红宝石无核葡萄胚珠培养成苗技术研究

以自然授粉的红宝石无核为试材,观察了胚珠生长状况,对胚珠离体培养与成苗技术进行了探索,结果表 明:红宝石无核的胚珠发育在花后35 d是其胚挽救的最佳时期。此时,取出胚珠接种在Nitsch+IAA 2.0 mg/L+GA 0.4 mg/L,附加水解酪蛋白100mg/L,活性炭2g/L的培养基中培养120 d,胚发育率为58％,后将胚珠切开处理并转接 到胚萌发培养基1/2MS+6-BA 0.5 mg/L中萌发,萌发率为16％,在1/2MS+6-IBA 0.2mg/L培养基上成苗,小苗生长 最好。通过前期保湿等措施,小苗移栽成活率达100％。

早熟和特早熟桃胚珠培养研究

本文以自然授粉的‘春蕾’、‘沪017’、‘布目早生’、‘1-4-8’、‘7-6-9’的胚珠为试材,研究了早熟和特早熟桃胚珠培养胚成苗的有关影响因素。本试验5个品种(品系)的结果表明,桃品种或品系的果实生育期愈短,胚珠培养胚的成苗率愈高,特早熟桃‘春蕾’花后48天的胚珠培养在改良S H培养基附加BA1.0mg/1+IAA1.0mg/1上30天,将长大的幼胚转移至TM培养基上,胚的成苗率达75％。此外,作者对胚珠培养技术在桃育种中的应用范围及其培养程序开展了讨论。

与四倍体杂交的无核葡萄胚珠培养获得三倍体植株

以四倍体葡萄为父本，与二倍体无核葡萄杂交，取其胚珠培养获得三倍体植珠。胚珠培养的三倍体胚发育率为3．0％～8．3％，成苗率为0．5％～5．0％。根尖细胞染色体计数57条。在圃场内栽培的三倍体植株花而不稔。用GA325mg／L处理可获得良好的果穗。试验表明，无核葡萄胚珠培养是葡萄三倍体育种的一条新途径。

猕猴桃种间远缘杂交胚珠培养

狗枣猕猴桃(Actinidiakolomikta)在远缘杂交过程中容易落果,无法获得杂交后代,针对这一问题以中科院武汉植物园猕猴桃资源圃中狗枣猕猴桃为母本,4倍体中华猕猴桃雄株(A.chinensis)为父本进行种间远缘杂交,授粉后29、45d小心剔取胚珠接种于培养基上,4℃条件下暗处理2周后转移至光下培养,每4周继代1次,当幼苗生长高度达3cm以上且根系发达时炼苗移栽。结果显示,培养基MS+GA30.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.0mg/L上,胚珠的萌发率最高,达到36.67%,在培养基MS+GA30.5mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L上,幼苗长势好,而培养基1/2MS+IBA0.7mg/L对根系的发育具有良好的促进作用。

大败育型无核葡萄胚珠培养成苗技术研究

将金星×郑州早红的杂交葡萄果穗在授粉后 60 d采回 ,取出胚珠接种在 1 /2 MS无激素的液体培养基中培养 ,经1 2 0 d后转接到不同处理的培养基中促进胚萌发。试验结果表明 ,1 /2 MS培养基加 BA0 .2 mg/L结合低温处理 3 0 d的培养条件 ,胚萌发率和成苗率最高 ,所获植株占萌发胚的 86% ,占培养胚珠的 45 % 。

白木纳格葡萄败育型胚珠培养研究

【目的】研究白木纳格葡萄败育型胚珠离体培养的最优方案,为木纳格葡萄胚挽救育种技术的研究奠定基础。【方法】以花后不同天数的白木纳格葡萄败育型胚珠为试材,进行离体培养,研究接种时间、基本培养基种类I、BA浓度以及活性炭对胚珠发育率的影响。【结果】白木纳格葡萄败育型胚珠取样适宜期为DAF35至DAF40,离体培养后,胚珠发育率均可达到50%以上,其中DAF 40 d为最佳取样时间,胚珠发育率可达到61.07%。在IBA 1.5 mg/L,GA30.5 mg/L,蔗糖60 g/L,琼脂5 g/L,活性炭1 g/L的Nitsch培养基中,白木纳格葡萄败育型胚珠发育率最高。【结论】建立了适合白木纳格葡萄败育型胚珠培养体系。

无核葡萄胚珠培养技术研究

对以无核葡萄为母本的9个杂交组合的杂交后代及无核品种的实生后代进行了胚珠培养。结果表明,母本对胚萌发率起着关键作用;大果的胚珠萌发率高;金星无核的最佳胚珠培养基为N itsch+水解酪蛋白100mg/L+活性炭2.0g/L+IAA 1.8mg/L+GA 0.4mg/L+糖20g;喙切可以大大提高金星无核胚珠的萌发率。研究了异常苗、畸形苗、白化苗的成苗情况,确定了相应的成苗培养基;并建立了各杂交组合后代和不同品种的实生后代适宜的快繁培养基。

柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究

选用‘椪柑’、‘锦橙’、‘桃叶橙’、‘华农本地早’花后7周幼果胚珠进行培养.其胚状体发生的百分率分别是:48.5%、21.2%、19.8%、6.4%;胚性愈伤组织则为:28.2%、13.5%、15.8%、5.8%.各品种胚状体和胚性愈伤组织发生的百分率明显不同.与品种胚数多少相一致.不同激素和有机物对柑桔胚珠培养、胚状体的发生及胚性愈伤组织形成产生不同的影响.多单胚的‘华农本地早’仅从基本培养基中产生胚状体和胚性愈伤组织.胚珠培养中,胚状体发生的方式,根据来源不同分为三种:第一种是由胚珠(或已黄的球形胚上)长出白色的胚性愈伤组织,继而产生胚状体:第二种是在已分化的幼苗下胚轴或根部产生胚性愈伤组织和胚状体;第三种是在畸形胚上直接不断的分化出胚状体.

胚珠培养获得秘鲁番茄与栽培番茄种间杂种具有非温敏抗根结线虫基因Mi-3

以含有Mi-3抗根结线虫基因的秘鲁番茄(Lycopersiconperuvianum)LA2823为父本,栽培番茄(Lycop-ersicon esculentum)高代优良自交系为母本,授粉后20～30d摘取幼果.将从幼果中分离出的直径大于2mm的胚珠放置在营养分化培养基上培养.2～4周后胚芽、胚根分别由两端伸出.培养的胚珠还可以通过体细胞胚发生途径产生胚芽.获得的种间杂种对根结线虫的抗性表型与野生种父本完全相同,在植物学性状上亦与其父本秘鲁番茄更相近.以栽培番茄为母本进行回交,成熟果实与母本相似,但其种子即使放置在MS培养基上也不能萌发.对回交种子胚败育现象进行了探讨.

无核葡萄杨格尔的胚发育及胚珠培养

早熟无核葡萄杨格尔的胚珠可正常受精。绝大多数受精旺在花后27～33天开始败育,仅个别胚可继续发育至大球形胚甚至心形胚。当胚发育最为充分而又尚未败育时取胚珠进行培养,存活胚的比例较高。胚珠培养的培养基内附加低浓度秋水仙碱对无核葡萄胚珠内胚的离体发育有良好的促进作用。胚珠培养萌发成苗的技术尚需要进一步系统的研究。

极早熟葡萄胚珠培养技术的研究

简化极早熟葡萄胚胎培养的操作,提高萌发成苗率及培养健壮幼苗技术的研究结果表明:胚珠横切半处理不仅可以提高胚的萌发成苗率,促使试管实生苗健壮生长,而且操作极简便;筛选出了胚珠内胚萌发成苗的最佳激素浓度组合和最适培养基;胚龄和充分的低温处理也是提高胚萌发成苗率,培养健壮幼苗的两大关键因素。

碳源和凝固剂对棉花胚珠培养基pH的影响

本文比较分析了二糖蔗糖、麦芽糖、乳糖和单糖葡萄糖、果糖、半乳糖共６种碳源；０．８％琼脂，０．２％Ｇｅｌｒｉｔｅ和液体三种凝固剂处理对棉花胚珠Ｂｔ培养基ｐＨ值的影响。试验结果表明，培养基分别经高温高压灭菌和贮存６周后，其ｐＨ值均有不同程度的降低。如果综合考虑碳源和凝固剂对培养基ｐＨ值的影响，那么在碳源中二糖就应采用蔗糖，在单糖中就应采用葡萄糖；在凝固剂中以采用０．８％琼脂较好。碳源和凝固剂通过对培养基ｐＨ的影响而会最终影响棉花胚珠离体纤维的发育。

不同接种时期对三个无核葡萄品种胚珠培养的影响

以自然授粉的3个假单性结实类型(种子败育型)无核葡萄品种为试材,在初花期后不同时间采回幼果,取出幼胚接种在发育培养基中进行离体培养,研究不同接种时期对胚珠发育和萌发状况的影响。结果表明,奇妙无核在初花后50～54d接种,胚珠发育率在50.0%以上,最高可达71.0%,随着时间的推移其发育率迅速下降;红宝石无核在初花期后51d接种,发育胚百分率最高达63.3%,其后百分率逐渐降低。2个品种的合子胚从产生到败育可跨越35d左右的时间。因此,奇妙无核与红宝石无核非常适合用于无核品种的胚培养。布朗无核胚败育的时期到来的早,且胚的发育率均远远低于其他2个品种,不宜用作胚培养。

花药、未授粉胚珠培养技术及其在甜菜育种中的应用

在以MS为基本培养基并附加各种植物激素和生理活性物质的一系列培养基中,通过甜菜花药和未授粉胚珠培养,获得大量的单倍体植株或突变体,为育种刨造新的材料。未授粉胚珠培养较花药培养有较大的优越性,不但诱导率高且出苗材料广泛,80％以上的不同基因型材料均可诱导出苗;在对其株系后代进行遗传性状观察鉴定中,初选出一批高糖纯合系和产质量优良的组合,经2～3年小区鉴定试验,根产量较对照种增加15.7～23.9％,含糖提高1.9～2.8度,产糖量较对照增加34.4％～41.7％。

用胚珠培养技术培养棉属种间杂种

棉花的种质资源丰富,即有栽培种,又有野生种,且两者的性状不同,如野生种具有栽培种没有的抗逆、抗虫和抗病性,栽培种则具有高产优质等性状,将两者结合起来一直是棉花育种学家努力探讨的工作,但由于远缘杂交的不亲和性。

青白杨派间杂交的胚珠培养研究

对由8个白杨派基因型和5个青杨派基因型所组成的13个青白杨派间杂交组合进行胚珠培养试验研究。结果表明:三交要明显好于单交;培养基对胚珠培养影响不大,较合适的培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1;基因型TB03做母本培养效果优于TB04;随着授粉时间延长,胚珠萌发率也越高。

IBA、GA_3对无核葡萄胚珠培养的影响

对几个无核葡萄进行胚珠培养时发现:IBA、GA3均能促进无核葡萄的胚发育,对于胚发育程度较好、败育时期较晚的金星无核来说,IBA(1.0 mg/L)+GA3(0.2 mg/L)效果较好;IBA(1.0 mg/L)+GA3(0.4 mg/L)效果最好,胚发育率较CK提高25.6%,而且转接后能获得正常的植株。对于胚在发育早期即败育的布朗无核、希姆无核来说,进行胚珠培养时IBA、GA3的浓度越高胚发育率越高,希姆无核比布朗无核更明显。

杏胚珠培养及幼胚子叶不定芽诱导研究

以盛花后25、35、50、55、60d的凯特杏胚珠为外植体,研究胚珠培养的适宜条件;选择发育一致的幼胚子叶,研究不定芽的发生条件。结果表明,SH培养基是凯特杏胚珠培养的适宜培养基;盛花后25d的凯特杏胚珠(PF=0),仅采用生长培养不足以发育成可见胚,试验采用诱导方式获得了可见胚,诱导出胚率为80%;以MS为基本培养基,BA与NAA结合诱导能力强;但这种胚小且瘦弱,继续生长培养,利用幼胚子叶诱导不定芽。在幼胚子叶诱导不定芽方面,盛花后25、35d取样的凯特杏胚珠,培养后获得幼胚子叶,诱导不定芽的适宜TDZ质量浓度为1.25mg/L,诱导出芽率分别为85.00%、80.00%;盛花后50、55d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为2.50mg/L,出芽率分别为65.00%、60.00%,而盛花后60d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为5.0mg/L,出芽率为61.11%,不定芽主要发生在子叶的近轴面、胚轴连接处及子叶近轴端两侧;在相同培养基中,25℃进行21d暗培养,盛花后35、50、55、60d材料出芽率分别为72.22%、65.00%、60.00%、55.56%;4℃下28d暗培养,35、50、55、60d依次为59.09%,71.42%、77.78%、86.36%;对不定芽进行伸长、生根与快繁培养,获得了健康正常的植株。通过以上研究,建立了凯特杏幼胚4级培养体系,即(1)胚珠培养,获得可见胚(1级培养);(2)幼胚生长培养(胚培养),获得了健壮幼胚(2级培养);(3)幼胚子叶再生,获得不定芽(3级培养);(4)不定芽组培苗快繁(4级培养)。