大鼠脑缺血再灌流后基质金属蛋白酶2和9的表达

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9(MMP-9)表达的变化规律与脑水肿的关系。方法:用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),用免疫组化技术分别观察脑缺血再灌流不同时间点MMP-2和MMP-9的表达。结果:(1)脑缺血再灌流后24h可见MMP-2阳性细胞开始出现,3～7d时阳性细胞数达高峰,显色最深,至14d时仍有表达,略高于假手术组。(2)脑缺血再灌流后6h缺血区内MMP-9阳性细胞开始出现,12h明显增高,至2d达高峰,3d后阳性细胞数开始减少,至14d时恢复到基础水平,各相邻时间点比较差异显著。结论:脑缺血再灌流后,病变区MMP-2和MMP-9表达增加,二者在脑缺血再灌流后脑水肿方面起重要作用。

电针预处理对全脑缺血再灌流大鼠炎性细胞因子的影响

目的研究炎性细胞因子在急性全脑缺血再灌流损伤中的作用及电针预处理的保护作用机理。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针治疗组(左侧肩隅、外关、髀关、足三里)、穴位对照组(左侧清灵渊、灵道、萁门、漏谷穴)、非穴位对照组(左侧天泉与曲泽连线中点、曲泽与郗门中点、五里与阴胞连线中点和膝关与中都连线中点)。三动脉结扎法造成大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,放射免疫法测定血浆内皮素(ET)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果与假手术组比较,模型组结扎颈总动脉30min的血浆IL-1β含量显著升高(P<0.05),血浆IL-6和TNF-α含量均有升高的趋势,但无显著性差异(P>0.05);再灌注30min,血浆IL-1β和TNF-α含量均显著升高(P<0.05),血浆IL-6有升高的趋势,但无显著性差异(P>0.05)。循经取穴电针能显著降低大鼠脑缺血和再灌注血浆IL-1β、IL-6和TNF-α含量,与模型组、穴位对照组或非穴位对照组比较差异有统计学意义。结论脑缺血再灌注急性期可导致血浆IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高,电针治疗脑缺血再灌注损伤的机制之一与降低炎性细胞因子含量及阻断炎症级联反应有关。

cGMP对脑缺血再灌流后海马区星形胶质细胞活化的作用机制研究

为了观察 c GMP对海马区胶质纤维酸性蛋白合成调节的作用 ,本研究用钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型 ,进行了免疫荧光法染色。结果表明 :脑缺血再灌流后海马区 c GMP合成增加 ,多数 c GMP阳性细胞为星形胶质细胞 ,此细胞的多数呈 c GMP强阳性染色 ,胶质纤维酸性蛋白反应也多呈强阳性 ;使用鸟苷酸环化酶 ( GC)抑制剂 ODQ,则 c GMP合成减少 ,c GMP阳性细胞多呈弱阳性 ,同一细胞的胶质纤维酸性蛋白反应也多呈弱阳性。本实验结果提示 :c

大鼠脑缺血再灌流后神经细胞凋亡与caspase-3和caspase-9基因表达

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及其与caspase-3和caspase-9基因表达的关系。方法:应用原位末端标记和原位杂交技术分别观察细胞凋亡与caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达。结果:脑缺血再灌流后,凋亡神经细胞主要分布于缺血半影区,随着时间的延长凋亡细胞数逐渐增加,至24 h达高峰。在缺血半影区,再灌流后神经细胞caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达逐渐增强,到24 h阳性细胞数目最多,COD值最高,而缺血中心区两基因均弱表达。结论:脑缺血再灌流后神经细胞凋亡是一个动态的渐进过程。caspase-3和cas—pase-9基因表达在介导细胞凋亡过程中起重要作用。

巴曲酶对大鼠脑缺血再灌流损伤保护作用机理的研究

为探讨巴曲酶对大鼠短暂性脑缺血再灌流损伤引起的细胞凋亡有无抑制作用，参照Ｓｍｉｔｈ等（１９８４）方法，制备大鼠前脑短暂性缺血再灌流模型，采用ＴＵＮＥＬ（脱氧核苷酸转移酶末端介导的ｄＵＴＰ－生物素切口末端标记）法，观察了海马脑区细胞凋亡的特征变化—ＤＮＡ降解片段（凋亡小体）。发现脑缺血１０ｍｉｎ再灌流２４ｈ，海马ＣＡ１区即可见凋亡小体，于再灌流４８ｈ、９６ｈ凋亡小体明显增多。给予巴曲酶（１．６ＢＵ／ｋｇ．ｉｖ）后上述变化被明显逆转。本实验提示巴曲酶对脑缺血再灌流损伤所引起的细胞凋亡有抑制作用。

大鼠脑缺血再灌流后HSP70的表达和bFGF对其影响

目的 研究脑缺血再灌流后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的意义及外源性碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对其影响。方法 应用免疫组化的方法观察大鼠局灶性脑缺血再灌流后脑组织 HSP70的表达以及在侧脑室注射外源性 b FGF对其影响。结果 缺血 2小时再灌流 0小时即可见 HSP70表达 ,至 2 4小时达高峰。 b FGF组与生理盐水组相比于 6～ 48小时各组可见 HSP70表达增高 (P<0 .0 5 )。结论 脑缺血诱导HSP70的表达 ,外源性 b FGF能增加 HSP70的表达。

7-硝基吲唑在脑缺血再灌流中的保护作用机制

综述了具有高度选择性的神经元型一氧化氮合酶抑制剂 (nNOSI) 7 硝基吲唑的特性和其在脑缺血再灌流中的保护作用机制 。

胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用及对AQP4、MMP-9表达的影响

目的观察胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用及对AQP4、MMP-9表达的影响。方法选取120只成年健康雄性大鼠,随机选择30只作为假手术组,其余90只制备脑缺血再灌注模型,成功78只,平均分为模型组和胡黄连苷Ⅱ组。胡黄连苷Ⅱ组给予胡黄连苷Ⅱ腹腔注射,模型组、假手术组给予等量的生理盐水腹腔注射,假手术组不制备脑缺血模型,其他步骤均同模型组。检测3组大鼠神经功能缺失评分、DCI、ACI、CIV,以及水通道蛋白4(AQP4)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和环氧合酶2(COX2)表达水平。结果胡黄连苷Ⅱ组神经功能缺失评分、DCI、ACI、CIV水平较假手术组显著降低,模型组各水平也较假手术组明显降低,且胡黄连苷Ⅱ组较模型组也明显降低;胡黄连苷Ⅱ组的AQP4、MMP-9和COX2表达水平分别为(1.12±0.14)、(0.95±0.08)、(0.58±0.05)ng/m L,较模型组明显降低,较假手术组显著升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论胡黄连苷Ⅱ可以显著抑制AQP4、MMP-9表达,对脑缺血再灌流损伤具有一定的保护作用。

脑缺血再灌流后大鼠海马锥体细胞和星形胶质细胞的体视学

为了研究脑缺血再灌流后海马锥体细胞和星形胶质细胞的变化,选取24只SD大鼠,随机分为对照组、缺血再灌流后6、12、24 h组,采用Nissl染色,GFAP免疫组织化学方法并应用体视学参数分别对海马CA1、CA3区锥体细胞和星形胶质细胞进行形态学定量分析。结果显示,海马CA1、CA3区锥体细胞体积密度(Vv)和表面积密度(Sv)随着缺血再灌流后存活时间的延长而减小,与对照组相比,6 h组显著降低(P<0.05),12 h组和24 h组极显著降低(P<0.01);而海马区星型胶质细胞的Vv、Sv却随缺血再灌流后存活时间的延长而加大,与对照组相比,6 h组无显著性差异(P>0.05),12、24 h组具极显著差异(P<0.01,P<0.01);同组海马CA1和CA3区,以及同组同一海马区域左右两侧比较,锥体细胞和星形胶质细胞Vv、Sv均无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明,海马CA1、CA3区锥体细胞随着缺血再灌流时间的延长受损加重,而星形胶质细胞功能趋于活跃且与锥体细胞损伤密切相关。

脑缺血再灌流后HSP70蛋白的表达及其与凋亡的关系

目的 :研究脑缺血再灌流后 HSP70蛋白的表达及其与凋亡的关系。方法 :应用免疫组化的方法观察大鼠局灶性脑缺血再灌流后脑组织 HSP70蛋白的表达和细胞凋亡的分布。结果 :缺血 2 h再灌流 0 h即可见 HSP70表达和凋亡细胞 ,HSP70至 2 4h达高峰 ,凋亡细胞数于再灌流后 2 4～ 48h达高峰。结论 :脑缺血诱导 HSP70蛋白的表达和细胞凋亡 ,脑缺血后

bFGF对脑缺血再灌流后HSP70及凋亡的影响

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)对脑缺血再灌流后 HSP70表达与细胞凋亡的影响。方法 线栓法制成大鼠大脑中动脉闭塞及再灌流模型 ,用免疫组化及原位末端标记的方法观察大鼠大脑中动脉闭塞 2 h后再通 1～ 72 h脑组织 HSP70表达与凋亡细胞的分布 ,侧脑室注射外源性 b FGF,并观察对它们的影响。结果 b FGF组与生理盐水组相比于 6～ 4 8h各时间点的 HSP70表达增高 ( P<0 .0 5 ) ,凋亡细胞数明显减少 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。结论 外源性 b FGF可能诱导脑缺血再灌流后

7-硝基吲唑对大鼠脑缺血再灌流保护作用的研究

目的 :探讨神经元型一氧化氮合酶抑制剂 (nNOSI) 7-硝基吲唑 (7-nitroindazole ,7-NI)对脑缺血再灌流保护作用的机理。方法 :选用体重 180～ 2 2 0 g的雌性Wistar大鼠 ,随机分组 ,左颈外动脉管腔内置渔线经颈内动脉送至大脑中动脉内 ,使之闭塞。 1h后拔出栓子 ,再灌流 0 5h到 2h。于再灌流前治疗组给予 7-NI(5 0mg kg) ,对照组和假手术组给予花生油 5ml kg ,根据再灌流不同时相 (0 5h ,1h ,2h)再分 3个亚组。缺血再灌流期间定时测定脑匀浆NOS活性和MDA含量 ,用嗜银Ⅲ染色法作光镜病理检查。结果 :再灌流后不同时相 ,7-NI组NOS活性、MDA含量均明显低于单纯缺血再灌流对照组 (P <0 0 5 ) ;光镜检查发现 7-NI组顶页皮质早期变性的神经元数在各时相也均低于相应的对照组 (P <0 0 5 )。结论 :于大鼠大脑中动脉闭塞 1h给予 7-NI(5 0mg kg)后再灌流 0 5h到 2h ,7-NI有如下影响 :抑制NOS活性 ;降低MDA含量 ;减轻光镜下病理的异常变化。证明

插线法制作大鼠局灶性脑缺血再灌流模型方法的改进

目的探索插线法制作大鼠局灶性脑缺血再灌流模型方法的改进。方法在前人制作模型方法基础上进行部分改进 ,用提线法阻断血流和在颈外动脉上剪小口进行插线。结果缩短了手术时间 ,简化了模型制作过程 ,提高模型成功率。结论本法复制插线法制作大鼠局灶性脑缺血再灌流模型 ,省时 ,操作简便 。

大鼠脑缺血再灌流后Bcl-2、Caspase-3 mRNA水平表达与大脑皮层及纹状体区炎性细胞浸润的影响

目的 探讨大鼠脑缺血再灌流后Bcl- 2蛋白、Caspase - 3mRNA的表达及炎性细胞浸润与神经细胞凋亡的关系。方法 将 5 4只Wistar大鼠随机分为二组 :假手术组 ,缺血再灌流组。采用原位末端标记 (TUNEL)、免疫组化和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌流后不同时间点神经细胞凋亡及损伤的变化与Bcl- 2、Caspase - 3mRNA表达。 结果 Bcl- 2表达于缺血再灌流 12～ 2 4h达高峰 ,再灌流 2～ 4d呈下降趋势 ,至 16d略高于假手术组 ;Caspase- 3mRNA于缺血再灌流 12～ 2 4h达高峰 ,2～ 4d呈降低趋势 ,至 16d略高于假手术组。结论 脑缺血再灌流后细胞凋亡介导神经细胞损伤、坏死是一个渐进的动态演变过程。Bcl- 2蛋白、Caspase-

火焰原子吸收法测定大鼠急性脑缺血再灌流时脑皮质铜锌变化

本文采用火焰原子吸收光谱法测定了大鼠全脑缺血，再灌流不同时间脑皮质铜锌的含量变化。脑皮质铜含量在缺血３０分钟后再灌流３０分钟（Ｉ３０Ｒ３０）和再灌流６０分钟（Ｉ３０Ｒ６０）较对照组升高（Ｐ＜０．０５）。锌含量实验组与对照组无显著性差异。结果显示：大鼠急性脑缺血再灌流时血铜向脑内转移，铜参与了脑血管病急性损伤期的活动。

藏药改善大鼠脑缺血再灌流损伤后学习记忆障碍的实验研究

为探讨藏药防治脑缺血后血供恢复期内认知功能障碍等脑血管病后遗症的可靠方法 ,采用交替夹闭与松解大鼠双侧颈总动脉 ,制作全脑缺血再灌流损伤动物模型 ,用迷宫法检测大鼠学习记忆行为 ,并测定大鼠海马的 MDA(丙二醛 )含量变化 ,对比观察藏药治疗组与未治疗组的组间差异。结果 ,脑缺血后血供恢复 50 d内 ,治疗组穿行迷宫时间缩短 ,海马中 MDA含量降低 ,均与未治疗组有显著差异 ( P<0 .0 5)。上述两组大鼠穿行迷宫的时间比假手术对照组延长 ,MDA含量升高 ,有极显著差异 ( P<0 .0 1)。表明藏药有改善和增强学习记忆能力之作用 。

脑缺血再灌流线粒体呼吸功能的变化

目的 观察鼠脑缺血和再灌流后脑细胞线粒体呼吸功能的改变。方法 采用沙鼠双侧颈总动脉夹闭30分钟，再开放造成脑缺血再灌流模型。测定脑缺血及再灌流后1h、3h、6h、24h和-48h线粒体呼吸Ⅲ、Ⅳ态及呼吸控制率(RCR)；测定线粒体呼吸链NADH—CoQ还原酶、琥珀酸脱氢酶活力。结果 脑缺血时线粒体呼吸控制率(RCR)和NADH—CoQ还原酶活力明显下降；再灌流初期代偿性增高，随着再灌流时间延长，线粒体呼吸Ⅳ态增加而呼吸Ⅲ态未能恢复，使RCR再次降低；NADH—CoQ还原酶、琥珀酸脱氢酶活力于再灌流后进一步下降，再灌流6小时后更为明显。结论 脑缺血可以造成线粒体功能损害，再灌流得到氧供使线粒体功能有所恢复，但再灌流可以造成二次打击，使线粒体无效耗氧增加，造成脑细胞的进一步损害。

钙离子对沙土鼠脑缺血再灌流后海马区胶质纤维酸性蛋白的作用

目的探讨钙离子对沙土鼠脑缺血再灌流后海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)合成的影响。方法钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型 ,体外孵育海马组织脑片 ,应用免疫荧光法染色 ,观察GFAP浓度的变化及分布。结果脑缺血再灌流后钙离子增加海马区GFAP的合成 ,GFAP阳性细胞主要分布在放射层及分子层。

通络熄风注射液对大鼠脑缺血再灌流损伤保护作用的实验研究

制备大鼠脑缺血再灌流模型,发现再灌流24h 后大鼠大脑皮质、海马、纹状体及血清中丙二醛(MDA)含量均显著升高,伴有脑匀浆乳酸脱氩酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)活性的下降,血清 LDH、CPK 活性升高。采用通络熄风注射液防治组则 MDA 的升高受到明显抑制(P<0.01),同时脑匀浆中酶活性增强,血清中酶活性减弱(P<0.05)。中风指数评价显示通络熄风注射液防治组中风指数下降(P<0.01),并使脑缺血再灌流大鼠的神经病学症状和行为障碍减轻。从脑保护角度阐明了通络熄风注射液的临床药理基础。