GATA3,P63在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

探讨GATA3和P63在膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma BTCC)中的表达情况及临床意义。方法 通过收集我院泌尿外科2022年1月至2023年6月确诊的60例BTCC组织标本,采用免疫组织化学法和免疫荧光双标记法检测GATA3和P63的表达。结果 GATA3在癌旁组织中及BTCC组织阳性表达率分别为93.3%和73.3%。P63在癌旁组织中及BTCC组织阳性表达率分别为86.7%和65%。BTCC组织中GATA3和P63的表达率低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。GATA3和P63的阳性表达率随肿瘤的病理分级升高、临床TNM分期增高而逐渐减低,差异有统计学意义(p<0.05)。GATA3和P63在BTCC组织中表达的阳性率呈正相关(R2=0.67,P<0.05)。二者在BTCC中均有表达缺失的现象。结论 GATA3和P63的缺失可能参与与BTCC的发生和发展,其有望成为BTCC辅助诊断及预后的因子。

不同剂量盐酸吡柔比星预防膀胱移行细胞癌术后复发的疗效

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,其生物学行为具有多发、复发和侵袭等特征。文献表明〔1〕,三维适形放疗同步吉西他滨化疗加吡柔比星热灌注化疗治疗老年晚期膀胱癌疗效较好,可明显提高近期疗效及改善症状,不良反应稍有增加,但患者能耐受。

Caspase-3与Bcl-2蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

背景和目的:肿瘤的发生是细胞异常增生和凋亡不足的结果。以往研究认为凋亡的发生与Caspase-3和Bcl-2蛋白有密切的联系。本研究拟通过检测Caspase-3和Bcl-2蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达,探讨其在膀胱移行细胞癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组织化学(SP)法,对52例膀胱移行细胞癌组织和10例正常膀胱粘膜组织中的Caspase-3及Bcl-2蛋白表达情况进行检测。结果:膀胱移行细胞癌组织中的Caspase-3蛋白表达率(53.8%,28/52)明显低于正常膀胱粘膜组织(90.0%,9/10),Caspase-3的蛋白表达与膀胱移行细胞癌的病理分级有关(P<0.05),但与临床分期没有明显的联系;膀胱移行细胞癌组织中的Bcl-2蛋白表达率(51.9%,27/52)明显高于正常膀胱粘膜组织(20.0%,2/10),且Bcl-2蛋白表达情况与病理分级、临床分期均无关(P>0.05)。在正常膀胱粘膜中Caspase-3与Bcl-2的蛋白表达呈负相关(rs=-0.659,P<0.01)。结论:Caspase-3蛋白的高表达与Bcl-2蛋白的低表达在膀胱癌的发生和细胞凋亡的调控方面可能起着重要作用。

MMP2活性测定在判断膀胱移行细胞癌侵袭性中的意义

背景与目的:活性基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase2,MMP2)在细胞外基质(extracellularmatix,ECM)和基底膜(basementmembrane,BM)降解、促进肿瘤的侵袭转移中具有重要作用,但在膀胱移行细胞癌(bladdertransitionalcellcarcinoma,BTCC)中MMP2活性与其侵袭性的关系尚不清楚。本研究旨在探讨活性MMP2对判定BTCC侵袭性的意义。方法:运用半定量明胶酶谱法对20例BTCC组织和4例正常膀胱粘膜组织中活性MMP2的含量进行检测,并对结果进行分析。结果:20例BTCC组织中19例检测到MMP2的活性,随着BTCC分级和侵袭能力的增强,MMP2活性亦明显升高,11例G1期肿瘤MMP2比活为(8896.5±1655.6)(mg·ml-1)-1,5例G2期肿瘤比活为(18355.6±5307.1)(mg·ml-1)-1,3例G3期肿瘤比活为(26467.1±4705.6)(mg·ml-1)-1;10例Tis～T1期肿瘤比活为(7843.4±1515.4)(mg·ml-1)-1,9例T2～T4期肿瘤比活为(21295.6±3297.9)(mg·ml-1)-1。正常膀胱粘膜组织中MMP2为阴性。结论:活性MMP2在BTCC进展中具有重要作用。

MDR1/P-gp在膀胱移行细胞癌中的表达及与Fas和Survivin蛋白表达的关系

目的:探讨膀胱移行细胞癌中MDR1基因(P-糖蛋白)与Fas、Survivin表达的相互关系及其与膀胱癌生物学行为的相关性。方法:应用免疫组织化学方法检测64例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱粘膜中P-GP、Fas、Survivin的表达。结果:膀胱移行细胞癌中P-GP、Survivin的表达阳性率高于正常粘膜,与膀胱癌的分级有关(P<0.01);而Fas在膀胱正常粘膜中表达高于移行细胞癌,差异有统计学意义(P<0.01)。复发性膀胱癌P-GP的阳性表达率高于初发膀胱癌(P<0.01)。膀胱移行细胞癌P-GP的表达与Fas呈负相关,而与Survivin表达无关。结论:膀胱移行细胞癌的MDR1(多药耐药基因)与Fas的表达密切相关,而与凋亡抑制蛋白Survivin的表达无关。本研究为采用MDR逆转剂或Fas干扰剂以增加膀胱移行细胞癌的化疗敏感性提供实验依据。

膀胱移行细胞癌环氧化酶2表达与淋巴管和血管生成的关系

【目的】探讨环氧化酶2(COX-2)在膀胱移行细胞癌的表达与微血管、淋巴管生成的关系及其预后意义。【方法】应用免疫组化方法检测81例膀胱移行细胞癌组织中COX-2的表达,同时应用CD34、D2-40分别显色微血管和淋巴管进行微血管和淋巴管计数。并分析其与肿瘤临床病理特征和预后的关系。【结果】COX-2表达阳性率为67.9%。COX-2表达与肿瘤分级呈正相关关系(P=0.016),COX-2表达阳性组MVD和瘤内淋巴管(ITLVD)阳性的比例较阴性组高,两组差异有统计学意义(P=0.046,P=0.030)。瘤内淋巴管阳性与肿瘤分级(P=0.001)和分期(P<0.001)明显相关,瘤旁淋巴管(PTLVD)表达与肿瘤分期(P=0.003)呈正相关。Kaplan-Meier分析表明MVD和瘤内、瘤旁淋巴管阳性对疾病特异性生存有明显的影响(P<0.001,P=0.024和P=0.004),COX-2和瘤内淋巴管阳性者无瘤生存时间较短(P=0.013,P=0.001)。多因素分析表明COX-2表达是膀胱移行细胞癌病人无瘤生存独立的预后因素。【结论】COX-2可能参与膀胱移行细胞癌的发生并促进血管及淋巴管生成,影响肿瘤的复发、进展和预后。

藏花素对膀胱移行细胞癌的增殖抑制作用

目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌是否具有增殖抑制作用。方法:MTT法检测藏花素对T24细胞增殖的影响;应用形态学手段观察细胞形态学的改变;流式细胞术检测肿瘤细胞周期动力学。荷瘤小鼠模型建立,测定藏花素处理后荷瘤小鼠体内抑瘤率。结果:藏花素能明显抑制T24细胞的增殖,并可导致其形态学的改变;藏花素作用后G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期和G2/M期细胞比例逐渐减少;对照组裸鼠肿瘤的平均体积明显大于藏花素处理组裸鼠肿瘤的平均体积,其差异具有显著性(P<0.05),裸鼠生长抑制率为27.8%。结论:体内外实验证明,藏花素对膀胱移行细胞癌的增殖有抑制作用。

COX-2和EGFR在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其相关性研究

目的探讨膀胱移行细胞癌组织中环氧化酶-2(COX-2)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达与膀胱移行细胞癌发生、发展的关系及其两者的相关性,分析COX-2、EGFR表达与肿瘤生物学行为的关系。方法采用免疫组化(S-P)法检测48例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜组织中COX-2与EGFR的表达。结果48例膀胱移行细胞癌组织中,COX-2与EGFR表达阳性率分别为70.8%和66.7%,显著高于正常膀胱黏膜组织(P<0.01)。COX-2与EGFR在原发组中的阳性表达率低于复发组。随着膀胱移行细胞癌病理分级和临床分期的增高,COX-2和EGFR的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。COX-2和EGFR的表达之间呈明显正相关(Kappa=0.419,P=0.004)。结论COX-2和EGFR在膀胱移行细胞癌组织中普遍表达,且两者表达密切相关,两者可能在膀胱移行细胞癌的发生,发展过程中起重要作用,可作为判断膀胱移行细胞癌的生物学行为及估计预后的指标。

膀胱移行细胞癌的ClC-3和NF-κB的表达及意义

目的:探讨ClC-3和NF-κB在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学染色技术检测31例病理诊断为膀胱移行细胞癌和6例正常膀胱组织中ClC-3和NF-κB的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中ClC-3主要在癌细胞的胞膜表达,阳性表达率74%(23/31)。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率40%(4/10),Ⅱ级阳性表达率81%(9/11)、Ⅲ级阳性表达率100%(10/10)。NF-κB在癌细胞的胞浆内表达,阳性表达率83%(26/31)。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率60%(6/10),Ⅱ级阳性表达率90%(10/11),Ⅲ级阳性表达率100%(10/10)。6例正常膀胱组织中仅有1例ClC-3表达弱阳性,NF-κB表达均为阴性。膀胱移行细胞癌组织中ClC-3和NF-κB阳性表达率高于正常膀胱组织(P<0.01)。结论:ClC-3和NF-κB可能与膀胱移行细胞癌病理分级和增殖有关。

膀胱移行细胞癌P-gp170表达与细胞凋亡的关系

目的 探讨原发性膀胱移行细胞癌 P-糖蛋白 (P-gp170 )表达与细胞凋亡的关系 .方法 用免疫组化 SP方法和凋亡细胞原位标记 (TUNEL)检测了 4 0例膀胱移行细胞癌P- gp170表达和细胞凋亡 ,并应用图像分析系统定量分析其凋亡指数 (AI) .结果 4 0例膀胱移行细胞癌 P- gp170表达率为 4 8% ,组织学分级之间无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;AI随组织学分级增高而增高 ,各分级之间有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;AI在膀胱移行细胞癌 P- gp170阳性表达组明显低于 P- gp170阴性表达组 ,有显著性差异 (P<0 .0 1) .结论 原发性膀胱移行细胞癌 P- gp170高表达可能抑制细胞凋亡过程致 AI降低 .

磷脂酶Cε基因在膀胱移行细胞癌中表达及其临床意义

目的探讨磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)基因在膀胱移行细胞癌表达及临床意义。方法采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测27例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱对照组中PLCε mRNA表达,分析其与膀胱病理学特征的关系。结果PLCε mRNA在膀胱移行细胞癌的表达显著高于正常膀胱组织(P<0.01),PLCε的表达和膀胱移行细胞癌分期有关(P<0.05)而与分级无关(P>0.05)。结论PLCε基因在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,可能是未来检测膀胱移行细胞癌一种新的有价值的肿瘤标志物,同时也可能成为膀胱肿瘤生物学治疗中一个新靶点。

激光捕获显微切割技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

背景与目的 :激光捕获显微切割技术 (LCM)是获取均一目的细胞的有效方法。利用LCM技术从膀胱粘膜中分离膀胱移行上皮细胞从肿瘤间质细胞中分离膀胱癌细胞 ,进行RNA提取、纯化、浓缩以备进一步研究。方法 :采用LCM技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞 ,提取RNA ,并对微量RNA进行纯化、浓缩。然后用RT PCR验证TotalRNA中β actin基因表达水平。结果 :对照实验Ⅰ证实经LCM后RNA完整性较好 ;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下LCMshooting次数与可获得RNA量间对应关系。从膀胱粘膜中捕获膀胱移行上皮细胞 2 5万shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞 2 0万shootings。经RT PCR验证β actin基因表达表达完整。结论 :使用LCM技术能成功地获取较为均一的研究目的细胞 ,RNA完整性较好 ,能用于进一步研究中。

膀胱移行细胞癌细胞凋亡与放疗敏感性关系

目的 研究膀胱移行细胞癌的细胞凋亡与放疗敏感性的关系 .方法 光镜观察 41例原发性膀胱移行细胞癌放疗前肿瘤组织细胞凋亡指数 (AI)、分裂相指数 (MI)及放疗后组织坏死程度 .结果 膀胱移行细胞癌 AI和 MI随肿瘤分化程度降低而增高 ,各组织学分级之间有显著性差异 (P <0 .0 1) ,放疗后组织坏死程度亦随癌组织分化程度降低而加重 ,各组织学分级之间差异显著 (P<0 .0 1) .结论 分化越差的膀胱移行细胞癌增殖活性和细胞凋亡数越高 ,对放疗越敏感 .AI可以作为选择放疗的一项指标 .

TERT在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

为了研究端粒酶逆转录酶 (TERT)在膀胱移行细胞癌 (TCC)中的表达特征 ,探讨 TERT与 TCC生物学行为的关系 ,选取不同分期、分级的膀胱移行细胞癌组织、癌旁组织、正常膀胱组织 ,用 TERT抗体和链酶卵蛋白 -过氧化物酶 (SP)免疫组织化学方法染色 ,观察 TERT的表达程度。结果显示 :TERT阳性的细胞主要是肿瘤细胞 ,免疫组化染色阳性表现为肿瘤细胞浆及部分胞核的棕黄色颗粒。TCC组织 TERT阳性率为 81.9% ,不同病理分级、临床分期之间无显著性差异 (P>0 .0 5 )。认为 TCC组织中 TERT阳性率明显高于正常膀胱粘膜组织及癌旁粘膜组织 ,TERT可作为 TCC早期诊断、鉴别诊断及预测复发的肿瘤标志物之一。

膀胱移行细胞癌中PTEN基因启动子甲基化及其表达的研究

目的检测膀胱移行细胞癌中PTEN基因启动子甲基化状态及其蛋白表达水平,并探讨它们与该肿瘤临床及病理特征的关系。方法应用免疫组织化学(S-P)法检测PTEN蛋白的表达,甲基化特异性PCR(MSP)法检测PTEN基因启动子的甲基化状态。结果PTEN蛋白在膀胱癌组织和正常膀胱组织中的阳性表达率分别是54.0%(27/50)和100.0%(10/10),两组间差异有显著性(P<0.01),且其表达水平在不同病理分级、临床分期间差异也存在显著性(P<0.01);在膀胱癌组织中PTEN基因启动子甲基化率为14.0%(7/50),而在正常膀胱组织中未检测到其启动子的甲基化(0/10),两组间差异有显著性(P<0.05),且PTEN基因启动子甲基化与其蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。结论PTEN基因启动子的甲基化可导致基因的沉默,是PTEN蛋白表达缺失的重要原因。PTEN基因启动子甲基化及其蛋白的表达缺失可能在膀胱移行细胞癌的发生及进展过程中起着重要作用,并对该肿瘤的生物学行为产生较大影响。

多发性浅表膀胱移行细胞癌中VEGF的表达及意义

目的 :探讨单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌组织中血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及意义。方法 :采用免疫组化方法对 6 0例浅表膀胱移行细胞癌组织及 10例正常膀胱组织进行血管内皮生长因子 (VEGF)的检测 ,观察单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌组织中VEGF表达的关系。结果 :多发性浅表膀胱移行细胞癌VEGF的高表达明显高于单发者的高表达 ;VEGF高表达的浅表膀胱移行细胞癌的患者的复发率明显高于低表达者的复发率。结论 :VEGF表达的高低与浅表膀胱移行细胞癌的生物学行为有关。

间隙连接蛋白Cx26、Cx43在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨间隙连接蛋白Cx26和Cx43在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测石蜡包埋处理的22例正常膀胱上皮组织和54例膀胱移行细胞癌中Cx26以及Cx43蛋白的表达水平,并采用计算机图像分析系统对Cx26、Cx43的表达进行定量分析。结果Cx26、Cx43高表达于膀胱移行细胞的胞浆以及胞膜中,而在癌细胞中表达明显减低,且分布不均匀,两者相比差异具有显著性(P<0.01),Cx26、Cx43的阳性表达随着在膀胱移行细胞癌病理分级的增高而降低,差异有显著性(P<0.01);但未发现其与临床分期明显相关(P>0.05)。结论Cx26、Cx43的表达随着在膀胱移行细胞癌病理分级的增高而降低,其异常表达可能是膀胱移行细胞癌发生、发展的重要因素之一。

膀胱移行细胞癌来源exosome的制备及相关蛋白分子的鉴定

目的分离纯化膀胱移行细胞癌T24细胞来源的exosome,对其形态学和蛋白组成进行初步分析,为进一步利用exosome治疗膀胱移行细胞癌奠定基础。方法采用超滤和蔗糖密度梯度离心法分离T24细胞释放的exosome,电镜观察形态大小,SDS-PAGE分离蛋白并用软件分析,Western blot检测热休克蛋白70(HSP70)、细胞黏附分子(ICAM-1)、细胞角蛋白20(CK20)的表达。结果成功的分离出了exosome,其大小为30～90nm,类圆碟形小囊泡,Western blot证实exosome表达HSP70、ICAM-1和CK20分子。结论 T24细胞可以分泌exosome,并负载了HSP70、ICAM-1等免疫相关蛋白,为肿瘤免疫治疗提供了理论基础。

RT-PCR检测膀胱移行细胞癌患者尿CK20 mRNA表达的研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌 (TCCB)患者尿细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )mRNA表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 6 1例TCCB患者、19例非肿瘤患者及 11例健康志愿者尿脱落细胞CK2 0mRNA。结果 6 1例TCCB患者中 5 2例尿脱落细胞CK2 0阳性表达 ,阳性率为 85 .3% ,对照组 30例中 2例表达 ,阳性率为 6 .7%。各分期尿CK2 0mRNA阳性率T1为 83.9% (2 6 / 31) ,T2 4期 86 .7% (2 6 / 30 ) ,两者差异无统计学意义 ;分级G1为 82 .8% (2 4 / 2 9) ,G2 85 .0 % (17/ 2 0 ) ,G3 91.7% (11/ 12 ) ,三者之间差异无统计学意义。行保留膀胱手术患者 5 1例 ,其中 4 2例术前尿CK2 0mRNA表达阳性 ,术后36例阴性 ,术后转阴率 85 .7%。 5 1例中有 2 9例 (术后尿脱落细胞CK2 0阳性表达 4例 )随访 6个月 ,4例CK2 0阳性表达者有2例 (5 0 % )复发 ,2 5例CK2 0阴性表达有 1例 (4 % )复发 ,两者复发率比较有统计学差异 (P <0 .0 0 5 )。结论 RT PCR检测尿脱落细胞CK2 0mRNA表达是诊断TCCB一种简便方法 ,其敏感性为 85 .3% ,特异性为 93.3% ,有助于膀胱TCCB的早期诊断和预后观察 。

藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响

目的:应用基因表达谱芯片研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响。方法:MTT法测定藏花素对T24细胞的生长抑制率,选出藏花素最佳作用时间和浓度,运用高通量的基因表达谱芯片检测藏花素作用T24细胞前后基因表达谱的变化,筛选差异表达基因。RT-PCR和免疫细胞化学验证上调基因p21^(WAF1)和下调基因cyclinD1。结果:MTT实验结果显示3 mmol·L^(-1)藏花素作用T24细胞48 h的抑制率与对照组相比有显著意义(P<0.05)。基因芯片检测发现3 mmol·L^(-1)藏花素作用T24细胞48 h引起该细胞系基因表达谱广泛地改变,其中表达差异2倍以上的基因共836个,这些差异表达基因的功能涉及多个方面,最为明显的是与细胞生长调节相关的细胞周期调节基因、细胞凋亡调控基因、DNA复制相关基因等类型。RT-PCR检测其中的细胞周期调节相关基因p21^(WAF1)和cyclinD1,结果与基因芯片相符。同时免疫细胞化学结果从蛋白表达水平上佐证p21^(WAF1)和cyclinD1变化与芯片结果一致。结论:藏花素可以诱导T24细胞基因表达谱广泛的改变,并可能通过调控细胞周期相关基因的表达来抑制T24细胞的增殖。