成纤维细胞生长因子受体1 抑制剂对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响

背景:课题组前期的研究表明靶向成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)可能是治疗类风湿性关节炎的有效靶点。目的:探讨FGFR1抑制剂(PD173074)对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组、PD173074低剂量组、PD173074高剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。造模成功后正常组及模型组大鼠腹腔注射无菌PBS,甲氨蝶呤组药物注射剂量为1.04 mg/kg,PD173074低剂量组和高剂量组药物注射剂量分别为5,20 mg/kg,1次/周。给药4周后取材,观察大鼠临床症状以及关节肿胀情况,踝关节Micro-CT三维重建及分析,观察踝关节病理变化,检测关节周围血管生成情况及核因子κB受体活化因子配体的表达,检测关节滑膜中p-FGFR1、血管内皮生长因子A、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达,观察肝、脾、肾病理变化并计算肝、脾、肾指数。结果与结论:①PD173074能够减轻模型大鼠踝关节临床症状及关节肿胀,延缓骨质丢失,改善骨结构,减轻关节滑膜侵袭以及软骨骨侵蚀,降低关节周围破骨细胞数量,抑制关节滑膜组织中的血管生成,降低核因子κB受体活化因子配体的表达,抑制FGFR1磷酸化蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶和血管内皮生长因子A的蛋白表达。②大鼠肝、脾、肾病理观察表明经过PD173074治疗后无明显的毒副作用。③研究证明了FGFR1抑制剂能够延缓Ⅱ型胶原诱导关节炎模型大鼠关节炎症及骨破坏的进展,并抑制血管的生成。初步验证了PD173074在Ⅱ型胶原诱导关节炎模型中的治疗作用,其可能是通过抑制FGFR1磷酸化发挥作用,为寻找类风湿性关节炎新的治疗靶点提供了方向。

谷胱甘肽通过组蛋白H3K27去甲基化调控巨噬细胞糖代谢及炎症改善鼠胶原诱导关节炎

目的:探讨谷胱甘肽(GSH)对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的治疗作用及其相关机制。方法:(1)建立体内模型:14只雌性DBA/1J小鼠随机分为CIA+PBS组和CIA+GSH组,第50天处死小鼠,收集血清,分离培养骨髓来源巨噬细胞(BMDM),记为BMDM1。(2)建立离体受损后免疫(TI)模型:分离培养正常小鼠BMDM,给予H3K27去甲基化酶抑制剂GSKJ1及PBS预刺激细胞2 h,然后采用体内模型两组小鼠血清孵育24 h,具体分组如下:(CIA+GSH)+PBS组,(CIA+GSH)+GSKJ1组,(CIA+PBS)+PBS组,(CIA+PBS)+GSKJ组。于第6天以LPS(10 ng/ml)刺激细胞24 h,记为BMDM2。(3)将BMDM1、BMDM2细胞提取总RNA并进行转录组学测序,得到差异表达基因,分析差异基因涉及生物学过程,通过qPCR检测糖代谢关键酶磷酸果糖激酶(PFK)和异柠檬酸脱氢酶(Idh3g)mRNA水平。收集BMDM1、BMDM2细胞培养上清,ELISA检测上清中TNF-α、IL-6的表达情况。结果:(1)与CIA+PBS组相比,CIA+GSH组小鼠关节肿胀程度减轻(P<0.05),关节炎评分降低(P<0.05);HE染色显示小鼠关节炎症细胞浸润减少,番红-O固绿染色显示软骨细胞增多,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色提示破骨细胞数目减少。(2)在BMDM1中,差异表达基因GO分析结果提示,CIA+GSH组与CIA+PBS组相比,差异表达基因涉及的生物过程主要包括:谷胱甘肽衍生物代谢过程、IL-6产生、炎症应答、固有免疫应答、主要代谢过程、糖脂结合等。与CIA+PBS组相比,CIA+GSH组Idh3g mRNA水平升高(P<0.05),PFK表达水平降低(P<0.05);炎症因子IL-6、TNF-α蛋白表达水平均降低(P<0.05)。在BMDM2中,差异表达基因GO分析结果提示,(CIA+GSH)+PBS组与(CIA+PBS)+PBS组相比,差异表达基因涉及的生物过程主要包括:炎症应答的激活、肿瘤坏死因子产生的调节、IL-6产生的调节、糖酵解过程的调节、1,3-β-D-葡聚糖等。与(CIA+PBS)+PBS组相比,(CIA+GSH)+PBS组Idh3g mRNA表达水平升高(P<0.05)、PFK表达水平降低(P<0.05),IL-6蛋白水平降低(P<0.05),两组TNF-α表达水平无明显差异;(CIA+GSH)+GSKJ1组与(CIA+PBS)+GSKJ1组相比,Idh3g、PFK表达水平无明显差异,IL-6、TNF-α表达水平均升高(P<0.05)。结论:GSH代谢通过H3K27去甲基化调控BMDM糖代谢关键酶基因及炎症因子表达,缓解CIA小鼠病情。

Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型制备

目的:研究建立较为理想的寒湿痹型实验性类风湿关节炎模型。方法:采用不同浓度Ⅱ型胶原和弗氏佐剂联合应用于大鼠足部注射,诱导关节炎;测量大鼠足肿胀度,并计算肿胀率;检测血清唾液酸水平;观察滑膜组织病理学及超微结构变化。结果:低浓度Ⅱ型胶原和完全佐剂组大鼠关节肿势迅猛,近似于佐剂关节炎大鼠模型,高浓度Ⅱ型胶原和不完全佐剂组大鼠关节肿势和缓;各模型组大鼠血清唾液酸水平均高于正常对照组;滑膜组织的病理学变化与类风湿关节炎相符。结论:高浓度的Ⅱ型胶原加不完全佐剂给药组是较为理想类风湿关节炎大鼠模型,中医辩证属寒湿痹症,与之相比较,佐剂关节炎模型接近于湿热痹症。

紫草素对胶原诱导关节炎IL-18、IL-10表达影响的研究

目的研究紫草素对Ⅱ型胶原诱导的关节炎IL-18、IL-10表达的影响。方法紫草素及对照药物口服给药CIA小鼠,连用30 d,用酶联免疫吸附测定试剂盒测定CIA小鼠脾中的IL-18、IL-10;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的IL-18、IL-10表达水平。结果紫草素降低了CIA小鼠脾细胞中IL-18(P<0.05),提高了IL-10(P<0.005),髌骨及邻近滑膜组织的IL-18mRNA水平与对照组相比显著被抑制(P<0.05),IL-10mRNA水平表达显著升高(P<0.05)。结论紫草素可能通过抑制IL-18,提高IL-10发挥对CIA小鼠的治疗作用。

紫草素对胶原诱导关节炎MMP-1和TIMP-1表达影响的研究

目的:研究紫草素对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)MMP-1、TIMP-1表达的影响。方法:紫草素及对照药物口服给药CIA小鼠,连用30天,用酶联免疫吸附测定试剂盒测定CIA小鼠血清中的MMP-1、TIMP-1;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1、TIMP-1表达水平。结果:与模型组(775.9 102.12)相比,紫草素组(255.9 103.7)降低了CIA小鼠血清中MMP-1水平(P<0.001),紫草素组(135.3 9.1)与模型组(106.3 7.07)相比,升高了TIMP-1水平(P<0.05),髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1mRNA水平与对照组相比显著被抑制(P<0.05);TIMP-1mRNA水平与对照组相比明显升高(P<0.05)。结论:紫草素可能通过抑制MMP-1,提高TIMP-1发挥对CIA小鼠的治疗作用。

外感风寒湿热对胶原诱导关节炎大鼠血清CD44水平的影响

目的:观察外感湿邪对胶原诱导关节炎(CIA)大鼠血清CD44水平的影响。方法:选取Wistar大鼠50只,随机分成5组,每组10只,分别为正常组、模型组、风寒湿组、风湿组及风湿热组,造模1个月后取大鼠踝关节滑膜进行病理切片,同时摘取眼球取血,用ELISA检测血清中CD44的变化情况。结果:模型组、风寒湿组、风湿组及风湿热组与正常组比较,滑膜细胞都有不同程度的增生,以风寒湿组增生最为明显,其次为风湿热组,风湿组次之,模型组增生程度最低;血清CD44水平均亦明显升高,差异有显著意义;5个实验组两两比较CD44值差异均有统计学意义。且各组血清CD44水平与其滑膜炎症程度呈正相关。结论:风、寒、湿、热等外邪对CIA发病是有影响的,影响程度以风寒湿组最为严重;在各造模组中,CD44水平明显升高,提示CD44可能参与了CIA的发生,且风、寒、湿、热等外在因素能加重CD44的表达,其中风寒湿组CD44表达值最高。

四妙丸对高脂饮食胶原诱导关节炎大鼠血脂及关节的影响

目的比较四妙丸和甲氨蝶呤对高脂饲料胶原诱导关节炎(CIA)大鼠的影响,明确四妙丸对关节炎和血脂的影响。方法选用Wistar大鼠建立高脂饲料的关节炎模型,观察四妙丸和甲氨蝶呤两种治疗4周后大鼠关节炎指数积分、滑膜HE染色以及检测血清中血脂和炎症因子的浓度。结果 CIA大鼠经甲氨蝶呤和四妙丸治疗后关节炎指数积分均明显下降,病理切片的滑膜增生层次和炎症细胞浸润均明显改善。与甲氨蝶呤组比较,四妙丸组血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平明显降低(P<0.01),而高密度脂蛋白胆固醇则明显升高(P<0.01);前炎症因子肿瘤坏死因子-α浓度下降(P<0.05),而白介素-17浓度则明显升高(P<0.05)。结论四妙丸可能兼具有抑制免疫和降低血脂的作用来阻止CIA的进展。

雷公藤多甙对胶原诱导关节炎大鼠的治疗作用及其作用机制

目的探讨雷公藤多甙对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)动物模型,胶原诱导关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)、血管内皮生长因子(vascuoar endothelial cell growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-1、2、9表达的影响,及对成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)ERK信号转导通路的影响,研究雷公藤多甙治疗RA的可能机制。方法采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;观察雷公藤多甙治疗后模型大鼠关节肿胀情况,用免疫组化法观察大鼠关节炎症及滑膜微血管密度;用Western blot法检测CIA大鼠血清IL-1β、TNF-α、VEGF、MMP-1、2、9的表达,并用胶原酶消化法分离培养正常大鼠及CIA大鼠原代FLS;用Western blot法检测不同浓度雷公藤多甙治疗后CIA大鼠FLS中ERK和p-ERK的表达。结果 CIA大鼠造模成功,雷公藤多甙治疗能降低CIA大鼠血清炎症因子及血管新生相关因子表达(P<0.05);免疫组化结果显示雷公藤多甙能抑制CIA大鼠关节滑膜血管新生(P<0.05);不同浓度雷公藤多甙对FLS中ERK蛋白表达无明显影响,但可降低FLS的p-ERK表达(P<0.05)。结论雷公藤多甙对CIA大鼠抗炎及抑制血管新生的作用可能与调节ERK信号转导通路有关。

川芎嗪联合来氟米特对胶原诱导关节炎大鼠血小板活化和炎症反应的影响

目的:探讨川芎嗪联合来氟米特对胶原诱导关节炎大鼠血小板活化和炎症反应的影响。方法:将50只SD大鼠随机取10只作为正常组,其余制备大鼠关节炎模型,将成模大鼠分为模型组(CIA组)、川芎嗪组(TMP组)、来氟米特组(LEF组)、川芎嗪联合来氟米特组(T+L组),各药物干预组分别给予相应药物,计算关节炎指数并观察关节病理变化,检测血清CRP及PDGF-BB水平,血浆GMP-140及VCAM-1水平。结果:与正常组比较,CIA组大鼠关节滑膜出现明显细胞增生、炎细胞浸润、血管翳形成浸入软骨,CRP及PDGF-BB水平、GMP-140及VCAM-1水平均显著上升;与CIA组比较,各药物干预组大鼠关节病理变化中滑膜增生、炎性细胞浸润、血管翳和骨破坏形成均有改善,大鼠关节炎指数均减小,双后肢关节红肿程度评分均降低,CRP、PDGF-BB蛋白水平、GMP-140水平及VCAM-1水平均降低,其中联合用药组效果优于TMP组和LEF组。结论:川芎嗪联合来氟米特能够显著抑制胶原诱导关节炎大鼠的血小板活化和炎症反应,对于RA患者具有潜在的应用价值。

蜂针对胶原诱导关节炎大鼠HPA轴的影响

目的:本课题采用前瞻性对照研究,观察蜂针对胶原诱导关节炎(CIA)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)的影响。方法:采用弗氏不完全佐剂乳化的Ⅱ型胶原乳剂造模。将53只造模成功的大鼠按简单随机法分为模型组、蜂针肾俞组、蜂针后三里组、西药组、蒸馏水组等,并设立正常组进行对照。其中西药组13只大鼠,其余各组每组10只大鼠。结果:蜂针组与西药组大鼠的IL-1、IL-6及TNF-α等致炎细胞因子水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,蜂针肾俞组、蜂针后三里组大鼠的CRH和ACTH水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);蜂针肾俞组大鼠的COR水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蜂针可有效抑制CIA大鼠体内细胞因子的水平,改善HPA轴免疫调节的作用。

大鼠胶原诱导关节炎模型的建立及评价

目的建立Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型及评价方法。方法大鼠皮内注射鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)与完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂建立模型,监测动物体重、后足容积、关节炎指数(AI)以及热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)和机械痛阈(MWT),免疫后第四十二天行影像学检查并取材进行组织病理学检查;酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物血清抗CⅡ抗体、IL-1β及TNF-α水平。结果 CIA大鼠体重增长缓慢,后足红肿明显,后足容积显著高于对照组,AI呈上升趋势,后足PWTL及MWT均显著降低,影像学检查发现关节腔狭窄,关节结构模糊,组织病理学检查可观察到明显炎症细胞浸润、关节结构的破坏及滑膜增生,ELISA结果显示CIA大鼠血清抗CⅡ抗体、IL-1β及TNF-α水平显著升高。结论本文成功建立了CIA大鼠模型及模型评价方法。

雷公藤多苷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜肥大细胞浸润和活化的影响

观察雷公藤多苷(GTW)对胶原诱导关节炎(CIA)大鼠滑膜肥大细胞数量和类胰蛋白酶水平的影响。采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导建立CIA大鼠模型后,分设正常组、模型组和GTW组(50mg/(kg/d),ig),正常组和模型组给予等体积溶媒,每天1次,连续28d。监测大鼠的关节炎指数评分,HE染色评价滑膜组织病理学改变,俾士麦棕染色观察滑膜肥大细胞浸润情况,ELISA检测滑膜组织类胰蛋白酶水平。结果显示,GTW可以显著降低CIA大鼠关节肿胀度,减轻滑膜炎症和关节破坏,减少CIA大鼠滑膜肥大细胞浸润,降低滑膜组织类胰蛋白酶水平。因此,GTW可以通过减少滑膜肥大细胞浸润、抑制其活化发挥抗RA作用。

脐带间充质干细胞移植治疗大鼠胶原诱导关节炎模型的疗效观察

目的探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)移植治疗大鼠胶原诱导关节炎(CIA)模型的疗效。方法 40只造模成功的Wistar大鼠随机分为MSCs移植治疗组(MSC组,n=20)、细胞对照组(FLS组,n=10)、疾病对照组(CIA组,n=10),10只正常的Wistar大鼠作为正常对照组。采用AI评分来评价CIA大鼠关节肿胀程度。第17天予MSC组CIA大鼠尾静脉注射1×106UCMSCs,FLSs组CIA大鼠尾静脉注射等量成纤维样滑膜细胞。第42天处死所有大鼠,外周血分离血清,踝关节HE染色。ELISA法检测血清中TNF-α、TGF-β、IL-1β、IL-6水平。踝关节病理评价关节间隙狭窄程度。结果 MSC组大鼠关节AI低于FLS组和CIA组(P<0.05);HE染色示CIA大鼠造模后踝关节出现炎性细胞浸润及关节腔狭窄,但MSC治疗组关节间隙明显好于CIA组和FLS组;CIA组和FLS组TNF-α、IL-1β、IL-6水平均高于正常对照组,MSC治疗组TNF-α、IL-1β、IL-6水平较CIA组和FLS组均有显著下降(P<0.05);TGF-β在对照组与CIA组间差异无统计学意义,但输注MSC后TGF-β得到上调(P<0.01)。结论 UCMSCs移植能通过抑制炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6,上调抑炎细胞因子TGF-β来减轻CIA大鼠关节炎症和软骨破坏。

高脂饲料对胶原诱导关节炎大鼠关节的影响

目的通过比较不同饮食对胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节的影响,明确高脂饲料对关节炎的作用。方法选用Wistar大鼠建立关节炎模型,给予普通和高脂饲料,观察不同饮食条件下大鼠关节炎指数积分、滑膜HE染色以及检测血清中血脂和炎症因子的浓度。结果与普通饲料CIA大鼠组比较,高脂饲料的CIA大鼠关节炎指数积分增加且持续加重,病理切片的滑膜增生层次、血管翳形成和炎性细胞浸润均明显增高,高脂饲料CIA组血清中TC、LDL-C水平明显升高(P<0.01),而HDL-C则明显降低(P<0.05),前炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-17的浓度也明显升高(P<0.05)。结论高脂饲料可能通过增强滑膜增生和促进炎症因子来促进CIA关节炎的进展。

关节腔内注射雷公藤甲素治疗胶原诱导关节炎大鼠的实验研究

目的:探讨关节腔内注射雷公藤甲素治疗胶原诱导关节炎(CIA)大鼠的疗效。方法:采用牛Ⅱ型胶原尾根皮下2次免疫诱导SD大鼠建立CIA模型。完全随机法将CIA大鼠分成4组,分别于二次免疫1周后在大鼠关节腔内分别注射雷公藤甲素(TP)、复方倍他米松、依那西普及0.9%NaCl溶液(阳性对照组),每周1次,连续注射4周,注射完毕后1周处死动物,取其足部制作病理切片,观察各组之间关节滑膜的病理变化,并与正常对照组SD大鼠的关节滑膜进行比较。结果:制作CIA大鼠模型的成功率为88.9%。TP组、复方倍他米松组、依那西普组及阳性对照组大鼠中滑膜炎的病理评分明显高于正常对照组。TP组、复方倍他米松组及依那西普组大鼠中滑膜炎的病理评分明显低于阳性对照组(P<0.05)。TP组与复方倍他米松组大鼠中滑膜炎的病理评分明显低于依那西普组(P<0.05),而TP组中滑膜炎的病理评分与复方倍他米松组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TP与糖皮质激素在关节腔内注射均可以有效地治疗CIA大鼠的关节炎,TP可能成为类风湿关节炎的备选药物。

周龄对C57BL/6小鼠胶原诱导关节炎造模成功率的影响

目的:建立C57BL/6小鼠胶原诱导关节炎(CIA)模型,探讨小鼠周龄对造模成功率的影响。方法:取C57BL/6小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只。相同饲养条件下分别饲养到7,10,11,12及14周龄,相同造模方法构建小鼠CIA模型,观察小鼠造模成功率。结果:7周,10周,11周,12周及14周小鼠造模成功率分别为20%,30%,30%,50%及60%,其中雌性小鼠占46%,雄性小鼠占54%。结论:胶原诱导关节炎小鼠造模成功率受周龄影响,14周时成功率可达60%;造模成功率不受小鼠性别影响。

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠的免疫调控作用

目的:研究补肾通督胶囊对CIA大鼠的免疫调控作用。方法:将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊(BS)低剂量组、中剂量组、高剂量组和雷公藤组,接受相应治疗。结果:BS对脾脏、外周血淋巴细胞有调控作用,对血清IL6和Ⅱ型胶原蛋白抗体的水平有抑制作用。结论:补肾通督胶囊对外周血淋巴细胞的调控作用效果显著。

海蛇药酒对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠外周血中CD4^+/CD8^+及IgA、IgM、IgG的影响

目的研究海蛇药酒对Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠外周血中CD4^+/CD8^+及IgA、IgM、IgG的影响,探讨其对类风湿关节炎(RA)的治疗作用。方法设立正常组、模型组、阳性对照组及海蛇药酒组,建立Ⅱ型CIA大鼠模型。应用流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4^+、CD8^+值,ELISA法检测大鼠外周血中IgA、IgM、IgG水平。结果与正常组比较,模型组CD4^+/CD8^+值、IgM、IgA、IgG水平均升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组与海蛇药酒组CD4^+/CD8^+值、IgM、IgA、IgG水平均降低(P<0.05);与阳性对照组比较,海蛇药酒组CD8^+值降低,IgM及IgG水平值升高,差异有统计学意义(P<0.05),其他指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论海蛇药酒可能通过纠正CD4^+/CD8^+的失衡而调节RA免疫功能紊乱,降低IgM、IgA、IgG水平,抑制免疫球蛋白的分泌及炎症反应,达到治疗RA的作用。

依达拉奉对大鼠胶原诱导关节炎的治疗作用及其机制

目的观察依达拉奉(MCI-186)对大鼠胶原诱导关节炎(CIA)的治疗作用及其可能机制。方法选用24只成年雄性Wistar大鼠,随机分成4组,每组6只,分别为正常组,模型组,依达拉奉低、高剂量组。测定不同时间点各组大鼠的踝关节足垫厚度,生化方法检测了各组大鼠血浆总超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、对大鼠滑膜组织进行组织核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF)-α的SP免疫组织化学染色,采用真彩色病理图像分析系统进行定量分析。取大鼠双膝关节滑膜组织,光镜下观察关节滑膜衬里层细胞(LCC)增生,衬里下层炎细胞浸润及血管翳形成等病理变化。结果与正常组相比,模型组血浆总SOD活力下降,MDA含量升高,滑膜组织NF-κB、TNF-α表达增加。依达拉奉高低剂量组均能提高血浆总SOD活力,降低MDA含量,使滑膜NF-κB、TNF-α表达下降,但两组比较无差异。组织形态学光镜下表明依达拉奉组滑膜衬里层增生减少,少见血管翳的形成。结论依达拉奉对CIA大鼠有明显的抗氧自由基及抗炎作用,能够降低CIA大鼠足垫肿胀程度,抗氧化及抑制炎性因子可能是其主要作用机制。

金荞麦药酒对胶原诱导关节炎大鼠凋亡基因及基质蛋白酶的影响

目的观察金荞麦药酒对胶原诱导关节炎老年大鼠模型、血清基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、滑膜细胞相关凋亡基因caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达、脾脏淋巴细胞凋亡率及膝关节滑膜巨噬细胞密度的影响。方法 60只18月龄雌性SD大鼠,随机分成正常组、模型组、阳性对照组、高剂量金荞麦组、中剂量金荞麦组、低剂量金荞麦组,建立Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型。药物干预21 d后,测定大鼠左后足跖肿胀体积,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清MMP-2、MMP-9的含量,RT-PCR检测滑膜细胞凋亡相关基因caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA的表达水平,流式细胞术分析脾脏淋巴细胞凋亡率,免疫组化法检测膝关节滑膜巨噬细胞密度。结果与正常组比较,模型组足跖肿胀体积、血清MMP-2和MMP-9的含量、膝关节滑膜巨噬细胞密度明显增加,caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA及脾脏淋巴细胞凋亡率明显下降,各给药组上述指标均得到明显改善。结论金荞麦药酒治疗胶原诱导关节炎的机制可能与调节血清MMP-2、MMP-9和滑膜细胞相关凋亡基因caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA表达及脾脏淋巴细胞凋亡和滑膜巨噬细胞密度有关。