趋化因子受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株中的表达

目的:观察趋化因子受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌(adenoidcysticcarcinoma,ACC)肺高、低转移细胞株中的表达,探讨趋化因子受体CXCR4表达在ACC肺侵袭转移中的作用。方法:选取ACC肺高转移细胞株(ACCM)和低转移细胞株(ACC2)以及舌癌8113细胞株(Tca-8113),分别应用单克隆抗体免疫荧光标记流式细胞术和Western印迹检测CXCR4在上述3种细胞中的表达。结果:3种细胞表面均有CXCR4受体的表达,其中ACC肺高转移细胞株ACCM表达阳性率为(77.32±6.96)%,显著高于肺低转移细胞株ACC-2的(35.32±6.71)%和舌癌Tca-8113细胞株的(33.82±5.56)%,(P<0.05)。Western印迹结果证实3种细胞株均有特征性的蛋白质表达条带,其中ACCM的蛋白质表达条带最为显著。结论:趋化因子受体CXCR4在ACC肺高转移细胞株中高表达,提示CXCR4可能与ACC嗜肺转移的生物学特性有关。

nm23-h1抑制腺样囊性癌高转移细胞株肺转移的实验研究

目的:研究nm23-h1对腺样囊性癌细胞株(adnoid cystic carcinoma cell line-M,ACC-M)的肺转移是否具有抑制作用。方法:20只裸鼠,随机分为两组,实验组每只裸鼠经尾静脉注入5×106个用阳离子脂质体介导nm23-h1质粒体外转染所得阳性表达的ACC-M细胞,对照组注入等量的未转染ACC-M细胞,1周及4周时处死动物获取肺标本,常规组织学观察。结果:1周时实验组未见转移,而对照组有少量小转移灶;4周时实验组肺内仍未见转移灶,对照组可见大量灰白色转移结节。结论:nm23-h1对ACC-M的肺转移具有抑制作用。

仑伐替尼治疗食管腺样囊性癌肺转移1例

1病例资料。患者,女性,68岁,2022年6月在当地医院就诊查胃镜示:食管距门齿28~34 cm食管粘膜破坏,表面糜烂、污秽、溃烂,病理示:腺样囊性癌(见图1)。经外院病理会诊示:腺样囊性癌。并行彩超引导下锁骨上淋巴结穿刺活检术,病理报告示:(左锁骨上淋巴结)异型细胞浸润/转移,考虑恶性。病理诊断:(左锁骨上淋巴结)癌浸润/转移,结合形态及免疫组化,考虑腺样囊性癌。

ADAM9、ADAM10基因沉默对腺样囊性癌高转移潜能细胞生物学行为的影响

目的:探讨ADAM9、ADAM10基因沉默对腺样囊性癌高转移潜能细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组化检测15例腺样囊性癌原发灶和相应淋巴结转移组织中ADAM9、ADAM10蛋白的表达情况;采用RNA干扰方法抑制腺样囊性癌高转移潜能细胞系ACC-M、SACC-LM中ADAM9、ADAM10基因的表达,检测该基因沉默后对肿瘤细胞周期及体外增殖、转移能力的影响。采用SPSS11.0软件包对数据进行单因素方差分析及Fisher确切概率检验。结果:ADAM9、ADAM10蛋白在腺样囊性癌淋巴结转移组织中的表达比在原发灶组织中显著增高(P<0.05);ADAM9、ADAM10基因沉默后细胞增殖能力下降(P<0.05),肿瘤细胞出现S期阻滞;并且ADAM9、ADAM10基因沉默后,肿瘤细胞的体外侵袭能力显著下降(P<0.01)。结论:ADAM9和ADAM10基因表达与腺样囊性癌的转移有关。ADAM9、ADAM10基因沉默可改变腺样囊性癌细胞体外增殖能力、侵袭能力等生物学特性。

肺高、低转移性涎腺腺样囊性癌细胞株核形的比较分析

本研究比较分析了肺高、低转移性涎腺腺样囊性癌细胞株的核形。结果：高转移性细胞株染色体众数为６１～６５，主干为６５；而低转移性细胞株染色体众数为５８～６１．主干为６０。与低转移性细胞相比，高转移性细胞株染色体数目没有明显增加，形态无明显变异；与正常体细胞相比，染色体数目增加主要发生在小体积组。结果提示：高转移性涎腺腺样囊性癌细胞其ＤＮＡ含量无明显增加，单纯ＤＮＡ含量的测定，并不能充分反应其转移特性，而应ＭＤＮＡ的结构上进行探讨。

蛋白激酶CK_2-β在腺样囊性癌肺转移细胞中的表达及意义

目的探讨蛋白激酶CK2-β在唾液腺腺样囊性癌肺转移细胞(SACC-LM)中的表达及其与肺转移的关系。方法利用Western印迹对蛋白激酶CK2-β在SACC-LM和SACC-83细胞核及细胞质中的表达进行检测分析;采用RT-PCR方法检测蛋白激酶CK2-β被不同浓度抑制剂(DRB)处理后nm23-H1的mRNA表达。结果与对照组SACC-83细胞相比,SACC-LM细胞中蛋白激酶CK2-β具有较高的表达;在SACC-LM细胞中,其在细胞核中的表达高于在细胞质中的表达。并且随着蛋白激酶CK2-β被抑制程度的提高,nm23-H1的表达增加。结论蛋白激酶CK2-β的表达与唾液腺腺样囊性癌的肺转移呈正相关。

涎腺腺样囊性癌裸鼠肺转移灶细胞时相分析及定量形态学研究

本研究利用流式细胞仪及Ｖｉｄａｓ自动图象分析系统，检测了涎腺腺样囊性裸鼠肺转移灶细胞周期时相分布及其定量形态学参数，结果表明：肺转移灶细胞Ｓ期明显低于皮下移植癌细胞（Ｐ＜０．０１），而Ｇ０／Ｇ１期高于皮下移植癌；肺转移灶细胞之核浆比、核面积、核周长、等效径、形态因子等定量形态学参数提示肺转移灶细胞趋向高分化。本研究结果对于解释涎腺腺样囊性癌临床生物学行为及制定临床治疗计划均有重要意义。

沉默miR-222上调PUMA基因表达诱导高转移潜能腺样囊性癌细胞凋亡

目的:研究沉默miR-222靶向p53上调凋亡调控因子(PUMA)对高转移潜能腺样囊性癌细胞系SACC-LM的影响。方法:用As-miR-222和对照(As-miR-222 NC)分别转染SACC-LM细胞,并设立空白对照,进行Transwell、CCK-8和流式细胞术,观察miR-222沉默对SACC-LM细胞迁移、增殖、凋亡和周期分布的影响。通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)与蛋白印迹测定(Western Blot)证实沉默miR-222靶向PUMA表达。结果:转染As-miR-222可抑制SACC-LM细胞的迁移和增殖,增加细胞凋亡率,并使G0/G1期的细胞比例显著增加(P<0. 01)。qRT-PCR与蛋白印迹实验证实,miR-222的沉默通过上调PUMA表达参与上述行为的调节。结论:沉默miR-222通过上调PUMA抑制SACC-LM细胞的迁移、增殖,诱导凋亡。

人涎腺腺样囊性癌肺转移裸鼠模型的建立

应用经体内外筛选和克隆化的肺高转移性涎腺腺样囊性癌Ａｃｃ－Ｍ细胞株建立肺转移裸小鼠模型。选用３月周龄雌性ＢＡＬＢ／Ｃｎｕ／ｎｕ裸小鼠６０只，经尾静脉接种１×１０６／０．２ｍｌ单细胞悬液。接种后１～３周内，组织学观察可见血管内有癌栓形成；接种后３～４周内为微转移灶期；接种后４～８周为巨视期，肉眼下可见转移灶；接种后８周动物死于肺转移。转移灶体内生长曲线表明，转移灶在４～５周时生长最快；转移灶潜伏期及带瘤生存期均较长，该模型是研究涎腺腺样囊性癌肺转移的良好模型。

76例头颈部腺样囊性癌伴肺转移患者的生存分析

背景与目的头颈部腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)常发生肺转移,目前ACC肺转移的研究报道不多,对于其确切的临床特征和治疗结果知之甚少,最佳治疗策略尚无共识。本研究探讨头颈部ACC肺转移的有效治疗策略、临床结局和长期预后。方法回顾性分析76例头颈部ACC肺转移患者的临床和随访资料。根据初始治疗分为手术、手术+放化疗、放化疗、支持治疗四组;根据国际肺转移分期系统(International Registry of Lung Metastases Staging System,IRLM)进行分期。采用Kaplan-Meier法、Log-rank检验比较不同治疗方式及不同IRLM分期患者的总生存期(overall survival,OS)及无进展生存期(progression-free survival,PFS)的统计学差异。结果接受手术治疗患者的OS及PFS优于支持性治疗或放疗/化疗的患者(OS:P<0.000,1;PFS:P<0.000,1);IRLM低分期的OS和PFS优于高分期患者(OS:P<0.000,1;PFS:P<0.000,1);单发肺转移、不合并胸腔积液患者具有更好的OS和PFS。结论接受手术治疗的ACC肺转移患者的远期预后与更好的OS和PFS相关。对于具备手术条件的ACC肺转移的患者,进行完整手术切除的意义高于其他治疗方案。

TNP-470联合顺铂抗腺样囊性癌生长和肺转移的实验研究

目的 研究血管生成抑制剂TNP 470联合顺铂 (CDDP)对口腔腺样囊性癌生长及肺转移的抑制作用。方法 分别将建株的口腔腺样囊性癌肺转移细胞株 (ACC M)细胞悬液注射至裸鼠皮下和尾静脉 ,建立口腔腺样囊性癌皮下移植瘤及实验性肺转移模型。从移植后的第 3周开始 ,于裸鼠对侧皮下注射TNP 470 30mg/kg,隔日 1次 ,共7次。CDDP分别在第 3周和第 4周腹腔给药各 1次 ,剂量为 5mg/kg。停药后第 2d处死裸鼠。测量肿瘤大小 ,称重并计数肺转移结节数。以兔抗人Ⅷ因子相关抗原抗体免疫组化染色后 ,计数皮下瘤块血管密度。结果 与单用TNP 470相比 ,TNP 470联合CDDP对口腔腺样囊性癌生长和肺转移的抑制作用更强 ,但对皮下移植瘤的血管密度影响无明显差异。结论 TNP 470联合CDDP对口腔腺样囊性癌生长和肺转移有明显的抑制作用。

细胞外基质与涎腺腺样囊性癌的远处转移

目的研究涎腺腺样囊性癌与细胞外基质的关系。方法通过肿瘤手术标本的免疫组化染色和超微结构观察、细胞系体外粘附实验及人工重组基底膜侵袭实验,并采用整合素受体抑制剂精氨酸-天冬氨酸进行体外及荷瘤动物体内实验,观察其预防及治疗肺转移的效果。结果肿瘤团索周围的基膜样物质呈多层、溶解或断裂现象。出现腺样囊性癌远处转移患者的肿瘤标本组织蛋白酶D免疫组化阳性反应率(75%)明显高于无转移患者(43.8%)。肺高转移涎腺腺样囊性癌细胞株对人工重组基膜的侵袭细胞数明显高于其相应的非高转移细胞系。精氨酸-天冬氨酸在体外能抑制肺高转移涎腺腺样囊性癌细胞对人工重组基膜的侵袭,在体内能显著延长涎腺腺样囊性癌实验性肺转移动物的生存期。结论涎腺腺样囊性癌的远处转移与细胞外基质有密切关系。

维甲酸对涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的抑制作用研究

本文利用已建立的涎腺腺样囊性癌肺转移动物模型，着重观察了Ａｃｃ－Ｍ细胞株经维甲酸体外处理后其在裸鼠肺部形成转移能力的情况。结果表明：１０μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ两种浓度有明显抑制转移作用，转移率及肺转移灶重量、数目和直径均较对照组有显著下降（Ｐ〈０．０５）；但抑制作用无浓度依赖性，揭示维甲酸对Ａｃｃ－Ｍ细胞株的作用位点是有限的。１０μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ可能是维甲酸抑制Ａｃｃ－Ｍ细胞株转移的最低饱和浓度。

肺转移性腺样囊性癌3例临床病理观察

目的 报道3例肺转移性腺样囊性癌（ACC）,并总结分析此类疾病的临床病理特征.方法 通过组织形态、免疫组化及组织化学染色分析其临床病理特征及免疫组化特点.结果 3例肺转移性ACC患者年龄分别为37岁、54岁和60岁,男女之比为2∶1;既往均有头颈部腺样囊性癌病史,确诊后9-14年（平均11年）出现肺内结节.胸部CT或X线检查示肺内多发结节,未见气管病变.1例经皮肺穿刺活检,2例行肺楔形切除术.镜下示3例均为筛状/管状型,未见实性区及高级别转化区域.3例均可见粉染基底膜样物质和蓝染黏液样物.3例随访3-48个月（平均25个月）,1例穿刺确诊后接受化疗,23个月后死亡;2例肺楔形切除术后放疗,病灶缩小,未见其他脏器受累.免疫组化：3例CD117、bcl-2和p16均（＋）;SMA和p63肌上皮（＋）;3例基底膜样物胶原Ⅳ均（＋）;3例GFAP及TTF-1均（-）;仅1例p53（＋）;Ki-67阳性指数2％-10％,平均6％.组织化学：3例AB/PAS均（＋）.结论 肺内原发性ACC非常罕见,诊断应首先排除转移性.筛状/管状型ACC转移到肺可以经历较长时间,发现肺内多发结节应考虑到转移癌.手术切除及术后放疗有助于治疗.

nm23-h1基因转染对腺样囊性癌ACC-M细胞系淋巴结转移的影响

目的 :研究阳离子脂质体介导nm2 3-h1质粒转染腺样囊性癌ACC -M细胞株对其颌面部移植瘤区域淋巴结转移的影响。材料与方法 :体外用阳离子脂质体 (Lipofectamine)介导将nm2 3-h1质粒转染nm2 3-低表达的腺样囊性癌ACC -M高转移细胞株 ,经G4 18筛选得到高表达nm2 3-h1的细胞并以 5× 10 5/只植入 10只裸鼠颌下区 ,以未转染的细胞作对照。观察肿瘤生长及淋巴结转移情况。 4周后处死动物 ,获取标本 ,作组织病理学检查。结果 :未转染组有一只裸鼠颌下淋巴结转移 (1/ 10 ) ,4只 (4/ 10 )裸鼠淋巴结反应性增生 ,转染组未见淋巴结转移及明显增生。结论 :nm2 3-h1可能在腺样囊性癌的区域淋巴结转移中起重要的作用。

EGFR及C-erbB-2蛋白表达与腺样囊性癌细胞系转移力之间的关系

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)和C-erbB-2在涎腺腺样囊性癌2个细胞系中的表达,探讨其与腺样囊性癌肺转移的关系。方法:培养人涎腺腺样囊性癌SACC-83和肺高转移性腺样囊性癌SACC-LM细胞系,分别提取它们的胞质和胞膜样品并采用Western Blot技术检测EGFR和C-erbB-2在其中的表达差异,利用电泳凝胶成像分析软件对结果进行量化分析。结果:EGFR在SACC-83细胞的细胞膜中呈现高表达(P<0.01),而在SACC-LM细胞的胞质中呈现高表达(P<0.01)。SACC-83与SACC-LM细胞比较,前者胞膜中EGFR的表达明显高于后者,而胞质中的表达却明显低于后者(均为P<0.01)。C-erbB-2无论在SACC-LM细胞的胞质和胞膜中的表达都明显高于SACC-83细胞系,经灰度值分析,差异非常显著(P<0.01)。结论:EGFR基因在胞质中的高水平积累以及C-erbB-2基因的高水平表达可能在腺样囊性癌肺转移中发挥重要作用。

紫杉醇对涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的抑制作用

目的观察紫杉醇对人高转移性涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-M)在裸鼠体内肺转移的抑制作用。方法22只裸鼠,尾静脉注射接种ACC-M细胞建立实验性肺转移模型,随机分为紫杉醇组和对照组。紫杉醇组于接种肿瘤细胞后第2天起腹腔注射紫杉醇10mg/kg,3d注射1次,共10次;对照组同期腹腔注射等量溶剂。接种6周后处死实验动物。观察发生肿瘤肺转移的裸鼠数目,称体质量;解剖裸鼠肺脏,称质量;记录肺转移灶数目。结果对照组和紫杉醇组相比,肺转移率100%vs54.54%,肺转移结节数(28.64±10.69)vs(15.17±4.83),转移肺湿质量(0.702±0.044)gvs(0.524±0.046)g,2组比较差别均有统计学意义(P<0.05)。结论紫杉醇对ACC-M细胞肺转移具有明显抑制作用。

BrdU体内标记腺样囊性癌肺转移灶的实验观察

目的 动态观察非放射性标记物 Brd U在动物体内标记情况 ,为 Brd U取代 3H- Td R提供依据。方法 6只裸鼠经尾静脉分别注入 Acc- M细胞 1× 10 6 / 0 .2 m l,4周后腹腔注射 Brd U2 0 0 μg/ g体重 ,注射 0 .5 h～ 2 0 h期间分别取材固定 ,免疫组化 ABC法染色 ,统计标记指数。结果 所有裸鼠形成肺转移癌阳性细胞核标记指数 (L I)约2 0 %～ 40 %。单次注射 Brd U后 ,L I不随注射时间延长而增加。正常组织中 ,肝窦和肠绒膜上皮有标记阳性细胞 ,肾、胰、脾等器官未见。结论 Brd U体内标记法可替代 3H- Td R应用于细胞增殖研究 ,避免放射性污染 ,但在人体内标记 ,尚需进一步探索。

HBXIP对腺样囊性癌细胞株ACC-M生物学功能及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:研究乙肝病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B X-interacting protein,HBXIP)对唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)增殖、迁移和侵袭的影响,及其对PI3K/Akt信号通路的影响。方法:将HBXIP质粒转染到ACC-M中,将细胞分为实验组(转染pEGFP-N1-HBXIP质粒)、对照组1(未转染组)和对照组2(vector组,pEGFP-N1)。采用RT-PCR检测HBXIP在ACC-M中的表达;采用MTT实验、Transwell小室实验和划痕实验检测HBXIP过表达对ACC-M的增殖、迁移和侵袭的影响;Western印迹法检测HBXIP过表达对Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K及S100A4蛋白表达量的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:MTT实验结果显示,实验组中存活的细胞数显著高于对照组(P<0.05);划痕实验结果显示,实验组细胞迁移率显著高于对照组(P<0.01);Transwell小室实验结果显示,实验组细胞侵袭个数显著高于对照组(P<0.01);Western印迹法结果显示,相对于对照组,实验组随着HBXIP过表达,p-Akt、p-PI3K及S100A4表达量相对增高。结论:HBXIP基因过表达ACC-M增殖、迁移和侵袭具有影响,可能通过促进Akt、PI3K磷酸化及S100A4蛋白表达量增加,促进ACC-M的增殖、迁移和侵袭。

多功能磁性纳米材料在腺样囊性癌肺转移诊断及治疗中的应用

目的探讨四氧化三铁(Fe_3O_4)磁性纳米颗粒在腺样囊性癌肺转移治疗中的作用,为腺样囊性癌肺转移的诊断以及治疗提供依据。方法 Fe_3O_4先经丙烯酸(PAA)修饰,再通过氨基聚乙二醇化马来酰亚胺(NH2-PEGMal)连接叶酸得到表面修饰叶酸的Fe_3O_4(IO-PEG-FA)。随后对纳米材料的尺寸、电位以及形貌进行评价,考察该体系的驰豫时间、升温性能以及肿瘤细胞杀伤能力以及循环肿瘤细胞捕获能力。结果 IO-PEG-FA具有较小的尺寸(约100 nm),有与Fe_3O_4相近的驰豫性能,从而可作为肿瘤转移的诊断材料;具有良好的升温性能,能高效地进行光热杀伤肿瘤细胞。体外循环肿瘤细胞的捕获效率实验表明,该体系有较好的循环肿瘤细胞捕获能力。结论 IO-PEGFA在腺样囊性癌肺转移的诊断以及治疗方面具有很好的前景。