微波辅助木质素脱甲基化改性及结构表征

为提高木质素的反应活性,采用微波辅助加热方式,在HBr/十六烷基三正丁基溴化磷(HBr/TBHDPB)体系下对木质素进行脱甲基化改性。考察了HBr用量、反应温度、反应时间和催化剂用量对木质素改性反应的影响。通过紫外光谱(UV)、核磁共振氢谱(1H NMR)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、凝胶渗透色谱(GPC)和元素分析等手段研究了木质素改性前后的官能团及分子质量变化,并由羟甲基化反应和曼尼希反应分析了木质素改性前后的活性变化。结果表明:木质素在微波辅助加热条件下,HBr用量为20 mmol/g,催化剂TBHDPB用量为木质素质量的2%,95℃反应1 h,制备的改性木质素含酚羟基为4.95%,相比原料木质素提高了32.71%,甲氧基为6.11%,相比原料木质素降低了20.44%。与甲醛反应的活性提高了18.15%,胺基侧链增加了7.54%。UV、1H NMR和FT-IR分析也表明,改性木质素的酚羟基含量增加,甲氧基含量降低。

联合使用脱甲基化药物和紫杉醇对肾癌细胞的侵袭能力影响机制研究

目的观察联合使用脱氧杂胞苷(DAC)与紫杉醇(PTX)对肾患细胞是否存在协同作用,并探究其机制。方法离体培养肾透明细胞癌ACHN细胞株,将120培养皿随机分为空白对照组、DAC组、PTX组、联合组,每组30个。DAC组:用DAC:0.5、1、2、4、8μmol/L处理3 d;PTX组:用PTX:1、2、4、8、16 nmol/L处理3 d;联合组:用DAC+PTX处理3 d。使用高速分选流式细胞仪观察T肽协同树突状细胞对肾癌细胞的凋亡率;通过ELISA检测淋巴细胞增强因子(LEF1)和E-cadherin在肾癌细胞中的表达;通过ELISA技术检测凋亡蛋白caspass-3在肾癌细胞中的表达。结果 DAC组、PTX组以及联合组对肿瘤细胞的抑制作用明显,其中联合组对肿瘤细胞的抑制作用最强(P<0.05),而且DAC和PTX对肿瘤细胞的抑制作用与药物浓度成正比(P<0.05)。与DAC组、PTX组比较,联合组中LEF1的表达水平最低(P<0.05),E-cadherin、caspass-3的表达水平最高(P<0.05),而且DAC和PTX对LEF1表达的抑制作用、对E-cadherin、caspass-3的表达的促进作用与药物浓度成正比(P<0.05)。结论 DAC与PTX联合干预肾癌细胞,具有协同作用,而且LEF1是新的肾癌治疗靶点,DAC与PTX合用可以提高肾癌细胞的凋亡率,并且降低肾癌细胞的侵袭转移能力。

马立克氏病毒DNA转录区和非转录区甲基化及脱甲基化的探讨

实验以鸡马立克氏病脾脏淋巴瘤继代细胞系MDCC MSB 1和感染马立克氏病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)为主要试验材料,作为参考系也使用了鸡马立克氏病卵巢淋巴瘤继代细胞系MDCC JP1、MDCC JP2、MDCC HP1及MDCC HP2细胞。用Suothern斑点分子杂交放射自显影等方法,验证了MDCC MSB 1等细胞株DNA的转录区和非转录区都存在着甲基化现象。转录区甲基化程度高于非转录区。用5 氮胞苷可以阻断DNA甲基化,阻断效果在转录区最好。

组蛋白赖氨酸的脱甲基化

组蛋白甲基化修饰调节染色质结构与基因转录,影响细胞分化与个体发育。2004年Shi等鉴定了第一个组蛋白脱甲基酶:赖氨酸特异性脱甲基酶1(lysinespecificdemethylase1,LSD1)。这个发现是“组蛋白密码”学说的重要进展,标志着组蛋白脱甲基化研究的开始。

甲基化和脱甲基化对过氧化氢脱木素作用的影响

已知,酚型木素和过氧化氢反应时通过苯氧基(C6H5O-)团的偶联形成二聚物.而酚羟基的甲基化作用会使大部份木素结构对H2O2的作用产生惰性.针叶木硫酸盐浆的残余木素中,每100个C9单位大约含有20～30个酚羟基和85个甲氧基,脱甲基化作用可以大大增加木素的酚羟基含量,故应了解脱甲基化对H2O2脱木素的影响,为了证明酚羟基的重要性,也应了解甲基化对H2O2脱木素的影响.

核酸(脱)甲基化与内源甲醛及认知损伤

核酸(DNA和RNA)甲基化/脱甲基是表观遗传调控的重要机制.甲醛参与DNA、RNA的甲基化/脱甲基过程,从而影响表观遗传的调节,包括学习记忆等认知功能.然而,甲醛代谢失调将影响核酸的甲基化与脱甲基,使动物的学习记忆能力下降,造成认知损伤.对北京地区604名老人(≥60岁)的调查显示,内源甲醛含量与被试受教育的年限相关,受教育程度越高,内源甲醛含量越低,反之亦然.这些结果表明,内源甲醛在人类学习记忆中扮演重要的角色,"活到老,学到老"可以延缓甲醛代谢失调引起的老年认知损伤.因此,研究内源甲醛代谢与核酸甲基化修饰之间的关系,对探索记忆储存及认知损伤等表观遗传学相关疾病的发生发展机制,具有一定的启示.

木质素脱甲基化改性及产物结构表征

通过对不同催化剂、催化剂量、反应温度和反应时间等反应条件下得到的改性木质素与甲醛反应活性的研究,确定了木质素脱甲基化反应条件,并通过FT-IR半定量、GPC1、H NMR对木质素脱甲基化前后结构进行表征。FT-IR半定量表明木质素甲氧基由反应前的0.990降至0.765,酚羟基由1.174增至1.529;GPC表明木质素脱甲基化后大分子木质素发生了降解,分子量小于2000的木质素含量由由改性前的38%增至改性后的51%;1H NMR表明木质素改性后脂肪族侧链与苯环分离,同时大量-βO-4醚键裂解。

HL-60细胞中的DNA脱甲基化活力

已有大量文献报道,真核生物的DNA甲基化作用与细胞癌变有着密切的关系,大部分癌基因及癌细胞的DNA总是处于不充分甲基化状态(undermethylation)。当然,真核生物的甲基化水平[5mC/(C+5 mC)％]主要是与催化这一过程的DNA甲基化酶的活力密切相关。

18-甲基-△^(9(11))-雌甾酚酮-3-甲醚的脱甲基和双键转位

18-甲基-△^(9(11))-雌甾酚酮-3-甲醚(3)用盐酸吡啶处理时,除在C_3-位发生脱甲基外,C_9(11)-双键同时也转移至C_(8(9))-位置,生成了18-甲基-△^(8(9))-雌甾酚酮(4)。产物结构经波谱和化学方法证明。

木质素基多酚的制备及生物活性

针对木质素活性位点低,活性差的问题,利用酸性熔盐水合物通过一锅法脱甲基化及酚化改性制备了木质素基多酚化合物即连苯三酚改性木质素(PEHL)。实验结果表明:脱甲基化木质素(DEHL)和PEHL的反应位点显著增加,含酚羟基的量由原料酶解木质素(EHL)中的1.25 mmol/g分别提高到3.49和5.70 mmol/g。DPPH·清除实验发现,木质素基多酚化合物的抗氧化活性显著增加,与EHL对DPPH·抑制率(25.4%)相比,质量浓度10 mg/L下DEHL和PEHL的DPPH·清除率分别提高了46.9和64.4个百分点;PEHL展示了良好的抑菌活性,添加量1 g/L时对大肠杆菌和金色葡萄球菌的抑制率分别为85.22%和99.76%;木质素基多酚还表现出较低的细胞毒性。

O-去甲基文拉法辛合成的新方法

以文拉法辛为原料,分别以新的脱甲基试剂半胱氨酸钠盐和青霉胺钠盐制备了O-去甲基文拉法辛,收率为86%和82%。一锅中分别完成了半胱氨酸钠盐、青霉胺钠盐的制备与文拉法辛脱甲基反应,简化了操作步骤。最优反应条件为溶剂N-甲基吡咯烷酮,反应温度175℃,产物析晶pH值9.5。

蓖麻DNA糖基化酶的序列与基因表达分析

为揭示DNA糖基化酶在调节蓖麻生长发育和影响基因印记过程中的分子机理,本研究基于蓖麻全基因组、利用生物信息学的方法结合转录组数据和RT-PCR半定量表达分析,鉴别蓖麻DNA糖基化酶氨基酸序列的结构特征、系统发生和表达形式。结果显示:三种DNA糖基化酶(DME、ROS和DML)氨基酸均为不稳定氨基酸,具有典型的与DNA结合和碱基切除修复有关的保守结构域;系统进化分析发现三种DNA糖基化酶在植物中同源性强,而且是独立演化的结果;在不同组织的表达上,蓖麻的DME和ROS基因具有相似的表达形式,即在根、茎和叶中不表达,在胚乳中表达最高,而DML在各个组织中都未检测到基因的表达。

8-喹啉基取代的槲皮素合成研究

槲皮素作为黄酮醇类化合物,广泛存在于许多植物来源的食物中,如谷物类、蔬菜类(洋葱、西蓝花)、水果类(葡萄、苹果、草莓、柑橘、樱桃)、茶叶、咖啡、红酒、果汁等食物。它具有抗氧化,抗炎,抗菌,抗病毒、抗肿瘤等多种生物活性。以槲皮素为先导物的改造吸引了众多研究兴趣。本文以槲皮素C8位,进行喹啉基取代改造,合成了3个新化合物,并对其抗氧化活性进行了测试。

丙硫菌唑防治小麦赤霉病试验探究

小麦赤霉病又被称为烂穗病、红麦头,是由多种镰刀菌侵染引起的、发生在小麦上的病害。丙硫菌唑为三唑硫酮类杀菌剂,属甾醇脱甲基化(麦角甾醇的生物合成)抑制剂,具有选择性、保护性、治疗性和持效性等特点。选择75%丙硫菌唑水分散粒剂防治小麦赤霉病试验,旨在为以防治小麦赤霉病为重点的小麦中后期病虫害统防统治推荐用药提供参考依据。

维奈克拉联合阿扎胞苷与地西他滨联合DAG/IAG方案治疗新诊断急性髓系白血病的效果比较

目的探讨维奈克拉联合阿扎胞苷与地西他滨(DAC)联合预激方案(DAG/IAG)治疗新诊断急性髓系白血病(AML)的效果及安全性。方法回顾性分析新诊断的AML40例患者病历资料,其中21例采用DAC联合DAG/IAG方案治疗为A组,另19例采用维奈克拉联合阿扎胞苷方案治疗为B组。所有病例经1个疗程化疗后评估疗效和安全性,获得完全缓解(CR)或部分缓解(PR)者均重复原方案化疗,无效者换其他方案。分析2组方案的疗效及安全性。结果2组患者在基线年龄、性别比例、危险度分层等方面差异均无统计学意义(P>0.05)。在诱导缓解治疗中,2组间反应比较,A组61.90%(13/21)患者达有效(OR,OR为CR+PR),38.09%(8/21)患者达未缓解(NR);B组89.47%(17/19)患者达OR,10.53%(2/19)患者达NR;B组缓解率优于A组,2组间差异有统计学意义(P<0.05)。A组不良反应发生率略高于B组,但均差异无统计学意义(P>0.05)。在随访期内,A组患者95.24%(20/21)疾病进展,中位无进展生存期5个月,1年无进展生存(PFS)率15.38%。B组患者31.58%(6/19)进展,1年PFS率58.56%。B组无进展生存期优于A组,2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论维奈克拉联合阿扎胞苷治疗不适合接受标准化疗的AML患者,诱导缓解率、无进展生存期均优于DAC联合DAG/IAG。

白皮杉醇的合成

以3,4-二甲氧基苄醇为原料,通过溴代、Arbuzov重排反应、Wittig-Horner反应和脱甲基化反应得到目标产物（E）-3,3′,4,5′-四羟基二苯乙烯,即白皮杉醇。该文考察了溴代试剂、Arbuzov重排反应温度、Wittig-Horner反应中溶剂及脱甲基反应试剂等各因素对产物产率的影响,得到最佳反应条件为：以三溴化磷为溴代试剂,Arbuzov重排反应条件为100℃反应1 h,再于120~130℃反应3~4 h,以DMF为Wittig-Horner反应溶剂,无水AlCl3作为脱甲基化试剂。通过IR、1HNMR及13CNMR确定了目标产物的结构。

高纯度3,4-二羟基苯甲醛的制备

研究了香兰素经脱甲基制备 3 ,4 二羟基苯甲醛的反应。正交试验确定最佳反应条件为 :香兰素 7.8g( 5 1mmol) ,CH2 Cl2 1 5mL( 2 3 4mmol) ,无水AlCl3 9.4g( 70mmol) ,吡啶 1 3 .3g( 1 68mmol)和TEBA 0 .0 5 g ,反应温度48℃ ,回流时间 2 8h ,收率 92 .6% ,纯度 99.7% (HPLC)。

格氏试剂法合成白藜芦醇

以对甲氧基苄氯为起始原料,先制得格氏试剂,再与3,5-二甲氧基苯甲醛反应,经脱羟基化和脱甲基化制得反式产物白藜芦醇,产率55%。产物经IR和1 H NMR进行了结构表征。该法具有原料成本低,合成路线步骤少,纯化后产物纯度好,产率较高等优点。

HIV病毒抑制剂中间体3,5-二羟基戊苯(olivetol)的新合成方法

以工业级的3,5-二甲氧基苯甲酸为起始原料,与L iH于室温下在四氢呋喃中反应5 h生成3,5-二甲氧基苯甲酸锂(Ⅰ),不需精制,直接与正丁基锂在冰浴中进行酰化反应制得3,5-二甲氧基苯戊酮(Ⅱ),收率85.06%;进而在210℃以下通过乌尔夫-黄鸣龙反应将Ⅱ还原为3,5-二甲氧基戊苯(Ⅲ),Ⅲ与熔融的吡啶盐酸盐在200℃回流2 h,脱甲基制得目标产物3,5-二羟基戊苯(Ⅳ),总收率为60.90%,质量分数为98.22%。利用IR1、HNMR、GC、HLPC-MS等分析手段对各步产物进行了表征。结果表明:该文所提出合成路线是可行的,具有工艺简单、收率高等特点,优于目前所报道的其他合成路线。目前正在进行放大实验。