乳清蛋白酶解制备的生物活性肽的研究进展

乳清蛋白中含有抗氧化肽、血管紧张素转换酶(angiote nsin converting enzyme,ACE)抑制肽、二肽基肽酶(dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)抑制肽等多种生物活性肽(bioactive peptides,BAPs),具降血压、降血糖、降血脂等多种功能,有助于人类神经、胃肠、心血管和免疫系统发育,应用前景广阔。BAPs主要由酪蛋白和乳清蛋白经酶促水解、微生物发酵或化学试剂获取。鉴于此,本文概述乳清蛋白的组成及功能,并对国内外有关乳清蛋白酶解制备的BAPs的研究进展进行重点论述,以期为乳清蛋白的高效利用以及相关功能性乳制品的开发提供参考。

胰高血糖素样肽1受体激动剂治疗阿尔茨海默病的潜在靶点预测及验证

背景:阿尔茨海默病的机制探究过程中揭示了生物信息学对共同靶点筛选的重要作用,能够利用其筛选结果为基础,探究药物对该疾病的治疗效果。目的:采用生物信息学与分子生物学等方法预测胰高血糖素样肽1受体激动剂利拉鲁肽治疗阿尔茨海默病的作用靶点。方法:利用DisGeNET数据库及SEA数据库获取阿尔茨海默病和利拉鲁肽作用的共同基因;利用DAVID在线数据库对共同靶点进行GO/KEGG富集分析;使用STRING数据库构建蛋白互作网络;使用CCK-8判断利拉鲁肽的最佳使用剂量;使用免疫荧光和免疫印迹技术对关键蛋白的表达情况进行分析。采用小鼠海马神经元HT22细胞系进行体外实验,细胞被随机分为3组:HT22组、HT22+Aβ组和HT22+Aβ+Lir组。HT22组不做特殊处理,HT22+Aβ组使用Aβ1-42干预HT22细胞系24 h构建Aβ损伤细胞模型,HT22+Aβ+Lir组在HT22+Aβ组的基础上添加利拉鲁肽12 h。结果与结论:①从DisGeNET数据库筛选出阿尔茨海默病相关联的基因,共得到3333个关联基因。再从SEA数据库中,得到利拉鲁肽的潜在作用靶点147个。最后使用R包筛选出阿尔茨海默病与利拉鲁肽共同靶点64个。②用DAVID数据库进行共同靶点的GO/KEGG分析,结果提示共同靶点主要富集在:神经活性配体-受体相互作用、肾素-血管紧张素系统、膀胱癌、内肽酶活性、肽受体活性、G蛋白偶联肽受体活性和转运囊泡等生物进程。③将已经得到的64个共同靶点蛋白导入至SRTING在线数据库进行蛋白互作网络构建,得到排名前3位的基因为基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β。④采用CCK-8试剂盒检测了培养细胞的活性,确定利拉鲁肽拮抗Aβ1-42的最佳浓度为100 nmol/L。⑤在免疫印迹实验与免疫荧光实验中,较HT22组相比,在HT22+Aβ组内基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β表达量明显上升(P<0.05);HT22+Aβ+Lir组较HT22+Aβ组相比基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β的表达量显著下降(P<0.05)。⑥结合上述生物信息学数据及在GEO数据库的差异基因二次验证结果提示,基质金属蛋白酶2,9和白细胞介素1β均可作为利拉鲁肽治疗阿尔茨海默病的潜在作用靶点。

大豆肽和豌豆肽对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢及其相关机制的研究

通过细胞实验探讨大豆肽与豌豆肽的复合物对II型糖尿病胰岛素抵抗作用,并初步探明其作用机制。采用1×10^(-6)mol/L的人胰岛素处理HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型;CCK-8法确定大豆肽及豌豆肽对HepG2细胞的安全剂量;检测不同复配比例的大豆肽和豌豆肽实验组的葡萄糖消耗、葡萄糖吸收及细胞中的糖原含量反应糖代谢情况,通过Western Blot法检测各蛋白的表达。结果表明,与对照组相比,HepG2细胞置于含1×10^(-6)mol/L人胰岛素培养液孵育24 h,葡萄糖消耗量、葡萄糖吸收量、糖原含量都降低,表明建模成功。大豆肽及豌豆肽干预均能改善HepG2细胞的胰岛素抵抗状况,提高细胞对葡萄糖的吸收和消耗能力、糖原合成能力,并能够提高葡萄糖转运蛋白GLUT2、GLUT4的表达量及胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的磷酸化水平,其中质量浓度为200μg/mL、比例为2∶1的大豆肽和豌豆肽效果最好。大豆肽与豌豆肽以2∶1的质量比进行复配可以有效改善HepG2细胞的胰岛素抵抗状况,可能与肽提高细胞中GLUT2和GLUT4的表达量,以及提高IRS-1和Akt蛋白的磷酸化水平有关。

澳洲坚果抗菌肽分离纯化及其肽段鉴定与分析

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备澳洲坚果多肽(macadamia nut peptide⁃0,MNP⁃0),以对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌活性为跟踪指标,通过超滤、DA201⁃C型大孔吸附树脂、交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25对其进行逐级分离纯化,获得抑菌活性较强的抗菌肽,并运用液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC⁃MS/MS)技术对其进行肽段组成与氨基酸序列分析。结果表明:超滤分离的不同分子量澳洲坚果多肽在所有多肽中所占质量分数不同,抑菌活性也有所差异。其中,澳洲坚果多肽组分MNP⁃4占比最高,为29.55%;抑菌活性也最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为10.01 mm与9.41 mm。大孔吸附树脂纯化多肽组分MNP⁃4的技术条件为75%乙醇溶液为解吸剂,静态吸附3 h,动态洗脱体积60 mL。经大孔吸附树脂与交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25分离纯化,获得3个澳洲坚果纯化多肽(macadamia nut purified peptide,MPP)组分,其中组分MPP⁃2的抑菌活性最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为18.67 mm与16.83 mm,优于多肽MNP⁃0与超滤分离多肽组分。分离纯化的澳洲坚果抗菌活性多肽MPP⁃2含有DDLTDPAPA、VLL、WDY、VPV、WDL、LLW、LWL、FDW 8个肽段,经预测分析,属于抗菌肽的肽段为WDL与FDW,其概率得分a(1.00≥a≥0.50)均为1.00,疏水率均为66.67%,均带有1个负电荷,等电点分别为0.69与0.67,并具有较好的溶解性。研究结果表明澳洲坚果可通过酶法制备具有抗菌活性的肽类成分。

牛血红蛋白肽的酶解工艺优化及其亚铁螯合物结构、稳定性研究

本研究以牛血为原料,提取牛血红蛋白进行酶解,筛选最适的酶解蛋白酶,采用单因素结合响应面试验探究最佳酶解工艺,通过扫描紫外光谱,傅里叶红外光谱,扫描电镜和全自动氨基酸分析仪等技术对制备的牛血红蛋白肽铁螯合物(Bovine Hemoglobin Peptide Iron Chelate,BHP-Fe)进行结构表征,并通过热重分析和体外模拟胃肠道消化探究其体外稳定性。结果表明:胃蛋白酶和碱性蛋白酶分步酶解为最适酶解方法。在胃蛋白酶初步酶解的基础上,得到碱性蛋白酶最佳酶解条件:料液比1:3,酶解pH9.8,酶解温度41℃,酶添加量5900 U/g,酶解时间2 h。在此条件下,酶解得到牛血红蛋白肽(Bovine Hemoglobin Peptide,BHP)的Fe^(2+)螯合能力达72.11%,牛血红蛋白水解度达35.07%。紫外光谱和傅里叶红外光谱结果显示,Fe^(2+)与BHP肽链上的羧基氧和氨基氮发生螯合反应生成了不同于多肽的新物质;扫描电镜结果显示,多肽与Fe^(2+)螯合后从表面光滑的碎片状变成表面粗糙的块状,两者存在明显差异;氨基酸含量变化显示天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸为多肽与金属离子的结合提供结合位点;热重分析结果表明,BHP与BHP-Fe在300℃高温状态下依然能保持较好的稳定性;体外模拟消化稳定性分析结果表明,BHP-Fe相较于其它铁补充剂在胃肠道中能保持较高的稳定性。本实验制备的多肽源性补铁剂螯合力强、消化稳定性好、具有广阔应用前景,可为牛血副产物的高效利用和新型多肽源补铁剂的未来发展前景提供建设性参考。

小麦肽及其与大豆肽、豌豆肽复配肽的体外组合对TNF-α刺激C2C12骨骼肌细胞蛋白表达的影响

通过细胞实验探讨小麦肽、大豆肽、豌豆肽复合物对TNF-α刺激C2C12骨骼肌细胞蛋白表达的影响,并初步探明作用通路。采用终质量浓度为25 ng/mL的TNF-α处理C2C12细胞4 d建立TNF-α刺激模型,CCK-8法确定小麦肽、大豆肽、豌豆肽对C1C12细胞的安全剂量;检测不同复配比例的小麦肽、大豆肽、豌豆肽实验组的肌球蛋白相关指标(MyoD、MyoG、MyHC)、泛素-蛋白酶体系统肌肉萎缩相关指标(TRIM63和MAFbx)的蛋白表达、Akt、mTOR和其磷酸化蛋白表达情况。结果表明,与对照组相比,TNF-α刺激的C2C12细胞中MyoD、MyoG和MyHC的蛋白表达量均有下降,其中MyHC显著降低;MAFbx和TRIM63表达量显著升高;Akt和mTOR的磷酸化水平显著降低,而经过肽样品处理后,各指标均有缓解,且以小麦肽与大豆肽+豌豆肽质量比1∶3效果最好。小麦肽与大豆肽+豌豆肽以1∶3的质量比进行复配在几种配比中可以最有效地改善由TNF-α造成的C2C12细胞肌蛋白含量降低,可通过调节E3泛素连接酶的表达和提高Akt/mTOR的蛋白磷酸化水平的通路,从而降低细胞中蛋白降解和促进蛋白合成。

玉米糖肽抗氧化活性的稳定性研究

为研究玉米糖肽在食品加工条件下抗氧化活性的稳定性,以转谷氨酰胺酶(TGase)为催化剂,利用生物安全、多伯氨基团的壳寡糖(COS)对玉米醇溶蛋白源活性肽进行糖基化修饰制备玉米糖肽,以DPPH自由基清除率和亚铁离子螯合率为指标,探究冻融次数、温度、pH、食品辅料(NaCl、葡萄糖和柠檬酸)和体外模拟胃肠消化对玉米糖肽抗氧化活性的影响。结果表明,玉米糖肽具有良好的冻融稳定性(4次)和热稳定性(60~100℃),弱碱(pH 8.0)条件下稳定,NaCl(0.5~5.0 g/100 mL)的添加对玉米糖肽的抗氧化活性无显著影响,葡萄糖(1~8 g/100 mL)的添加对DPPH自由基清除活性无显著影响,对亚铁离子螯合能力有促进作用,柠檬酸(0.04~0.20 g/100 mL)的添加及体外模拟胃肠消化对DPPH自由基清除活性有促进作用,对亚铁离子螯合能力有抑制作用。因此玉米糖肽具有一定的抗氧化活性稳定性,选择合理的加工及储藏条件有利于维持玉米糖肽的抗氧化活性。

3种肽对细胞氧化损伤的保护作用及促细胞增殖能力比较

目的探究小麦肽、大豆肽和海参肽对H_(2)O_(2)诱导的L929细胞氧化应激损伤的保护作用及促细胞增殖能力比较。方法首先通过测定L929细胞的增殖率方法来确定L929细胞的浓度及H_(2)O_(2)的浓度,建立L929细胞H_(2)O_(2)损伤模型,测定3种肽对L929细胞的氧化损伤保护能力,再通过测定细胞周期及细胞凋亡率的方法来比较3种肽的促细胞增殖能力。结果海参肽的氧化损伤保护能力优于大豆肽和小麦肽;200μg/mL大豆肽和海参肽处理后的成纤维细胞增殖指数相比于空白对照都有显著增加,即大豆肽和海参肽可以通过影响细胞周期提高增殖指数而促成纤维细胞增殖,且同浓度海参肽的促成纤维细胞增殖能力优于同浓度的大豆肽,而小麦肽对细胞周期的影响无显著性差异。海参肽的抑制成纤维细胞凋亡作用最强,经200μg/mL海参肽作用后,细胞的凋亡率由空白对照的的(3.59±0.11)%降至(1.89±0.09)%。结论海参肽对细胞氧化损伤保护及促细胞增殖能力最强,大豆肽次之。

司美格鲁肽对2型糖尿病合并超重及肥胖患者的胰腺和肝脏脂肪含量以及胰岛β细胞功能的影响

目的探讨司美格鲁肽对2型糖尿病(T2DM)合并超重及肥胖患者的血糖控制、胰腺和肝脏脂肪含量以及胰岛β细胞功能的影响。方法采用单中心、前瞻性、临床病例对照试验的方法,选取2021年10月至2022年10月在金华市中心医院诊断为T2DM合并超重(BMI 25~<28 kg/m^(2))及肥胖(BMI≥28 kg/m^(2))的86例患者为研究对象,均接受稳定剂量的二甲双胍单药或联合口服用药至少3个月,糖化血红蛋白(HbA1C)为6.5%~8.0%。采用随机数字表法将患者分为对照组和观察组,各43例。对照组继续原方案口服降糖,观察组在原方案的基础上联合司美格鲁肽(起始剂量0.25 mg,4周后增加至0.5 mg并稳定,1次/周,皮下注射)。两组均干预24周。比较两组患者血糖(FPG、餐后2 h血糖和HbA1C)、血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)、BMI、腰围、胰岛细胞功能[空腹胰岛素(FINS)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]。通过非对称回波的最小二乘估算法迭代水脂分离序列测量胰头、胰体和胰尾的胰腺脂肪分数(PFF),计算平均PFF并进行组间比较;测量肝脏右上、右下和左叶的肝脏脂肪分数(HFF),计算平均HFF并进行组间比较。结果对照组39例和观察组40例随访至研究结束。治疗后观察组患者FPG、餐后2 h血糖、HbA1C、BMI、FINS、HOMA-IR、平均PFF和平均HFF均低于对照组,而HOMA-β高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论司美格鲁肽应用方便,对T2DM合并超重及肥胖患者能够在常规降糖药的基础上进一步改善胰岛素和胰岛β细胞功能,降低血糖水平、胰腺和肝脏脂肪含量,同时可产生额外的减重获益。

冻干重组人脑利钠肽对缺血性心肌病心力衰竭患者NT⁃proBNP、AngⅡ、NE水平、心室重构和炎症因子的影响

目的探讨缺血性心肌病(ICM)心力衰竭(HF)患者应用冻干重组人脑利钠肽治疗对N末端脑钠肽前体(NT⁃proBNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、去甲肾上腺素(NE)水平、心室重构和炎症因子的影响。方法于2020年10月至2023年2月从宿松县人民医院选择86例ICM HF患者分为对照组和试验组,均43例,以随机数字表法分组。对照组和试验组分别予以常规治疗和冻干重组人脑利钠肽联合常规治疗,均治疗2周。比较两组疗效(治疗2周后)、血清NT⁃proBNP、AngⅡ、NE、心室重构指标和炎症因子水平(治疗前和治疗2周后)。结果治疗2周后,较对照组(74.42%),试验组总有效率(93.02%)更高,差异有统计学意义(χ^(2)=5.460,P<0.05)。两组治疗2周后的血清NT⁃proBNP、AngⅡ、NE、TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃8和LVTWP、PWS、IVSS较治疗前降低,试验组更低,差异有统计学意义(t=5.672、20.016、55.416、6.742、5.851、5.258、5.940、6.681、5.865,P<0.05)。结论ICM HF患者应用冻干重组人脑利钠肽治疗可降低血清NT⁃proBNP、AngⅡ、NE水平,改善神经分泌功能,同时可抑制心室重构及机体炎症,疗效显著。

一种植物蛋白复合肽盐的工艺研究

食盐与我们的日常生活密切相关,但如果摄入过多食盐,会导致体内钠离子积累过多,进而引发一系列的疾病。该研究在以谷朊粉为原料制得咸味肽的基础上,以感官评分、色差值、水分、乳化性和乳化稳定性为指标,对氯化钾、酵母提取物和柠檬粉的添加量进行单因素试验,并利用响应面试验优化肽盐的配方。结果表明,在氯化钾为0.4 g、酵母提取物为0.2 g、柠檬粉为0.3 g的条件下,复合肽盐中多肽含量为11.4 mg/g,钠离子含量为0.35 g/100 g,钾离子含量为1.181 g/100 g,且添加酵母提取物和柠檬粉掩盖了肽盐的不良气味,外观呈浅黄色;减少了生活中钠的摄入量,得到低钠、减盐不减咸的调味品。

重组人脑利钠肽治疗射血分数保留心力衰竭患者的疗效

目的:探讨重组人脑利钠肽治疗射血分数保留心力衰竭患者的疗效和安全性,以及患者用药后sST2及N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平变化。方法:选取包头市第四医院2020年2月-2022年2月收治射血分数保留心力衰竭患者60例,按照是否接受重组人脑利钠肽治疗分为观察组(联合注射用重组人脑利钠肽治疗)30例及对照组(常规治疗)30例,观察两组治疗前、治疗72 h后,6 min步行试验(6 MWT)、血清sST2和NT-proBNP水平、超声心动图指标及临床疗效。结果:治疗72 h后,观察组6 MWT高于对照组,NT-proBNP水平低于对照组(P<0.05);治疗72 h后,观察组左心房容积指数(LAVI)低于对照组,左心室射血分数(LVEF)升高(P<0.05);观察组总有效率高于对照组(P<0.05);治疗72 h后,观察组血清sST2水平降低(P<0.05)。结论:注射用重组人脑利钠肽可改善射血分数保留心力衰竭患者的心肌功能,增加心脏排血量,减轻心肌细胞损伤,经sST2及NT-proBNP水平评估后确保有效,且临床用药安全性好,建议推广。

替西帕肽用于2型糖尿病治疗的研究进展

替西帕肽是一种新一代糖尿病药物,由礼来公司开发,并于2022年5月获得美国食品药物监督管理局(FDA)批准上市。替西帕肽基于多靶点激动剂与单一激动剂相比具有多重药理作用,是一种葡萄糖依赖性的促胰岛素多肽和胰高血糖素样肽-1受体双重激动剂。FDA批准替西帕肽皮下注射作为单一疗法或联合疗法,配合饮食和体育锻炼,以改善糖尿病患者的血糖水平。替西帕肽除了改善血糖控制外,该药物还能有效减轻体重、改善心脏代谢参数、改善血压、降低低密度脂蛋白、胆固醇和三酰甘油等。替西帕肽的有效性和安全性在一项超过1~5期临床试验项目中进行了评估,目前正在进行其他临床试验,以评估其在其他疾病中的应用。

沙库巴曲缬沙坦联合重组人脑利钠肽治疗难治性心力衰竭的效果及对心功能与NT-proBNP的影响

目的观察沙库巴曲缬沙坦联合重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗难治性心力衰竭的临床效果,重点观察对患者心功能与N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)的影响。方法根据随机数字表法将2020年6月—2021年1月黄骅市人民医院收治的难治性心力衰竭患者120例分为rhBNP组和联合用药组,各60例。在基础治疗上,rhBNP组采用注射用重组人脑利钠肽治疗,联合用药组在rhBNP组基础上加用沙库巴曲缬沙坦钠片治疗,2组疗程均为6个月。比较2组临床疗效,治疗前后心功能指标[左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)、左房内径(LAD)]、6 min步行距离(6MWD)、实验室血清指标[N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肾素(RA)、醛固酮(ALD)、血管紧张素Ⅱ受体(AngⅡ)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)],不良反应与随访6个月主要不良心血管事件发生率。结果联合用药组治疗总有效率为91.67%,明显高于rhBNP组的70.00%(χ^(2)=9.091,P=0.003)。治疗6个月后,2组LVEDD、LVESD、LAD缩小,LVEF升高与6MWD延长,且联合用药组上述指标改善幅度大于rhBNP组(P均<0.01);2组血清NT-proBNP、RA、ALD、AngⅡ与hs-CRP水平降低,且联合用药组低于rhBNP组(P均<0.01)。rhBNP组不良反应总发生率为13.33%,联合用药组为18.33%,2组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.563,P=0.453);随访6个月,联合用药组严重心律失常、急性心力衰竭再住院、心源性死亡发生率与rhBNP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论难治性心力衰竭患者治疗中采用沙库巴曲缬沙坦联合rhBNP治疗方案,可在提高治疗总有效率同时,有效改善患者心功能并降低NT-proBNP等血清指标,且不良反应较少,随访不良心血管事件发生率较低。

慢性心力衰竭患者血清和肽素及脑钠肽水平观察及临床意义分析

目的观察慢性心力衰竭(CHF)患者血清和肽素(CPT)及脑钠肽(BNP)的水平并分析其临床意义。方法选取2022年2月至2023年3月中国医科大学附属第四医院收治的100例CHF患者设为CHF组,另选取同期于中国医科大学附属第四医院体检的60例健康体检者设为对照组,进行回顾性分析。比较两组研究对象CPT、BNP水平;根据病情程度不同将CHF组患者分为Ⅱ级组(32例)、Ⅲ级组(41例)和Ⅳ级组(27例),分析不同心功能患者CPT、BNP水平,分析血清CPT、BNP水平与CHF患者病情程度的关系。结果CHF组患者血清CPT、BNP水平均高于对照组(均P<0.05)。Ⅳ级组患者血清CPT、BNP水平均高于Ⅲ级组和Ⅱ级组,Ⅲ级组高于Ⅱ级组(均P<0.05)。受试者操作特征(ROC)曲线分析结果显示,血清CPT、BNP水平预测CHF患者心功能分级Ⅳ级的曲线下面积(AUC)分别为0.761、0.715,敏感度分别为0.778、0.741,特异度分别为0.849、0.795。Spearman相关性分析结果显示,CHF患者心功能分级与血清CPT、BNP水平均呈正相关(r=0.584、0.627,均P<0.05)。结论在CHF患者中,血清CPT、BNP水平与心功能分级存在正相关关系,上述指标用于评估CHF患者心功能具有一定参考价值。

澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定

为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))6.18 mg/mL与还原能力IC_(50)2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC_(50)0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC_(50)0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于10个氨基酸,匹配得分大于200分的9条肽段分子量为631~920 Da,均无毒性;筛选获得高抗氧化活性肽HLLPK、KEFFP、KEFFPA,其分子量分别为606.84、666.83、737.92 Da。本研究初步揭示了澳洲坚果抗氧化肽组成,深化了澳洲坚果抗氧化肽的研究,为澳洲坚果抗氧化肽的开发利用提供了理论参考。

度拉糖肽与利拉鲁肽应用于初诊2型糖尿病患者短期胰岛素强化治疗的有效性与安全性研究

目的评估度拉糖肽与利拉鲁肽对初诊2型糖尿病(T2DM)患者短期胰岛素强化治疗的效果与后续结果的影响。方法采用双向性观察研究,收集2022年在东莞市松山湖中心医院进行胰岛素强化治疗的初诊T2DM伴高血糖状态患者,分为度拉糖肽组和利拉鲁肽组,并对住院期间数据和出院后16周的随访数据以及治疗方案进行统计分析。结果共收集到128例符合纳排标准的患者,其中利拉鲁肽组65例,度拉糖肽组63例。①住院期间,度拉糖肽组血糖达标时间更短(P<0.05),并且需胰岛素序贯治疗率更低(P<0.05)。②出院1、4、10、12、13~16周度拉糖肽组血糖均低于利拉鲁肽组,第12周后,度拉糖肽组的空腹及餐后血糖、糖化血红蛋白、空腹血浆血糖均低于利拉鲁肽组(P<0.05),且两组研究药物使用时长差异无统计学意义(P>0.05)。③治疗期间未观察到严重不良反应,主要不良反应为恶心、呕吐、便秘、腹泻、低血糖,两组总体不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论度拉糖肽与利拉鲁肽应用于短期胰岛素强化治疗,安全性均较好。度拉糖肽组降糖时间更短,出院方案更简单,且随着时间延长降糖效果更显著。度拉糖肽应用于胰岛素强化方案可能更适合初诊T2DM伴有高血糖状态患者。

不同长效胰高血糖素样肽-1受体激动剂对口服药物控糖不佳2型糖尿病患者糖化血红蛋白空腹血糖体质量指数的影响

目的探究不同长效胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂药物在口服药物控制不佳2型糖尿病(T2DM)中的应用。方法采用随机数字表法将120例口服药物控糖不佳的T2DM患者分为利拉鲁肽组、艾塞那肽组及胰岛素组,每组40例,3组分别给予利拉鲁肽、艾塞那肽及甘精胰岛素治疗。测定代谢指标、血清脂联素、瘦素、炎症因子水平,评价安全性。结果治疗后利拉鲁肽组及艾塞那肽组体质量指数(BMI)、体脂率(FAT)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)低于胰岛素组(P<0.05),空腹胰岛素(FINS)水平高于胰岛素组(P<0.05);利拉鲁肽组FPG、2 h PG低于艾塞那肽组(P<0.05);艾塞那肽组LDL-C水平低于利拉鲁肽组(P<0.05);治疗后利拉鲁肽组及艾塞那肽组脂联素水平高于胰岛素组(P<0.05),瘦素、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)低于胰岛素组(P<0.05);与胰岛素组比较,利拉鲁肽及艾塞那肽总胃肠道不良反应发生率升高(P<0.05)。结论与甘精胰岛素比较,GLP-1受体激动剂用于口服药物血糖控制不佳T2DM患者中血糖控制效果更好,但胃肠道反应较多;其中利拉鲁肽对控制空腹及餐后血糖效果更好,艾塞那肽对血脂调节作用好且用药频率低。

胰高血糖素样肽1受体激动剂周制剂的Mini卫生技术评估

目的对我国上市的4种胰高血糖素样肽1受体激动剂(GLP-1RA)周制剂进行综合评估,为医院优化药品目录和临床合理用药提供依据。方法采用Mini卫生技术评估法,参照《中国医疗机构药品评价与遴选快速指南》建立评价细则,从药学特性、有效性、安全性、经济性、其他属性5个维度对4种GLP-1RA周制剂进行综合评价。结果4种GLP-1RA周制剂的Mini卫生技术评分从高至低依次为度拉糖肽78.60分、司美格鲁肽77.35分、聚乙二醇洛塞那肽67.40分、艾塞那肽微球65.50分。其中,度拉糖肽在降糖获益、动脉粥样硬化性心血管疾病获益、肾病获益、经济性方面有优势;司美格鲁肽在降糖减重方面有优势,但经济性低于度拉糖肽;艾塞那肽微球在儿童人群中使用有优势,但日均治疗费用最高;聚乙二醇洛塞那肽需要进一步的临床证据。结论4种GLP-1RA周制剂总体均具有较高的综合分值,其中度拉糖肽和司美格鲁肽可能具有更全面的药学价值,而艾塞那肽微球针对儿童人群具有唯一性。

白果肽的二肽基肽酶-Ⅳ抑制活性及其抑制机理研究

食源性二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidaseⅣ,DPP-Ⅳ)抑制肽可有效调节机体内糖代谢,降低机体血糖水平。为评估白果肽(phenylalanine-alanine-proline-serine-tryptophan,FAPSW和methionine-proline-glycine-proline-proline,MPGPP)的降糖潜能,采用体外试验测定其DPP-Ⅳ抑制活性,并进一步通过分子对接和分子动力学模拟揭示其抑制机理。结果表明,FAPSW和MPGPP具有良好的DPP-Ⅳ抑制活性,且MPGPP的DPP-Ⅳ抑制活性[IC_(50)=(0.158±0.009)g/L]强于FAPSW[IC_(50)=(2.540±0.126)g/L];分子对接结果表明,静电相互作用、氢键、疏水作用和范德华力在FAPSW和MPGPP抑制DPP-Ⅳ活性中起重要作用;分子动力学结果表明,FAPSW和MPGPP结合DPP-Ⅳ能形成稳定的复合物结构,且MPGPP-DPP-Ⅳ复合物的稳定性要强于FAPSW-DPP-Ⅳ。结合自由能结果表明,静电相互作用在FAPSW和MPGPP结合DPP-Ⅳ中起主导作用。研究结果可为FAPSW和MPGPP在功能食品领域的开发和利用提供一定的理论参考。