八肽胆囊收缩素(CCK-8)对抗电针镇痛及电针耐受机理的初步探讨

本文采用电生理学方法,以大鼠丘脑束旁核痛兴奋神经元(PEN)和痛抑制神经元(PIN)的电活动变化为才旨标,在细胞水平上研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)与电针镇痛和电针耐受机理的关系.结果表明:电针大鼠“足三里”穴位可抑制PEN和兴奋PIN的电活动,产生镇痛效应;脑室注射CCK-8可取消电针对PEN和PIN放电的影响;而无硫CCK-8对呈现电针效应的PEN和PIN的电活动无影响.长时间电针(六小时)可使PEN和PIN的放电对再次电针无明显变化,亦即产生对电针镇痛的耐受效应.推测,内源性CCK-8可能参与电针耐受的形成.

家兔中脑导水管周围灰质(PAG)中八肽胆囊收缩素(CCK-8)对吗啡镇痛和电针镇痛的拮抗作用

CCK-8是目前所知作用最强的一种抗阿片肽。我们曾经报告，只要向大鼠脑室注射1-4ng的CCK-8即可显著对抗吗啡镇痛和电针镇痛。为探讨CCK-8的中枢抗阿片作用部位及种属特异性，我们将CCK-8注入家兔PAG，观察其对吗啡镇痛和电针镇痛的影响。

胆囊收缩素八肽拮抗谷氨酸神经毒性作用的病理研究

目的 观察胆囊收缩素八肽 (CCK -8)对谷氨酸神经毒性作用所致神经元病理损害的影响。 方法 采用扫描及透射电镜技术分别观察经不同因素处理后的原代培养的大鼠大脑皮层神经元和经侧脑室注射药物后的大鼠海马CA1 区神经元的形态学变化 ,同时应用生物体视学计量分析法对细胞内线粒体各指标的变化进行比较。 结果 CCK -8在体内外均能明显改善谷氨酸所致神经元胞体、细胞膜肿胀及破溃 ,轴、树突断裂、丢失或线粒体肿胀、数目减少等病理损害。 结论 CCK

胆囊收缩素八肽对猪心肺复苏后脑功能的疗效评价

目的本研究制作心肺复苏（CPR）的猪模型，评价胆囊收缩素八肽（CCK-8）对大动物复苏后体温及脑功能的影响。方法12头国产健康巴马小型猪随机分为两组：对照组（Control组）和CCK-8治疗组（CCK-8组）。经右心室电极放电诱导室颤10min，然后CPR5min，复制CPR猪模型。对照组中，复苏后5min静脉注射生理盐水20mL。CCK-8组中，CCK-8的剂量为44．4μg/kg，溶于等量生理盐水并在复苏后5min静脉注射。复苏后4h内全程监测平均动脉压、心率、右房压、心电图及体温。复苏后2、4、12、24h采血检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）、S100B蛋白（S100B）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。复苏后24h进行神经功能学评分（NDS）。结果与Control组比较，CCK-8并未降低体温，但明显降低复苏后NSE、S100B、IL-6和TNF-α（P〈0．05），并改善NDS（P〈0．05）。结论在CPR猪模型中，CCK-8并未产生诱导低温的作用，但抑制复苏后的炎症反应并改善了脑功能。

八肽胆囊收缩素(CCK_8)的人工合成

本文报道了用液相法合成八肽胆囊收缩素(H-Asp-Tyr(SO_3H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH_2,ccK_8)。先分别合成C-端四肽和N-端四肽,然后缩合成八肽,并用温和的乙酰硫酸吡啶盐(PAS)法使其酪氨酸的酚羟基硫酯化。根据其氨基酸组成,层析行为和生物活性等证实产物为纯品。

豚鼠胆道感染时胆囊收缩素八肽和血管活性肠多肽对胆道Oddi括约肌动力的作用

明确胆囊收缩素八肽(CCK-8)和血管活性肠多肽(VIP)在胆道感染时对胆道Oddi括约肌(OS)动力作用的改变,探索胆道OS动力异常与胆道感染发病机制的关系。方法:建立假手术组和胆道感染的豚鼠动物模型,对其胆道OS动力进行监测;并在外周静脉恒速输入CCK-8和VIP时,监测胆道OS动力的变化。结果:在胆道感染组:(1)静脉输入CCK-8促使胆总管内压力上升的作用增强,对OS的基础压力(BP)的降压作用反转;静脉输入CCK-8时OS时相收缩频率增加远较对照组明显,OS时相收缩明显紊乱。(2)VIP抑制性调节作用在胆道感染期间呈进行性下降,首先是对OS的BP。结论:(1)胆道感染时,CCK-8对胆道OS作用异常,尤其是对OS的BP作用失常,是引起胆道内静水压力梯度建立出现障碍的重要原因。(2)VIP对胆道OS的抑制性调节作用减弱,首先是在OS,可能是引发胆道OS动力紊乱的始发因素之一。

胆囊收缩素-8、β-内啡肽与多巴胺在大鼠癫痫发作中的相互关系

采用核团微量注射、放射免疫分析及荧光分光测定等实验方法 ,探讨了大鼠癫痫发作过程中胆囊收缩素 8、β 内啡肽和多巴胺的相互关系及作用。结果表明 :(1 )海马内注射胆囊收缩素 8,大鼠癫痫发作明显减轻 ;海马内注射L 365和胆囊收缩素 8,胆囊收缩素 8压抑癫痫发作的作用消失 ;(2 )癫痫发作后海马内 β 内啡肽含量显著降低而胆囊收缩素 8含量显著增加 ;(3)大鼠海马内注射胆囊收缩素 8,海马内β 内啡肽含量明显减少 ;若大鼠海马内注射胆囊收缩素 8再诱发癫痫 ,此时大鼠癫痫发作明显减轻 ,海马内 β 内啡肽含量显著降低 ;(4)海马注射 β 内啡肽抗血清后大鼠癫痫发作明显减弱 ,海马内胆囊收缩素 8含量明显升高 ;(5)大鼠海马内注射胆囊收缩素 8,海马内多巴胺含量明显增加。以上结果提示 :胆囊收缩素 8具有压抑癫痫发作作用 ,该作用可能是通过胆囊收缩素 B受体而实现的 ;而内源性β 内啡肽可能具有加强癫痫发作作用 ;胆囊收缩素 8与 β

固定化酶催化合成CCK-8 C-端三肽衍生物

报道胆囊收缩素 (CCK 8)C 末端片段三肽衍生物Phac Met Asp(OMe) Phe NH2 的固定化酶催化法合成 .以Phac Met OCam为起始原料 ,采用三种固定化酶———α 糜蛋白酶 /Celite 5 45、木瓜蛋白酶 /VA Epoxy、嗜热菌蛋白酶 /Celite 5 45 ,经过三步酶促反应得到目标三肽化合物 .对酶的专一性、酶的固定化、溶剂选择和合成条件等进行了研究 。

胆囊收缩素-8对高血压大鼠脑出血后核因子-κB活性的影响

目的：探讨胆囊收缩素-8（cholecystokinin-8，CCK-8）对高血压性大鼠脑出血后血肿周围组织核因子-κB （ Necular Factor Kappa B ，NF-κB）活性的影响。方法取成年SD大鼠72只，体重250～300 g，随机分假手术组（ n ＝12）、脑出血组（ n ＝24）和CCK-8治疗组（ n ＝24）。采用电泳迁移率改变分析方法（electrophoretic mobility shift assay ， EMSA）检测核内NF-κB的活性，用免疫组化方法观察NF-κB在细胞内的表达情况，并用干湿重法测量出血侧脑组织含水量。结果脑出血组各时间点NF-κB的活性以及脑含水量较假手术组和CCK-8治疗均有明显增高（ P ＜0妹．05）。结论脑出血后，脑组织NF-κB的表达明显增加，CCK-8可以有效的抑制NF-κB的活性，这对于减轻NF-κB在脑出血后介导的继发性炎性损害起到了积极的作用。

酶催化法合成CCK-8的一个四肽片段

用酶催化法合成了缩胆囊素 ( CCK-8)的 1个四肽片段 ( Phac-Met-Gly-Trp-Met-OEt) .该四肽片段是依次通过 Phac-Met-OEt与 Gly-OMe· HCl,Trp-OMe和 Met-OEt偶合得到的 ,这 3步偶合反应分别用α-糜蛋白酶、木瓜蛋白酶和α-糜蛋白酶作为催化剂 ,并对影响反应的因素进行了研究 ,反应中间体和产物均经质谱 ( FAB-MS)

八肽胆囊收缩素对中枢神经和小肠痛觉调制机制的研究

八肽胆囊收缩素(CCK-8)是一种典型的脑-肠肽,即存在于中枢神经系统,又存在于胃肠道.近年许多资料表明,CCK-8是迄今发现作用最强的抗阿片物质,在痛觉调制中起重要作用.

中风星蒌通腑胶囊介导CCK-8调控IL-10/STAT3信号通路改善脑出血小鼠的炎症损伤

目的探讨中风星蒌通腑胶囊介导胆囊收缩素八肽(CCK-8)对白细胞介素10(IL-10)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对脑出血小鼠的脑部炎症反应的调控作用及机制。方法将110只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组、脑出血组及中风星蒌通腑胶囊低、中、高剂量组,每组22只。采用胶原酶法建立脑出血模型,模型复制2 h后进行中风星蒌通腑胶囊混悬液灌胃(10 mL·kg^(-1)),假手术组与脑出血组灌以等量的生理盐水。记录小鼠的神经功能学评分及左转率;于术后72 h采用干湿质量法检测脑含水量;于术后72 h采用Western Blot法检测小鼠血肿周围肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)以及Janus激酶1(JAK-1)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)通路蛋白的相对表达水平;于术后第3、5天采用Elisa法检测小鼠CCK-8的相对表达水平;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测IL-10、STAT3的mRNA的表达水平。结果与脑出血组比较,中风星蒌通腑胶囊低、中、高剂量组干预治疗后,第3天及第5天小鼠改良神经功能缺陷(NDS)评分明显降低(P<0.01),低剂量组第3天及第5天左转率降低(P<0.05),中剂量组第3天(P<0.05)及第5天(P<0.01)左转率降低,高剂量组第3天及第5天左转率明显降低(P<0.01)。低剂量组小鼠脑含水量减少(P<0.05),中、高剂量组小鼠脑含水量明显减少(P<0.01)。低剂量组促炎因子TNF-α、IL-6及JAK-1、STAT3、p-STAT3通路蛋白的表达均明显减少(P<0.01),IL-1β表达减少(P<0.05),抑炎因子IL-10表达明显增加(P<0.01);中、高剂量组促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6及JAK-1、STAT3、p-STAT3通路蛋白的表达均明显减少(P<0.01),抑炎因子IL-10表达明显增加(P<0.01)。低剂量组CCK-8的含量在用药后第3天增加(P<0.05),第5天含量明显增加(P<0.01);中、高剂量组CCK-8的含量在用药后第3天及第5天明显增加(P<0.01)。IL-10的mRNA相对表达水平在用药后均明显增高(P<0.01),STAT3 mRNA相对表达水平在用药后均明显降低(P<0.01)。结论中风星蒌通腑胶囊可以增加脑肠肽CCK-8的表达,调控IL-10/STAT3信号通路,从而减轻小鼠脑出血后的继发性炎症反应及细胞毒性脑水肿。

c-fos在CCK-8抗LPS所致的肺动脉平滑肌细胞损伤中的变化

目的 :观察c -fos在八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)减轻脂多糖 (LPS)所致的肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)损伤中的变化。方法 :贴块法培养大鼠PASMC。应用电镜技术和生化方法 ,观察细胞形态和测定细胞丙二醛 (MDA)含量及乳酸脱氢酶 (LDH)释放率 ;台盼蓝染色法记录PASMC蓝染率的变化 ;免疫细胞化学技术检测细胞内c -fos蛋白的表达情况。结果 :CCK - 8可减轻LPS引起的细胞超微结构损伤 ;CCK - 8可降低LPS引起的细胞台盼蓝摄取率、MDA含量与LDH释放率的增高 ;LPS可轻微上调PASMC内c-fos蛋白表达 ,CCK - 8可使该上调作用显著上升。结论 :CCK - 8可减轻LPS所致的PASMC损伤 ;CCK - 8可能通过使c -fos蛋白表达上调来发挥其抗损伤作用。

在尾核痛反应神经元和整体甩尾反射水平上研究CCK-8对抗电针的镇痛作用

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对抗电针(EA)对大鼠尾核(Cd)中痛反应神经元放电和甩尾潜伏期(TFL)痛阈的同时影响。方法采用同步记录大鼠Cd中痛兴奋神经元(PEN)或痛抑制神经元(PIN)电变化与辐射热照大鼠尾所引起TFL的方法。结果(1)辐射热照大鼠尾可使PEN诱发放电增加或PIN诱发放电减少的同时发生甩尾反射,表现出辐射热致疼痛效应。(2)EA双侧“足三里”15min,可抑制PEN的电活动或加强PIN的电活动,同时使TFL延长,即呈现出EA的镇痛效应。(3)脑室(icv)注射CCK-8(10ng/10μl)能同时对抗EA所引起的PEN或PIN和TFL的镇痛作用。结论CCK-8的抗EA镇痛作用,在中枢痛反应神经元电活动和整体行为反射水平上是协调一致的。揭示,PEN和PIN的电活动作为疼痛和镇痛指标是确实可行的。

胆囊收缩素主动免疫对猪生长性能、胴体品质影响研究

试验采用单因子设计,选用健康无病、体格健壮体重约28kg的DLY三元杂交生长肥育阉割猪15头,随机分配到3个处理中,每个处理5个重复,每个重复1头猪。处理1、2和3的猪分别用由0μg、250μg和500μgCCK-8与人血清白蛋白交联后形成抗原进行臀部肌肉多4点注射免疫,免疫的时间分别为试验第1、29、43和59d。试验期74d。结果表明:250μg、500μgCCK-8的CCK-HAS使动物体内产生了较高滴度的CCK抗体,试验43d后达到显著水平(P<0.05);同时抗体有效的中和了血液中的CCK-8,使得试验43d血液中的CCK-8显著降低(P<0.05)。其中250μg处理显著提高全期采食量、日增重,幅度为11.96%、14.62%(P<0.05);而500μg处理对生产性能没有影响。250μg、500μg处理对眼肌面积、4点平均膘厚及部分肉质指标滴水损失、大理石纹、肌肉pH、色度计L值和a值没有影响。

脑卒中后痴呆患者的血浆CCK-8变化及临床意义

采用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定了３９例脑卒中后痴呆、５４例脑卒中后非痴呆患者及２５例正常对照者的血浆胆囊收缩素八肽（ＣＣＫ－８）水平。结果显示，脑卒中后痴呆者的血浆ＣＣＫ－８水平高于非痴呆者（Ｐ＜０．０５），脑卒中者高于正常对照者（Ｐ＜０．０５），脑卒中后非痴呆者与正常对照者无差异（Ｐ＞０．０５）。认为ＣＣＫ－８参与了脑卒中后痴呆的病理生理过程。

胆囊收缩素主动免疫产蛋鸡的营养生理效应研究

用胆囊收缩素(CCK)主动免疫产蛋鸡,研究产蛋鸡血清和卵黄中CCK特异性抗体的产生规律及不同CCK免疫剂量对产蛋鸡生产性能和胰腺、胆囊发育及内分泌激素的影响。结果显示:用CCK 8 主动免疫产蛋鸡,可以提高血清和卵黄CCK抗体水平,降低血液中CCK水平;CCK抗体的产生量在第1 次加强免疫后即可接近高峰,第2、第3次加强免疫可维持较高的抗体水平。CCK主动免疫产蛋鸡后,对蛋鸡胰腺、胆囊发育、胰蛋白含量以及蛋鸡体内的生长激素、胰岛素和瘦素水平均没有显著影响,同时对蛋鸡采食量和料蛋比等生产性能也没有显著影响。用CCK主动免疫产蛋鸡,在不影响蛋鸡正常生理功能的同时,可以获得含特异性CCK抗体的卵黄。