4在部分肺腺癌细胞株A549中表达.结论神经营养因子GDNF、BDNF、NT3和NT4可能在肺癌的增殖中发挥作用.

抗菌肽merecidin作用于人肺腺癌A549细胞株的磷酸化蛋白质组学分析

目的:观察抗菌肽merecidin作用于人肺腺癌A549细胞后其细胞内所有蛋白质的磷酸化水平变化,探究抗菌肽对A549细胞生物学功能的影响以及促进细胞凋亡可能涉及到的信号通路与作用靶点。方法:9μmol/L抗菌肽merecidin作用于肺腺癌A549细胞6 h后收集并提取总蛋白,通过胰酶酶解肽段,并对肽段进行TMT标记和HPLC分级,IMAC-Fe富集磷酸化肽段,利用高分辨质谱对富集肽段进行检测。利用MaxQuant软件对质谱分析得到的磷酸化肽段进行搜库鉴定和定量,结合生物信息技术分析差异磷酸化蛋白质的功能、通路等信息。结果:通过对对照组和抗菌肽merecidin处理组磷酸化蛋白进行IPA分析,以上调或下调倍数≥2倍且P<0.05的条件鉴定出抗菌肽merecidin处理组中差异磷酸化蛋白质共有753个,其中明显上调有229个、下调有417个;其中与细胞凋亡相关的差异蛋白质有RB1、MAPK1、ARAF、PTK2、FOXO、MARCKS等。生物进程分析结果显示差异磷酸化蛋白主要集中在细胞信号转导、核酸的降解转运以及细胞能量代谢、蛋白质的翻译合成、细胞骨架的形成等,富集结果显示差异磷酸化蛋白质主要参与凋亡相关信号通路有MAPK、ErbB、PI3K-Akt和Ras等,通过蛋白互作分析找出凋亡相关蛋白质PTK2,PRKCA、MA2PK2、MAPK1、LMNA等之间有关联。结论:抗菌肽merecidin可能通过影响RB1、MAPK1、ARAF、PTK2、FOXO、MARCKS等基因和信号通路诱导肺癌A549细胞的凋亡及其他细胞功能的改变。

芝麻素对长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的影响

[目的]探讨芝麻素对长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞株凋亡的影响.[方法]选择人肺腺癌A549细胞株进行体外传代培养,制备成浓度为1.0×105个/mL的细胞悬浮液并接种于96孔板中.实验设空白组(加入DMEM培养液)、对照组(加入DMEM培养液及人肺腺癌A549细胞株)、芝麻素组(芝麻素10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg/mL)、长春瑞滨组(长春瑞滨5、10、15、20、25、30、35μg/mL)及联合用药组(加入IC50浓度的芝麻素和长春瑞滨,IC50为后续联合用药组实验药物浓度).空白组加入160μL的DMEM培养液,对照组及实验组各加入160μL已制备好的人肺腺癌A549细胞株悬浮液,待细胞株贴壁后,空白组、对照组及实验组分别加入20μL的生理盐水和20μL各相关浓度的药物.采用MTT法检测细胞增殖能力,利用倒置显微镜及HE染色法观察细胞形态学变化,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果]在10~100μg/mL质量浓度范围内,低质量浓度的芝麻素具有抑制A549细胞株增殖的作用,IC50质量浓度为40μg/mL;在5~35μg/mL质量浓度范围内,长春瑞滨具有抑制A549细胞株增殖的作用,且随着药物质量浓度升高细胞抑制率升高,IC50质量浓度为20μg/mL;芝麻素与长春瑞滨联合用药对A549细胞株的抑制率明显高于单药用药(P<0.01).倒置显微镜及HE染色法观察结果显示,与对照组比较,芝麻素(40μg/mL)、长春瑞滨(20μg/mL)及联合用药(芝麻素40μg/mL+长春瑞滨20μg/mL)作用于A549细胞株48 h后贴壁细胞数量均明显减少,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱,部分细胞体积变小、变圆或呈不规则形,核染色质凝集,细胞膜起泡形成凋亡小体,失去原有肿瘤细胞多角形或梭形形态,且联合用药组较单药组上述变化更为明显.流式细胞仪检测结果显示,药物作用48 h后,芝麻素组(40μg/mL)、长春瑞滨组(20μg/mL)及联合用药组(芝麻素40μg/mL+长春瑞滨20μg/mL)细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01),且联合用药组早期凋亡率明显高于单独用药组(P<0.01).[结论]芝麻素可增强长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用.

miR-33a-5p靶基因分析验证及对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的研究miR-33a-5p过表达对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及探索其可能的机制。方法在A549细胞中瞬时转染miR-33a-5p mimics,CCK-8和BrdU实验检测细胞增殖能力,转录组测序(RNA-seq)检测mRNA表达水平,targetscan(8.0)、miRDB(2020)、miRWalk(release_2022_01)和ENCORI(starbase,v2.0)联合筛选miR-33a-5p的潜在靶基因,并与RNA-seq的下调表达的基因取交集,RT-qPCR进行基因表达验证。结果RT-qPCR结果显示,miR-33a-5p在A549细胞中高表达(P<0.05);CCK-8实验和BrdU实验结果显示,细胞增殖能力受到抑制(P均<0.05);RNA-seq结果显示,差异基因共494个,其中上调266个,下调228个;GO功能富集主要在细胞外区组成、质膜的组成、受体复合物、细胞外泌体、细胞外基质结构组成、钙离子结合等,KEGG富集主要在补体和凝血途径、胰岛素抵抗、ABC转运途径、IL-17途径、NOD样受体途径和NF-κB信号通路等;靶基因预测分析和RT-qPCR表达验证显示,MTHFD2、OSBPL6、HADHB、HMGCLL1、GUCY1A2和DEPTOR是miR-33a-5p的潜在靶基因(P均<0.05)。结论miR-33a-5p可能通过调控MTHFD2、OSBPL6、HADHB、HMGCLL1、GUCY1A2和DEPTOR基因转录后表达水平来抑制A549细胞的增殖。

黏蛋白13在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞恶性生物学行为的影响与可能的机制

目的:探讨黏蛋白13(MUC13)在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及EMT的影响与可能的机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)和高通量基因表达(GEO)数据库分析MUC13在肺腺癌组织与正常肺组织、癌旁组织中的差异表达。qPCR法和WB法检测人肺腺癌细胞NCI-H1395、NCI-H1975、H1299、A549和人正常肺上皮细胞BEAS-2B中MUC13 mRNA和蛋白的表达水平。利用si RNA技术敲低A549细胞中MUC13表达,实验分为si-MUC13组、NC组和si-MUC13+IGF-1组。通过克隆形成实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测敲低MUC13对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,WB法检测敲低MUC13对A549细胞上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT等蛋白表达的影响。结果:MUC13 mRNA和蛋白在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达(均P<0.01),选取表达水平较高的A549细胞进行后续实验。敲低MUC13后,A549细胞的增殖能力显著降低,G0/G1期的细胞数量显著增多、G2/M期及S期的细胞数量显著减少,细胞凋亡率显著升高,细胞迁移及侵袭能力均显著降低(均P<0.01);A549细胞中E-cadherin表达显著上调,N-cadherin、vimentin表达显著下调,p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值均显著降低(均P<0.01);再加入IGF-1处理后,A549细胞中p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值均显著升高(均P<0.01)。结论:MUC13在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达,其可能通过激活EGFR/PI3K/AKT信号通路促进A549细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。

人参皂甙Rg3对肺腺癌A549细胞株信号传导相关基因表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg3[2 0 (R) Rg3]对人肺腺癌A5 4 9细胞株的信号传导相关基因差异表达的影响。方法 A5 4 9细胞株分 2组进行培养 ,实验组培养液中含有 10 -6mol/L的2 0 (R) Rg3,对照组不加药物 ,干预培养 72h后用BiostarH 4 0s型基因芯片测定其基因差异表达。结果 共检测到有效基因点数量 3490个 ,2 0 (R) Rg3干预后有 2 4个基因发生差异表达 ,其中 2个细胞信号和传递蛋白基因以及 2个细胞骨架和运动基因上调 ,原癌基因和抑癌基因下调的有 3个 ,蛋白翻译合成的基因 2个下调、1个上调 ,DNA合成修复重组和代谢相关基因 1个、免疫相关基因 1个下调 ,代谢基因 1个上调 ,其他功能基因也受到一定影响。结论 2 0 (R) Rg3可显著影响人肺腺癌A5 4 9细胞株信号传导等相关基因的差异表达。

SOCS3基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的影响

背景与目的:已证实在多种肿瘤细胞中存在着持续激活的信号转导与转录活化因子3(signaltransducersandactivatorsoftranscription3,STAT3)蛋白,持续激活的STAT3与正常细胞恶性转化及肿瘤细胞恶性增殖密切相关。而新近研究发现的细胞因子信号负调控因子家族(suppressorsofcytokinesignaling,SOCS)可通过抑制STAT酪氨酸磷酸化过程从而负性调控STATs介导的信号通路,最终影响细胞的存活、增殖和凋亡。但关于SOCS与肺癌细胞的生物学行为是否相关尚未见报道。本实验拟研究SOCS家族成员SOCS3对人肺腺癌细胞株A549增殖的影响。方法:以脂质体为载体将pEFSOCS3和pSV2neo共转染至人肺腺癌细胞株A549,应用RT-PCR和免疫细胞化学法测定转染前后细胞中SOCS3mRNA和蛋白表达,Westernblot检测STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法、3H-TdR掺入法检测基因转染前后细胞增殖情况。结果:RT-PCR和免疫细胞化学证实转染后细胞中有SOCS3稳定表达;与对照组(包括未转染组和转染空载体组)相比,转染组细胞中STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平显著下降(P<0.01),转染pEFSOCS3细胞生长抑制率转染组为40.58%对照组为32.23%;

人肺腺癌A_(549)多重抗药细胞株生物学特性变化

目的：探讨人肺腺癌Ａ５４９多重抗药细胞株生物学特性变化。方法：采用阿霉素（ＡＤＭ）浓度递增的方法诱导人肺腺癌Ａ５４９细胞系（Ａ５４９／Ｐ），在体外持续培养６个月，获得了具有多重抗药性的Ａ５４９／Ｒ２细胞，该细胞能在０．２μｇ／ｍｌＡＤＭ下持续增殖。通过光镜和电镜观察其增殖及形态结构变化。结果：Ａ５４９／Ｒ２细胞由巨大细胞增殖而来，其微绒毛、线粒体及分泌泡明显增加，有进一步分化趋向。结论：Ａ５４９／Ｒ２细胞的进一步分化特征可能与其抗药性形成有关。

刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制研究

目的探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法在0、2、4、6、8、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48 h后,采用细胞划痕实验测定A549细胞的迁移情况;Transwell实验测定A549细胞侵袭情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞48 h后,采用流式细胞术(PI单染法)测定A549细胞周期;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染法)测定A549细胞的凋亡情况;Real-Time PCR法测定A549细胞的周期、凋亡相关基因表达水平;Western Blot法测定A549细胞的周期、凋亡相关蛋白表达水平。结果(1)干预24、48、72 h后,与对照组(0 g·L^(-1))比较,刺梨果多糖2、4、6、8、10 g·L^(-1)组的A549细胞生长受到显著抑制,细胞的存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),刺梨果多糖干预48 h的IC50值为6.109 g·L^(-1),后续实验采用2、6、10 g·L^(-1)浓度作为刺梨果多糖低、中、高剂量。(2)干预48 h后,与对照组比较,刺梨果多糖2、6、10 g·L^(-1)组的A549细胞迁移距离显著增加(P<0.05,P<0.01),细胞侵袭数量显著减少(P<0.05,P<0.01);刺梨果多糖6、10 g·L^(-1)组的G0/G1期、G2/M期细胞比例均显著升高(P<0.05,P<0.01),S期的细胞比例显著降低(P<0.01);刺梨果多糖2、6、10 g·L^(-1)组A549细胞的G0/G1、G2/M期相关调控因子CDK-4、CDK-6、CyclinD1、CDK-1、CyclinB1 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.05,P<0.01);A549细胞的凋亡率均显著升高(P<0.01);凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01);促凋亡Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01),抗凋亡Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论刺梨果多糖能够抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞周期于G0/G1和G2/M期,并通过线粒体通路和死亡受体通路诱导A549细胞凋亡。

4种蜘蛛毒素对人肺腺癌细胞株A549体外增殖的影响

目的比较4种蜘蛛毒素对肺腺癌细胞株A549体外增殖抑制作用的强弱。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)测定了不同质量浓度的雷氏大疣蛛、敬钊缨毛蛛、海南单柄蛛和虎纹单柄蛛毒素对人肺腺癌细胞株A549的抑制作用,DNA琼脂糖凝胶电泳法检测4种蜘蛛毒素对A549细胞的凋亡作用并观察细胞形态变化。结果 4种蜘蛛毒素对A549的细胞增殖具有不同的抑制作用;同一蜘蛛毒素浓度越高抑制作用越好,蜘蛛毒素作用时间越长抑制效果越强,量效关系和时效关系良好。经雷氏大疣蛛和敬钊缨毛蛛毒素作用的A549细胞电泳均出现相差约200 bp的DNA梯子状条带,形态学观察到细胞凋亡。结论 4种蜘蛛毒素对A549细胞增殖的抑制作用效果不同,以雷氏大疣蛛毒素作用最强,IC50为16μg/mL。

基于JAK2/STAT3通路研究周氏固金消瘤汤含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响

目的:探讨周氏固金消瘤汤(ZSGJXLT)含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响及其机制。方法:应用健康SD大鼠制备ZSGJXLT含药血清与空白血清,将0%(空白血清)及5%、10%、20%、30%、40%ZSGJXLT含药血清作用于A549细胞,CCK-8法测算细胞活性抑制率和半数抑制浓度(IC_(50))。用0%ZSGJXLT(空白对照组)、5%ZSGJXLT(ZSGJXLT低剂量组)、10%ZSGJXLT(ZSGJXLT中剂量组)及20%ZSGJXLT(ZSGJXLT高剂量组)含药血清培养A549细胞,细胞划痕实验及高内涵细胞成像技术观察细胞运动情况;Transwell侵袭及迁移实验观察细胞侵袭及迁移情况;Western blot法检测A549细胞JAK2/STAT3通路相关蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,不同浓度ZSGJXLT含药血清组A549细胞活性受到不同程度的抑制,与时间及浓度呈正相关性,24 h的IC_(50)为25.42%。与空白对照组相比,ZSGJXLT中、高剂量组A549细胞划痕愈合率、细胞移动速度均显著下降(均P<0.05),不同浓度ZSGJXLT含药血清组A549细胞侵袭及迁移数量明显减少(均P<0.05)。与空白对照组比较,ZSGJXLT中、高剂量组A549细胞的p-JAK2、p-STAT3、VEGFA蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);不同浓度ZSGJXLT含药血清组MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达有下调趋势,而E-cadherin蛋白表达有上调趋势,呈剂量依赖性,其中ZSGJXLT高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:周氏固金消瘤汤含药血清能抑制A549细胞侵袭迁移能力,其机制可能与调控JAK2/STAT3通路有关。