炎调方通过PD-1/PD-L1通路抑制脓毒症大鼠T淋巴细胞衰竭的实验研究

目的研究炎调方对脓毒症大鼠T淋巴细胞及T淋巴细胞表面表面程序性死亡蛋白(PD-1)、程序性死亡蛋白配体(PD-L1)表达的影响。方法SD大鼠(雄性)分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组。盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后12、24、48、72 h采集外周血处死大鼠(每个时间点各5只大鼠),采用流式细胞分析法测定CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)比例;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD4^(+)及CD8^(+)表面PD-1、PD-L1表达水平。结果白介素-6(IL-6)在脓毒症模型组12 h分泌达到高峰后逐渐下降,降钙素原(PCT)在模型组24 h达到高峰后逐渐下降;炎调方组在12 h降低IL-6的水平(P<0.05),24 h时明显降低IL-6、PCT的水平(P<0.01)。模型组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)比例早期分泌开始减少,48 h分泌达最低点(P<0.01);炎调方组在48 h时可升高CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)比例,提高CD4^(+)/CD8^(+)的比值而具体调节T细胞活化和增殖的功能。模型组CD4^(+)、CD8^(+)表面PD-1、PD-L1表达水平早期24 h即表达增多(P<0.01),72 h表达最多;炎调方组24 h时即可抑制PD-1、PD-L1的表达水平而具体改善T细胞衰竭的作用。CD4^(+)的比例与CD4^(+)表面PD-1、PD-L1的表达呈负相关(P<0.01);CD8^(+)比例与CD8^(+)表面PD-1、PD-L1的表达呈负相关(P<0.01)。结论脓毒症早期48 h内即出现了T细胞活化和增殖的功能衰竭引起的T细胞免疫抑制。炎调方能在脓毒症早期改善T细胞活化和增殖的功能,其机制可能与抑制PD-1/P-L1通路有关。

外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞对老年脓毒症患者预后的预测价值

目的 探讨外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞对老年脓毒症患者预后的预测价值。方法 采用回顾性队列研究,选取2015年2月—2016年8月西安交通大学第二附属医院重症医学科住院的年龄≥60岁的脓毒症患者75例,依据ICU结局分为存活组(n=54)及死亡组(n=21)。收集患者一般资料,诊断脓毒症当天进行急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分及序贯器官衰竭(SOFA)评分,检测外周血液标本TNF-a、IL-10及CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞。结果 死亡组平均年龄大于存活组(P<0.05)。死亡组较存活组有更高的APACHEⅡ评分、SOFA评分及休克比例,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞、TNF-a、IL-10较存活组更高(P<0.05)。存活组的耐药菌感染比例低于死亡组,但差异无统计学意义(P>0.05)。无论单因素还是对一系列协变量进行调整的多因素Logistic回归分析均显示,较高的外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞比例与高的ICU死亡率相关(OR, 1.21;95%CI, 1.10~1.33)(OR, 1.30;95%CI, 1.07~1.58);APACHEⅡ评分预后预测的AUC为0.78(95%CI 0.67~0.90),将最适诊断界点22.5分作为预测死亡可能的临界点,敏感性和特异性分别为61.9%和75.2%。SOFA评分预后预测的AUC为0.80(95%CI,0.68~0.92),将最适诊断界点9.5分作为预测死亡可能的临界点,敏感性和特异性分别为71.4%和77.8%。外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞预后预测的AUC为0.91(95%CI,0.83~0.99),将最适诊断界点60.2%作为预测死亡可能的临界点,敏感性和特异性分别为81.0%和92.6%。结论 老年脓毒症患者外周血高CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞比例与ICU死亡率增加相关,一定程度上可用于评估此类人群的病情严重程度及预测预后。

PD-1检测联合T淋巴细胞亚群分析对脓毒症患者预后评估的临床研究

目的 检测PD-1表达量联合T淋巴细胞亚群和部分细胞因子分析,评估脓毒症患者的免疫状态及预后。方法 选取符合2016年美国重症医学会/欧洲重症医学会(SCCM/ESICM)脓毒症及脓毒症休克定义Sepsis-3诊断标准,并且符合入组条件的68例患者,根据病情分为脓毒症组和脓毒症休克组,其中脓毒症组30例,脓毒症休克组38例,记录患者一般临床资料,通过ELISA法检测PD-1,抽取外周血送检,检查项目包括血常规、淋巴细胞亚群测定(T辅助淋巴细胞CD4^(+)与T抑制淋巴细胞CD8^(+))、降钙素原、白介素-6、超敏C反应蛋白。结果 2组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),但2组患者急性生理与慢性健康评分和序贯器官衰竭的评分比较差异有统计学意义(P<0.05);脓毒症休克组的PD-1较脓毒症组表达水平高,差异有统计学意义(P<0.05),但淋巴细胞计数、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较脓毒症组低(P<0.05);2组患者的感染指标降钙素原及炎症指标白介素-6和超敏C反应蛋白比较差异有统计学意义(P<0.05),脓毒症休克组较脓毒症组检测值更高(P<0.05);总T淋巴细胞相比,2组患者差异无统计学意义(P>0.05);脓毒症休克组患者的住ICU时间、14天病死率、28天病死率均较脓毒症组明显升高(P<0.05);PD-1表达水平、CD4^(+)T细胞是影响脓毒症患者死亡的独立危险因素。结论 脓毒症和脓毒症休克患者早期即出现免疫抑制,脓毒症休克组患者免疫抑制更严重,预后更差。

通腑益气活血汤配合肺泡灌洗治疗肺炎脓毒症的疗效及对患者T淋巴细胞亚群、线粒体损伤指数的影响

目的观察通腑益气活血汤配合纤支镜肺泡灌洗治疗肺炎脓毒症的疗效,并探讨其对患者T淋巴细胞亚群、线粒体损伤指数的影响。方法选取2020年1月至2023年1月河南省第二人民医院收治的92例肺炎脓毒症患者作为研究对象,按随机数表法分为观察组和对照组各46例。对照组患者予以纤支镜肺泡灌洗治疗,观察组患者予以通腑益气活血汤配合纤支镜肺泡灌洗治疗,均治疗2周。比较两组患者治疗2周后的疗效,及治疗前、治疗1周后、治疗2周后的中医证候积分、血气指标[经皮血氧饱和度(SpO_(2))、动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))]、肺功能[第1 s用力呼吸容积(FEV_(1))、FEV_(1)/用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%)]、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))、线粒体损伤指数(CD3^(+)MDI、CD4^(+)MDI、CD8^(+)MDI)、临床肺部感染评分(CPIS)、Murray肺损伤评分(MLIS)及急性生理与慢性健康量表(APACHEⅡ)评分;随访2个月,统计两组患者的生存情况及CPIS、MLIS、APACHEⅡ评分。结果观察组患者的治疗总有效率为91.30%,明显高于对照组的76.09%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗2周后,观察组患者的主症、次症积分及总积分明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗2周后,观察组患者的FEV_(1)、FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC、PaO_(2)及SpO_(2)明显高于对照组,PaCO_(2)明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗2周,观察组患者的CD3^(+)、CD4^(+)明显高于对照组,CD8^(+)、CD3^(+)MDI、CD4^(+)MDI、CD8^(+)MDI明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗2周后,观察组患者的MLIS、CPIS及APACHEⅡ评分明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);随访2个月,观察组患者的生存率为95.95%,略高于对照组的89.13%,但差异无统计学意义(P>0.05),而观察组患者的MLIS、CPIS及APACHEⅡ评分明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通腑益气活血汤配合纤支镜肺泡灌洗应用于肺炎脓毒症,可有效调节患者的血气与免疫功能,缓解临床症状,减轻肺损伤、改善肺功能,临床应用效果显著。

T淋巴细胞亚群和中性粒细胞/淋巴细胞比值与脓毒症严重程度的相关性分析

目的分析T淋巴细胞亚群、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)降钙素原(PCT)等炎症指标水平与脓毒症严重程度的相关性。方法采用前瞻性研究方法。选择2021年1月至2022年12月山东省淄博市中心医院重症医学科收治的78例脓毒症患者作为研究对象。将患者按病情严重程度分为脓毒性休克组(37例)和脓毒症组(41例),以同期40例本院健康体检者作为健康对照组。采用流式细胞仪测定3组受试者CD4^(+)T淋巴细胞(CD4^(+)T)和CD8^(+)T淋巴细胞(CD8^(+)T)计数水平,计算CD4^(+)T/CD8^(+)T淋巴细胞比值(CD4^(+)T/CD8^(+)T)、NLR;采用电化学发光免疫分析法测定PCT、白细胞介素-6(IL-6)水平;采用免疫散射比浊法测定C-反应蛋白(CRP)水平,记录两组患者24h内急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEI),比较各组淋巴细胞亚群及各项炎症指标的差异;采用Pearson相关性分析法分析各项指标与APACHEI的相关性。结果脓毒性休克组、脓毒症组CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD4^(+)T/CD8^(+)T均明显低于健康对照组[CD4^(+)T计数(×10^(6)L):168.27±76.68、266.08±131.57比789.60±173.78,CD8^(+)T计数(×10^(6)/L):156.50±68.37、205.81±75.60比636.42±90.59,CD4^(+)T/CD8^(+)T:1.09±0.39、1.27±0.34比1.44±0.38,均P<0.01],NLR、PCT、CRP及IL-6水平均明显高于健康对照组[NLR:25.85±11.62、15.94±8.72比2.68±1.31,PCT(μg/L):21.82±15.28、9.09±4.96比0.13±0.10,CRP(mg/L)158.65±62.33、106.97±51.49比6.48±2.08,IL-6(ng/L):1344.64±899.21、245.31±176.99比3.25±1.83,均P<0.01];脓毒性休克组APACHEⅡ评分明显高于脓毒症组(分:32.00±1.00比22.01±1.09,P<0.05)。相关性分析显示:脓毒症患者2组的CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD4^(+)T/CD8^(+)T水平与APACHEⅡ评分水平均呈负相关(r值分别-0.571、-0.506、-0.555,均P<0.01),NLR、PCT、CRP及IL-6水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(r值分别0.711、0.709、0.777、0.707,均P<0.01)。结论T淋巴细胞亚群水平越低,NLR及PCT等炎症指标水平越高,脓毒症病情越严重。因此,T淋巴细胞亚群及各项炎症指标水平可作为评估脓毒症病情严重程度的标志物。

T淋巴细胞在脓毒症大鼠血清及肺部的分布特征

目的研究T淋巴细胞在脓毒症大鼠血清及肺部的分布特征。方法20只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(Sham)24 h、Sham 48 h、脓毒症组(CLP)24 h和CLP 48 h。采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症模型。分别在造模后24、48 h留取各组大鼠外周血、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),并进行CD3^(+)T及CD4^(+)T淋巴细胞流式检测。留取肺组织苏木精-伊红(HE)染色光镜观察大鼠肺组织病理变化,并行肺损伤病理评分。结果与Sham组相应时间点比较,CLP组血清CD3^(+)T及CD4^(+)T淋巴细胞比例在CLP后24 h及48 h均减低(均P<0.05);Sham组和CLP组血清CD3^(+)及CD4^(+)T淋巴细胞在CLP后48 h较24 h均有不同程度增生,但CLP组增生程度较Sham组减低(均P<0.05)。与Sham 24 h比较,CLP 24 h大鼠BALF中CD3^(+)及CD4^(+)T淋巴细胞比例明显减低(均P<0.05);与CLP 24 h比较,CLP 48 h BALF中CD3^(+)及CD4^(+)T淋巴细胞比例明显升高(P<0.05)。病理观察显示,各组大鼠均有不同程度肺损伤改变,CLP 24 h组大鼠肺损伤评分更高(P<0.05),可见大量炎症细胞浸润、肺间质充血水肿、肺泡出血等改变。结论大鼠血清及肺部T淋巴细胞在脓毒症中后期增生被抑制;血清CD3^(+)及CD4^(+)T淋巴细胞水平从一定程度上可以反映肺组织水平;脓毒症肺脏损伤情况越重,BALF中T淋巴细胞增生趋于减低。

乳酸/白蛋白比值、白细胞介素-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数对重症肺炎并脓毒症患者短期预后的预测价值

目的探讨乳酸/白蛋白比值(LAR)、白细胞介素-6(IL-6)、CD4^(+)T淋巴细胞计数对重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的预测价值。方法选择2022年1月至2023年6月郑州大学附属郑州中心医院呼吸重症医学科(RICU)收治的73例重症肺炎并脓毒症患者为研究对象,依据患者28 d生存结局将其分为生存组(n=43)和死亡组(n=30)。通过查阅电子病历收集患者的临床资料,包括:年龄、性别及合并高血压、糖尿病、冠状动脉性心脏病(CHD)情况,入住RICU治疗时的序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理与慢性健康状态评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、平均动脉压(MAP)、英国胸科协会改良肺炎评分(CURB-65)、总胆红素(Tbil)、血肌酐(Scr)、血小板计数(PLT)、白细胞(WBC)计数、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)。入住RICU后第1、3、7天,抽取患者动脉血,应用全自动血气分析仪检测乳酸水平;抽取患者外周静脉血,应用酶联免疫吸附试验检测患者血清中白蛋白和白细胞介素-6(IL-6)水平,流式细胞仪检测CD4^(+)T淋巴细胞亚群计数;计算2组患者第1、3、7天的LAR。比较2组患者的临床资料及第1、3、7天的LAR、IL-6及CD4^(+)T淋巴细胞计数水平,应用logistic回归分析重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的影响因素,受试者操作特征(ROC)曲线评估各影响因素对重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的预测价值。结果2组患者的性别、年龄、合并高血压占比、合并糖尿病占比、合并CHD占比、RICU住院时间以及入住RICU时的Tbil、MAP、PLT、Scr、WBC、PCT、CRP比较差异均无统计学意义(P>0.05);死亡组患者的APACHEⅡ评分、CURB-65评分显著高于生存组(P<0.05)。第1、3、7天,死亡组患者的CD4^(+)T淋巴细胞计数显著低于生存组,SOFA评分显著高于生存组(P<0.05)。第1天,死亡组与生存组患者的LAR、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);第3、7天,死亡组患者的LAR及IL-6水平显著高于生存组(P<0.05)。生存组患者第3、7天的LAR、IL-6、SOFA评分显著低于第1天,第7天的LAR、IL-6、SOFA显著低于第3天(P<0.05);生存组患者第3、7天的CD4^(+)T淋巴细胞计数显著高于第1天(P<0.05);生存组患者第7天与第3天的CD4^(+)T淋巴细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组患者第7天的IL-6水平显著低于第1、3天(P<0.05),第1天的IL-6水平与第3天比较差异无统计学意义(P>0.05);LAR、CD4^(+)T淋巴细胞计数、SOFA评分各时间点间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,第3天,重症肺炎并脓毒症患者LAR、IL-6水平与SOFA评分呈显著正相关(r=0.385、0.394,P<0.05);第7天,LAR、IL-6与SOFA评分亦呈显著正相关(r=0.418、0.402,P<0.05);第3、7天,CD4^(+)T淋巴细胞计数与SOFA评分均呈显著负相关(r=-0.451、-0.454,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,APACHEⅡ评分、第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数是重症肺炎并脓毒症28 d死亡的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,APACHEⅡ评分,第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及三者联合,第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及二者联合对重症肺炎并脓毒症患者的28 d死亡均有一定预测价值(P<0.05);第3天的LAR、IL-6和CD4^(+)T淋巴细胞计数联合预测重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的ROC曲线下面积(AUC)为0.891,APACHEⅡ评分预测重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的AUC值为0.769,第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数预测重症肺炎并脓毒症28 d死亡的AUC值分别为0.795、0.757、0.770,第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及二者联合预测重症肺炎并脓毒症28 d死亡的AUC值分别为0.743、0.802、0.888。结论入院3 d LAR、3 d IL-6、3 d CD4^(+)T淋巴细胞计数以及7 d IL-6、7 d CD4^(+)T淋巴细胞计数是影响重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的相关因素;联合检测第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数能够更好地评估患者病情严重程度及预后。

获得性免疫缺陷综合征合并脓毒症患者外周血中T淋巴细胞亚群研究

目的 探讨获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并脓毒症患者外周血中T淋巴细胞亚群。方法 回顾性选取2021年10月至2023年9月海南医学院第二人民医院内AIDS合并脓毒症患者60例作为试验组,AIDS无脓毒症患者60例作为对照1组,健康献血员20名作为对照2组。应用免疫荧光和单克隆抗体标记技术检测试验组、对照1组和对照2组外周血T淋巴细胞亚群(CD3细胞数量、CD4细胞数量、CD8细胞数量、CD4/CD8比值),比较试验组、对照1组和对照2组T淋巴细胞亚群计数和比例,并统计分析试验组不同年龄、确诊时间患者的T淋巴细胞亚群计数和比例。结果 试验组患者的CD3细胞数量、CD4细胞数量分别为(864.72±184.22)、(145.37±25.37)个/μL,均明显少于对照1组[(971.80±135.14)、(218.11±36.24)个/μL]、对照2组[(1 098.12±156.23)、(296.23±41.25)个/μL],CD4/CD8比值为0.258±0.024,明显低于对照1组(0.344±0.034)、对照2组(0.458±0.045),差异均有统计学意义(P<0.05);对照1组患者的CD3细胞数量、CD4细胞数量均明显少于对照2组,CD4/CD8比值明显低于对照2组,差异均有统计学意义(P<0.05);但3组研究对象的CD8细胞数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同年龄患者的CD3细胞数量、CD4细胞数量、CD8细胞数量、CD4/CD8比值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同确诊时间患者的CD4细胞数量比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中,确诊时间0~1年、1~2年患者的CD4细胞数量均多于2~3年、3~4年、4~5年、≥5年患者(P<0.05);但不同确诊时间患者的CD3细胞数量、CD8细胞数量、CD4/CD8比值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 AIDS合并脓毒症患者外周血中T淋巴细胞亚群降低,CD4细胞数量与确诊时间密切相关,不仅能拓宽临床对于AIDS机会性感染认识,更能为其诊治提供新的思路及方向。

基于CD80/CTLA⁃4途径探究IL⁃7对脓毒症T淋巴细胞功能的机制研究

目的基于CD80/CTLA⁃4途径探究IL⁃7对脓毒症T淋巴细胞功能的影响。方法选取我院2021年1月1日~2023年6月6日收治的104例脓毒症患者,分离患者外周血中T淋巴细胞并纯化,刺激培养T淋巴细胞并分为3组,即对照组、IL⁃7组和CYAL⁃4组。流式细胞仪分别检测T淋巴细胞凋亡率和增殖代数;ELISA检测淋巴细胞IL⁃7、IFN⁃γ、TNF⁃α水平;流式细胞仪检测淋巴细胞表面CD80表达;免疫荧光法检测T淋巴细胞表面CTAL⁃4表达。结果与对照组相比,IL⁃7组和CTAL⁃4组T淋巴细胞凋亡率明显降低(分别为45.17±4.02、48.06±4.08),T淋巴细胞增殖代数(分别为6.01±1.04、5.92±1.02)、T淋巴细胞中IL⁃7(分别为115.46±9.07、112.39±9.01)、IFN⁃γ(分别为21.46±2.15、20.07±2.12)、TNF⁃α(分别为347.15±2.26、340.87±12.08)水平明显增加(P<0.05);但IL⁃7组T淋巴细胞凋亡率、增殖代数、IL⁃7、IFN⁃γ、TNF⁃α水平和CTAL⁃4组相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,IL⁃7组和CTAL⁃4组T淋巴细胞中CD80(分别为6.28±0.87、6.31±0.89)和CTAL⁃4阳性率(分别为3.68±0.57、3.65±0.55)明显降低(P<0.05);IL⁃7组T淋巴细胞中CD80和CTAL⁃4阳性率和CTAL⁃4组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL⁃7可抑制脓毒症患者T淋巴细胞凋亡,促进T淋巴细胞增殖,促进T淋巴细胞中IL⁃7、IFN⁃γ、TNF⁃α水平,其作用机制可能与抑制CD80/CTLA⁃4途径有关。

脓毒症患者外周血T淋巴细胞亚群及炎症因子水平与预后的关系研究

目的:探讨脓毒症患者外周血T淋巴细胞亚群及炎症因子水平与预后的关系。方法:选取2020年7月至2023年5月在联勤保障部队第九八九医院治疗的70例脓毒症患者,纳入脓毒症组,入院后28d根据患者存活情况又分为存活组和死亡组,比较两组患者的外周血T淋巴细胞亚群包括CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)和CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)比值、降钙素原(PCT)和中性粒细胞与淋巴细胞计数比值(NLR)水平。随访所有脓毒症患者28d内预后情况,ROC分析相关指标对预后的预测价值。结果:随访28d内,脓毒症患者存活53例,死亡17例。死亡组患者的PCT、NLR、CD_(8)^(+)高于存活组,CD_(4)^(+)和CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)均较存活组低,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC分析显示,PCT、NLR、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)对脓毒症患者预后预测的曲线下面积为0.748、0.794、0.794、0.739和0.872,PCT预测敏感度和特异度为76.47%和94.34%,NLR预测敏感度和特异度为82.35%和92.45%,CD_(4)^(+)预测敏感度和特异度为64.71%和83.02%,CD_(8)^(+)预测敏感度和特异度为58.82%和94.34%,CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)预测敏感度和特异度为82.35%和86.79%。结论:外周血PCT、NLR及T淋巴细胞亚群在脓毒症患者中表达异常,其中NLR对脓毒症患者预后有较高预测价值,PCT和外周血T淋巴细胞亚群对脓毒症患者预后预测价值一般。

超声心动图参数及外周血T淋巴细胞亚群、NF-κB、CD64水平预测新生儿败血症预后的价值

【目的】探讨超声心动图参数及外周血T淋巴细胞亚群、核因子-κB(NF-κB)、簇分化抗原64(CD64)水平预测新生儿败血症预后的价值。【方法】选取2020年1月至2023年2月本院收治的95例新生儿败血症,根据预后情况将其分为存活组(n=80)和死亡组(n=15)。比较两组患儿超声心动图参数[左室短轴缩短率(FS)、升主动脉内径(AAO)、左室射血分数(LVEF)]、心肌损伤标志物[肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))、NF-κB、CD64水平;采用Logistic多因素回归分析新生儿败血症预后不良的相关影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析心电图指标及实验室指标预测新生儿败血症预后的临床价值。【结果】两组患儿肌酸激酶CK、CK-MB水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组FS、AAO及LVEF高于死亡组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿CD8^(+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组患儿CD3^(+)、CD4^(+)水平高于死亡组,NF-κB、CD64水平低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白(CRP)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组患儿白细胞计数(WBC)低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示:FS、LVEF、CD64是影响新生儿败血症预后的相关因素(P<0.05)。FS、LVEF、CD64联合预测新生儿败血症预后的ROC曲线下面积为0.948,明显高于各指标单独预测的0.827、0.895和0.877(P<0.05)。【结论】FS、LVEF联合CD64检测对新生儿败血症预后有良好的预测价值,临床可通过密切监测上述指标及时判断新生儿败血症预后,采取相关干预措施。

淋巴细胞亚群和细胞因子检测在脓毒症并发MODS中的应用价值

目的分析淋巴细胞亚群和细胞因子检测在脓毒症并发多器官功能障碍综合征(MODS)中的应用价值。方法收集2022年1月至2023年6月中山大学附属第一医院符合《脓毒症与感染性休克的国际共识》中脓毒症诊断标准的脓毒症患者103例为研究对象,根据是否发生MODS分为MODS组(46例)与非MODS组(57例)。回顾性分析这两组患者的基线资料、淋巴细胞亚群、细胞因子和血清学指标,使用秩和检验比较两组患者淋巴细胞亚群、细胞因子与血清学指标水平,采用受试者工作特征曲线分析淋巴细胞亚群、细胞因子和血清学指标诊断脓毒症并发MODS的效能。结果MODS组CD3^(+)CD19^(-)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞水平明显低于非MODS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MODS组白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平明显高于非MODS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD3^(+)CD19^(-)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞诊断脓毒症并发MODS的曲线下面积(AUC)分别为0.899、0.711、0.676;IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α诊断脓毒症患者MODS的AUC分别为0.637、0.797、0.761、0.650;PCT诊断脓毒症并发MODS的AUC为0.720。结论淋巴细胞亚群、细胞因子水平对诊断脓毒症并发MODS有一定价值,其中CD3^(+)CD19^(-)T淋巴细胞诊断灵敏度最高,IL-6诊断特异度最高。

脓毒症中医证型分布、病原学特征及T淋巴细胞亚群与预后的相关性研究

【目的】探究脓毒症中医证型分布、病原学特征及T淋巴细胞亚群与预后的相关性。【方法】采用回顾性分析方式,选取2020年1月至2022年1月在广州中医药大学第一附属医院重症医学科住院治疗的脓毒症患者86例,总结中医证型分布规律及病原学特征,并根据疾病分期分为脓毒症组33例和脓毒症休克组53例,比较2组患者的T淋巴细胞亚群及相关辅助检查指标,分析2组间的指标差异及与预后的相关性。【结果】(1)86例脓毒症患者的中医证型分布按频次从高到低排序依次为阴竭阳脱证33例(38.4%)、热毒炽盛证25例(29.1%)、痰热壅肺证15例(17.4%)、肺脾气虚证13例(15.1%)。(2)86例脓毒症患者中,肺部感染占比最高,达到54.7%(47/86);其他依次为尿路感染[22.1%(19/86)]、腹腔感染[9.3%(8/86)]、血流感染[9.3%(8/86)]、胆道感染[4.6%(4/86)]。肺部感染患者以革兰阴性菌感染为主,肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为前3种最常见的致病细菌。31.9%(15/47)的肺部感染患者合并真菌感染。(3)脓毒症组的CD4^(+)、CD8^(+)淋巴细胞水平高于脓毒症休克组(P<0.01),血乳酸(Lac)、D-二聚体、序贯器官衰竭评分(SOFA)低于脓毒症休克组(P<0.01)。(4)相关性分析结果显示:CD8^(+)淋巴细胞与脓毒症患者不良预后呈负相关(P<0.05);SOFA评分、血Lac与脓毒症患者不良预后呈正相关(P<0.01);CD4淋巴细胞、D-二聚体与脓毒症患者不良预后无明显相关关系(P>0.05)。【结论】脓毒症患者阴竭阳脱证占比最高,肺部是脓毒症患者最常见的感染部位,且容易合并真菌感染;CD8淋巴细胞与脓毒症患者不良预后存在负相关关系,可作为脓毒症患者预后的预测指标。

Th1/Th2细胞因子谱在不同感染程度病人水平变化及其对脓毒症病人预后的评估价值

目的:探讨外周血1型或2型辅助型T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子谱对不同感染程度病人的临床应用及其对脓毒症病人短期预后的评估价值。方法:选取78例脓毒症病人(脓毒症组),64例局部感染病人(普通感染组)以及42例非感染病人(非感染组),收集3组病人的临床资料,比较入科后各组病人细胞因子浓度,使用Spearman等级相关分析其与感染严重程度的关系;依据随访结果,将脓毒症病人分成存活组(31例)和死亡组(47例),比较2组Th1/Th2细胞因子谱的差异,采用logistic回归分析筛选影响脓毒症病人预后的独立危险因素,对脓毒症病人28 d生存率进行亚组分析,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析病人28 d累积生存情况。结果:随着感染严重程度的增加,IL-4水平逐渐降低,IL-6、IL-8及IL-10水平逐渐升高;普通感染组和脓毒症组病人IL-5水平低于非感染组(P<0.05~P<0.01)。Spearman等级相关分析显示,IL-4与感染严重程度呈负相关(P<0.01);IL-6、IL-8、IL-10与感染严重程度呈显著正相关(P<0.01)。随访28 d,脓毒症病人死亡率60.26%。死亡组病人IL-5、IL-6、IL-8、IL-10浓度均大于存活组(P<0.05~P<0.01);logistic回归分析显示,IL-5和IL-8是脓毒症病人28 d死亡的独立危险因素(P<0.05);根据最佳截断值对IL-5、IL-8进行亚分组,结果提示IL-5、IL-8升高,增加了脓毒症病人28 d死亡的风险。Kaplan-Meier生存分析进一步证实了IL-5≥0.55 pg/mL组病人的28 d累积生存率明显低于IL-5<0.55 pg/mL组病人(P<0.05);IL-8≥54.61 pg/mL组病人的28 d累积生存率明显低于IL-8<54.61 pg/mL组病人(P<0.01)。结论:Th1/Th2细胞因子谱与感染严重程度呈现出显著的相关关系,且IL-5及IL-8对脓毒症病人28 d生存情况具有良好的预测价值。

间充质干细胞对自然衰老脓毒症大鼠炎性因子及T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨间充质干细胞(MSCs)对自然衰老脓毒症大鼠炎性因子及T淋巴细胞亚群的影响。方法 将90只自然衰老的SD大鼠(21月龄)按随机数字表法分为3组,其中模型组36只,治疗组36只,假手术组18只,各组大鼠再随机平均分为3组,分别在造模或治疗后6、24和72 h麻醉断头处死取材。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型。假手术组除不行盲肠结扎穿孔法外,其他操作同模型组。治疗组大鼠在造模1 h后,经尾静脉注射脐带MSCs,模型组和假手术组在造模1 h后经尾静脉注射等量的生理盐水。观察各组大鼠72 h生存率,通过Aimplex法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子(TNF)-α及转化生长因子(TGF)-β的水平。对各组大鼠脾组织行TUNEL染色,激光共聚焦显微镜观察脾淋巴细胞凋亡情况;流式细胞术分析各组大鼠CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比值。结果 假手术组大鼠观察期内无异常,术后72 h存活率为100.00%。模型组大鼠术后出现竖毛、食欲不振及精神萎靡等症状,而这些症状在治疗组大鼠中有所缓解,且治疗组CLP术后72 h存活率明显高于模型组(66.67%vs. 41.67%,P<0.01)。与假手术组相比,模型组IL-1β、IL-6和IL-17A等促炎因子水平升高,脾结构模糊、淋巴细胞凋亡比例增加,外周血和脾中CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组IL-1β、IL-6和IL-17A等促炎因子水平降低,抗炎因子IL-10水平升高,脾结构清晰、淋巴细胞凋亡明显减少,外周血和脾中CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MSCs能够明显提高自然衰老脓毒症大鼠的生存率,抑制过度的炎症反应,减少淋巴细胞凋亡,改善机体免疫功能,从而发挥保护作用。

miR-21水平与ICU脓毒症患者T淋巴细胞亚群指标的关系及在多重耐药菌感染防治中的价值

目的探讨微小RNA(miRNA)-21(miR-21)与重症监护病房(ICU)脓毒症患者T淋巴细胞亚群指标间的关系,并分析其对防治多重耐药菌(MDRO)感染的价值。方法选取2020年1月至2022年5月ICU脓毒症患者125例为研究对象,其中一般脓毒症患者73例,脓毒症休克患者52例。检测纳入研究者血清miR-21水平及T淋巴细胞亚群指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞百分比和CD4^(+)/CD8^(+)比值),分析miR-21水平与T淋巴细胞亚群指标的相关性。统计ICU脓毒症患者MDRO感染情况,分析患者MDRO感染的影响因素,构建风险模型。结果脓毒症休克患者血清miR-21水平、CD8^(+)T淋巴细胞百分比高于一般脓毒症患者,CD3^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值低于一般脓毒症患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。ICU脓毒症患者血清miR-21水平与CD3^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值呈负相关(r=-0.842、-0.788、-0.825,P<0.001),与CD8^(+)T淋巴细胞百分比呈正相关(r=0.818,P<0.001)。校正机械通气、住ICU时间、使用糖皮质激素等因素后,合并慢性阻塞性肺疾病、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、抗菌药物使用频率、抗菌药物持续使用时间、miR-21为ICU脓毒症患者发生MDRO感染的独立影响因素(P<0.05)。ICU脓毒症患者MDRO感染的风险模型显示,MDRO感染风险得分>8分患者感染风险最高,感染率为66.67%。结论ICU脓毒症患者miR-21表达与T淋巴细胞亚群指标密切相关,而且miR-21高表达会增加MDRO感染风险,检测血清miR-21水平对MDRO感染防治具有重要指导意义。

T淋巴细胞亚群预测脓毒症患者的病情及预后的价值研究

目的:探究T淋巴细胞亚群预测脓毒症患者的病情及预后的价值。方法:选取我院2021年1月-2022年6月收治的脓毒症住院患者作为脓毒症组(n=80),另选同时期于我院完成体检的健康者作为对照组(n=40),比较两组T淋巴细胞亚群水平、系统性炎症反应综合征,(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)诊断结果,以及各T淋巴细胞亚群水平与SIRS各诊断指标之间的相关性。根据患者入院28d的预后情况,将患者分为存活组和死亡组,比较两组患者入院第1d、7d时的T淋巴细胞亚群水平,并通过二元分析Logistic回归分析及ROC曲线分析T淋巴细胞亚群对脓毒症患者预后的预测价值。结果:脓毒症患者入院时CD4^(+)、CD8^(+)水平及体温、心率、呼吸频率及白细胞计数均低于对照组,CD4^(+)/CD8^(+)水平高于对照组,组间差异具有统计学意义(P<0.05);脓毒症患者入院时CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均与体温、心率、呼吸频率及白细胞计数均成反比,而CD8^(+)水平则与体温、心率、呼吸频率及白细胞计数均成正比(P<0.05);入院28d后,80例脓毒症患者中有22例死亡,死亡率为27.5%;死亡组患者入院第7d时T淋巴细胞亚群的CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平低于存活组,且低于入院第1d,CD8^(+)水平高于存活组,且高于入院第1d,组间、组内差异均具有统计学意义(P<0.05);存活组患者入院第7d时CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均高于入院第1d,CD8^(+)水平低于入院第1d,组内差异具有统计学意义(P<0.05);二元Logistic回归分析结果显示,CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)均是影响脓毒症患者预后的独立影响因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)联合预测脓毒症患者预后的曲线下面积为0.955,灵敏度为0.864,特异性为0.983。结论:T淋巴细胞亚群水平的变化与脓毒症患者的病情密切相关,CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)联合可准确预测脓毒症患者的预后。

T淋巴细胞亚群、血管内皮功能指标与脓毒症患者预后的关系

目的分析脓毒症患者T淋巴细胞亚群及血管内皮功能指标与其预后的关系。方法选取2020年1月至2023年1月我院收治的脓毒症患者150例,根据患者1个月内死亡情况分为死亡组与存活组,记录T淋巴细胞亚群、血管内皮功能指标,并对影响脓毒症患者预后的因素进行Logistic回归分析。结果死亡组CD3^(+)、CD4^(+)水平低于存活组,CD8+水平高于存活组(P<0.05)。死亡组血清血管性假血友病因子(vWF)、内皮素-1(ET-1)水平高于存活组,一氧化氮(NO)水平低于存活组(P<0.05)。CD8^(+)、vWF、ET-1为脓毒症患者1个月内死亡的危险因素(OR>1,P<0.05),CD3^(+)、CD4^(+)及NO则为保护因素(OR<1,P<0.05)。结论T淋巴细胞亚群、血管内皮功能指标与脓毒症患者预后具有相关性,临床治疗需调节患者免疫力并改善其血管内皮功能。

脓毒症患者血T淋巴细胞亚群、血清炎症因子的变化与疾病早期严重程度预后的临床研究

目的研究脓毒症患者血T淋巴细胞亚群、血清炎症因子的变化与疾病早期严重程度、预后的关系。方法选择2021年7月至2022年9月九江市第一人民医院收治的78例脓毒症患者作为观察组,按照病情严重程度分为脓毒血症组(n=64)与脓毒性休克组(n=14),另选取同期健康体检者30例作为对照组。对各组血T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)、白细胞计数(WBC)、血小板(PLT)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)水平进行检测,并记录患者SOFA评分,分析各指标与SOFA评分的关系。结果脓毒血症组与脓毒性休克组的CD3、CD4、CD8低于对照组,CD4/CD8、WBC、CRP、PCT、IL-6高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);脓毒性休克组的PLT低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);脓毒血症组的CD4/CD8高于脓毒性休克组,CRP、PCT、IL-6低于脓毒性休克组,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒血症组的SOFA评分低于脓毒性休克组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,CD4/CD8与SOFA评分呈负相关,CRP、PCT、IL-6与SOFA评分均呈正相关(r=-0.635、0.493、0.621、0.573,P<0.05)。结论血T淋巴细胞亚群、血清炎症因子在脓毒症患者中呈异常表达状态,且血CD4/CD8、CRP、PCT、IL-6均与SOFA评分密切相关,临床检测价值较高。

T淋巴细胞内质网应激在脓毒症中的作用

T淋巴细胞凋亡在脓毒症发生、发展过程中起重要作用,与脓毒症免疫抑制密切有关,如何减少T淋巴细胞凋亡是影响脓毒症患者预后的重要因素。内质网(endoplasmic reticulum,ER)是重要的细胞器,负责促进蛋白质的折叠、组装,并参与多种生理活动。在应激和炎性条件下,内质网失去功能稳态,被称为内质网应激(ER stress)。在内质网应激期间,未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)被激活,使内质网功能恢复到正常的平衡。然而,一旦应激超过UPR的代偿能力或延长,就会引发细胞损伤、甚至凋亡。越来越多的证据表明,内质网应激是导致脓毒症T淋巴细胞凋亡的重要病理生理机制之一,本文就脓毒症中T淋巴细胞内质网应激和UPR信号通路的相关研究进展进行综述,讨论T淋巴细胞内质网应激作为脓毒症免疫治疗新靶点的临床意义和价值。