基于MCL-1mRNA表达探讨经颅磁刺激对大脑中动脉阻塞模型大鼠脑组织损伤的作用机制

目的:基于骨髓细胞白血病序列1(MCL-1)表达探讨经颅磁刺激(TMS)对大脑中动脉阻塞(MCAO)模型大鼠脑组织损伤的作用机制。方法:选择健康雄性无特定病原体(SPF)级SD大鼠30只(3月龄),采用随机数字表法将30只大鼠分为假手术组、模型组和TMS组,各10只,建模成功后24 h内进行TMS治疗。采用Longa评分评估3组神经功能缺损程度;采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测定脑梗死面积;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡;采用蛋白免疫印记法(Western Blot)检测MCL-1蛋白表达水平;采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCL-1mRNA表达水平。结果:假手术组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积均低于TMS组、模型组,TMS组神经功能缺损评分、脑梗死面积均低于模型组(P<0.05)。假手术组细胞凋亡指数低于TMS组、模型组,TMS组细胞凋亡指数低于模型组(P<0.05)。假手术组MCL-1mRNA高于TMS组、模型组,TMS组MCL-1mRNA高于模型组(P<0.05)。假手术组MCL-1蛋白表达水平高于TMS组、模型组,TMS组MCL-1蛋白表达水平高于模型组(P<0.05)。结论:TMS通过升高MCL-1mRNA表达,减少细胞凋亡,抑制MCAO大鼠脑组织损伤。

阿里红黄酮减轻低氧力竭运动大鼠脑组织损伤的机制研究

目的探讨阿里红黄酮(Fomes Officinalis Ames Flavone,FOF)对长期低氧力竭运动大鼠认知能力、神经炎症、小胶质细胞活化的影响。方法60只雄性大鼠,随机分为NC组、HE组、HE+LFOF组、HE+MFOF组和HE+HFOF组。HE组、HE+LFOF组、HE+MFOF组和HE+HFOF组大鼠接受连续6周力竭跑台运动,HE+LFOF组、HE+MFOF组和HE+HFOF组每次运动后30 min分别灌胃100、200和400 mg·kg^(-1)·d^(-1)阿里红黄酮。干预后评价大鼠自主活动和空间记忆能力;检测脑组织炎症、氧化应激反应及小胶质细胞活化情况。结果与HE组比较,HE+LFOF组、HE+MFOF组和HE+HFOF组运动总距离、跨越格栅数量、平均游泳速度、穿越平台次数和平台所在象限停留时间、脑组织SOD和GSH-px浓度均显著上升(p<0.05),中心区域活动时间、逃避潜伏期(1d~5d)、脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α浓度和脑组织含水量、MDA、IL-1β、COX-2、Iba-1、GFAP蛋白表达均显著降低(p<0.05)。结论100~400 mg·kg^(-1)FOF可以抑制长期低氧力竭运动大鼠脑组织损伤并改善大鼠自主活动和空间记忆能力。

酒精中毒大鼠脑血管病变及相应脑组织损伤的病理观察

目的 观察酒精中毒后大鼠脑血管病变、脑组织损伤情况及探讨相关机制。方法 Wistar雄性大鼠酒精灌胃 4周造成慢性酒精中毒模型。通过光学显微镜观察酒精中毒后大鼠脑血管的病理变化及相应脑组织的损伤。结果 酒精中毒组大鼠额叶脑内小血管内弹力膜厚薄不一 ,出现皱褶 ,内皮细胞部分脱落 ,中膜平滑肌细胞及外膜胶原纤维增生 ;大脑皮质、海马、小脑皮质等部位均有神经细胞数目缺失及不同程度的细胞变性及损伤 ,但以小脑皮质的改变尤为明显。结论 酒精中毒后可以引起脑血管自身结构的改变并影响脑血流 ,造成缺血缺氧性改变 ,可能是酒精中毒后脑损伤的机制之一。

1,2-二氯乙烷急性吸入染毒脑组织损伤形态学研究

为了研究 1 ,2 二氯乙烷 (1 ,2 -DCE)在静式吸入染毒条件下对脑组织的急性损害。采用连续静式吸入染毒大鼠 1 2h后 ,观察不同染毒剂量下受试动物脑组织的形态学变化 ;测定脑组织干湿重及含水量。结果显示 :染毒剂量为 2 .5g m3 时 ,脑组织在形态学上无明显变化 ,含水量为 80 .41 % ,与对照组 (79.82 % )相比 ,无明显差异 ;5 .0g m3 染毒组在形态学上出现轻微脑水肿 ,脑组织含水量为 82 .1 4 % ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5) ;1 0 .0g m3 组脑组织在形态学上水肿明显 ,其含水量 (83 .65 % )与各组之间差异显著 (P <0 .0 5)。结果提示 :1 ,2 -DCE在短期大量吸入的情况下可导致动物出现脑水肿。

川芎、当归萃取液对实验性急性脑梗死大鼠行为学和脑组织损伤的影响

目的 :通过建立大鼠急性脑梗死模型 ,观察不同剂量的川芎、当归萃取液与阳性药物 (尼莫地平 )对大鼠急性脑梗死的行为和病理等影响。方法 :各实验组大鼠在术后清醒 (术后 4h及 2 8h) 2次给药 ,并进行 2次行为检查 (术后 4及 5 2h)和第2次给药后 2 4h(术后 5 2h)进行大鼠脑组织病理切片检查。结果 :给川芎、当归萃取液及阳性药物后的大鼠行为积分值明显低于对照组 ,且脑部病理损害程度明显轻于溶剂组。结论 :川芎、当归萃取液对急性阻断大脑中动脉所致脑缺血造成大鼠行为障碍具有明显的缓解治疗作用 ,对大脑中动脉阻断后脑缺血造成的脑部病理损害具有保护。

Anti-MBP与大鼠脑组织损伤后脑干继发性脱髓鞘病变的关系

目的研究大鼠脑组织损伤后,血液中髓鞘碱性蛋白抗体(Anti-MBP)效价与继发性脑干脱髓鞘病变之间的关系。方法制作大鼠脑组织损伤模型,通过间接ELISA法检测伤后不同时期血液中MBP含量、Anti-MBP效价,锇酸染色法检测脑干中髓鞘变性的程度。结果伤后早期大鼠血液中MBP含量上升,10d后显著下降;伤后4d起Anti-MBP效价显著上升,同时,脑干中脱髓鞘病变的程度也明显加重;10d后两者达到高峰,与对照组相比,Anti-MBP效价上升了4倍,脱髓鞘病变数量上升10倍;30d后逐渐下降。相关分析显示Anti-MBP效价与脱髓鞘病变的程度呈正相关关系。结论颅脑损伤后,特异性抗原MBP释放入血,刺激机体的免疫系统,产生Anti-MBP。后者与继发性脑干脱髓鞘病变密切相关。

大鼠脑组织损伤后局部细胞免疫与神经元凋亡的关系

目的研究大鼠脑组织损伤后不同时期损伤灶局部CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润情况的变化及其与损伤灶局部神经元凋亡之间的关系。方法制作大鼠脑组织损伤模型,应用免疫组化方法,在不同时程检测脑组织损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞数及神经元凋亡数。结果伤后24h脑组织损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞即有明显增加,伤后10d达到高峰,与对照组比较分别上升了15倍和20倍,伤后30d逐渐下降。同时期损伤灶局部神经元凋亡数亦呈现出类似的变化规律。相关分析显示损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞数变化与神经元凋亡数之间呈密切的正相关关系。结论颅脑损伤后,脑组织损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞增加非常显著,细胞免疫应答显著增强,介导损伤灶局部神经元凋亡,加重脑组织继发性损伤。

益肾降氮汤对慢性肾功能衰竭大鼠肾功能及脑组织损伤疗效的实验研究

目的:探讨益肾降氮汤防治慢性肾功能衰竭及尿毒症脑病的作用。方法:用腺嘌呤制作CRF大鼠模型,实验组给服益肾降氮汤,对照组以自来水作对照因素,观察实验前后大鼠的BUN、SCr、UUN、UCr、UPr变化及大鼠脑组织光镜下的病理改变。结果:该汤剂能有效延缓实验大鼠肾功能衰竭的进展、提高肌酐清除率、降低血清BUN、SCr浓度,其降低SCr的作用优于降低BUN的作用;同时对脑组织具有明显的保护作用,实验组脑组织、脑细胞、海马回的损伤程度明显小于对照组。结论:益肾降氮汤能有效延缓实验大鼠肾功能衰竭的进展并对实验大鼠的脑组织具有明显的保护作用,提示在CRF患者的治疗中活血管药物的使用对延缓慢性肾功能衰竭的进展及UE、ET的发生可能具有非常积极的作用。

神经元特异性烯醇化酶及S100β蛋白在颅内感染及脑组织损伤评估中的临床意义

目的探讨脑脊液中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β蛋白水平在颅内感染及脑组织损伤评估中的临床意义。方法选取我院2014年5月至2016年5月收治的颅内感染患者40例作为感染组,另选取同期来我院进行体检的40名健康人员为对照组,应用罗氏COBAS-601全自动电化学发光仪及其配套试剂检测两组人员的脑脊液NSE、S100β蛋白水平,然后对其进行统计分析。结果感染组中病毒性感染患者的脑脊液NSE、S100β蛋白水平均显著高于化脓性、结核性感染患者,差异有统计学意义(P<0.05),但化脓性、结核性感染患者的脑脊液NSE、S100β蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05);感染急性期昏迷患者的脑脊液NSE、S100β蛋白水平均显著高于未昏迷患者,差异有统计学意义(P<0.05)。化脓性、结核性、病毒性感染患者及感染急性期昏迷、未昏迷患者的脑脊液NSE、S100β蛋白水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑脊液中NSE、S100β蛋白水平能够将有效的参考依据提供给临床对颅内感染及脑组织损伤的评估。

糖尿病大鼠红细胞对脑组织损伤的影响

研究糖尿病时红细胞的变化对脑组织损伤的影响。方法：用链脲佐菌素（ＳＴＺ，５０ｍｇ／ｋｇ）诱发大鼠糖尿病，分离红细胞，输注给正常大鼠（８×１０９个红细胞／只），测定脑组织ＭＤＡ和亚硝酸盐含量，同时将分离红细胞在体外用异硫氰酸荧光黄（ＦＩＴＣ）标记，荧光显微镜观察输入的红细胞在脑微血管中的流动。结果：ＳＴＺ大鼠血糖持续高于正常，病程达一年的大鼠糖基化血红蛋白（％）明显高于正常大鼠（Ｐ<０．０１）。将糖尿病１年大鼠红细胞输给正常大鼠，４ｈ后，糖尿病红细胞组大鼠脑组织ＭＤＡ和亚硝酸盐含量明显高于对照红细胞组（ＭＤＡＰ＝０．０３２；亚硝酸盐Ｐ＝０．０２７）。软脑膜微循环的活体观察发现有ＦＩＴＣ标记的糖尿病红细胞粘附于微血管壁。结论：糖尿病的红细胞可以直接引起正常脑组织自由基代谢产物的变化，其作用可能与红细胞对内皮细胞的粘附有关。

RNA干扰下调ACE和AT1R对自发性高血压大鼠血压及脑组织损伤的影响

目的 用RNA干扰下调血管紧张素转换酶（ACE）和血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）,观察其对自发性高血压大鼠（SHR）血压及脑组织损伤的影响。方法 SHR随机分为5组：空白对照组、病毒对照组、Ad5-ACEshRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组,同时设WKY正常血压对照组。各组大鼠均于实验第1、17天各注射1次,干预前后检测血压、心率的变化。于首次注射后第3天,酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织中ACE、AngⅡ含量,实时荧光定量PCR检测脑组织ACE mRNA、AT1R mRNA表达,Western blot检测脑组织ACE、AT1R蛋白表达。实验结束时做脑组织光镜病理检查观察脑结构。结果 于首次注射后第3天,Ad5-ACEshRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组尾动脉压分别下降25.2±5.3 mmHg、23.5±4.8 mmHg、27.1±6.4 mmHg,第14天分别下降24.4±5.6 mmHg、23.6±4.9 mmHg、26.3±6.9 mmHg,第17天时血压有所回升;第2次注射后Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组尾动脉压再次明显下降,第23天时较首次注射前分别下降40.2±4.5 mmHg、37.8±3.9 mmHg、43.7±7.3 mmHg,第37天时血压有所回升,第40天时血压上升至第2次注射前水平;空白对照组和病毒对照组血压则持续升高26 mmHg,两组比较差异无统计学意义;正常血压对照组尾动脉压无明显变化。Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织ACE、AngⅡ显著低于空白对照组和病毒对照组（P〈0.05）,而与正常血压对照组比较差异无统计学意义。Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织ACE mRNA和Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织AT1R mRNA的表达明显低于空白对照组、病毒对照组（P〈0.05）,而与正常血压对照组比较差异无统计学意义。Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织AT1R蛋白表达显著低于空白对照组、病毒对照组（P〈0.05）。光镜显示Ad5-ACEshRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织结构明显改善。结论 RNA干扰下调ACE和AT1R表达,降低SHR血压并改善脑损伤,尤以Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组效果明显且副作用少。RNA干扰对高血压的基因治疗具有良好应用前景。

长期运动预处理对缺血性脑卒中大鼠脑组织损伤和神经功能障碍的改善作用及其可能机制

目的探讨长期运动预处理对缺血性脑卒中大鼠脑组织损伤和神经功能障碍的改善作用及其可能机制。方法将36只大鼠随机分为假手术组、脑缺血组和运动+脑缺血组,各12只。运动+脑缺血组大鼠进行连续4周的跑步和游泳锻炼,其他两组自由活动,随后应用线栓法构建中动脉脑缺血模型(脑缺血组和运动+脑缺血组)。建模24 h后评估大鼠神经功能缺损情况,过量麻醉处死大鼠后取脑组织,评估脑水肿和脑梗死程度,并检测海马与前额皮层组织中Toll样受体4(TLR4)、离子化钙结合适配分子1(Iba1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β与IL-6的表达情况。结果脑缺血组、运动+脑缺血组、假手术组大鼠的神经功能缺损评分依次降低,脑水肿和脑梗死程度依次减轻(均P<0.05)。与假手术组相比,脑缺血组大鼠海马区与前额皮层中Iba1、TLR4、TNF-α、IL-1β与IL-6的表达量均增加(均P<0.05);与脑缺血组相比,运动+脑缺血组海马区与前额皮层中Iba1、TLR4、TNF-α、IL-1β与IL-6的表达量均降低(均P<0.05)。结论长期运动可减轻缺血性脑卒中大鼠的脑组织损伤和神经功能障碍,其或通过抑制小胶质细胞激活引起的炎性因子反应发挥作用。

一氧化氮介导小鼠急性缺氧窒息引起的脑组织损伤

目的 研究小鼠缺氧窒息后脑组织一氧化氮 (NO)含量的动态变化。方法 40只小鼠随机分成 5组 ,缺氧组放入密闭瓶中使其缺氧 ,然后观察不同时间脑组织中NO含量的变化。结果 缺氧 30min后NO含量开始升高 ,与对照组比较存在明显差异 (P <0 .0 5 ) ,48h后NO含量达到高峰 ,72h后NO含量开始下降。结论 小鼠急性缺氧后脑组织NO含量明显升高 。

基于Raf-MEK-ERK信号通路探究梓醇对蛛网膜下腔出血大鼠脑组织损伤的影响

[目的]通过考察梓醇对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑组织丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf)-丝裂原活化蛋白激酶(MEK)-细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响,探讨其抗SAH脑损伤的作用机制。[方法]将大鼠随机分为假手术组、SAH组、梓醇组、梓醇+U0126组(梓醇+Raf-MEK-ERK信号通路抑制剂U0126)。采用血管内穿孔法构建大鼠SAH模型,评估大鼠神经功能和SAH分级,伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性,苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理变化,免疫荧光染色检测神经元细胞凋亡及微管连接蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p-ERK阳性细胞表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测脑组织Raf、MEK、磷酸化(p)-MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、自噬基因Beclin-1、LC3-Ⅱ表达。[结果]与假手术组相比,SAH组神经元细胞排列松散,数目减少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、原位末端标(TUNEL)阳性细胞数显著增加,凋亡率、LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达、Bax、Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达显著升高,神经功能评分减少,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与SAH组相比,梓醇组神经元损伤明显减轻,细胞死亡较少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、TUNEL阳性细胞数显著减少,凋亡率、Bax显著降低,神经功能评分、Bcl-2表达升高,LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达及Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达进一步升高(P<0.05);Raf-MEK-ERK通路抑制剂U0126可逆转梓醇对脑组织损伤的改善作用(P<0.05)。[结论]梓醇可能通过激活Raf-MEK-ERK信号通路,促进神经细胞自噬,改善SAH大鼠脑损伤。

大黄对老龄大鼠脑缺血再灌注脑组织损伤的保护作用

将老龄大鼠分为对照组、模型组、大黄组、尼莫地平组、血栓心脉宁组 ,观察大黄对老龄大鼠脑缺血再灌注后脑电图和病理组织变化及有关指标改变。结果表明 :老龄大鼠脑缺血再灌注脑组织损伤明显 ,大黄具有明显保护作用。其作用机制与大黄拮抗自由基损伤 ,调节ATP酶活性和神经肽及单胺类神经递质的变化 ,提高一氧化氮含量 。

人参抗栓素对脑缺血大鼠脑组织损伤及ATP酶、SOD活力的影响

大量实验研究表明,人参一次皂甙具有抗组织缺血、抗血栓形成等作用,故又称为“人参抗栓素”。本研究主要了解人参抗栓素对脑缺血损伤的影响,为研究开发治疗中风的药物提供实验依据。1 材料与方法1.1 实验动物 Wistar大鼠40只,雌雄各半,体重280～320g。由吉林省药品检验所提供。合格证号:106003。1.2 实验药物 人参抗栓素胶囊:由吉林人参研究所提供,规格:净重200mg/粒,(含人参一次皂甙150mg/

内皮素受体拮抗剂BQ—123对全脑缺血再灌流后脑组织损伤的保护作用

目的 观察内皮素拮抗剂 ＢＱ－１２３对缺血再灌流后脑神经元损伤的保护作用。方法 采用Ｐｕｓｉｎｅｌｌｉ的四血管阻断法（４ＶＯ）制作大鼠全脑缺血再灌流动物模型。在再灌流后 ３０分钟给予ＢＱ－１２３（５０μｇ／１μｌ，ｉｃｖ）。结果 ＢＱ－１２３能增加缺血后海马ＣＡ１区神经元的存活数，行为实验表明 ＢＱ－１２３治疗后大鼠的学习了己忆能力有提高。结论 内皮素受休拮抗剂 ＢＱ－１２３对全脑缺血再灌流引起海马区神经元损伤有部分保护作用。

还原型谷胱甘肽对大鼠心肌缺血-再灌注后脑组织损伤的保护作用

心肌梗死时及时的再灌注是抢救梗死心肌唯一有效的途径,可以使频临坏死的危险区心肌细胞得到挽救。但是,缺血心肌的再灌注还会引发心肌更为严重的损伤,增大梗死面积,称之为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MRI)。研究证实,再灌注期活性氧(reactive oxygen species,ROS)的进一步形成是造成包括心脏本身在内,机体各脏器氧化损伤的主要原因之一[1]。甲醛是日常家装后最常见的室内空气污染物,也是室内氧化剂的重要来源,吸入甲醛会导致组织器官的氧化损伤[2]。本研究将从检测脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)与谷胱甘肽过氧物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的变化来反映心肌缺血再灌注对脑组织产生的损伤。同时模拟心肌梗死患者生活环境中甲醛吸入对其损伤产生的影响,并使用还原型谷胱甘肽(GSH)干预期望对脑组织具有一定的保护作用。

先天性巨细胞病毒感染导致脑组织损伤的研究进展

人巨细胞病毒 (HCMV)感染在人群中非常普遍 ,通常呈潜伏感染。先天性巨细胞病毒主要侵入脑组织 ,是宫内感染造成先天性中枢神经系统损害的主要原因。研究者通过对鼠巨细胞病毒感染造成小鼠脑损伤模型的观察发现脑室下区和皮质边缘区的神经干细胞 ,神经祖细胞和未成熟神经胶质细胞对MCMV最具敏感性 ,并且这种敏感性随着脑组织的发育而逐渐衰退。在转基因鼠模型中MCMV早期基因e1启动子的激活受限于中枢神经系统提示CMV对中枢神经系统具有特殊的亲和力 ,且其在急慢性感染中的神经特异性激活与脑功能失调的发病机制有关。此外 ,脑组织中CMV潜伏感染的好发部位多为脑室下区的神经干细胞或祖细胞 ,而这正是脑发育的关键位置 ,潜伏感染的持续存在或是间歇的再激活也可能是引起长期感染后脑功能障碍的原因。