免疫治疗在胰腺导管腺癌中的研究现状

胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDA)预后极差,是一种高致命性恶性肿瘤。目前临床治疗PDA的主要方法是手术切除,其他治疗方式以化疗为主,或者化疗联合放疗等。许多临床试验试图使用免疫方法治疗PDA,包括使用免疫检查点抑制剂、PDA疫苗、过继性T细胞疗法等,并尝试在免疫治疗基础上联合用药,当免疫治疗与其他方式相结合时,可以存在协同效应,使药物作用效果增强。在此篇综述中,我们阐述了免疫治疗在PDA中的现状、耐药机制及取得的成就、发展方向。

环状RNA SAMD8调控miR-223-3p/RHOB表达抑制胰腺导管腺癌进程的分子机制

目的探讨环状RNA SAMD8(circ-SAMD8)在胰腺导管腺癌(PDAC)进展中的潜在机制。方法基于Microarray数据(GSE79634)分析PDAC组织中circRNAs的表达谱。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证circ-SAMD8(hsa_circ_0006148)在PDAC组织和细胞(CFPAC-1和PANC-1)中的表达。采用生物信息学分析预测circ-SAMD8的靶微小RNA(miRNA)及其下游mRNA,并采用双荧光素酶报告基因实验进行鉴定。采用MTT法和集落形成法检测PDAC细胞的增殖能力。采用免疫印迹法(Western blot)检测抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达水平。采用流式细胞术检测凋亡细胞百分比。结果circ-SAMD8在PDAC组织和细胞中的表达水平低于癌旁组织和正常细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达circ-SAMD8能有效促进PDAC细胞凋亡,抑制PDAC细胞增殖。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-223-3p是circ-SAMD8的一个潜在相互作用分子,miR-223-3p的下游mRNA靶点是RHOB。miR-223-3p在PDAC组织和细胞中异常过表达,并伴有RHOB低表达。在转染miR-223-3p模拟物或sh-circ-SAMD8的PDAC细胞中,RHOB表达显著降低,增殖能力增强,凋亡率降低。结论circ-SAMD8通过海绵化miR-223-3p,调控下游RHOB的表达,有效抑制PDAC的发生发展。

胰腺导管腺癌患者KLK11的表达水平及患者生存的影响因素分析

目的:探讨胰腺导管腺癌患者肿瘤组织中组织激肽释放酶11(KLK11)的表达水平及临床意义。方法:选取2018年1月—2022年12月在宜昌市中心人民医院接受根治性胰十二指肠切除术的152例胰腺导管腺癌患者,收集所有纳入患者的临床资料,分析KLK11低表达(n=65)和高表达(n=87)的免疫组化结果及其对患者生存的影响,并进一步通过Cox比例风险模型进行单因素和多因素分析探讨影响胰腺导管腺癌患者生存的独立影响因素。结果:免疫组化结果显示,胰腺导管腺癌组织中存在KLK11低表达及高表达;KLK11高表达组患者的生存率明显低于KLK11低表达组患者(P=0.003);肿瘤中-低分化(HR=3.447,95%CI:1.542,7.707)、肿瘤>3.0 cm(HR=4.452,95%CI:2.094,9.465)、TNM分期为Ⅱ期(HR=14.840,95%CI:5.284,41.680)/Ⅲ期(HR=27.880,95%CI:9.419,82.550)、有门静脉侵犯(HR=4.929,95%CI:1.395,17.421)及KLK11高表达(HR=6.007,95%CI:2.270,15.895)均是影响胰腺导管腺癌患者术后生存的独立危险因素(均P<0.05)。结论:肿瘤中-低分化、肿瘤>3.0 cm、TNM分期为Ⅱ期/Ⅲ期、有门静脉侵犯及KLK11高表达是影响胰腺导管腺癌患者术后生存的独立危险因素。

多参数MRI影像组学在术前预测胰腺导管腺癌淋巴结转移中的价值

目的联合常规MRI及表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)图的影像组学特征构建多参数MRI影像组学模型术前预测胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)淋巴结转移(lymph node metastasis,LNM),并与建立的常规MRI影像组学模型和临床模型比较预测效能,探索基于ADC图影像组学的附加价值。材料与方法218例PDAC按照7∶3的比例随机分为训练集和验证集。纳入临床及常规影像特征构建临床影像学模型。提取常规MRI图像(T1WI、T2WI、动脉期图像及门静脉期图像)及ADC图的影像组学特征。在训练集中采用最小绝对收缩和选择算子筛选出与LNM最相关的特征用于模型构建。构建基于常规MRI影像组学模型(影像组学模型1)和联合常规MRI和ADC图的影像组学模型(影像组学模型2)。使用受试者工作特征曲线下面积(area under the curve,AUC)评估模型预测效能。采用DeLong检验比较模型间的AUC值的差异是否有统计学意义。校准曲线评估模型的准确性。决策曲线分析评估模型的临床价值。结果临床影像学模型、影像组学模型1、影像组学模型2术前预测LNM的AUC值在训练集和验证集中分别是0.741和0.674、0.818和0.702、0.854和0.839。影像组学模型2术前预测LNM的AUC值高于临床影像学模型(训练集P=0.009,验证集P=0.023)及影像组学模型1(训练集P=0.044,验证集P=0.041),差异均具有统计学意义。影像组学模型1的预测效能与临床影像学模型相比,差异不具有统计学意义(训练集P=0.095,验证集P=0.759)。三个模型的校准曲线均显示预测值与实际值具有较好的一致性。决策曲线显示影像组学模型2比影像组学模型1和临床影像学模型具有更高的净效益。结论联合常规MRI及ADC图构建的多参数MRI影像组学模型具有术前预测PDAC患者LNM的潜能,且其效能优于常规MRI影像组学模型及临床影像学模型。

基于ZOOM-mDixon的T2^(*)/R2^(*)成像术前预测胰腺导管腺癌淋巴结转移的价值

目的 探讨ZOOM-mDixon序列衍生的定量T2^(*)/R2^(*)值在术前评价胰腺导管腺癌淋巴结转移的可行性。材料与方法 回顾性分析经病理证实的59例胰腺导管腺癌患者临床及影像资料,其中淋巴结转移(lymphatic metastasis, LNM)31例,非淋巴结转移(non-lymph node metastases, nLNM)28例。术前均行包括ZOOM-mDixon序列的MRI扫描,分析两组的临床基本资料(年龄、术前CA19-9水平等)、常规影像学特征(部位、形态等)和T2^(*)/R2^(*)值。使用组内相关系数(intra-class correlation coefficient, ICC)评价其可重复性,采用U检验、t检验或χ^(2)检验比较两组间各参数的差异,绘制受试者工作特征(receiving operator characteristic, ROC)曲线,利用曲线下面积(area under the curve, AUC)评价相关指标的诊断性能。结果 T2^(*)/R2^(*)值的组间和组内ICC值均在0.83~0.97之间。两组间的年龄、肿块形态、肿块短径、肿块部位、术前糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)19-9、CA125、癌胚抗原(carcinoma embryonic antigen, CEA)水平等差异无统计学意义,而性别、病灶长径和病灶边界差异有统计学意义(P值分别为0.023、0.048、0.040)。两组间的T2^(*)值和R2^(*)值差异有统计学意义(P值均<0.05)。与nLNM组相比,LNM组的R2^(*)值较小[17.63(15.10, 22.50)/s vs. 24.00(20.00, 28.30)/s];T2^(*)值更高[(63.77±13.95)ms vs.(49.71±12.67)ms]。T2^(*)/R2^(*)值预测胰腺癌淋巴结转移的AUC分别为0.775和0.766。结论 ZOOM-mDixon序列衍生的T2^(*)/R2^(*)成像量化值可术前预测胰腺导管腺癌的淋巴结转移,为临床治疗提供参考。

胰腺导管腺癌行腹腔镜下胰十二指肠切除术后早期复发的列线图模型及其预测价值分析

目的探究胰腺导管腺癌(PDAC)患者行腹腔镜胰十二指肠切除术(LPD)后肿瘤早期复发的危险因素并建立预测模型。方法回顾性分析2016年4月—2022年7月于吉林大学第一医院行LPD的240例PDAC患者的临床资料,以术后肿瘤早期复发(复发时间≤12个月)为研究结局。按照7∶3比例,随机将患者分为训练组(n=168)与验证组(n=72)。训练组术后早期复发70例(41.67%),非早期复发98例(58.33%)。验证组术后早期复发32例(44.44%),非早期复发40例(55.56%)。计数资料组间比较采用χ^(2)检验或Fisher精确概率法。Logistic回归分析影响术后早期复发的危险因素。采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估模型的区分度,AUC>0.75为该模型有足够的区分度。用Bootstrap重采样法随机抽样1000次验证,并用验证组再次验证。使用校准曲线和Hosmer-Lemeshow拟合优度检验评估校准度,决策曲线评估临床实用性。结果单因素、多因素分析结果显示:术前CA19-9水平≥37 U/mL、肿瘤最大直径>3 cm、肿瘤低分化、有淋巴结转移、术后未行辅助化疗是影响PDAC行LPD术后早期复发的独立危险因素[OR(95%CI)分别为6.265(1.938~20.249)、10.878(4.090~28.932)、3.679(1.435~9.433)、0.209(0.080~0.551)、0.167(0.058~0.480),P值均<0.05]。以此为基础构建列线图模型,AUC=0.895(95%CI:0.846~0.943,P<0.001),校准曲线Hosmer-Lemeshow检验表明模型具有良好的校准度(P=0.173)。决策曲线显示列线图具有良好的临床应用价值。结论术前CA19-9水平≥37 U/mL、肿瘤最大直径>3 cm、肿瘤低分化、有淋巴结转移、术后未行辅助化疗是影响PDAC LPD术后早期复发的独立危险因素,以此为依据构建列线图模型可有效预测术后早期复发。

黏附性G蛋白偶联受体F1在胰腺导管腺癌中的表达及其促进癌症进展的机制研究

目的·分析黏附性G蛋白偶联受体F1(adhesion G protein-coupled receptor F1,ADGRF1)在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)发生及发展过程中的表达变化,探究ADGRF1对PDAC细胞增殖的影响以及促进PDAC进展的潜在分子机制。方法·基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析ADGRF1在正常胰腺组织及PDAC组织中的mRNA水平表达。利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测ADGRF1在正常胰腺导管上皮细胞hTERT-HPNE及多种PDAC细胞中的表达情况。利用免疫组织化学染色(immunohistochemistry staining,IHC)检测PDAC患者的癌组织及癌旁组织中ADGRF1的表达差异。转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低ADGRF1后,通过CCK8和平板克隆形成实验检测PDAC细胞AsPC-1、SW1990增殖能力的变化。构建稳定过表达ADGRF1的Patu8988细胞,通过CCK8实验检测过表达ADGRF1引起的PDAC细胞增殖变化。利用RNA测序(RNA-sequence,RNA-seq)、基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)和免疫浸润分析预测与ADGRF1促进PDAC癌症进展相关的信号通路。结果·TCGA数据库和GEO数据库的分析结果显示ADGRF1 mRNA在PDAC组织中的表达高于正常胰腺组织(均P=0.000)。qPCR和Western blotting结果显示,与hTERT-HPNE细胞相比,多种PDAC细胞中ADGRF1的mRNA和蛋白水平均有所上调(均P<0.05)。IHC结果显示ADGRF1在PDAC患者癌组织中的表达也高于癌旁组织。此外,下调ADGRF1能够抑制PDAC细胞AsPC-1、SW1990的增殖能力;而过表达ADGRF1则促进Patu8988细胞的增殖能力(均P<0.05)。RNAseq、GSEA富集分析和免疫浸润的结果显示,ADGRF1的表达与干扰素α(interferon-α,IFN-α)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)等信号通路有关。结论·ADGRF1在PDAC细胞和组织中高表达,促进PDAC细胞的增殖,其机制可能与多个免疫相关信号通路有关。

胰腺导管腺癌免疫检查点阻断耐药的生物标志物和治疗选择

免疫检查点阻断(immune checkpoint blockade,ICB)的单药治疗在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中未见成效,采取合理的联合疗法是克服PDAC ICB抵抗的有效策略。目前为克服PDAC ICB耐药的联合手段主要包括增强PDAC表面的程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)或组织相容性复合体Ⅰ(histocompatibility complexⅠ,MHC-Ⅰ);靶向免疫细胞中发挥抑制功能的关键效应因子,改善PDAC的免疫抑制微环境;联合能量消融、光动力疗法、纳米材料包裹等手段促进肿瘤相关抗原的释放,刺激免疫激活。本综述旨在对近年PDAC中发现的ICB耐药靶标和新兴手段进行梳理,为克服PDAC ICB耐药提供新思路。

以手术切除为目标的胰腺导管腺癌综合治疗进展

胰腺癌尤其是胰腺导管腺癌(PDAC)预后较差且缺乏有效的治疗方法。早发现、早手术能较大程度地改善PDAC患者预后。手术结合围手术期的全身治疗则在改善PDAC患者预后方面具有较大的潜力。术前应用新辅助放化疗可提高可切除PDAC患者的预后,在交界可切除PDAC患者中应用是安全的且比直接手术疗效更佳,在局部晚期PDAC患者中应用也具有一定的转化效果。术前靶向治疗和免疫治疗对可切除PDAC患者的预后没有明显改善。微创手术逐渐成为PDAC患者手术的选择,机器人手术因其术中及术后的优势,有望成为PDAC患者手术方式的更好选择。

Myo1E在胰腺导管腺癌组织中的表达及临床意义

目的:分析肌球蛋白1E(Myo1E)在胰腺导管腺癌(PDAC)组织中的表达及临床意义。方法:用在线癌症基因组图谱数据库中PDAC的二代测序数据,分析Myo1E mRNA在PDAC组织中的表达水平,与患者预后和免疫检查点的关系;用PDAC组织芯片,经免疫组化染色,统计分析Myo1E蛋白表达的临床意义以及和免疫检查点PD-L1的相关性。结果:Myo1E mRNA和蛋白在PDAC组织中的表达明显高于良性胰腺组织,且与患者预后差有关;Myo1E蛋白表达与肿瘤直径(P=0.004)、淋巴结转移(P<0.001)、侵犯周围组织(P=0.008)、临床分期(P<0.001)相关;生存分析显示,Myo1E蛋白在PDAC组织中表达,是患者预后的独立风险因素(HR:1.686,P=0.010);且与PD-L1的表达具有线性正相关(r=0.388,P<0.001)。结论:PDAC组织中Myo1E是患者预后的独立风险因素,或可成为潜在的免疫治疗靶点。

胰腺导管腺癌的双能量CT成像研究进展

胰腺导管腺癌(PDAC)是一种恶性程度高、预后极差的肿瘤,早期诊断和准确评估对其治疗决策及改善预后十分重要。双能量CT是近年来CT成像领域发展的前沿方向,具有多参数、多维度、定量成像的特点。双能量CT除了提供常规CT的解剖学信息,还可获得物质分离图、虚拟单能量图、有效原子序数图及能谱曲线等多参数图像,有助于对疾病的诊断和评估。本文就PDAC的双能量CT成像研究进行综述。

联合临床病理参数及多序列MRI-Rad评分的影像组学列线图预测胰腺导管腺癌术后生存的价值

目的:探讨联合临床病理参数和多序列MRI-Rad评分的影像组学列线图在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)患者术后生存预测中的价值。方法:回顾性分析我院2016年06月至2020年06月间行根治性切除手术并经病理确诊的197例PDAC患者胰腺MRI及临床病理资料。将患者按照7∶3比例划分为训练集(138例)与验证集(59例)。从T2加权成像(T2-weightedimaging,T2WI)、增强T1加权成像(T1-weightedimaging,T1WI)和扩散加权成像(diffusionweightedimaging,DWI)3个序列MRI图像中共提取360个影像组学特征并通过特征组间和组内相关系数(inter-and intra-class correlation coefficient,ICC)分析,保留ICC>0.75的特征。应用最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator regression,LASSO)进一步筛选特征并建立MRI影像组学评分(radiomics score,Rad-score)。根据时间依赖性受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under curve,AUC)分析Rad评分预测1年和3年无病生存期(disease-free survival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)的性能,并基于Rad评分截断值将患者分为高Rad评分组与低Rad评分组,使用Kaplan-Meier(K-M)生存分析评估Rad评分与DFS和OS关系。通过单变量和多变量Cox回归分析确定与DFS和OS相关的临床病理独立预测因素并构建临床病理模型。利用肿瘤T分期、N分期和M分期信息构建TNM分期系统模型。联合临床病理独立危险因素及Rad评分制定影像组学列线图(nomogram),利用Harrell's一致性指数(C-index,C指数)、校准曲线(calibration curves)和决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)评估列线图的效能并在3种模型间进行比较。结果:通过ICC和LASSO分析,从多序列MRI中共筛选7个影像组学特征并建立Rad评分。Rad评分预测1年和3年DFS和OS的AUC分别为0.807、0.795和0.839、0.812,低Rad评分组患者DFS和OS显著优于高Rad评分组(P<0.001)。多因素Cox回归结果显示Rad评分、CA19-9、分化程度、T分期、N分期和M分期与PDAC术后患者DFS和OS显著相关(P<0.001)。在训练集和验证集中,联合Rad评分和5项临床病理危险因素构建的影像组学列线图预测DFS和OS的C指数分别为0.860(95%CI 0.823~0.895)、0.850(95%CI 0.825~0.905)和0.832(95%CI 0.806~0.857)、0.822(95%CI 0.787~0.860),校准曲线和决策曲线分析显示列线图具有良好的区分度、校准度和临床实用性,比临床病理模型和TNM分期系统具有更好的生存预测性能(P<0.001)。结论:联合临床病理特征和多序列MRI-Rad评分的影像组学列线图在预测PDAC切除术后患者DFS和OS方面有一定临床价值,这将为患者风险分层管理和个体化治疗提供参考。

胰腺星状细胞在胰腺导管腺癌肿瘤微环境中的作用研究进展

胰腺导管腺癌(PDAC)是胰腺癌中一种常见的恶性肿瘤类型,疾病进展快、恶性程度高、预后差、对放化疗不敏感。PDAC的恶化、远处转移、治疗抵抗不仅取决于PDAC细胞,肿瘤微环境在疾病进展与演变的过程中也发挥着不可或缺的作用。胰腺星状细胞(PSCs)是建设肿瘤微环境重要的参与者,为癌细胞的“成长”构建一个“舒适”的微环境。本文通过总结PSCs在肿瘤微环境的发挥的作用以及对PDAC的影响,希望可以从肿瘤微环境方面改善治疗方案,提高患者的生存率。

整合数据库筛选胰腺导管腺癌铁死亡核心基因及预后分析

目的筛选胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)铁死亡核心基因及预后分析。方法基于基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库,选取GSE71989数据集,借助limma包和铁死亡数据集对差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行筛选。利用Metascape数据库进行富集分析、String数据库建立蛋白质互作网络(protein-protein interaction network,PPI),采用最大集团中心性(matthews correlation coefficient,MCC)算法筛选预后相关核心基因。利用Kaplan Meier plotter、R、GEPIA2和TIMER数据库对所筛选的核心基因进行预后分析并验证,基于CMap数据库筛选PDAC潜在治疗药物。结果筛选共得到2038个DEGs,其中上调基因1552个、下调基因486个,与铁死亡数据集相交,得到66个共同DEGs;京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析显示,铁死亡相关基因富集通路包括铁死亡途径、白介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、化学致癌作用-活性氧通路、过氧化物酶体增殖物活化受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)信号通路和低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)信号通路等;MCC算法得到预后核心靶点:还原氢氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)、小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV1)、缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1 subunit alpha,HIF1A)、过氧化物酶体增殖因子激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARG)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素内过氧化物合成酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2);验证分析提示核心基因均为高表达基因、与患者总生存率密切且均具有诊断价值(P<0.05);免疫浸润表明NOX4、HIF1A和IL-6基因与巨噬细胞、中性粒细胞浸润水平呈正相关关系(P<0.05)。NOX4、CAV1和H1F1A基因与CD8+、DC细胞浸润水平呈正相关关系(P<0.05)。筛选所得小分子药物包括HU-211、伊斯平斯和熊果酸,且所得小分子均与PDAC有较强相关性。结论基于整合数据库筛选所得铁死亡相关基因(NOX4、CAV1、HIF1A、PPARG、IL-6、PTGS2)对PDAC有较高诊断价值,可能为预后相关诊断指标。

胰腺导管腺癌(PDAC)肿瘤微环境中胰腺星状细胞的重要作用相关研究进展

胰腺导管腺癌(PDAC)属恶性肿瘤疾病范畴,以病情进展速度快、恶性病变程度高、易出现远端转移且放化疗敏感度差等为疾病特点。肿瘤微环境的形成及演变,对于肿瘤疾病病情发展及肿瘤性质演变具有参与性,而胰腺星状细胞作为肿瘤微环境参与成分,则将影响肿瘤微环境形成、肿瘤增长。本次就胰腺星状细胞在胰腺导管腺癌肿瘤微环境中作用进行综合性叙述,进而为相关人员提供一定的支持以及参考。

线粒体融合蛋白2在胰腺导管腺癌中的研究进展

胰腺癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,其恶性程度高,早期病情隐匿,5年生存率仅为15%~20%。因此寻找精准有效的分子诊断标志物及治疗靶点至关重要。线粒体融合蛋白2(MFN2)是人体一种重要的多功能蛋白,在生理和病理条件下参与各种生物过程,包括线粒体融合、线粒体自噬、脂质代谢、细胞增殖及凋亡等,其生物学活性与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。本文对MFN2的生物学功能及其在胰腺导管腺癌中的作用进行综述,期望为胰腺导管腺癌的诊断、治疗及预后评估提供新的肿瘤标志物及治疗方法。

FN对胰腺导管腺癌生物学行为的影响的研究进展

胰腺导管腺癌(PDAC)是一种高度恶性且高转移性的疾病,其对化疗的抵抗性很强,术后生存率也很低,预后极差,目前也并无其他疗效较好的治疗方法。PDAC的一个突出特征是存在大量的致密增生性基质,其促进了肿瘤细胞侵袭性和化学抗性的增加。纤维连接蛋白(FN)是一种在PDAC基质中含量丰富的糖蛋白,其能促进肿瘤细胞的转移扩散和增强肿瘤组织的化疗耐药性,且在一定程度上促进血管生成。本文中,我们讨论了FN对PDAC侵袭性和化疗耐受性的影响,并提出了可能的治疗策略。

KRT6A调控胰腺导管腺癌细胞生物学行为的作用及作为诊断与预后判断靶标的研究

目的:通过生物信息学分析以及细胞生物学实验研究角蛋白6A(KRT6A)对胰腺导管腺癌(PDAC)诊断、预后判断、免疫微环境以及PDAC细胞PANC1增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法:通过GEPIA平台整合TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库与GTEx(Genotype-Tissue)数据库中的数据,分析KTRT6A在PDAC组织中的表达情况,并通过CIBERSORT工具分析KRT6A表达与PDAC组织中免疫细胞浸润的关系,然后通过GSEA方法研究与KRT6A基因表达相关的肿瘤信号通路。选取长海医院病理科保存的60例PDAC组织与癌旁组织标本进行免疫组化分析,验证KRT6A在肿瘤组织中表达情况;通过干扰RNA敲减PANC1细胞中KRT6A的表达,采用CCK-8实验以及流式细胞术检测敲减KRT6A对细胞的增殖、凋亡的影响。结果:利用TCGA与GTEx数据库数据分析发现,KRT6A在人PDAC组织中呈高表达,且与患者较差的生存期存在关联(P=0.015)。利用CIBERSORT软件以及GSEA分析发现,KRT6A高表达的PDAC组织中M2型巨噬细胞浸润性升高(P=0.034),且与Wnt通路(NES:1.7359272,P<0.05)、磷酸戊糖途径(PPP)(NES:1.5613053,P<0.05)等信号通路上调有关联(P<0.05或P<0.01);免疫组化结果进一步验证了KRT6A在PDAC组织中呈高表达(P<0.001)。增殖和凋亡实验发现,干扰KRT6A能够显著抑制PANC1细胞的增殖(P<0.05)以及凋亡(P<0.001)。结论:KRT6A在人PDAC组织中呈高表达,敲减其表达能够抑制PANC1细胞的增殖和凋亡,具有作为PDAC诊断与预后判断新靶标的潜力。

胰腺导管腺癌类器官模型的建立及个体化治疗策略的筛选

近年来,胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)的发病率明显上升,且PDAC发病隐匿、恶性程度高、化疗反应差异大,导致5年相对生存率低。对癌症患者进行个体化针对性的治疗,可以较大程度改善临床患者预后。类器官(patient-derived organoid,PDO)是由干细胞增殖和分化形成的组织或器官样结构,是近年来新兴的体外3D培养模型。肿瘤PDO模型可以较好地维持原发瘤的组织形态特征。其构建策略是从患者肿瘤组织中提取原代细胞,利用生长因子和基质胶来创建模拟人体内的三维生长环境。类器官能在体外模拟肿瘤细胞的病理状态,比人体临床试验中的药物反应具有更高的相关性,可应用于临床患者的药物筛选,为肿瘤患者的个体化治疗提供了良好的实验平台。此外,通过深度测序或表型分析发现的基因突变和药物治疗靶点,对研究PDAC的发病机制和耐药性具有重要意义。在本研究中,作者重点探索了PDAC类器官模型的培养条件和构建方法,分析了影响类器官模型成功率的主要因素,同时利用病理分析和DNA测序证明了PDAC类器官保持了原发肿瘤组织的生物学特征。进一步选择了4种临床常用的化疗药物进行单一或联合治疗,分析药物在PDO模型中的敏感性,为PDO模型广泛应用于胰腺导管癌患者个体化药物筛选提供思路。

胰腺导管腺癌免疫相关基因预后风险模型的构建与评估

目的构建整合胰腺导管腺癌(PDAC)分子亚型和免疫相关基因的风险评估模型。方法以GSE71729数据集(n=145)为训练集,整合PDAC鳞状和非鳞状亚型之间差异表达基因和差异免疫相关基因构建调控网络,筛选发挥主调控鳞状亚型的5个免疫标志基因。基于患者生存信息和免疫标志基因构建整合免疫评分(IIS)模型来预测PDAC患者的临床预后,并在5个验证集(n=758)中检验其预测效能。结果根据IIS将PDAC患者分为高危组和低危组。在训练集和验证集中,高危组患者的总体生存期均短于低危组(P均<0.001)。多变量Cox回归分析显示IIS是PDAC的独立预后因子(HR=2.16,95%CI=1.50~3.10,P<0.001)。结论IIS可用于PDAC患者的危险分层,并可能成为PDAC潜在的预后标志物。