达格列净联合二甲双胍对格列美脲治疗血糖控制不佳的老年T2DM患者血糖及胰岛β细胞功能的影响

目的观察达格列净联合二甲双胍对格列美脲治疗血糖控制不佳的老年2型糖尿病(T2DM)患者血糖及胰岛β细胞功能的影响。方法选取2022年1月—2024年1月南昌市洪都中医院收治的格列美脲治疗血糖控制不佳的老年T2DM患者96例,按照随机数字表法分为研究组(n=48)和对照组(n=48)。研究组给予达格列净联合二甲双胍治疗,对照组给予二甲双胍治疗,2组均治疗3个月。比较2组治疗前后血糖、胰岛β细胞功能指标及不良反应。结果治疗3个月后,2组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)低于治疗前,空腹胰岛素(FINS)、餐后2 h C肽(2 hCP)水平及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、改良β细胞功能指数(MBCI)、胰岛素生成指数(IGI)、口服葡萄糖胰岛素敏感性指数(OGIS)高于治疗前,且研究组FPG、2 hPG水平及HOMA-IR低于对照组,FINS、2 hCP水平及HOMA-β、MBCI、IGI、OGIS高于对照组(P<0.05或P<0.01)。研究组不良反应总发生率为10.42%,与对照组的16.67%比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.801,P=0.371)。结论格列美脲治疗血糖控制不佳的老年T2DM患者应用达格列净联合二甲双胍能降低血糖水平,改善胰岛β细胞功能,且未增加药物不良反应发生风险,安全性较高。

葛根芩连汤在糖尿病患者治疗中的应用及对其糖脂代谢、胰岛β细胞功能的影响研究

糖尿病患者,予葛根芩连汤,评析影响。方法 患者64例(2023.01~2023.12收治),按治疗方案差异性,等分参照组、试验组,前者、后者分别行常规治疗、常规+葛根芩连汤治疗。对两组治疗价值进行差异性分析。结果 试验组糖脂代谢、胰岛β细胞功能、中医证候积分<参照组(P<0.05);而不良反应(P>0.05)。结论 葛根芩连汤治疗安全可行,有助糖尿病患者病情好转与康复,值得优选。

山奈酚调节cAMP/PKA/CREB信号通路对STZ诱导糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的:探讨山奈酚(Kae)调节cAMP/PKA/CREB信号通路对STZ诱导糖尿病(DM)大鼠胰岛β细胞凋亡的影响。方法:将60只大鼠分为将SD大鼠分为空白对照(CK)组、Model组、Kae低剂量(Kae-L)组、Kae高剂量(Kae-H)组、Kae-H+cAMP抑制剂(H-89)组,每组12只。血糖仪检测大鼠血糖(FPG);ELISA法检测血清空腹胰岛素(FINS)和胰腺组织IL-10、IL-6、TNF-α、cAMP水平;试剂盒检测胰腺组织MDA含量、SOD和CAT活性;HE染色观察胰腺组织形态;醛品红-橙黄G染色观察胰岛β细胞凋亡;Western blot检测胰腺组织cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、PKA、CREB蛋白表达。结果:与CK组相比,Model组大鼠胰岛细胞不完整,胰岛细胞与周围细胞界限模糊,胰岛萎缩,胰岛中胰岛β细胞数量减少,FPG、FINS、HOMA-IR水平、胰腺组织中IL-6和TNF-α水平、MDA含量、cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平显著升高,胰腺组织中IL-10和cAMP水平、SOD和CAT活性及Bcl-2、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与Model组相比,Kae-L和Kae-H组大鼠胰岛细胞形态有明显改善,胰岛中胰岛β细胞数量增多,FPG、FINS、HOMA-IR水平、胰腺组织中IL-6和TNF-α水平、MDA含量、cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平显著降低,胰腺组织中IL-10和cAMP水平、SOD和CAT活性及Bcl-2、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高(P<0.05);H-89可减弱Kae对DM糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的改善作用(P<0.05)。结论:Kae通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路可减轻炎症和氧化应激,降低胰岛β细胞凋亡。

达格列净联合胰岛素泵强化治疗对糖尿病患者胰岛β细胞功能及血糖控制的影响

目的探讨达格列净联合胰岛素泵强化治疗糖尿病(diabetes mellitus,DM)的临床疗效及其对胰岛β细胞功能、血糖控制的影响。方法选取2022年7月—2023年7月福建省三明市中西医结合医院收治的100例DM患者,按治疗方法不同分为两组,各50例。对照组采用胰岛素泵强化治疗,观察组采用达格列净联合胰岛素泵强化治疗。比较两组胰岛β细胞功能指数、首次达标时每日胰岛素用量、停泵前每日胰岛素用量、血糖达标时间及血糖指标。结果治疗后,观察组胰岛β细胞功能指数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组首次达标时每日胰岛素用量、停泵前每日胰岛素用量以及血糖达标时间均优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,两组空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白均下降,但两组血糖指标比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论达格列净联合胰岛素泵强化治疗DM,可改善患者胰岛β细胞功能,且血糖控制效果更加理想,有助于患者血糖值趋于正常。

血液灌流联合序贯血液透析滤过对糖尿病肾病患者胰岛β细胞功能、营养状态及炎症反应的影响

目的探讨血液灌流联合序贯血液透析滤过对糖尿病肾病(DN)患者胰岛β细胞功能、营养状况及炎症反应的影响。方法选择2020年2月至2023年2月南阳市中心医院收治的100例DN患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组50例。对照组患者采用序贯血液透析滤过治疗,观察组患者采用序贯血液透析滤过联合血液灌流治疗。分别于治疗前、治疗6个月后,测量2组患者的体质量和身高,计算体质量指数(BMI);应用皮脂厚度计测量肱三头肌皮皱厚度(TSF);采用主观综合性营养评分(SCA)评估患者营养状况;抽取2组患者空腹静脉血,采用放射免疫分析法测定空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和稳态模型胰岛素分泌指数(HOMA-β);应用全自动生化分析仪测定血胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;酶联免疫吸附法测定血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果治疗前,对照组与观察组患者的HOMA-β、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗后的FINS、HOMA-IR显著低于治疗前,HOMA-β显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组患者的FINS、HOMA-IR显著低于对照组,HOMA-β显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者的BMI、TSF、SGA比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者的BMI、TSF、SGA显著高于治疗前,且观察组患者的BMI、TSF、SGA显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗后的TC、TG、LDL-C水平显著低于治疗前,HDL-C水平显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组患者的TC、TG、LDL-C水平显著低于对照组,HDL-C水平显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6水平显著低于治疗前,且观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6水平显著低于对照组(P<0.05)。结论序贯血液透析滤过联合血液灌流可显著改善DN患者胰岛β细胞功能、营养状况和脂代谢水平,抑制炎症反应。

热量限制对db/db小鼠胰岛β细胞退分化的影响

目的 研究热量限制(CR)在改善db/db小鼠胰岛β细胞退分化中的作用。方法 选取3周龄的db/db小鼠,随机分为自由进食(db-FD)组和CR(db-CR)组,相同周龄的雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照(C-FD)组。C-FD和db-FD组自由进食,db-CR组每日进食量为C-FD组的60%。饮食干预6 w,每周测小鼠体质量、空腹血糖。干预结束后,检测糖耐量、胰岛素耐量、空腹胰岛素水平、胰腺胰岛素含量;免疫组化检测胰岛结构和形态;胰岛RNA-seq分析寻找热量限制后表达改变的胰岛β细胞功能相关基因;免疫荧光染色检测胰岛β细胞特异转录因子和退分化相关蛋白的表达。结果 饮食干预期间db-CR组体质量(2~6 w)和空腹血糖(4~6 w)较db-FD组明显减轻(P<0.05)。干预结束时,与db-FD组相比,db-CR组糖耐量和胰岛素耐量明显改善,胰腺胰岛素含量明显提高(P<0.05),胰岛结构完整,胰岛素淡染区减少。RNA-seq分析和免疫荧光染色显示,db-CR组胰岛β细胞特异转录因子[胰腺十二指肠同源蛋白(Pdx)1,NK6同源框1(Nkx6.1)]表达升高,退分化相关因子乙醛脱氢酶家族1成员(Aldh1)A3表达减少,叉头盒(FOX)O1表达升高。结论 CR可通过减少β细胞退分化改善db/db小鼠胰岛β细胞功能。

黄连大黄药对调控ROS/NF-κB/GSDMD信号通路对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞焦亡的影响

目的基于活性氧(reactive oxygen species,ROS)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)焦亡信号通路探讨黄连大黄药对发挥2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)胰岛β细胞保护作用的分子机制。方法选取自发性T2DM大鼠—Goto-Kakizaki(GK)大鼠构建动物模型,24只符合成模标准的GK大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.1 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄连大黄高剂量组(4.72 g·kg^(-1)·d^(-1))及低剂量组(2.36 g·kg^(-1)·d^(-1)),并随机选取6只正常Wistar大鼠设为正常组,连续灌胃干预8周后采用免疫荧光法检测大鼠胰腺组织胰岛素(insulin,INS)阳性表达,RT-PCR法检测细胞增殖相关细胞周期蛋白D1(cyclin D1,CCND1)、髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-Myc)mRNA表达,TUNEL染色检测胰岛细胞死亡,流式细胞术检测ROS水平,Western blot法检测NF-κB p65、GSDMD及消皮素D N端片段(gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白的表达,ELISA法检测白介素1β(interleukin 1β,IL^(-1)β)水平。结果与正常组比较,模型组大鼠胰腺组织INS平均光密度值显著降低,CCND1、c-Myc mRNA表达显著下调,TUNEL阳性率、ROS水平和NF-κB p65、GSDMD-N蛋白表达以及IL-1β水平均显著升高(P均<0.01);与模型组比较,黄连大黄低剂量组INS平均光密度值有效升高,CCND1、c-Myc mRNA表达有效上调,TUNEL阳性率、ROS水平以及NF-κB p65、GSDMD-N蛋白表达、IL-1β水平均明显降低(P<0.01,P<0.05),黄连大黄高剂量组仅c-Myc mRNA表达有效上调,NF-κB p65蛋白表达明显降低(P均<0.05)。结论黄连大黄药对可能通过ROS/NF-κB/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡,促进增殖进而起到保护T2DM大鼠胰岛β细胞的作用。

METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用

背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。

人诱导多能干细胞来源功能性胰岛β细胞的体外定向分化方法的建立

1型糖尿病是由胰岛β细胞功能受损、胰岛素分泌不足所致,目前,主要通过外源性胰岛素补充来治疗,但外源性胰岛素无法精准调控血糖,严重低血糖可危及生命。胰岛移植是一种替代疗法,但面临器官供体不足和异种来源胰岛β细胞存在人畜共患病交叉感染风险的问题。因此,获得足量且安全的胰岛β细胞是1型糖尿病细胞治疗面临的难题。本研究旨在通过人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)在体外向胰岛β细胞分化,提供一种潜在的1型糖尿病治疗新策略。为实现这一目标,我们采用了结合2D和3D培养系统的分化策略,模拟胰岛β细胞的体内发育环境,并使用多种生长因子调节在胰腺发育和β细胞分化中发挥重要作用的关键信号包括Notch信号通路(Notch signaling pathway)、Wnt信号通路(Wnt signaling pathway)、TGF-β/Smad信号通路(TGF-β/Smad signaling pathway)等,在体外将hiPSC定向诱导分化至胰岛β细胞。结果显示,在2D、3D结合的培养条件下,分化过程中定型内胚层细胞,胰腺祖细胞,胰腺内分泌细胞及胰岛β细胞阶段的特异性基因的表达显著提高(P<0.05),并在胰岛素含量及葡萄糖刺激后表现出显著增强的胰岛素分泌能力(P<0.05)。总之,本研究成功建立了一种从hiPSC到功能性胰岛β细胞的分化策略,为1型糖尿病提供了一种新的细胞治疗途径。这种方法不仅为研究胰岛β细胞的发育生物学提供了新的工具,也为临床应用提供了一种潜在的胰岛β细胞来源,有望解决现有治疗方法的局限性。

1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞铁死亡的干预作用及机制

目的 研究1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞铁死亡的干预作用及机制。方法 使用高糖作用于小鼠胰岛β细胞以建立细胞铁死亡模型,考察低、高剂量1,8-桉叶油素(0.25、0.5μmol/L)对胰岛β细胞中Fe2+水平的影响,并考察1,8-桉叶油素(0.5μmol/L)联合铁死亡诱导剂Erastin(20μmol/L)和抑制剂Ferrostatin-1(20μmol/L)后对胰岛β细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、环氧合酶2(COX2)蛋白表达的影响。采用高脂高糖饲料饲养联合腹腔注射链脲佐菌素构建2型糖尿病小鼠模型,考察低、高剂量1,8-桉叶油素(50、200 mg/kg)对模型小鼠胰腺组织病理形态、铁含量以及GPX4、COX2蛋白表达的影响。结果 细胞实验结果显示,与模型组比较,经1,8-桉叶油素干预后,胰岛β细胞中Fe2+水平显著降低(P<0.05);GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05),COX2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且联合Ferrostatin-1后上述两种蛋白表达趋势相同,而联合Erastin后差异无统计学意义。动物实验结果显示,与模型组比较,经1,8-桉叶油素干预后,小鼠胰岛结构恢复完整,形态有所改善;胰腺组织中铁含量和COX2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞损伤具有明显的改善作用,其作用机制可能与降低细胞内铁沉积以及调控铁死亡相关蛋白有关。

轻断食对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的作用及其机制研究

目的探讨轻断食对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗以及胰岛β细胞AMPK-mTOR-ULK1自噬信号通路的影响及其可能的机制。方法46只雄性Wistar大鼠中随机选取6只作为正常对照组(给予普通饲料饲养4 w),其余40只大鼠建立2型糖尿病模型(给予高脂饲料饲养,每5天腹腔注射1次STZ 25 mg/kg体重,共4 w)。40只2型糖尿病大鼠模型建立成功后,根据干预的不同分为模型组、模型+轻断食组、模型+运动干预组、模型+药物干预组、模型+运动+轻断食组。所有干预组大鼠同时每5天腹腔注射1次小剂量STZ 25 mg/kg体重,正常对照组同时每5天腹腔注射1次生理盐水0.5 mL/100 g体重。干预结束行简易糖耐量试验(OGTT),检测各组大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素水平,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),评价干预效果。Western-blot法检测干预前、后大鼠胰腺组织中AMPK-mTOR-ULK1信号通路及自噬相关蛋白腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化-AMPK(p-AMPK)、哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化-mTOR(p-mTOR)、UNC-51样激酶1(ULK1)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白-1(Beclin-1)的表达水平。结果与模型组大鼠比较,模型+轻断食组、模型+运动+轻断食组大鼠的空腹血糖、空腹胰岛素及服糖后2 h血糖水平、HOMA-IR水平显著降低(P均<0.05);大鼠胰腺组织Beclin-1、p-AMPK、ULK1表达均显著降低,p-mTOR表达明显升高(P<0.05)。与模型组大鼠比较,模型+运动+轻断食组的HOMA-β水平显著升高(P<0.05),大鼠胰腺组织中的LC3表达显著降低(P<0.05)。结论轻断食干预对2型糖尿病大鼠具有改善胰岛素抵抗、提升胰岛β细胞功能的作用,并影响细胞自噬AMPK-mTOR-ULK1信号通路。

二甲双胍对消化道恶性肿瘤合并糖耐量异常患者胰岛β细胞功能的影响

目的分析二甲双胍对恶性消化道肿瘤合并糖耐量异常患者胰岛β细胞功能的影响。方法选取2019年6月至2023年6月在联勤保障部队第908医院就诊的120例恶性消化道肿瘤合并糖耐量异常患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为二甲双胍治疗组及治疗对照组,各60例,另选取同期在联勤保障部队第908医院体检的60例健康人群作为健康组。比较3组空腹血糖(GLU0)、空腹乳酸(LA0)、稳态模式评估法胰岛素分泌指数(HOMA-β)、糖负荷30 min后胰岛素增量和血糖增量(ΔINS30/ΔGLU30)比值、糖负荷30 min后乳酸(LA30)、糖负荷30 min后乳酸增量和血糖增量(ΔLA30/ΔGLU30)比值、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果治疗对照组GLU0、LA0、TNF-α、IL-6水平及ΔLA30/ΔGLU30比值高于健康组和二甲双胍治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍治疗组HOMA-β、ΔINS30/ΔGLU30比值低于健康组,而高于治疗对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍可有效减轻炎症反应,改善恶性消化道肿瘤合并糖耐量异常患者胰岛β细胞功能不全和糖代谢障碍。

胰岛β细胞去分化与2型糖尿病

最新的流行病学数据显示,截止2018年,我国糖尿病患病率已上升至12.4%,在非传染性疾病中仅次于心血管疾病和肿瘤,是严重威胁我国人民健康的常见病、多发病[1],其中绝大多数为2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)。胰岛β细胞数量减少与胰岛素分泌功能障碍是T2D的病理生理学基础之一。以往认为,β细胞减少与细胞凋亡相关,近十年的研究发现β细胞去分化是T2D进程中β细胞衰竭的主要原因。本文就β细胞去分化的特征、原因和机制等最新研究进展做一综述,为更深入地了解T2D的发病机制和干预方法提供参考。

Circ_ZFYVE1对胰岛β细胞周期和自噬的影响

目的:观察Circ_ZFYVE1(cZFYVE1)对小鼠胰岛β细胞(MIN6)周期和自噬的影响。方法:Sanger测序分析验证cZFYVE1的环化位点;MIN6细胞分为正常组(NC,含葡萄糖浓度5.5 mmol/L)、高糖1组(HG1,含葡萄糖浓度15 mmol/L)和高糖2组(HG2,含葡萄糖浓度25 mmol/L)进行培养48 h,qRT-PCR法检测NC组、HG1组和HG2组cZFYVE1表达水平;慢病毒转染实验构建空载体组(sh-NC)、稳定过表达cZFYVE1组(circ-ZFYVE1)和稳定敲低cZFYVE1组(si-cZFYVE1)。qRT-PCR法检测转染后各组MIN6细胞中cZFYVE1基因的表达量;流式细胞术检测各组细胞周期百分率;透射电子显微镜观察各组细胞自噬小体和细胞器的变化;免疫荧光法检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin-1荧光强度;Western Blot法检测各组细胞周期调节蛋白Cyclin D1以及自噬相关蛋白Beclin-1、P62和LC3-Ⅱ的表达水平。结果:Sanger测序证实cZFYVE1存在环化剪接位点。qRT-PCR结果显示,与NC组相比,HG1组和HG2组cZFYVE1表达水平降低,HG2组cZFYVE1水平较HG1组表达降低(P<0.01)。与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组cZFYVE1表达升高,si-cZFYVE1组cZFYVE1表达降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组G1期细胞百分率降低,S期细胞百分率升高,G2期细胞百分率升高,si-cZFYVE1组G1期细胞百分率升高,S期细胞百分率降低,G2期细胞百分率降低(P<0.01)。透射电镜结果显示,与sh-NC组比较,si-cZFYVE1组自噬体减少。免疫荧光结果显示,与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组自噬相关蛋白Beclin-1免疫荧光强度升高,si-cZFYVE1组Beclin-1免疫荧光强度降低(P<0.01)。Western blot结果显示,与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达水平升高,自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达水平升高,P62表达水平降低,si-cZFYVE1组Cyclin D1蛋白表达水平降低,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低,P62蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:Circ_ZFYVE1可能促进MIN6胰岛β细胞自噬并影响细胞周期。

α-葡萄糖苷酶低表达对胰岛β细胞形态、增殖能力、炎症及氧化应激反应的影响

目的观察α-葡萄糖苷酶(GAA)低表达对胰岛β细胞形态、增殖能力、炎症反应及氧化应激反应的影响,以探讨GAA在糖尿病发病机制中的潜在作用。方法分别用siRNA1、2、3、4序列干扰胰岛素瘤胰岛β细胞(βTC6细胞)中GAA的表达,结果siRNA4序列的干扰效果最好,将其作为后续实验的干扰序列。将βTC6细胞随机分为siRNA组、阴性对照组(NC组)、空白对照组(Con组)。siRNA组转染siRNA4序列,以降低GAA的表达;阴性对照组转染siRNANC序列;Con组不进行任何处理。在细胞培养24、48、72和96 h,用CCK8法观察各组细胞增殖能力;培养48 h,使用倒置显微镜观察各组细胞数目及形态,采用Western blotting法检测细胞中炎症因子IL-6和IL-1β蛋白,免疫荧光法检测细胞中活性氧(ROS)。结果与Con组和NC组相比,siRNA组在显微镜下细胞数目增加,细胞间隙变小,培养24、48、72、96 h的细胞OD值均升高,培养48 h的细胞IL-6、ROS降低(P均<0.01)。Con组与NC组上述指标比较,P均>0.05。结论GAA低表达可使胰岛β细胞形态改变,增殖能力提高,炎症反应及氧化应激反应减弱;GAA可能通过使胰岛β细胞形态改变、增强炎症反应及氧化应激反应而参与糖尿病的发病过程。

基于“胰脾一体”观点探讨2型糖尿病胰岛β细胞功能障碍的中医辨治

“胰脾一体”观点认为,现代解剖学胰腺是中医“脾脏”的重要组成部分,是中医“脾脏”发挥生理功能的核心器官。2型糖尿病胰岛β细胞功能不全患者往往存在脾气虚弱、脾不散精、脾阴不足、脾络不畅等多种病理交叠状态。因此,在实际临床诊疗过程中,应注重从“脾”论治2型糖尿病胰岛β细胞功能障碍,常用治法为健脾气、散脾精、滋脾阴、通脾络,使得脾气旺而精得散,脾阴足而精自生,脾络和而气行健,最终实现胰岛素分泌稳态平衡,改善胰岛功能。

人参发酵萃取物促斑马鱼胰岛β细胞再生作用研究

目的人参作为一种传统中药,其含有抗氧化、抗炎、抗衰老等多种活性物质。许多研究报道其具有预防与治疗糖尿病的功能。但其是否具有促进胰岛β细胞再生的功能还未研究。本文利用斑马鱼作为实验动物,来研究人参发酵萃取物与胰岛β细胞再生的关系。方法本文通过胰岛特异性标记的系列转基因斑马鱼模型,激光共聚焦显微镜成像等方法来评估人参发酵萃取物能否促进胰岛β细胞再生,以及促β细胞再生的作用方式。结果人参发酵萃取物能够显著促进糖尿病斑马鱼模型中的β细胞再生,并降低血糖。进一步发现其作用方式是通过促进胰腺内分泌前体细胞向β细胞分化,从而促进β细胞再生。结论人参发酵萃取物具有促斑马鱼胰岛β细胞再生的作用。而这种促胰岛β细胞再生的作用主要是通过促进胰腺内分泌前体细胞向胰岛β细胞分化达成的。

磷酸西格列汀联合二甲双胍治疗T2DM的效果及对糖脂代谢和胰岛β细胞功能的影响

目的观察磷酸西格列汀联合二甲双胍治疗2型糖尿病(T2DM)的效果及对糖脂代谢和胰岛β细胞功能的影响。方法选取2020年6月—2023年10月广州中医药大学茂名医院/茂名市中医院收治的T2DM患者63例,按照电脑随机法分为对照组(31例,给予二甲双胍治疗)和试验组(32例,给予磷酸西格列汀联合二甲双胍治疗)。2组均持续治疗3个月。比较2组临床疗效,治疗前后氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]、糖脂代谢指标[空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))与总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、胰岛β细胞功能指标[胰岛素(INS)、C肽],不良反应。结果试验组治疗总有效率高于对照组(96.88%vs.74.19%,χ^(2)=4.893,P=0.027)。治疗3个月后,试验组与对照组血清SOD水平升高、MDA水平降低,且试验组血清SOD水平高于对照组、MDA水平低于对照组(P<0.01);试验组与对照组糖脂代谢指标较治疗前明显改善,且试验组FPG、HbA_(1c)与TC、LDL-C水平低于对照组,HDL-C水平高于对照组(P<0.01);试验组与对照组INS水平降低、C肽水平升高,且试验组INS水平低于对照组、C肽水平高于对照组(P<0.01)。试验组不良反应总发生率与对照组比较(6.25%vs.16.13%),差异无统计学意义(χ^(2)=0.716,P=0.397)。结论磷酸西格列汀联合二甲双胍治疗T2DM的疗效显著,可有效控制病情,改善氧化应激、糖脂代谢及胰岛β细胞功能,且用药不良反应少。

胰岛β细胞功能及同型半胱氨酸、尿微量白蛋白/肌酐比值对2型糖尿病患者心率变异性的影响研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者心率变异性(HRV)与胰岛β细胞功能及同型半胱氨酸(Hcy)、尿微量白蛋白/肌酐比值(ACR)的相关性。方法选择上海市第六人民医院收治的300例T2DM患者作为研究对象,男性156例,女性144例;年龄(55.54±8.90)岁,年龄范围为32~78岁。根据24 h正常窦性心搏RR间期标准差(SDNN)将患者分为HRV正常组(100 ms≤SDNN≤180 ms,n=163)及HRV下降组(SDNN<100 ms,n=137)。收集HRV正常组和HRV下降组患者的一般资料、生化指标及HRV指标,分析胰岛β细胞功能及Hcy、ACR与T2DM患者HRV下降的相关性,采用Logistic回归模型评估T2DM患者HRV下降的危险因素,绘制受试者工作曲线分析预测指标对T2DM患者HRV下降的预测价值。结果与HRV正常组比较,HRV下降组年龄较大,病程较长,空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、Hcy、空腹C肽(C_(0))、ACR水平较高,餐后2 h C肽(C_(2))、C_(2)/C_(0)水平较低,SDNN、5 min正常RR间期均值的标准差(SDANN)、相邻正常RR间期相差超过50 ms的心搏数占总窦性心搏数的百分比(pNN50)、相邻RR间期之差的均方根(rMSSD)、低频功率(LF)、高频功率(HF)水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关系数分析显示,C_(2)、C_(2)/C_(0)与HRV指标之间均呈显著性正相关(P<0.05),C_(0)、Hcy、ACR与HRV指标之间均呈显著性负相关(P<0.05)。经Logistic回归模型分析显示,病程较长、FPG升高、Hcy升高、C_(0)升高、C_(2)降低、C_(2)/C_(0)降低及ACR升高是T2DM患者HRV下降的独立危险因素(P<0.05)。病程、FPG、Hcy、C_(0)、C_(2)、C_(2)/C_(0)、ACR及各指标联合对预测T2DM患者HRV下降均具备一定价值,且联合预测价值更高。结论病程、FPG、Hcy、C_(0)、C_(2)、C_(2)/C_(0)及ACR是T2DM患者HRV下降的独立危险因素,均具备一定预测价值,且联合预测价值更高。

大柴胡汤加减方治疗2型糖尿病肝胃郁热证对胰岛β细胞功能的影响分析

目的观察在2型糖尿病肝胃郁热证中应用大柴胡汤加减方治疗对患者血糖水平和胰岛β细胞功能的影响。方法选取2022年1月至2023年1月期间宿迁市中医院收治的72例2型糖尿病肝胃郁热证患者,依据随机数字表法分为常规组和试验组,各36例。常规组开展常规短期胰岛素强化治疗,试验组在常规治疗基础上予以大柴胡汤加减方治疗,两组患者均以14 d为1个治疗周期,均开展2个周期的治疗。比较两组患者治疗后临床疗效,治疗前后中医证候积分、血糖水平、胰岛β细胞功能,以及治疗期间低血糖发生情况。结果试验组患者临床疗效优于常规组,治疗总有效率高于常规组(均P<0.05);与治疗前比,治疗后两组患者中医证候积分、餐后2h血糖、空腹血糖、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均降低,且试验组均低于常规组(均P<0.05);与治疗前比,治疗后两组患者胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)水平均升高,且试验组高于常规组(均P<0.05);试验组患者低血糖发生率低于常规组(P<0.05)。结论在常规胰岛素强化治疗的基础上联合大柴胡汤加减方治疗肝胃郁热证2型糖尿病能够改善患者胰岛功能,降低患者血糖水平,改善患者临床症状,提高治疗效果,且能够预防低血糖的发生。