肿瘤抑制基因7L通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胰腺癌细胞生长的作用机制

目的 探讨肿瘤抑制基因(ST)7L对胰腺癌细胞增殖和凋亡能力的影响及其作用机制。方法 收集胰腺癌患者及健康体检者血浆标本各22例,同时收集胰腺癌组织和癌旁组织标本13对。将ST7L过表达质粒及空白质粒分别转染胰腺癌细胞作为ST7L组和对照组,将ST7L敲降质粒及空白质粒分别转染胰腺癌细胞作为si-ST7L组和si-NC组。采用实时荧光定量(qRT)-PCR检测临床样本中ST7L的表达水平;采用Western blot检测胰腺癌细胞系中ST7L的表达水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测相关蛋白表达水平并分组进行比较。结果 胰腺癌患者血浆ST7L表达水平明显低于健康对照者,胰腺癌组织中ST7L的表达水平显著低于对应癌旁组织;ST7L在胰腺癌细胞系PANC-1、AsPC-1、PaCa-2中的表达水平均明显低于胰腺导管正常细胞H6C7(P<0.05)。ST7L组及对照组细胞24 h、48 h、72 h及96 h的增殖能力均依次升高,ST7L组细胞24 h、48 h、72 h及96 h的增殖能力均明显低于同期对照组(P<0.05)。ST7L组PANC-1及PaCa-2细胞凋亡率均高于对照组;ST7L组PANC-1及PaCa-2细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达水平均高于对照组,而Bcl-2表达水平均低于对照组(P<0.05)。ST7L组细胞β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达均低于对照组;si-ST7L组细胞β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达均高于si-NC组(P<0.05)。结论 ST7L可能通过降低Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达来抑制胰腺癌细胞生长。

B淋巴细胞瘤-2关联永生基因3蛋白、多重肿瘤抑制基因1在宫颈癌癌前病变中表达及联合液基细胞学检查的临床意义

目的研究B淋巴细胞瘤-2关联永生基因3(BAG3)蛋白、多重肿瘤抑制基因1(P16)在宫颈癌癌前病变中表达及联合液基细胞学检查的临床意义。方法选择绵阳市中心医院2015年6月至2017年6月在妇科门诊筛查并确诊的120例宫颈病变病人为研究对象,根据其病变情况分为两组,其中癌前病变组病人69例,宫颈癌组病人51例。对比两组病人的BAG3、P16水平,将不同严重程度宫颈癌癌前病变病人的BAG3、P16水平进行比较,分析联合检测效能。结果宫颈癌组病人的BAG3(2.74±0.37)水平、P16(1.45±0.38)水平显著高于癌前病变组BAG3(1.70±0.51)、P16(0.53±0.16),差异有统计学意义(P<0.05)。不同严重程度宫颈癌癌前病变病人的BAG3和P16水平差异有统计学意义(P<0.05),其中宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)组的BAG3(1.01±0.24)水平低于CINⅡ组BAG3(1.78±0.79)和CINⅢ组的BAG3(2.33±0.88),且CINⅡ组低于CINⅢ组,差异有统计学意义(P<0.05);CINⅠ组的P16(0.21±0.06)水平低于CINⅡ组P16(0.45±0.10)和CINⅢ组的P16(0.72±0.17)水平,且CINⅡ组低于CINⅢ组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合诊断对于宫颈癌的诊断特异度显著高于单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。通过ROC曲线分析结果发现联合检测对于宫颈癌癌前病变的诊断ROC曲线下面积显著高于单独检测(P<0.05)。结论随着宫颈癌前病变的进展,P16、BAG3表达增加,BAG3蛋白、P16联合液基细胞学检查对于病人的诊断具有积极的意义。

多种肿瘤抑制基因的共同改变与EGFR突变型肺癌患者的不良预后相关

该研究纳入了接受EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗且有肿瘤基因组谱的EGFR突变非小细胞肺癌患者。通过TP53和另外5个TSGs(RB1、NF1、ARID1A、BRCA1和PTEN)变异将该队列分层为3个亚组:携带TP53突变和≥1个其他TSG突变(TP53mut/TSGmut)、携带TP53突变但无其他TSG突变(TP53mut/TSGwt)、TP53wt。在两个独立队列中评估了患者特征和临床预后。

肿瘤抑制基因联合增殖细胞核抗原免疫组化检测在早期宫颈病变中的诊断价值分析

目的:探讨肿瘤抑制基因(P16)联合增殖细胞核抗原(Ki-67)免疫组化检测在早期宫颈病变中的诊断价值。方法:选取2020年1月—2022年9月江苏省淮安市淮安医院收治的100例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者作为研究对象,按镜下病理诊断分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组;将同期宫颈炎症且鳞状上皮正常的100例患者作为对照组。进行免疫组化检测,比较四组免疫组化检测阳性表达情况。结果:对照组免疫组化检测均为阴性,CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组P16与Ki-67阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:随着宫颈病变分级越来越高,P16和Ki-67的表达也越来越高,患者阳性率也越来越高。P16与Ki-67的表达在宫颈病变诊断中发挥着重要价值,可作为宫颈早期病变病理检测的检测手段。

中国儿童急性淋巴细胞性白血病染色体6q16.3～21区域候选肿瘤抑制基因的定位与鉴定

为了克隆儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)候选肿瘤抑制基因,首先选取分布于6q16.3～21上的11个多态性微卫星标记,对139例中国儿童ALL标本进行杂合性缺失(LOH)分析.分析显示32%的患者存在至少一个位点的LOH,且高频缺失区位于D6S1709～D6S301之间,大小为2cM.各位点LOH与白细胞总数、病态细胞数有显著性相关(P<0.05),与年龄、性别、形态学分型和免疫学分型无显著相关(P>0.05).进一步在高频缺失区域内,采用定位候选克隆策略、生物信息学技术及RT-PCR技术筛选、鉴定与儿童ALL相关的候选肿瘤抑制基因及其cDNA片段.在D6S1709～D6S301之间筛选到一个在儿童ALL细胞中低表达的EST(GenBank登录号:AA403058),与正常外周血单个核细胞比较,在15例ALL患者中有10例表达下调(P<0.05).采用数字化差异表达分析显示,位于6q16.3～21区域内的AMD1基因、PPIL6基因和WASF1基因在肿瘤组织中的表达丰度要低于正常组织(P<0.05).上述结果为进一步在6q16.3～21区域克隆肿瘤抑制基因提供了线索.

潜在的肺癌肿瘤抑制基因RBM5的研究进展

RBM5首先作为LUCA-15于1996年被克隆出来,曾被命名为LUCA-15、RBM5、H37等。RBM5蛋白是RNA结合基序蛋白家族成员;该家族是由HU-GO基因命名委员会正式命名的RRB/RBM/RNP新近发现的蛋白亚群,此类蛋白是RNA结合蛋白,与RNA的剪接、翻译和稳定性有关,

食管癌组织多种肿瘤抑制基因微卫星多态位点的杂合丢失和不稳定

目的：研究ｐ５３ ，ｐ１６， Ｒｂ ， Ｄ Ｃ Ｃ， Ａ Ｐ Ｃ 等多种已知抑癌基因在食管癌组织中的缺失及与临床病理的关系。方法：采用 Ｐ Ｃ Ｒ 银染技术，检测高发区３６ 例配对的食管癌标本１４ 个微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 多态位点的杂合丢失和不稳定性。结果：分别与ｐ５３ ，ｐ１６ 及 Ｒｂ 连锁的 Ｄ１７ Ｓ２６１ ， Ｄ９ Ｓ１６２ 、 Ｄ９ Ｓ１７１、 Ｉ Ｆ Ｎ Ａ 和 Ｄ１３ Ｓ１７０ 均有高频率的杂合丢失（ ＞ ２５ ％ ） ；两个以上的位点异常者占８６％ ，ｐ Ｔ Ｎ Ｍ Ⅲ期患者微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 多态位点异常的频率显著高于Ⅱ期患者（ Ｐ＜ ０．０１） 。结论：同一病例有多个微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 多态位点异常提示食管上皮癌变涉及多个抑癌基因的失活。

肝细胞癌肿瘤抑制基因 p53 过度表达及点突变的研究

应用一种敏感的ＡＲＦ免疫组化和ＰＣＲ、银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测了本地区３８例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中肿瘤抑制基因ｐ５３的过度表达及点突变。结果发现１６例有ｐ５３蛋白过度表达（４１．２％），７例有ｐ５３基因２４９位密码子点突变（１８．４％），２例２４９位密码子外第７外显子点突变。９例ｐ５３基因有突变的肝癌中８例ｐ５３蛋白阳性，两者符合率为８８．９％。ｐ５３基因蛋白过度表达和点突变与ＨＣＣ分化和转移有关。本组ＨＣＣｐ５３基因突变率与该地区黄曲霉素（ＡＦＢ１）含量及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染分布一致，提示ｐ５３基因突变与ＡＦＢ１和ＨＢＶ等环境因素的协同作用有关，其中ＡＦＢ１主要与ｐ５３基因２４９位密码子特异型突变有关，而ＨＢＶ可能在散发型突变中发挥重要作用。

卵巢癌细胞卡铂耐药相关肿瘤抑制基因的表达变化及其启动子区甲基化观察

目的观察卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因的表达变化及其启动子区甲基化状态。方法应用分子生物信息学方法,从卵巢癌卡铂耐药基因表达谱芯片中筛选13个肿瘤抑制基因(VHL、COPS2、NOL7、GGNBP2、RBL1、S100A2、PARG1、PERP、TCF3、DNAJA3、ING1、RARRES3、RBBP8),并采用RT-PCR法检测这些基因在卵巢癌卡铂耐药细胞系(SKOV3-CB)及其亲本细胞系(SKOV3)的表达;分析肿瘤抑制基因启动子区CPG岛并设计出8个基因(VHL、COPS2、NOL7、RBL1、PARG1、PERP、DNAJA3)的引物,采用甲基化特异性PCR法检测SKOV3-CB、SK-OV3细胞8个基因启动子区甲基化状态。结果与SKOV3相比,除GGNBP2基因外,其余12个基因均在SKOV3-CB中表达下调。SKOV3-CB、SKOV3的ING1、DNAJA3、VHL甲基化引物均能够扩增出产物,未甲基化引物均不能扩增出产物;COPS2、PERP甲基化引物均不能够扩增出产物,未甲基化引物均能够扩增出产物;PARG1、NOL7、RBL1甲基化引物与未甲基化引物均能够扩增出产物。结论卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因表达下调,其启动子区无甲基化;甲基化机制与卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因的表达下调无关。

肿瘤抑制基因p53在涎腺肿瘤中的表达及分析

用免疫组化方法观察了肿瘤抑制基因ｐ５３在良性及恶性涎腺肿瘤中的表达。结果显示，ｐ５３在３２％（８／２５）的多形性腺瘤及８３％（１０／１２）的恶性涎腺肿瘤（包括粘液表皮样癌、腺泡细胞癌、腺样囊性癌及多形性腺瘤恶变）中有过表达。结果揭示了ｐ５３在涎腺肿瘤中的表达率较高，尤其是恶性肿瘤中。表明涎腺肿瘤的发生可能与ｐ５３基因的异常有密切的关系。

甲基化特异PCR 方法对p16肿瘤抑制基因的研究

目的：研究肺癌、结肠癌组织中 p16 肿瘤抑制基因甲基化状态及其临床意义。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）方法，特异扩增分析甲基化和非甲基化两种状态。结果：p16基因在人胚肺组织处于非甲基化状态；在人肺巨细胞癌细胞系（PLA801-D)呈甲基化状态；在检测的肿瘤标本中，60％ 肺癌组织及 70％ 结肠癌组织出现甲基化状态。结论：p16 基因的甲基化状态是肺癌、结肠癌组织中 p16 基因异常形式之一，有可能成为肿瘤分子诊断的重要标志，MSP 方法有临床普及应用前景。

肿瘤抑制基因p53的研究进展

综述了p5 3基因的特性、认识阶段。

肿瘤抑制基因p16的研究进展

p16基因(也称多重肿瘤抑制基因,MTS_1)是1994年被鉴定的又一抑癌基因。本文介绍了近几年国外有关该基因的研究工作,特别对p16基因的定位、p16蛋白的作用途径以及该基因突变在肿瘤发生、发展过程中的作用及地位进行了综述。

肿瘤抑制基因PTEN在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的研究肿瘤抑制基因PTEN在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测83例乳腺癌组织PTEN蛋白的表达情况。结果83例乳腺癌组织的PTEN阳性表达率为61.4%(51/83),PTEN阴性表达率为38.6%(32/83)。PTEN表达与乳腺癌原发肿瘤的大小(P<0.05)、临床分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)以及雌激素受体(ER)(P<0.05)有关。PTEN高表达的乳腺癌患者5年总生存率明显高于低表达者(P<005)。结论乳腺癌组织中存在肿瘤抑制基因PTEN的表达缺失或减弱,可能与乳腺癌的发生、发展有关。PTEN可以作为一个判断乳腺癌预后的指标。

肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体的构建及其在A549细胞中的表达

目的构建肿瘤抑制基因WWOX的真核表达载体,并观察其在人肺腺癌细胞A549中的表达。方法采用RT-PCR法,从正常人胚肾细胞HEK-293中钓取WWOX基因,将其克隆至pMD18-T载体上,测序后定向连接到真核表达载体pEGFP-C1中,构建真核表达载体pEGFP-C1-WWOX,并用脂质体转染至A549细胞中,采用共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)与WWOX的融合蛋白在A549细胞中的表达。结果测序结果显示,RT-PCR法获得的WWOX全编码序列与GenBank中报道的序列一致。真核表达载体pEGFP-C1-WWOX转染A549细胞48h后,共聚焦显微镜观察到细胞中有绿色荧光呈现,RT-PCR观察到WWOX基因得到有效转录。结论已成功构建了肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体pEGFP-C1-WWOX,并在A549细胞中表达了WWOX和GFP融合蛋白。

明胶酶及肿瘤抑制基因pten在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的 探讨喉鳞癌中明胶酶MMP 2、MMP 9及肿瘤抑制基因PTEN的表达及其相关性。方法 应用S P免疫组化法检测 6 8例喉鳞癌、9例异型增生及 15例正常喉粘膜的MMP 2、MMP 9及PTEN蛋白表达。结果 (1)MMP 2、MMP 9阳性表达率 :喉鳞癌中分别为 73 5 3%、79 4 1% ,均显著高于异型增生表达率 (4 4 4 4 %、2 2 2 2 % )及正常喉粘膜表达率(13 33%、2 0 0 0 % ) ,P <0 0 5 ;伴淋巴结转移的喉鳞癌组分别为 96 88%、10 0 % ,显著高于未转移组 5 2 78%、6 1 11% ,P <0 0 1。T3 T4期MMP 9的表达 (10 0 % )高于T1 T2期 (5 3 33% ) ,P <0 0 1。 (2 )PTEN在异型增生喉上皮中高表达率6 6 6 7% ,显著高于正常喉上皮 (13 33% )P <0 0 1,喉鳞癌中高表达率 4 4 12 % ,阴性表达率为 2 2 0 6 % ,总异常率 (6 6 17% )与正常组 (13 33% )间差异显著 ,P <0 0 5。PTEN高表达率在伴淋巴结转移组 (2 5 0 0 % )低于未转移组 (6 1 11% ) ,P <0 0 5 ;与组织学分级负相关 (P <0 0 1)。 (4 )喉鳞癌中MMP 2与MMP 9表达间呈正相关 ,二者分别与PTEN表达呈负相关。结论 MMP 2、MMP 9表达增强及PTEN表达减弱对喉鳞癌的浸润转移起促进作用且相互协同 ,是喉鳞癌侵袭的重要标志物 ,其中PTEN异常是一早期事件。

肿瘤抑制基因PTEN的研究现状

肿瘤抑制基因PTEN是1997年由三个研究小组发现,现统称为PTEN。PTEN包括N端、C2区域和C端区域。其主要结构功能区位于N端,编码的蛋白与张力蛋白、辅助蛋白同源,参与细胞生长及肿瘤细胞浸润、血管发生及肿瘤转移的调节;并具有磷酸酶活性,参与细胞调控。PTEN的C端可调节PTEN稳定性和酶活性。其C2区域参与正确定位PTEN的催化结构域。PTEN可通过三磷脂酰肌醇激酶途径调节细胞周期;通过FAK途径抑制细胞的浸润、转移;通过蛋白激酶途径参与细胞转化和细胞周期调控。许多原发性肿瘤中都有PTEN缺失,但早期便发生完全缺失的只有子宫内膜癌和卵巢癌,其余病例中的完全失活发生在肿瘤后期,所以PTEN基因的缺失被认为是恶变过程中的后期事件。PTEN突变中有1/3是与以常染色体为主的疾病有关。

血管平滑肌细胞表型改变与肿瘤抑制基因p21^(WAF1)和p53的关系

目的:增殖表型血管平滑肌细胞中肿瘤抑制基因p21WAF1基因和p53基因表达可能具有对抗血管平滑肌细胞的增殖能力,观察血管平滑肌细胞表型变化与肿瘤抑制基因p21WAF1和p53的关系。方法:实验于2003-09/10哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。应用胶原酶消化法建立大鼠原代培养血管平滑肌细胞,去血清诱导体外培养血管平滑肌细胞分化。流式细胞分析检测不同表型血管平滑肌细胞增殖能力,反转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹分析方法检测血管平滑肌细胞分化相关基因平滑肌特异性α-肌动蛋白和calponin表达变化,反转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹杂交方法检测p21WAF1和p53基因表达变化。结果:去血清培养后,原代培养大鼠血管平滑肌细胞增殖能力下降,DNA合成前期细胞明显增加(48.38±2.35)%,细胞分化基因平滑肌特异性α-肌动蛋白和calponin明显表达。肿瘤抑制基因p21WAF1和p53表达下降。在200g/L血清培养后,大鼠血管平滑肌细胞增殖旺盛,DNA合成前期细胞相对较少(28.80±1.58)%,细胞分化相关基因平滑肌特异性肌动蛋白和calponin表达明显下调,肿瘤抑制基因p21WAF1和p53表达显著增加。结论:肿瘤抑制基因表达与血管平滑肌细胞表型状态密切相关。

肝细胞腺瘤肿瘤抑制基因杂合性缺失分析

目的 探讨肿瘤抑制基因杂合性缺失 (LOH)在肝细胞腺瘤 (HCA)发生中的可能作用。方法 采用显微组织切割术从石蜡组织切片中提取DNA ,在聚合酶链式反应 (PCR)基础上进行毛细管电泳DNA测序 ,对 1 2例手术切除的HCA标本进行了视网膜母细胞瘤 1基因 (Rb1 )、腺瘤性息肉病基因 (APC)、结直肠癌突变基因 (MCC)、结直肠癌缺失基因 (DCC) 4种肿瘤抑制基因 (TSGs)LOH检测。结果 4种肿瘤抑制基因LOH发生率分别为Rb1 (2 /7,2 8 5 % )、APC(1 /1 0 ,1 0 0 % )、MCC(0 /5 ,0 % )、DCC(0 /6 ,0 % )。发生LOH的 3例HCA无 1例在手术切除后出现肿瘤复发。结论 HCA的LOH是较为少见的分子事件 ,Rb1和APC基因的LOH可能在少数HCA的发生中起一定作用 。