鸡胰岛素样生长因子-I的研究进展

介绍了鸡胰岛素样生长因子 -I(IGF -I)的结构、功能 ,并阐述了该基因的遗传变异与生产性能相关的最近研究进展。

肝硬化患者血清胰岛素样生长因子-I测定及其临床意义

目的 探讨肝硬化患者血清胰岛素样生长因子 I(IGF I)测值改变及其与肝功能Child分级间的关系。方法 45例肝炎后肝硬化患者及 34例健康对照者应用免疫放射法测定血清IGF I值 ,比较IGF I在正常人与肝硬化以及肝功能不同Child级别组中的变化。结果 肝硬化患者的血清IGF I值 (2 45 .5 3± 94.0 9)ng/ml明显低于正常组 (6 7.98± 6 5 .97)ng/ml,P <0 .0 0 1,且随肝功能Child分级的增高而进行性下降。 结论 IGF I测值与肝功能状况有明显的相关性 ,测值低于 30ng/ml则临床预后不良。研究结果提示血清IGF

大菱鲆胰岛素样生长因子-I成熟肽的克隆、重组表达及活性分析

通过RT-PCR方法从大菱鲆肝组织克隆了胰岛素样生长因子-I(IGF-I)成熟肽片段,分析表明,此成熟肽由70个氨基酸残基组成,含有3个链内二硫键。将扩增片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,实现了IGF-I成熟肽和GST蛋白在Escherichia coli BL21(DE3)plysS中的融合表达。融合蛋白分子量约为34ku,诱导4h时占菌体总蛋白的59%,主要以包涵体形式存在。Western-blotting免疫印迹表明,融合蛋白可以特异性地被anti-GST抗体识别。包涵体经6mol/L盐酸胍变性溶解及脉冲法稀释复性后,通过GSTrapFF亲和预装柱纯化,获得了电泳分析纯的融合蛋白。以细胞增殖实验检测蛋白生物活性,结果显示,纯化蛋白能促进大菱鲆肾脏细胞的增殖。

胰岛素样生长因子-I调节胚胎着床的体外研究

目的 :观察胰岛素样生长因子 I (IGF I)对体外培养的滋养层细胞粘附到细胞外基质的影响 ,研究IGF I在胚胎着床过程中的调节作用。方法 :原代培养滋养层细胞 ,建立体外滋养层细胞粘附模型 ,IGF I按不同的时间和剂量处理细胞 ,用酶联免疫检测仪测定光密度值代表粘附细胞的相对数目。免疫细胞化学法检测粘着局部磷酸化粘着斑激酶 (pFAK)的表达。结果 :随IGF I浓度的增加 ,滋养层细胞的粘附数目明显增多 ,差异具有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,10 0nM时粘附细胞数目最多 ,但与 10nM时相比 ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。相同浓度的IGF I处理时 ,随时间的延长 ,粘附细胞数目也明显增多 ,差异具有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,10nMIGF I培养 2h达最佳量效反应 (P <0 0 0 1)。加入抗整合素αvβ3 抗体能明显阻止其促粘附作用(P <0 0 0 1)。免疫组化染色显示 10nMIGF I处理后 ,粘着局部出现pFAK ,而对照组则无pFAK表达。结论 :IGF I能促进滋养层细胞粘附到纤维粘连蛋白 (FN) ,且这种粘附过程具有明显的时间和剂量依赖性 ,生理剂量的IGF I通过刺激整合素与配体结合 ,激活FAK ,进而激活整合素介导的信号传导通路 ,显著促进滋养层细胞粘附到细胞外基质。

胰岛素样生长因子-I对骨骼肌生长和修复研究进展

生长激素(GH/)胰岛素样生长因子-I(IGF-I)轴是肌肉生长的重要调节因子之一。虽然许多组织都能表达IGF-I,但它们各自的功能不同。骨骼肌是IGF-I的靶器官,同时也分泌IGF-I。骨骼肌组织表达的IGF-I对骨骼肌损伤后的再生、修复非常重要,也是通过适当干预保持肌肉质量的重要调节因素。主要讨论GH/IGF-I在促进骨骼肌再生和修复中的作用,并讨论其在运动康复中的应用前景。

肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子-I、基质金属蛋白酶-2在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相关性

目的：探讨肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子-I（IGF-I）及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相关性。方法：分别收集正常卵巢组织20例（正常对照组），卵巢良性上皮性肿瘤组织30例（良性肿瘤组），卵巢上皮性癌组织70例（卵巢癌组）。采用免疫组织化学SP法检测3组卵巢组织中HGF、IGF-I及MMP-2的表达，分析3个因子与卵巢上皮性癌临床病理因素间的关系，采用Spearman相关性检验分析3个因子间的相关性。结果：①HGF、IGF—I和MMP-2在正常对照组、良性肿瘤组、卵巢癌组中的表达呈上升趋势，且组间两两比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②卵巢癌组中，HGF、IGF-I及MMP-2的阳性表达在临床分期I～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期及有无淋巴结转移中比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。③在卵巢癌组中，HGF、IGF-I及MMP-2的阳性表达三者间均呈正相关（P〈0．01）。结论：HGF、IGF-I及MMP-2在卵巢上皮性癌组织中高表达，可能共同参与卵巢上皮性癌的发生发展，与癌细胞的增殖、浸润和转移有关，且存在协同作用。

新生儿血清瘦素水平变化及与胰岛素样生长因子-I和胰岛素关系研究

为探讨新生儿期血清瘦素、胰岛素样生长因子_I(IGF_I)和胰岛素水平变化及其对新生儿生长发育的影响,采用放射免疫法检测46例健康新生儿静脉血和脐静脉血瘦素、IGF_I和胰岛素水平 ,采用新生儿体重、身长和Rohrers指数[(RI)=出生体重(g)×100/身长(cm)3]估测新生儿生长营养状态。结果显示早期新生儿组血清瘦素水平(0.59±0.43μg/L)明显低于初生组(8.29±6.76μg/L)和晚期新生儿组(1.68±0.58μg/L) ;早期至晚期新生儿组血清瘦素水平的增长值与此期间血清IGF_I、胰岛素和新生儿体重的增长值呈显著正相关(r=0.383,r=0.284,r=0.365) ;初生至早期新生儿组血清瘦素水平的下降值与胰岛素水平、新生儿体重的变化无相关性。提示瘦素在调节新生儿期体重和能量平衡方面起重要作用 ;瘦素可能通过IGF_I。

胰岛素样生长因子-I对体外培养的肾小管上皮细胞表型转化的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对体外培养的肾小管上皮细胞(HKC)表型转化的作用及IGF-I和TGF-β1之间有无协同作用。方法分为4组:(1)无血清对照组;(2)阳性对照组TGF-β1(8μg/L);(3)IGF-I(1、10、50和250μg/L)组;(4)IGF-I(50μg/L)+TGF-β1(8μg/L)和IGF-I(250μg/L)+TGF-β1(8μg/L)联合作用组。采用免疫荧光和免疫组化双染色法、流式细胞仪和酶联免疫吸附法观察HKC胞质中抗原角蛋白、钙黏蛋白、波形蛋白和-αSMA的表达,检测细胞培养上清液纤连蛋白和Ⅰ型胶原的浓度。结果IGF-I(50、250μg/L)能诱导HKC细胞表达波形蛋白、-αSMA,失去角蛋白和钙黏蛋白的表达;使-αSMA阳性的HKC细胞数显著高于阴性对照组。联合作用组-αSMA阳性的细胞数明显高于IGF-1或TGF-β1单用组,但无协同作用;IGF-I(10、50、250μg/L)组培养上清液纤连蛋白、Ⅰ型胶原的浓度明显升高,有剂量和时间依赖性。结论IGF-I能诱导肾小管上皮细胞发生表型转化;IGF-I和TGF-β1对诱导HKC转化无协同作用。

血清胰岛素样生长因子-I、瘦素水平及其与2～7岁小于胎龄儿生长关系的研究

目的探讨胰岛素样生长因子-I（IGF-I）和瘦素（leptin）在小于胎龄儿（SGA）儿童生长中的作用。方法选择符合纳入标准的60例儿童作为研究对象（SGA组），适于胎龄儿40例儿童作为对照组。分析两组儿童相关资料及血清IGF-I、leptin水平。结果①对照组和SGA组身高标准差得分（HtSDS）、体重标准差得分（WtSDS）差异有统计学意义（P均〈0．01）。②男女童血清IGF-I水平差异无显著性（P〉0．05）。③年龄分组比较对照组和SGA组的血清IGF-I水平差异无显著性（P〉0．05）。④当HtSDS、WtSDS均〈-2时，leptin与IGF-I存在较强的正相关关系（r=0．94，P〈0．01）；当HtSDS、WtSDS均〉0时两者不存在相关关系（r=0．46，P〉0．05）。结论①2～7岁组的SGA儿童生长落后于同龄正常儿童，但其血清IGF-I水平无明昆降低，特别是2～岁组，提示SGA儿童可能存在IGF-I抵抗。②在营养不良时血清IGF-I和瘦素水平呈正相关。

复元胶囊对兔膝骨关节炎软骨中胰岛素样生长因子-I及胰岛素样生长因子结合蛋白3表达的影响

目的观察复元胶囊对兔膝骨关节炎软骨中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)表达的影响。方法采用右后肢伸直石膏固定法造模,将44只雌雄各半新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、盐酸氨基葡萄糖组、复元胶囊低、中、高剂量组。正常组4只,其余各组8只。各药物组每天灌胃1次,持续6 w。免疫组织化学法检测IGF-I、IGFBP3表达。结果模型组IGF-I、IGFBP3表达积分明显高于正常组(P<0.01);复元胶囊各剂量组与模型组比较,IGF-I表达积分不同程度升高(P<0.05),而IGFBP3表达积分不同程度降低(P<0.01),高剂量组显著。结论复元胶囊具有防治膝骨关节炎作用,其机制可能与调节IGF-I、IGFBP3表达水平有关。

银鲳(Pampus argenteus)胰岛素样生长因子-I基因的克隆和表达分析

胰岛素样生长因子-I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)是影响脊椎动物生长、发育及代谢的重要调控因子。本研究采用RT-PCR和RACE技术,克隆了银鲳(Pampus argenteus)肝脏IGF-IcDNA序列,应用半定量RT-PCR、Real-time q PCR和原位杂交的方法检测了IGF-I的组织表达特性、在肝脏中的生长表达特性和IGF-I基因在肝脏中的定位。序列分析表明,IGF-I cDNA序列全长836bp,其5′非编码区128bp、3′非编码区92bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)605bp,由此推导IGF-I前体蛋白由201个氨基酸组成;前体肽由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成,其中信号肽59个氨基酸,成熟肽68个氨基酸,E肽74个氨基酸;成熟肽由B、C、A、D四个区域组成,E肽分析表明,银鲳IGF-I属Ea-4型。同源性比较结果表明,银鲳与同目鲈形目鱼类的IGF-I编码序列同源性较高,为83.52%—91.40%;与哺乳类、鸟类和爬行类的同源性较低。半定量RT-PCR和Real-time q PCR组织特异性表达结果显示,IGF-I m RNA在肝脏组织中的表达量最高,显著高于其它组织,肾脏、心脏、肌肉、脑、鳃、小肠、卵巢次之,嗅球、脾脏和胃中表达较低;半定量RT-PCR和Real-time q PCR不同生长阶段表达结果显示,IGF-I m RNA在30—50g肝脏组织中表达量最高(P<0.05);IGF-I m RNA在肝脏中的原位杂交定位结果显示,在肝脏细胞中均有表达,阳性信号主要位于细胞质中,靠近细胞边缘处信号较强。

蛋氨酸对肉兔氮代谢、血清激素及肝脏胰岛素样生长因子-ImRNA基因表达的影响

选用2月龄新西兰肉兔60只,随机分成五个处理组,在日粮中添加不同水平的蛋氨酸(0、0.2%、0.4%、0. 6%和0.8%),探讨了日粮添加不同水平蛋氨酸对2-3月龄肉兔氮代谢,血清胰岛素(INS)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-I(IGF-I)含量,及肝脏IGF-I mRNA基因表达量的影响。结果表明:日粮添加蛋氨酸对生长肉兔氮的表观消化率(DN/IN)影响显著(P<0.05),添加0.4%的蛋氨酸时,DN/IN最高;蛋氨酸添加量对粪氮(FN)、尿氮(UN)、沉积氮(RN)、氮的总利用率(RN/IN)、氮的生物利用率(RN/DN)和可消化氮(DN)均无显著影响(P>0.05),但是可消化氮(DN)呈现先升高后降低的趋势。蛋氨酸添加水平对血清中INS和GH的含量无显著影响,对IGF-I含量影响显著(P=0.02),对IGF-I mRNA基因表达量影响极显著(P=0.001)。2月龄至3月龄生长肉兔适宜的蛋氨酸添加水平为0.4%。

脉冲电磁场对去势大鼠骨组织胰岛素样生长因子-I表达的影响

目的观察脉冲电磁场(EM)对去势大鼠骨组织结构和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)表达的影响,探讨EM在预防骨质疏松中的作用。方法3月龄SD大鼠随机抽签法分为正常对照组(Sham),去势组(OVX),雌激素治疗组(E2)及脉冲电磁场治疗组(EM),2个月后测定骨形态学参数,通过斑点杂交技术测定骨组织IGF-ImRNA的表达,通过免疫组织化学方法进行细胞定位。结果骨形态学测定显示E2组较OVX组骨小梁数目与厚度明显增加,髓腔变窄;EM组骨小梁数目与厚度接近或超过E2组。OVX组骨组织IGF-ImRNA的表达水平(27±6)OD较Sham组(78±6)OD显著下降P<0.01(t=1.823),EM组(69±7)OD与E2组(75±5)OD无显著性差异P>0.05(t=3.206),两组均接近Sham组水平,与OVX组比较显著性增高P<0.01(t=2.138,t=1.752)。结论EM显著抑制了雌激素缺乏导致的骨结构的衰退,改善骨结构特性,在一定程度上其作用优于雌激素替补治疗。EM可能是一种颇具潜力的预防OP的方法,其作用可能是通过IGF-I介导的。

多囊卵巢综合征患者血清抑制素B、类胰岛素样生长因子-I的测定及临床意义

目的探讨血清抑制素B、类胰岛素样生长因子-I及性激素与PCOS发病的相关性。方法应用免疫学方法比较同期PCOS不孕患者与非PCOS不孕患者血清抑制素B、类胰岛素样生长因子-I及性激素的水平,分析其与PCOS发病的相关性。结果多囊卵巢综合征患者血清抑制素B、类胰岛素样生长因子-I、黄体生成素、雄激素水平明显高于对照组,具有差异性。结论 PCOS不孕妇女的基础血清INHB、IGF-I水平显著高于正常对照组,提示INH-B、IGF-I可能参与了PCOS发病的病理生理过程。

逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子-I在软骨细胞中的表达

目的探讨逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子-I(human insulin-like growth factor-I,hIGF-I)体外转染兔软骨细胞后软骨细胞hIGF-I的表达情况及其生物学行为变化。方法将构建的含有目的基因的逆转录病毒载体pLNC-IGF-GFP体外转染兔关节软骨细胞,经G418筛选阳性克隆,采用RT-PCR及免疫化学染色检测转染软骨细胞中hIGF-I的表达情况,并在荧光显微镜下观察标记基因GFP的表达情况。采用MTT法、流式细胞仪、免疫细胞化学染色、二甲基亚甲蓝法及ELISA法对转染hIGF-I后的软骨细胞的增殖能力及表型进行检测。结果 G418筛选后获得的软骨细胞阳性克隆,经RT-PCR和免疫细胞化学检测表明hIGF-1基因在mRNA和蛋白质水平得到稳定表达,荧光显微镜下观察转染的软骨细胞可激发出绿色荧光,证明转染成功。转染软骨细胞株的增殖能力、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的分泌水平,在转染后6 w内均高于同时间点未转染的软骨细胞,差异具有显著性(P<0.05)。结论逆转录病毒载体能有效地将hIGF-I基因转染至兔软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃,能够在较长时间维持软骨细胞表型,为进一步研究软骨缺损的组织工程修复和基因治疗打下基础。

利用转基因动物模型研究胰岛素样生长因子-I(IGF-I)在中枢神经系统中的生物学作用

胰岛素样生长因子 I(IGF I)是一种多功能性的细胞营养因子 ,在中枢神经系统的发育过程中发挥着重要的作用。近年来 ,针对IGF I在中枢神经系统 (CNS)中的生物学作用开展了大量的研究。综述了利用IGF I及其所属蛋白家族部分成员的转基因动物模型研究它们在中枢神经系统中的分布和对中枢神经系统各组成部分生长发育的影响及其临床学上的应用。

哲罗鱼胰岛素样生长因子-II的原核表达与活性分析

在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行变性/复性后获得较纯的目的蛋白,利用ELISA和MTT方法对目的蛋白进行免疫学活性及生物学活性分析。ELISA结果显示该目的蛋白能够与商品化的抗鲑鳟鱼IGF-II的抗体发生特异性反应,并且呈现抗原浓度依赖性,该结果说明本研究获得了具有良好免疫原性的IGF-II蛋白;MTT方法测定IGF-II蛋白对鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epitheliaoma papulosum cyprini,EPC)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)性腺细胞(rainbow trout gonad,RTG-2)的增殖效果来鉴定IGF-II蛋白的生物学活性,结果显示所表达的哲罗鱼IGF-II蛋白能够有效的刺激EPC细胞和RTG-2细胞增殖。该结果表明利用原核表达系统获得的哲罗鱼IGF-II蛋白具有良好的生物学活性。本研究为哲罗鱼的生长模式和生长繁殖的研究奠定了基础。

胰岛素样生长因子-I与缺氧缺血性脑病

胰岛素样生长因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）是一种在调节神经生长方面起重要作用的生物活性物质。它通过激活有丝分裂蛋白激酶促进神经细胞树突和轴突的生长。缺氧缺血时脑组织ＩＧＦ－Ｉ水平增高而血浆ＩＧＦ－Ｉ水平下降。ＩＧＦ－Ｉ通过降低脑血管阻力、阻止钙通道开放、减少一氧化氮含量等途径来减轻缺氧缺血对脑组织的损害。本文就ＩＧＦ－Ｉ在神经组织生长发育中的作用，脑内的分布，缺氧缺血脑损伤时ＩＧＦ－Ｉ水平变化和作用机理，及其应用前景作一综述。