大鼠骨折合并中型脑损伤胰岛素生长因子2及血小板源性生长因子对骨折愈合影响的实验研究

目的研究大鼠四肢骨折合并中型脑损伤时血清胰岛素生长因子2(IGF-2)及血小板源性生长因子(PDGF)水平,探讨其在中型脑损伤中对骨折愈合的影响。方法 SD大鼠随机分为:对照组、四肢骨折组、中型脑损伤组、四肢骨折合并中型脑损伤组,共4组,分别建立中型脑损伤和骨折模型,术后第2、4周拍X射线片,拍片后处死大鼠,取血酶联免疫吸附双抗体夹心法检测各组大鼠血清中IGF-2和PDGF水平。结果 X线片结果显示4周后中型脑损伤组和四肢骨折合并中型脑损伤组骨折处骨痂形成,骨折线模糊,而对照组和单纯四肢骨折组骨折线清晰。与对照组比较,中型脑损伤组和四肢骨折合并中型脑损伤组血清IGF-2和PDGF的浓度均显著性地升高(P<0.01),与2周时比较4周时上述因子的表达水平有所恢复(P<0.01),但仍高于对照组和四肢骨折组(P<0.05)。中型脑损伤组与四肢骨折合并中型脑损伤组之间血清IGF-2和PDGF水平无统计学差异(P>0.05)。对照组与四肢骨折组之间血清IGF-2和PDGF的浓度也无统计学差异(P>0.05)。结论中型脑损伤可促进骨折愈合加快,血液中IGF-2和PDGF水平的升高可能是其主要的作用机制。

急性冠状动脉综合征患者血清转化生长因子α和胰岛素生长因子2的变化及其临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征患者血清转化生长因子α(TGF-α)和胰岛素生长因子(IGF-2)的变化及其临床意义。方法选择急性冠状动脉综合征患者(ACS组)21例,稳定型心绞痛患者(SAP组)24例,健康对照组22例。ACS患者入院即刻采血,其余研究对象第2天清晨空腹抽血,以放射免疫法测定TGF-α和IGF-2水平,同时检测心肌损伤标志物肌钙蛋白T(cTNT)。ACS组及SAP组均行冠状动脉造影检查。结果血清TGF-α水平ACS组、SAP组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),在冠心病两亚组中,ACS组TGFα显著高于SAP组(P<0.05)。ACS组冠脉狭窄积分与血清TGF-α、IGF-2水平呈显著正相关(P<0.01),SAP组冠脉狭窄积分与TGF-α、IGF-2水平呈弱相关(P>0.05)。ACS组cTNT与血清TGF-α、IGF-2水平呈显著正相关(P<0.01),SAP组cTNT与血清TGF-α、IGF-2水平呈弱相关(P>0.05)。结论 TGF-α和IGF-2可能参与了急性冠脉综合征的基本病理过程。

中央静脉区肝实质细胞在部分小鼠肝损伤过程中通过分泌类胰岛素生长因子2促进肝脏再生

【据《Hepatology》2017年12月报道】题:中央静脉区肝实质细胞在部分小鼠肝损伤过程中通过分泌类胰岛素生长因子2促进肝脏再生(作者Liu J等)肝脏再生通常发生在各种肝损伤之后,其中机制研究最清楚的是部分肝切除引起的肝脏再生。但近年来有越来越多的证据表明,其他肝脏损伤往往可能采用不同的机制来促进肝脏再生。来自上海科技大学的Liu等发现在酪氨酸血症或CCl 4长期处理引起的肝损伤后,肝脏中会诱导产生大量类胰岛素生长因子(IGF)2。但类似现象并未在部分肝切除或CCl 4单次诱导产生的急性肝损伤过程中发现。

胰岛素样生长因子结合蛋白2对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制研究

背景糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点。目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制。方法体外培养的人足细胞随机分为正常血糖(normal glucose,NG)组(5 mmol/L)以及高血糖(high glucose,HG)24 h组、HG 48 h组、HG 72 h组(30 mmol/L)。采用RT-qPCR法检测IGFBP2、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达水平,Western blot检测IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白表达水平,以此确定后续实验HG处理的最佳时间点。将IGFBP2小干扰RNA转染进入足细胞并分为NG组、阴性对照干预组(NG-NC-siRNA)、IGFBP2敲低siRNA干预组(NG-IGFBP2-siRNA1、NG-IGFBP2-siRNA2、NG-IGFBP2-siRNA3),RT-qPCR检测IGFBP2 mRNA表达水平,选择敲低效率最高的IGFBP2-siRNA用于后续实验。根据实验内容将足细胞随机分为:(1)NG组和HG组;(2)NG组和NG+125 ng/mL rhIGFBP2组;(3)HG组和HG-IGFBP2-siRNA组。(1)(2)(3)均通过RT-qPCR检测TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,共聚焦显微镜检测线粒体超氧化物和活性氧荧光强度,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随HG处理时间增加,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1 mRNA水平随时间升高,Western blot结果显示IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白水平随时间升高。与NG组比较,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1均在HG 72 h时mRNA水平最高(P<0.05),Western blot结果显示IGFBP2在HG 72 h时和Cleaved Caspase 3在HG 48 h时蛋白水平最高(P<0.05),据此选72 h为后续实验诱导时间点。RT-qPCR检测结果显示,与NG组相比,阴性对照干预组mRNA表达无统计学差异(P>0.05),NG-IGFBP2-siRNA2组IGFBP2 mRNA表达水平最低(P<0.05),敲除效率最高,因此选择IGFBP2-siRNA2进行后续实验。与NG组相比较,HG组线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均增强(P<0.05)。与NG组相比较,NG+125 ng/mL rhIGFBP2组的TNF-α和ICAM-1 mRNA水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均升高(P<0.05)。与HG组相比较,HG-IGFBP2-siRNA组的TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论敲除IGFBP2后通过减弱高血糖处理下的线粒体功能紊乱和氧化应激降低人足细胞凋亡,因此抑制IGFBP2的表达有望成为糖尿病肾病的潜在治疗策略。

胰岛素样生长因子-2通过介导胃癌大鼠Treg免疫活性破坏机体免疫功能的促癌作用研究

目的研究胰岛素样生长因子-2(IGF-2)通过介导胃癌大鼠Treg免疫活性破坏机体免疫功能的促癌作用。方法选取健康SD雄性大鼠40只,于右侧腋窝皮下接种胃癌SGC-7901细胞株建立胃癌模型,随机分为模型组、低剂量组(25μg/kg IGF-2)、中剂量组(50μg/kg IGF-2)及高剂量组(100μg/kg IGF-2),每组10只,均连续给药14 d。观察记录4组大鼠瘤体积、瘤质量以及胸腺、脾脏重量,计算抑瘤率以及胸腺、脾脏指数。流式细胞仪检测血液Treg、Th17水平,采用苏木精-伊红染色法观察肿瘤组织病理学形态,TUNEL检测胃癌细胞凋亡,采用蛋白印迹法检测4组大鼠肿瘤组织PI3K/Akt信号通路表达情况。结果各剂量组脾脏指数、胸腺指数均低于模型组,且随着给药剂量的增加,均呈明显降低趋势,而促瘤率均呈增加趋势(P<0.05)。各剂量组肿瘤组织细胞凋亡率均低于模型组,随着给药剂量的增加,凋亡率均呈降低趋势(P<0.05)。随着IGF-2剂量的增加,Treg、Th17、Treg/Th17均明显增加(P<0.05)。不同剂量组的p-Akt、CYP19A1蛋白表达水平高于模型组,随着给药剂量的增加,p-Akt、CYP19A1蛋白表达水平呈明显增加趋势(P<0.05)。结论IGF-2可促进胃癌大鼠肿瘤生长,其作用机制可能为通过上调PI3K/Akt信号通路,破坏Treg/Th17细胞免疫功能平衡,从而抑制肿瘤细胞凋亡。

胰岛素样生长因子2结合蛋白2基因多态性与妊娠期糖尿病的关系

目的分析胰岛素样生长因子2结合蛋白2(IGF2BP2)基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选择GDM患者84例为GDM组,另选取同期健康孕妇84例为对照组,收集两组一般资料。实时聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法检测IGF2BP2基因rs4402960位点、rs1470579位点和rs11705701位点的多态性。结果GDM组总胆固醇、空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,GDM组IGF2BP2基因rs4402960位点GG基因型较少,TT基因型较多,等位基因T频率较高,等位基因G频率较低(P<0.05);rs11705701位点等位基因A频率较低,等位基因G频率较高(P<0.05);而其他基因型和基因频率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGF2BP2基因多态性与GDM发生有关,可通过基因多态性结果评估和筛选GDM高风险人群,以提高对GDM控制。

糖尿病孕妇胎盘胰岛素生长因子2和其交互印迹基因H19表达及印迹状态变化

目的了解胰岛素生长因子2（1GF2）和H19基因在糖尿病与非糖尿病孕妇胎盘中表达水平以及印迹状态的变化。方法选取2009年2月至9月在北京大学第一医院分娩的糖尿病孕妇33例为病例组，其中妊娠期糖尿病（GDM）患者23例，糖尿病合并妊娠患者10例，同期分娩的无妊娠合并症的非糖尿病孕妇31名为对照组。提取胎盘组织中的RNA和DNA，采用实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）方法比较病例组和对照组中IGF2和H19基因表达量的变化，采用限制性片段长度多态性（RELP）方法比较2者印迹状态的变化。统计学方法采用非配对样本t检验。结果（1），G砣基因在病例组胎盘中表达量高于对照组，差异具有统计学意义（分别为2．4±1．2、1．94-0．8，t：-2．2，P〈0．05）；H19基因在病例组胎盘中表达量高于对照组，但差异无统计学意义（分别为7．2±3．6、6．14-2．7，t=-1．5，P〉0．05）；（2）IGF2基因Apal位点的杂合率为60．9％（39／64），H19基因Rsal位点的杂合率为34．4％（22／64）；（3），GF2基因Apal位点和H19基因Rsal位点在病例组和对照组杂合子胎盘中均无印迹丢失。结论（1）IGF2基因在糖尿病孕妇胎盘中表达量增加；（2）IGF2基因和H19基因在糖尿病孕妇胎盘中无印迹丢失发生，是否发生其他位点或DMR区的甲基化变化仍有待于进一步研究。

利拉鲁肽对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏胰岛素生长因子2-mRNA结合蛋白3表达的影响

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指除乙醇和其他明确的肝损害因素所致的，以弥漫性肝细胞大疱性脂肪变性为病理特征，与高胰岛素血症、血脂异常、2型糖尿病以及遗传-环境-代谢应激密切相关的临床综合征；

胰岛素样生长因子2的遗传学特征与生物学作用

胰岛素样生长因子 (insulin -likegrowthfactor ,IGF)是一类多功能细胞增殖调控因子 ,因其化学结构与胰岛素相似而得名 ,IGF2是一个由 6 7个氨基酸组成的蛋白质 ,它在胎儿发育、肿瘤细胞增殖、肌肉生长等方面具有重要的调控作用。本文主要论述了IGF2的基因结构、遗传方式 ,以及与印迹表达、肿瘤发生。

外源性胰岛素样生长因子-2促进骨骼肌损伤修复的实验研究

目的 :研究局部使用外源性胰岛素样生长因子 2 (Insulin-likeGrowthFactor-2 ,IGF -2 )对骨骼肌钝性打击伤后愈合速度、质量和对内源性IGF -1、IGF -2的mRNA表达的影响。方法 :对大鼠右下肢腓肠肌内侧面中段实施钝性打击伤 ,分别于损伤局部注射外源性IGF -2 (实验组 )及生理盐水(对照组) ,观察骨骼肌损伤修复情况。结果 :伤后实验组比对照组更早形成基底板层保护膜 ,更早更多地激活成肌细胞、生成肌丝、形成肌管、融合成肌纤维 ,愈合质量也较好。实验组的IGF -1mRNA含量在伤后 1、2、3、4天升高 ,IGF -2的mRNA含量在伤后 1、2、3、4、6、9、1 4天均升高 ;对照组的IGF -1mRNA含量在伤后 2、3、4、6、9、1 4天升高 ,IGF -2的mRNA含量在伤后 3、4、6、9天升高。结论 :局部注射外源性胰岛素样生长因子 -2可以使内源性的IGFmRNA表达提早 ;可以刺激成肌细胞增生 ,促进肌管形成 ,加速肌管融合成肌纤维 ,加速骨骼肌创伤后修复过程 。

胰岛素样生长因子2研究进展

胰岛素样生长因子2(IGF2)是迄今所知功能最复杂的生长调控因子,它能促进细胞的有丝分裂和分化,参与生后基因组重建,与X染色体的失活有重要关系。所有的这些功能说明IGF2在机体生长发育过程中的重要性。此外,IGF2与个体生长速度、瘦肉率、背膘厚等生产性能关系密切,在某些物种已经被作为候选基因确定下来。作为重要的印记基因,IGF2的表达状况与肿瘤,以及潜在肿瘤的发生发展关系密切,在肿瘤治疗方面起重要作用。文章综述了IGF2的基因结构、生物学作用、基因印记、生长发育和肿瘤的关系等方面的研究进展。

陆川猪和大白猪胰岛素样生长因子2基因对生长性状的效应分析

试验旨在探讨陆川猪和大白猪胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor-2,IGF2)基因多态性与生长性状的关系,以期为猪生产性状标记辅助选择侯选基因的选择提供理论依据。采用PCR-SSCP技术,在陆川猪和大白猪群体中检测到了1个SNP位点,并将这个SNP位点与生长性状进行关联分析。结果表明,IGF2基因对陆川猪和大白猪初生重、平均日增重影响均显著(P<0.05),对断奶重的影响在大白猪上显著(P<0.05),在陆川猪上不显著(P>0.05),可作为用于育种实践的分子遗传标记。

胰岛素样生长因子2研究进展

胰岛素样生长因子2在胎儿生长发育、肿瘤细胞增殖、肌肉生长等方面具有重要的调控作用。综述了胰岛素样生长因子2基因结构、基因组印迹和作为影响肌肉重量数量性状基因座的研究进展。

金鱼胰岛素样生长因子2基因克隆与组织表达

采用PCR方法,扩增并克隆了金鱼的IGF2基因.序列分析结果显示:金鱼的IGF2基因共包括有4个外显子和3个内含子,开放阅读框长606 bp,编码201个氨基酸;编码序列与斑马鱼有85%一致性;蛋白质序列与斑马鱼的有80.9%的一致性.RT-PCR证明金鱼IGF2基因在鳃、心脏、肾、肌肉、尾鳍、雌雄性腺等组织中均有表达.

低氧无血清诱导乳鼠心肌细胞胰岛素样生长因子2受体表达上调

目的研究胰岛素样生长因子2受体(IGF-2R)在体外模拟心肌缺血低氧环境时表达的变化。方法分离培养SD乳鼠心肌细胞,以低氧和无血清处理不同时间点后收获细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时定量RT-PCR测定IGF-2RmRNA的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定IGF-2R蛋白水平。结果与对照组相比,低氧无血清处理12和24 h乳鼠心肌细胞IGF-2RmRNA表达显著增高(P<0.01),处理24 h后IGF-2R蛋白表达也升高(P<0.05)。结论低氧无血清可诱导乳鼠心肌细胞IGF-2R的表达,IGF-2R可能在缺血低氧引起心肌损害过程中发挥重要的作用。

胰岛素样生长因子-2对局灶性脑缺血再灌注脑损伤的保护机制

目的探讨胰岛素样生长因子-2(Insulin-Like Growth Factor-2,IGF-2)对局灶性脑缺血再灌注损伤影响的可能机制。方法取55只SD大鼠建立局灶性脑缺血再灌注模型,随机分成假手术对照组(n=5)、脑缺血再灌注组(n=25)、IGF-2治疗组(n=25),按再灌注时间分为5个亚组,每个亚组5只(6h组、12h组、1d组、3d组、7d组);脑缺血1h后开始再灌注。免疫组化法检测脑缺血不同时间大脑皮层S100B蛋白,用原位末端标记技术和免疫组化分别检测各组大鼠大脑皮层缺血中心和周围区神经细胞凋亡和bcl-2蛋白的表达。结果脑缺血再灌注损伤组与假手术对照组比较凋亡细胞数明显增多(P<0.05),与脑缺血再灌注组相比,IGF-2治疗组凋亡细胞数明显减少(P<0.05);免疫组化检测结果显示,与脑缺血再灌注组相比,IGF-2治疗组S100B蛋白表达明显减少(P<0.05);与脑缺血再灌注组相比,IGF-2治疗组bcl-2蛋白表达明显增多(P<0.05)。结论IGF-2可促进bcl-2蛋白的表达增多,S100B蛋白表达减少,凋亡细胞数明显减少,可能是IGF-2产生脑保护机制的原因之一。

同型半胱氨酸干扰胰岛素样生长因子2和H19的印迹表达及其与血管平滑肌细胞增殖的关系

目的采用动脉粥样硬化的独立危险因子同型半胱氨酸刺激脐静脉血管平滑肌细胞,观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2和H19表达的干扰作用,分析二者与血管平滑肌细胞增殖的关系及其在动脉粥样硬化发病中的可能作用。方法将培养的脐静脉血管平滑肌细胞分为0、50、100、200、500及1000μmol/L同型半胱氨酸组,以0μmol/L同型半胱氨酸组为空白对照组。用不同浓度的同型半胱氨酸刺激血管平滑肌细胞48 h后,MTT法检测血管平滑肌细胞的增殖水平;半定量逆转录聚合酶链反应法检测血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2和H19的mRNA表达水平,Western Blotting法检测血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2的蛋白表达水平。结果与空白对照组相比较,同型半胱氨酸各浓度组血管平滑肌细胞的增殖活力明显增加,以高浓度(500及1 000μmol/L)组为著(P<0.05)。同时,同型半胱氨酸组血管平滑肌细胞H19的mRNA表达水平增加,500及1000μmol/L浓度组(0.548 6±0.063 3及0.733 3±0.049 6)明显高于空白对照组(0.202 2±0.012 4)(P<0.05);胰岛素样生长因子2的mRNA和蛋白表达均下降,尤以高浓度组为著,500及1 000μmol/L浓度组的mRNA(0.258 8±0.024 8及0.168 9±0.069 6)和蛋白(0.116 7±0.015 5及0.083 7±0.018 0)表达水平均明显低于空白对照组(0.515 8±0.018 9和0.244 3±0.042 3)(P<0.05)。结论同型半胱氨酸能干扰胰岛素样生长因子2和H19的表达,并可能进一步促进血管平滑肌细胞的增殖。

胰岛素样生长因子2的基因组印迹与疾病相关性研究进展

胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factors,IGF2）在结构与功能上与胰岛素有很多相似的地方,且具有能够调节细胞增殖、分化和生长的作用从而被命名[1]。研究提示IGF2主要是通过IGF2基因的印迹作用来发挥其在生物体内的功能。

脐血胰岛素样生长因子-2和印记基因H19与胎儿生长受限的关系

目的探讨脐血胰岛素样生长因子-2(IGF-2)和H19印记状态与胎儿生长受限(FGR)的关系。方法采用放射免疫法测定42例FGR孕妇(研究组)和晚期正常妊娠妇女30例(对照组)脐血中IGF-2水平,同时采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,检测胎盘组织中H19基因印记状态。结果①研究组脐血IGF-2水平为(1.52±0.20)μg/L,明显低于对照组的(1.97±0.21)μg/L(P<0.05)。②研究组中杂合子20例,其中9例双等位基因表达;对照组中杂合子14例,均为单等位基因表达;研究组H19基因印记丢失明显高于对照组(P<0.05)。③研究组H19双等位基因表达的病例脐血IGF-2水平均明显低于H19杂合性丢失和H19单等位基因表达病例(P<0.05);H19杂合性丢失和H19单等位基因表达病例脐血IGF-2水平无显著性差异。结论妊娠晚期IGF-2减低是导致FGR发生的原因之一;H19基因印记丢失下调IGF-2基因间接影响胎儿生长发育。