单胺氧化酶A基因多态性与急性脑卒中后抑郁及奥氮平疗效的相关性分析

目的探讨单胺氧化酶A(MAOA)基因多态性与急性脑卒中后抑郁及奥氮平疗效的相关性。方法回顾性选取2020年9月至2022年9月南方医科大学珠江医院收治的172例急性脑卒中患者作为研究对象,根据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分将患者分为抑郁组(HAMD评分≥8分,76例)和非抑郁组(HAMD评分<8分,96例),抑郁组患者均接受奥氮平口服治疗。检测所有患者MAOA串联重复序列(MAOA-uVNTR)基因型及等位基因分布,收集一般资料、治疗前HAMD评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和日常生活能力量表(ADL)评分以及抑郁组患者治疗后的各项评分。使用多因素Logistic回归模型分析急性脑卒中后抑郁的影响因素、MAOA基因多态性与影响因素的交互作用及不同基因型与奥氮平疗效的相关性。结果2组家庭年收入、家庭关系、卒中次数、病灶数目、NIHSS评分、ADL评分比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。基因多态性检测结果显示,抑郁组LL型28例(36.8%)、SL型26例(34.2%)、SS型22例(28.9%),非抑郁组LL型16例(16.7%)、SL型42例(43.8%)、SS型38例(39.6%),2组基因型分布比较差异有统计学意义(P=0.033)。多因素Logistic回归分析结果显示,卒中次数、病灶数目、NIHSS评分、ADL评分是急性脑卒中后抑郁的独立影响因素(均P<0.05);将上述因素与MAOA-uVNTR基因代入Logistic回归模型进行交互作用分析,结果显示NIHSS评分与MAOA-uVNTR基因存在交互作用(P<0.05)。奥氮平治疗后,LL型、SL型、SS型患者HAMD、NIHSS评分均低于治疗前,ADL评分高于治疗前,且SL型和SS型患者HAMD、NIHSS评分均低于LL型患者,ADL评分高于LL型患者(均P<0.05);以LL型为参考,奥氮平对SS型的疗效更优(比值比=2.786,95%置信区间:2.432~3.564,P=0.016)。结论MAOA基因多态性与急性脑卒中后抑郁及奥氮平疗效存在相关性。

单胺氧化酶A(MAOA)在前列腺癌进展中的作用

单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)是一种催化单胺类神经递质和膳食胺氧化脱氨反应的线粒体酶,在神经精神疾病的发病、进展和治疗中发挥着重要作用。最近有研究发现前列腺癌(prostate cancer,PCa)中的MAOA表达升高与肿瘤的进展密切相关,是驱动PCa异质性转化的重要因素。本文主要综述了MAOA在前列腺癌不同病程发展中的作用,包括前列腺癌的发生、发展、侵袭、转移以及耐药。讨论了MAOA在肿瘤微环境中的作用及其抑制剂的潜在用途,进一步提出了在临床前模型中开展基于靶向MAOA的治疗研究,推动相关临床试验,以期为PCa的治疗提供新的潜在治疗靶点。

单胺氧化酶、新型CHA_(2)DS_(2)-VASc-HSF评分预测急性ST段抬高型心肌梗死病人急诊PCI术后发生无复流的价值

目的:探讨单胺氧化酶(MAO)、新型CHA_(2)DS_(2)-VASc-HSF评分对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病人经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后发生无复流的预测价值。方法:选取2019年1月—2021年11月于孝感市中心医院心内科住院的STEMI病人289例,根据PCI术后心肌是否发生无复流分为复流组(221例)与无复流组(68例)。结果:与复流组相比,无复流组MAO、新型CHA_(2)DS_(2)-VASc-HSF评分、白细胞计数及Killip分级>1级占比较高(P<0.05)。Logistic回归分析显示,MAO、新型CHA_(2)DS_(2)-VASc-HSF评分、Killip分级>1级是STEMI病人PCI术后发生无复流的影响因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,MAO、新型CHA_(2)DS_(2)-VASc-HSF评分及二者联合预测无复流的曲线下面积(AUC)分别为0.762,0.803,0.859(P<0.001),优于任一单项指标(P<0.05)。结论:MAO、新型CHA_(2)DS_(2)-VASc-HSF评分对STEMI病人PCI术后无复流的发生具有预测价值,二者联合较任一单项指标预测价值更高。

猕猴桃多胺氧化酶基因家族的鉴定及表达分析

通过鉴定猕猴桃多胺氧化酶(PAO)基因家族成员,分析其在猕猴桃果实生长发育、成熟及储藏过程中的表达变化,发掘与猕猴桃果实成熟、软化相关的重要候选基因,为调控猕猴桃鲜果的发育及采后保鲜提供参考。以拟南芥AtPAO、水稻OsPAO蛋白序列作为参考序列,利用BLAST程序分别从中华猕猴桃、毛花猕猴桃、软枣猕猴桃基因组或转录组中筛选和鉴定PAO家族成员;利用Compute pI/Mw分析蛋白质分子质量、理论等电点,利用SignalP-4.1、TMHMM-2.0预测信号肽和跨膜区,利用WoLF PSORT进行亚细胞定位预测;利用MEGA 6构建系统发育进化树,利用MEME进行保守基序分析,利用TBtools分析PAO基因的共线性关系;基于转录组数据和荧光定量PCR技术,分析PAO基因的组织表达情况及其在猕猴桃果实生长发育、成熟及储藏过程中的表达变化。结果表明,中华猕猴桃、毛花猕猴桃、软枣猕猴桃中各存在4、4、5个PAO基因,分别是AcPAO1—4、AePAO1—4、AaPAO1—5。AcPAO、AePAO位于中华猕猴桃、毛花猕猴桃的8条染色体上,基因长度为1722~9837 bp。AcPAO、AePAO、AaPAO编码的氨基酸数目为420~496个,分子质量为45.74~55.92 ku,等电点为5.29~5.79,均不含有信号肽和跨膜区;AcPAO、AaPAO主要定位在过氧化物酶体,而AePAO分布范围较广;依据系统进化关系,13个猕猴桃PAO蛋白分属于3个类群,同一类群含有相似的motif分布及保守结构域;AcPAO、AePAO间存在4对共线性基因,它们在进化中经历了纯化选择。AcPAO3的表达量随猕猴桃果实成熟、软化呈现先升高后降低趋势,且能够响应不同储藏温度;AaPAO为组成型表达,多数成员的表达量在果实储藏过程中亦呈现先升高后降低的趋势。

水稻多胺氧化酶基因(OsPAO4)CRISPR/Cas9编辑突变体的创制

【目的】稻瘟病是水稻生产上的重要限制因素,挖掘与利用抗病基因是实现水稻高产稳产的重要保障。前期研究发现,稻瘟病抗性相关osa-miR-21可能通过靶向调控多胺氧化酶基因OsPAO4调节水稻稻瘟病抗性,但目前多胺氧化酶(Polyamine oxidases,PAOs)在水稻抗病中的功能研究尚未见报道。为进一步探究其在水稻抗病中的可能生物学功能,本研究利用CRISPR/Cas9编辑技术对水稻OsPAO4基因进行定点编辑并对其后代突变体进行分析。【方法】在OsPAO4第2外显子处设计了1个20 bp的编辑靶点,将靶点核苷酸片段克隆至pRGEB32载体,获得OsPAO4编辑载体。随后,利用农杆菌介导法转化水稻Pik-H4 NIL愈伤组织中,经过再生培养、潮霉素检测获得转基因阳性植株,并对T_(0)代植株靶位点附近DNA序列进行PCR和测序分析。【结果】OsPAO4基因被成功编辑,最终获得25个转基因阳性植株,并在T_(0)代产生多种突变类型:3株纯合突变、18株杂合突变和4株未发生编辑的植株。此外,T_(0)代杂合突变ospao4-8的颖壳颜色由紫色变为深灰色,且ospao4突变体中过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性有所升高,推测OsPAO4可能参与水稻的基础免疫过程。【结论】创制了多种类型ospao4突变体材料,初步确定OsPAO4可能参与水稻免疫过程的调控,为进一步深入揭示OsPAO4基因的具体生物学功能和分子调控机制奠定了重要基础。

姜黄素联合单胺氧化酶A抑制剂氯吉灵对肺癌细胞增殖的影响

目的 研究姜黄素(curcumin, Cur)联合单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)抑制剂氯吉灵(clorgyline, Clo)对肺癌细胞增殖的影响及作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度Cur和Clo对肺癌细胞H460增殖的作用;Western Blot检测Cur、Clo、Cur联合Clo对H460细胞MAOA表达水平的影响;裸鼠移植瘤模型研究Cur、Clo、Cur联合Clo对H460细胞体内增殖的抑制作用;免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)检测裸鼠移植瘤组织中各治疗组的Ki67蛋白表达变化,TUNEL染色检测裸鼠移植瘤组织中各治疗组细胞的凋亡水平。结果 Cur、 Clo、Cur联合Clo对H460细胞增殖均有抑制作用,且呈现剂量依赖性;并且能够抑制H460细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.01),降低Ki67的表达水平,增加细胞凋亡,且联合组呈现更显著的抑制效果(P<0.01)。结论Cur联合Clo抑制H460肺癌细胞的增殖,其机制可能与降低细胞增殖蛋白Ki67的表达、增加细胞凋亡有关。

血清腺苷脱氨酶与单胺氧化酶联合血脂检验在诊断脂肪肝中的临床意义

目的分析血清腺苷脱氨酶(ADA)与单胺氧化酶(MAO)联合血脂检验在诊断脂肪肝中的临床意义。方法选取成武县人民医院2017年5月-2020年7月脂肪肝患者86例作为脂肪肝组,轻度47例、中度25例、重度14例,并以1∶1配比选取同期健康体检者86例作为健康体检组,对比2组血清ADA、MAO水平、血脂水平,比较脂肪肝组不同病情程度血清ADA、MAO水平、血脂水平,分析其相关性。结果脂肪肝组血清ADA、MAO水平较健康体检组高,差异有统计学意义(P<0.05);脂肪肝组TG、TC、LDL-C水平较健康体检组高,HDL-C水平较健康体检组低,差异有统计学意义(P<0.05)。脂肪肝组重度患者血清ADA、MAO水平较低度、中度患者高,差异有统计学意义(P<0.05);脂肪肝组重度患者TG、TC、LDL-C水平较轻度、中度患者高,HDL-C水平较轻度、中度患者低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson分析显示,ADA(r=0.684)、MAO(r=0.691)、TG(r=0.705)、TC(r=0.637)、LDL-C(r=0.613)和脂肪肝病情程度呈正相关,HDL-C(r=-0.496)和脂肪肝病情程度呈负相关(P<0.05)。结论脂肪肝患者病情严重程度与血清ADA、MAO及血脂水平具有相关性,临床可通过检验上述指标水平评估病情严重程度和疾病进展,为临床制定治疗方案提供科学依据。

单胺氧化酶A介导的活性氧簇在心血管疾病中的作用

心血管疾病是人类最常见的死亡原因之一,其发病率逐年上升,因此,寻找有效的心血管疾病预防和诊治方法越来越迫切。单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAO-A)是一种定位于线粒体外膜的黄素酶,负责5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的氧化脱氨,在这个过程中伴随过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))、醛和氨等活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的堆积。过量产生的ROS通过靶向线粒体DNA,导致线粒体功能障碍,从而加速ROS的产生,这是引起心脏氧化应激和心脏损伤的主要原因。既往MAO-A抑制剂多用于精神及神经系统疾病的治疗,但MAO-A在心血管疾病中的作用直到最近才受到关注。基于以上研究发现,系统综述了MAOA降解胺类物质生成的ROS在心血管疾病中的作用,以及作为治疗心血管疾病的潜力,以期为心血管疾病的治疗提供参考数据。

单胺氧化酶和白细胞介素-6在慢性肾衰竭并发心力衰竭患者中的诊断及预后评估价值

目的 探究单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)在慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)并发心力衰竭(heart failure,HF)患者中的诊断及预后评估价值。方法 回顾性分析邯郸明仁医院2018年2月至2019年2月收治的CRF患者121例,其中单纯CRF患者50例(单纯CRF组)、合并HF的患者71例(CRF-HF组),同期选取60名健康体检者作为对照组,比较3组受试者的血清MAO、IL-6浓度及心功能,并行相关性分析,同时绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清MAO、IL-6浓度对CRF并HF患者的诊断及预后评估。结果 单纯CRF组和CRF-HF组患者的血清MAO、IL-6浓度明显高于对照组,且CRF-HF组高于单纯CRF组,差异有统计学意义(P均<0.01)。单纯CRF组和CRF-HF组患者的左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)均明显大于对照组,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)均明显小于对照组,且CRF-HF组又分别大于和小于单纯CRF组,差异有统计学意义(P均<0.01)。Pearson相关性分析显示,CRF-HF患者血清MAO、IL-6浓度均与LVEF呈明显负相关(P均<0.01),均与LVESD、LVEDD呈明显正相关(P均<0.01)。血清MAO的诊断灵敏度、特异度分别为85.92%、85.00%,ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.898(95%CI:0.844~0.953,P<0.01),预后AUC为0.902(95%CI:0.833~0.971,P<0.01)。血清IL-6诊断CRF并HF的灵敏度、特异度分别为92.96%、81.67%,AUC为0.939(95%CI:0.901~0.976,P<0.01),预后AUC为0.880(95%CI:0.795~0.964,P<0.01)。结论 血清MAO、IL-6在CRF并HF中均呈高表达,且与患者心功能具有明显相关性,二者在CRF并HF患者的诊断及预后评估中具有重要的价值,有望成为诊断和预测CRF并HF患者预后的新型标志物。

血清α-L-岩藻糖苷酶、单胺氧化酶、5-核苷酸酶联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、单胺氧化酶(MAO)、5-核苷酸酶(5-NT)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选取150例原发性肝癌患者、150例良性肝病患者及150例健康体检者,分别作为原发性肝癌组、良性肝病组及对照组。比较3组研究对象的血清AFU、MAO、5-NT水平,分析血清AFU、MAO、5-NT单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值。结果原发性肝癌组患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均高于良性肝病组和对照组,良性肝病组患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。血清AFU、MAO、5-NT联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均高于各指标单独检测。结论原发性肝癌患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均较高,上述指标联合检测可为原发性肝癌的诊断提供依据。

海洋真菌来源丁内酯I的单胺氧化酶抑制活性及结构类似物虚拟筛选

【目的】为研究海洋土曲霉(Aspergillus terreus)C23-3的次级代谢产物中的单胺氧化酶抑制剂及其抑制作用类型,借助计算机模拟方法探讨同类型化合物对单胺氧化酶的潜在抑制活性及构效关系,以开发单胺氧化酶抑制剂。【方法】采用活性引导下的色谱方法分离纯化得到活性化合物,采用核磁共振、质谱、圆二色谱分析鉴定其结构,采用酶标比色法评价化合物对单胺氧化酶抑制作用。使用Autodock vina对其结构类似物进行抑制单胺氧化酶活性虚拟筛选。【结果】1)分离鉴定得到一个具有单胺氧化酶抑制活性的化合物丁内酯I;2)丁内酯I对单胺氧化酶A和单胺氧化酶B的抑制作用为可逆非竞争性抑制,对单胺氧化酶A的半抑制浓度(IC50)为21.45μmol/L,抑制常数Ki=6.27μmol/L;对单胺氧化酶B的IC50为24.16μmol/L,Ki=12.61μmol/L;3)分子对接显示丁内酯I可与单胺氧化酶形成多个氢键,五元内酯环为α,γ‒二芳基取代、含有苯并吡喃或苯并呋喃基团的aspvinone类丁内酯化合物在虚拟筛选中对单胺氧化酶最小结合亲和力得分更低(即结合力更强)。【结论】丁内酯I是可逆的单胺氧化酶抑制剂,对单胺氧化酶的抑制为非竞争性抑制。真菌来源丁内酯类化合物可作为单胺氧化酶抑制剂的新来源。

血清腺苷脱氨酶、单胺氧化酶及血脂检验在脂肪肝诊断及评估中的应用价值

目的:探讨血清腺苷脱氨酶(ADA)、单胺氧化酶(MAO)及血脂检验在脂肪肝诊断及评估中的应用价值。方法:在2021年2月—2023年1月期间丹江口市中医院收入的脂肪肝患者中选取90例作为观察组,再选取同期进行健康体检的健康人50例作为对照组。两组均进行ADA、MAO、血脂指标、常规肝功能指标检测,将检测结果进行对比。其中血脂指标包括三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),常规肝功能指标包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、胆碱酯酶(CHE)。将观察组根据病情严重程度分为轻度组、中度组、重度组,每组有30例患者。对比这三组的上述检测指标。结果:相较于对照组,观察组的ADA、MAO、TG、TC、LDL-C水平均更高,HDL-C水平更低,P<0.05。相较于轻度组、中度组,重度组的ADA、MAO、TG、TC、LDL-C水平均更高,HDL-C水平更低,P<0.05。相较于轻度组,中度组的ADA、MAO、TG、TC、LDL-C水平均更高,HDL-C水平更低,P<0.05。相较于对照组,观察组的ALT、AST、GGT、ALP、CHE水平均更高,P<0.05。相较于中度组、重度组,轻度组的ALT、AST、GGT、ALP、CHE水平均更低,P<0.05。相较于重度组,中度组的ALT、AST、GGT、ALP、CHE水平均更低,P<0.05。结论:脂肪肝患者与健康人之间、不同严重程度脂肪肝患者之间的ADA、MAO、血脂指标、肝功能指标水平均存在差异,上述指标在脂肪肝诊断及评估中的应用价值较高。

盐胁迫对不同耐盐性枣树品种根系和叶片中多胺含量及多胺氧化酶活性的影响

为探讨枣(Ziziphus jujuba Mill.)树中多胺及多胺氧化酶活性与其耐盐性的关系,对耐盐性强的‘金丝小枣’和耐盐性弱的‘冬枣’2年生苗中不同状态和种类的多胺和多胺氧化酶活性进行了研究。结果表明,在120 mmol L–1NaCl盐胁迫下,枣树根系和叶片中的多胺含量升高,耐盐性强的品种的上升幅度显著大于耐盐性弱的品种;随着盐胁迫时间的延长,根系和叶片中多胺含量逐渐降低,耐盐性弱的品种的降低幅度显著大于耐盐性强的品种,叶中的多胺含量的降低幅度大于根中的,结合态多胺的降低幅度大于游离态多胺的、精胺和亚精胺的降低幅度大于腐胺的;两个品种根系和叶片中多胺氧化酶(PAO)活性均明显高于二胺氧化酶(DAO)活性,盐胁迫下耐盐性弱的品种酶活性增强幅度显著大于耐盐性强的品种。这些说明,枣树品种的耐盐性与其内源多胺的组成、含量有关,多胺氧化酶的种类与活性对盐胁迫的响应也密切相关,多胺积累有利于提高枣树品种的耐盐性。

单胺氧化酶抑制药的药物相互作用

综述单胺氧化酶抑制药与其他药物及食物的相互作用。对近 10年来单胺氧化酶及单胺氧化酶抑制药的有关文献进行归纳 ,发现一系列药物及食物不宜与单胺氧化酶抑制药合用。单胺氧化酶抑制药与其他药物合用时要慎重。

多胺氧化酶在多胺代谢中的作用

本文概括了精胺氧化酶和乙酰多胺氧化酶参与的主要的生化,细胞和生理过程,多胺氧化酶是黄素腺嘌呤二核苷酸包含酶,可以催化多胺和乙酰多胺的氧化,其底物的特异性和氧化产物的种类依赖于酶的来源.酵母菌的多胺氧化酶可以氧化精胺,N1-乙酰精胺,N1-乙酰亚精胺,然而在脊椎动物中,是由两个不同的多胺氧化酶亚家族分别承担了这些功能,即精胺氧化酶和乙酰多胺氧化酶,分别特异性地催化精胺和N1-乙酰精胺/N1-乙酰亚精胺的氧化.精胺氧化酶和乙酰多胺氧化酶高效参与多胺生物合成和降解的调节.因为多胺是细胞生长和分化的基础调节者,因此它们的体内平衡对细胞生命十分重要,而精胺氧化酶和乙酰多胺氧化酶则起到了调节体内多胺平衡的作用.精胺氧化酶和乙酰多胺氧化酶参与药物反应,细胞凋亡和应激反应,它们的异常可以改变多胺的体内平衡.多胺分解代谢的调节异常经常与包括癌症在内的几种病理状况有关.

单胺氧化酶抑制药物体外筛选模型的建立

目的:构建一种能用于治疗神经退行性变疾病单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)抑制药物的体外筛选模型。方法:采用紫外分光光度方法,以苄胺或5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)分别作为MAO-B或MAO-A的反应底物,测定其活性,并对MAO浓度、底物浓度、缓冲液浓度、pH值、反应时间和温度等进行优化。结果:研究确定的模型反应体系条件为:在温度37℃、酶预孵育时间20 min和反应时间60 min下,测定MAO-B活性最佳条件为100 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 7.6),MAO和底物苄胺的终浓度分别为0.15 mg/ml和2.00 mmol/L;测定MAO-A活性最佳条件为100 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 7.4),MAO和底物5-HT的终浓度分别为0.40 mg/ml和5.00 mmol/L。结论:建立了一种MAO抑制药物体外筛选的模型,该模型具有成本低、操作简便等特点,适合于大规模筛选MAO-B和MAO-A的抑制药物。

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证模型大鼠海马单胺氧化酶A、B表达的影响

目的:研究经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证大鼠海马单胺氧化酶A/B(MAOA/B)表达水平的影响。方法:雌性未孕SD大鼠48只,随机分为3组:正常对照组、模型组、经前舒治疗组,束缚造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型,旷场实验对模型进行评价,治疗组采用经前舒颗粒治疗,RT-PCR和Western blot方法分别检测各组大鼠海马MAOA/B的mRNA及蛋白的表达。结果:模型大鼠海马MAOA mRNA及蛋白表达显著升高,经前舒颗粒治疗后,MAOA mRNA和蛋白表达均显著降低,而MAOB mRNA和蛋白表达各组间没有显著性变化。结论:PMS肝气郁证大鼠海马MAOA表达出现异常,经前舒颗粒的作用机制可能是通过调节海马MAOA的表达而发挥作用。

注意缺陷多动障碍患儿与正常儿童的单胺氧化酶B基因表达 是发病风险因子吗

目的:检测注意缺陷多动障碍患儿与正常儿童的单胺氧化酶B基因表达水平,探计其与注意缺陷多动障碍发病风险的关系。方法:纳入对象为1999-07/09在上海某特殊教育学校中注意缺陷多动障碍患儿40例和江阴市某小学按性别、年龄和种族与患者相匹配原则选择的健康儿童45名。应用定量反转录聚合酶链反应技术检测两组儿童外周血细胞中单胺氧化酶B基因的mRNA表达量,分析单胺氧化酶B基因mRNA平均表达量在两组样本间的差异。结果:按实际完成处理,有36例注意缺陷多动障碍患儿和38名健康儿童的有效样本进入结果分析。注意缺陷多动障碍和健康儿童的单胺氧化酶B基因反转录的表达量分别为(0.018±0.008)和(0.018±0.004)amol/μgcDNA,差异无显著性(t=0.02,df=1,P>0.05)。结论:注意缺陷多动障碍和正常儿童单胺氧化酶B基因的表达无差异,验证了单胺氧化酶B与注意缺陷多动障碍无联系。

小鼠精胺氧化酶的原核表达与鉴定

目的:原核表达和分离纯化小鼠精胺氧化酶(SMO)。方法:采用RT-PCR法从小鼠胚胎干细胞(ES细胞)RNA中克隆小鼠SMOcDNA,构建SMO原核表达质粒并转染大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,将表达的小鼠SMO重组蛋白在变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化和透析复性。结果:在大肠杆菌中高表达出小鼠SMO重组蛋白;纯化并透析复性后的重组SMO具备快速氧化特异性底物精胺的酶活性。结论:建立了原核表达和纯化有活性小鼠SMO的实验方法。