不同基因型甘薯品种胚性愈伤诱导和植株再生试验及福薯604胚性悬浮体系的建立

以福薯604、福菜薯18号、福薯7-6等16个甘薯品种为材料,通过茎尖诱导胚性愈伤,进行愈伤分化再生试验,比较不同基因型品种的愈伤诱导率、愈伤生长状态和植株再生率等的差异,结果表明,胚性细胞的诱导率和再生率因品种的不同而呈现明显差异.试验筛选出诱导率高、胚性愈伤状态好、分化再生率高的品种福薯604,并建立其胚性悬浮体系,测量胚性悬浮细胞的生长量,为甘薯优良品种福薯604遗传转化提供技术支持.

红姜花胚性细胞悬浮体系的建立和原生质体培养

以红姜花(Hedychium coccineum)未成熟花丝和花药为试材,研究了红姜花胚性愈伤组织的诱导、细胞悬浮体系的建立以及原生质体的培养。结果表明:在MS+4mg/L 2,4-D+4mg/L NAA+1mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂上经过120d培养诱导出了愈伤组织,愈伤组织在增殖培养基上经过继代筛选获得浅黄色、松散易碎的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织通过3个月的悬浮培养,得到均质稳定的胚性细胞悬浮系。以胚性悬浮细胞(ECS)为起始材料分离原生质体,酶解试验表明,在原生质体分离过程中,用于原生质体分离的酶液需要保持一定的渗透压以保护原生质体不被破坏。当甘露醇的浓度为0.14mol/L时,原生质体产量最高,达到2.25×105个/mL PCV ECS(packed cell volume,PCV)。在看护培养系统中,原生质体经过7d的培养,细胞第一次分裂,经过14d培养,细胞分裂频率达到12.3%,28d时,细胞团形成频率达到4.2%。所形成的细胞团具有典型的胚性细胞特征。

大豆幼胚子叶胚性悬浮细胞系的建立与次生胚诱导

本研究选用黑龙江省 5个大豆品种的幼胚子叶 ,建立了胚性悬浮培养体系 ,并由悬浮体系增殖产生次生胚。系统探讨了培养基组成和浓度对体细胞胚诱导和悬浮培养物生长的影响 ,以及悬浮体系继代时间与胚成熟率和再生率的关系。结果表明 ,高效体细胞胚诱导培养基为 :MSB +4 0mg/L 2 ,4 -D + 6 %蔗糖。高效球型胚增殖培养基为 10mg/L2 ,4 -D + 1/2MS氮源 + 5mM谷氨酰胺 + 5mM天门冬酰胺。培养 8周后的次生胚成熟率和再生率显著提高 ,到第 12周分别达6 3%和 35 % 。

Studies on Parameters Affecting Embryogenesis of Protoplasts Isolated from Suspension of Embryogenic Cells in Loblolly Pine

Protoplasts of embryogenic suspension cells of loblolly pine (Pinus taeda L).were isolated at exponential growth stage.Influences of various concentrations of basal medium,levels of BA,and concentrations of inositol on the differentiation of embryonal suspensor mass (ESM),early stage somatic embryos (ESE) ,and lae stage somatic embryos (LSE) were investigated .A study of the effect of various concentrations of LP basal medium sowed that the optimal basal medium concentration of ESM,ESE,and LSE differentiation was 1.25 LP medium.The effects of various levels of BA and inositol showed that the optimal concentrations of BA for the formation of ESM,ESE and LSE were 4 mg/L ,2mg/L and 1mg/L,respectively ,and the optimal concentrations of inositol for the ESM ,ESE and LSM formation were 400mg/L,800mg/L and 1,200mg/L,respectively.