藏红花素通过跨膜受体蛋白/发状分裂相关增强子1信号通路对缺氧诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的探讨藏红花素对缺氧诱导的视网膜神经节细胞凋亡的作用及其可能机制。方法于2021年1月至2022年1月采用不同浓度藏红花素处理视网膜神经节细胞RGC-5,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活情况并筛选合适浓度。培养RGC-5细胞并用氯化钴(CoCl_(2))处理建立缺氧模型,分为缺氧组、藏红花素组、阳性对照(抗坏血酸)组和藏红花素+跨膜受体蛋白信号通路抑制剂(DAPT)组,另设对照组。Cell counting kit-8法检测细胞存活情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;钙荧光探针(Flou-4)实验检测各组细胞钙离子水平;实时定量PCR法检测跨膜受体蛋白(Notch1)、发状分裂相关增强子1(Hes-1)mRNA表达情况;蛋白质印迹法检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、钙依赖性蛋白酶家族1(Cal⁃pain1)蛋白表达情况。结果藏红花素组细胞活力0.83±0.08高于缺氧组0.45±0.04,细胞凋亡率(17.92±1.21)%低于缺氧组(51.82±5.36)%,钙离子水平0.27±0.04低于缺氧组0.76±0.05,差异有统计学意义(P<0.05);藏红花素+DAPT组细胞活力0.50±0.06低于藏红花素组0.83±0.08,细胞凋亡率(36.50±3.50)%高于藏红花素组(17.92±1.21)%,钙离子水平0.65±0.05高于藏红花素组0.27±0.04,差异有统计学意义(P<0.05)。与缺氧组比较,藏红花素组Bcl-2蛋白表达水平升高,Notch1、Hes-1mRNA表达、Bax和Calpain1蛋白表达水平降低(P<0.05)。与藏红花素组比较,藏红花素+DAPT组Bcl-2蛋白表达水平降低,Notch1、Hes-1mRNA表达、Bax和Calpain1蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论藏红花素对体外培养的缺氧RGC-5细胞凋亡有一定的抑制作用,可能是通过抑制钙离子内流,阻滞Notch1/Hes-1通路,提高细胞内抑凋亡蛋白Bcl-2表达水平发挥作用。

褪黑素膜受体研究进展

褪黑素受体分为膜受体和核受体,其中褪黑素膜受体属于G蛋白偶联受体,在下丘脑、垂体、睾丸、卵巢和乳腺等中枢和外周组织器官广泛分布和表达,其可通过与褪黑素结合共同发挥生物学作用。论文综述了褪黑素受体的基本特征、信号转导机制及其在调节昼夜节律、动物生殖生理、抗氧化等方面的功能;同时,利用文献计量方法研究1992-2023年褪黑素受体相关研究主题的文献数据,多视角展示褪黑素受体研究领域研究热点及其演进趋势,明确近期研究前沿和热点方向,为研究褪黑素受体提供参考。

分析宫腔粘连患者子宫内膜中Notch跨膜受体-1及缺氧诱导因子-1α表达水平

目的分析宫腔粘连患者子宫内膜中Notch跨膜受体-1(Notch1)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平。方法选取37例非宫腔粘连患者作为对照组,75例宫腔粘连患者作为宫腔粘连组。比较两组患者宫腔组织中Notch1及HIF-1αmRNA表达水平,比较不同严重程度宫腔粘连组患者Notch1、HIF-1αmRNA表达水平及蛋白表达水平,分析Notch1、HIF-1α表达水平与宫颈粘连严重程度相关性。结果相比对照组,宫腔粘连组Notch1mRNA及HIF-1αmRNA均显著更高,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组患者Notch1、HIF-1αmRNA及蛋白表达水平高于中度组及轻度组(P<0.05),中度组患者Notch1HIF-1αmRNA表达水平及蛋白表达水平均高于轻度组(P<0.05)。Notch1及HIF-1α表达水平与宫腔粘连严重程度成正相关(P<0.05)。结论宫腔粘连患者子宫内膜中Notch1及HIF-1α有着相对较高的表达水平,Notch1HIF-1α表达水平与宫腔粘连严重程度成正相关。

膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系

背景与目的:线粒体介导的细胞凋亡大部分与细胞周期相关,但膜受体介导的细胞凋亡是否与细胞周期有关尚不清楚。本研究旨在观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞周期特异性,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。方法:用肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体分别处理指数生长期的Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞;应用AnnexinV/PI和API等方法,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期特异性。结果:处于静止期的外周血淋巴细胞对凋亡诱导剂不敏感,凋亡率是6%～8%。Molt-4、Jurkat细胞以及加入植物血凝素刺激的外周血淋巴细胞经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后出现了明显的细胞凋亡,凋亡率是15%～28%。膜受体介导的细胞凋亡主要发生在细胞周期的早G1期。结论:膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期相关,具有细胞周期特异性。

雌激素膜受体非基因组效应的研究进展

雌激素受体分布于哺乳动物的许多组织中,介导了大部分已知的雌激素效应。细胞膜存在雌激素受体的非基因组效应。膜受体非基因组效应参与骨骼、神经和血管及凋亡等调节作用。笔者就雌激素膜受体介导的非基因组效应进行综述。

膜受体介导的细胞凋亡与细胞增殖

目的：观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞增殖，阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞增殖的关系。方法：用肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体分别处理指数生长期的Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞；应用SubGl法和AnnexinV／PI等方法通过流式细胞仪检测细胞增殖和细胞凋亡。结果：处于静止期的外周血淋巴细胞对凋亡诱导剂不敏感，凋亡率是6％-8％。Molt-4、Jurkat细胞以及加入PHA刺激的外周血淋巴细胞经肿瘤坏死因子一a、抗Fas抗体诱导后出现了明显的细胞凋亡，凋亡率是15％-28％。经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后，进入细胞周期增殖的细胞较静止期的细胞凋亡率有明显增加。结论：膜受体介导的细胞凋亡与细胞增殖具有协同作用。

孕激素膜受体1在乳腺癌的表达及其生物学意义

目的探讨孕激素膜受体1(PGRMC1)在乳腺癌中的表达状况及与临床病理指标的可能关系。方法采用免疫组织化学方法回顾性分析检测60例乳腺癌PGRMC1的表达,并评价其与病理分级、临床分期、转移,化疗敏感性以及预后之间的关系。结果 60例乳腺癌组织PGRMC1表达阳性37例,阴性23例。PGRMC1的表达与乳腺癌淋巴结转移(P=0.004)、肿瘤大小(P=0.03)和临床分期(P=0.039)密切相关;与年龄(P=0.196)和肿瘤病理分级(P=0.526)无关。PGRMC1的表达与乳腺癌患者的总体生存率(Log-rank=15.638;P=0.0001)和无瘤生存率(Log-rank=4.443;P=0.035)有关。多因素分析结果提示PGRMC1是乳腺癌独立的预后因子(P=0.002)。结论 PGRMC1的表达乳腺癌随转移和临床分期升高而增强,可能是乳腺癌的预后因素之一。

跨膜受体蛋白Notch2在肺腺癌组织中的表达变化及意义

目的探讨跨膜受体蛋白Notch2在肺腺癌发生、发展中的作用。方法收集肺腺癌及其配对癌旁正常肺组织石蜡标本各130例份,采用免疫组化法检测Notch2阳性表达率,分析其与患者临床病理特征的关系;比较Notch2阳性与阴性表达者3年及5年生存率。结果肺腺癌及其配对癌旁正常肺组织石蜡标本Notch2阳性表达率分别为54.6%(71/130)、36.2%(47/130),二者比较P<0.05。肺腺癌组织Notch2阳性表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况有关(P均<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤直径无关(P均>0.05)。肺腺癌Notch2阳性表达者与阴性表达者3年生存率分别为57.3%、84.7%,5年生存率分别为14.1%、40.0%;Notch2阳性表达者3年及5年生存率均低于Notch2阴性表达者(P均<0.05)。结论肺腺癌组织Notch2表达升高;Notch2表达升高可能参与了肺腺癌的发生、发展,并提示患者预后不良。

血小板膜受体P2Y12基因多态性与原发性高血压血瘀证的相关性研究

目的探讨血小板膜受体P2Y12基因G52T、-T744C多态性与原发性高血压（EH）血瘀证易感性的关系。方法选择福建省汉族人群EH血瘀证患者216例，EH非血瘀证患者220例，血压正常对照者193例。抽取受试者外周静脉血，提取DNA，采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）检测P2Y12基因G52T、-T744C多态性类型。结果3组间G52T的GG、GT和TT基因型分布频率差异无统计学意义（x2=2．041，P=0．728），-T744C的TT、TC和CC基因型分布频率差异有统计学意义（x2=10．500，P=0．033）；经进一步誓分割检验显示，EH血瘀证组TC／CC基因型分布频率（43．1％）高于EH非血瘀证组（30．9％）和健康对照组（33．2％），差异有统计学意义（X2=7．598，P=0．006）。多因素Logistic回归分析显示，以健康对照组为参照系，TC／CC基因型人群是患EH血瘀证的独立危险因素；调整相关混杂因素后，TC／CC基因型人群患EH血瘀证的相对危险度是1．518，95％可信区间（95％CI）为1．011～3．025，P=0．042。结论P2Y12基因TC／CC型可能是汉族人群EH血瘀证发病的易感危险因素之一。

烟碱对脑内膜受体及信号转导系统基因表达的调节作用

目的 利用基因表达芯片检测反复摄取烟碱对大鼠脑内膜受体和细胞信号转导系统相关的蛋白激酶基因表达的影响。方法 大鼠每天 2次皮下注射烟碱 (1 2mg·kg-1) ,连续用药 2wk后取全脑 ,提取RNA ,逆转录合成cD NA ,转录合成生物素化RNA ,并将其片断化后与芯片杂交 ,对荧光信号扫描分析。结合RT PCR方法对芯片分析结果进行验证。结果 反复摄入烟碱 ,脑内共有 2 2 4个重要蛋白的基因表达发生变化。其中 ,蛋白激酶、膜受体和离子通道共 94个发生变化。在蛋白激酶中 ,MAPK激酶等 13种上调 ;IP3 激酶等 7种发生下调。在膜受体中 ,NMDA受体等 9种发生上调 ;GluRD等 13种发生下调。结论 反复给予烟碱可影响多种膜受体和细胞信号转导相关基因的表达水平 ,这些变化可能与脑内N受体失敏有关。

沉默孕激素膜受体1基因抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖的研究

目的通过siRNA抑制子宫内膜癌细胞株Ishikawa孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)表达,探讨抑制子宫内膜癌细胞增殖的作用。方法应用Ambion公司siRNA设计工具设计以PGRMC1为靶标的siRNA并用该公司试剂盒化学合成。MTT法检测转染siRNA后细胞增殖抑制率,RT-PCR检测转染siRNA后PGRMC1基因mRNA水平变化,Western blot检测蛋白表达变化。流式细胞仪检测转染组与对照组细胞周期变化;Annexin V阳性细胞百分比,对比细胞凋亡率;双氢二氯荧光黄染色阳性率判定细胞内ROS水平。结果 si-PGRMC1可显著抑制该基因mRNA及蛋白的表达,使细胞增殖受抑,G2期细胞比例明显增加,凋亡细胞比率明显增加,细胞内ROS水平也随之升高。结论 PGRMC1参与了调控子宫内膜癌细胞增殖。

雌激素膜受体GPR30的研究进展

雌激素膜受体GPR30作为一个独立的雌激素受体,介导了雌激素众多的生理功能,该文就GPR30的结构、定位、信号通路和生物学效应作一综述。

参与小胶质细胞活化的膜受体研究进展

在中枢神经系统(CNS),小胶质细胞(MG)的作用越来越受到重视,MG被认为是CNS中天然免疫和适应性免疫的主要调节者〔1〕,MG以静息和活化两种状态存在,静息的MG对CNS起着支持、营养、保护和修复等作用,而活化的MG一方面营养和保护了CNS,另一方面通过释放促炎症细胞因子、自由基、超氧化物阴离子、一氧化氮(NO)、活性氧、前列腺素E2(PGE2)等多种物质,对CNS产生了更多的损伤作用。

宫颈鳞癌组织中跨膜受体蛋白Notch3的表达变化及其意义

目的观察宫颈鳞癌组织中跨膜受体蛋白Notch3的表达变化,并探讨其意义。方法收集宫颈鳞癌组织石蜡标本及其对应的正常宫颈组织石蜡标本各116例、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ+Ⅱ级病灶石蜡标本53例及CINⅢ级病灶石蜡标本41例,采用免疫组化法检测各标本中的Notch3,分析Notch3表达与宫颈鳞癌临床病理参数及预后的关系。结果宫颈鳞癌组织、正常宫颈组织、CINⅢ级组织及CINⅠ+Ⅱ级组织中Notch3的阳性表达率分别为52.6%、21.6%、43.9%和41.5%,宫颈鳞癌组织中Notch3的阳性表达率高于正常宫颈组织、CINⅢ级组织及CINⅠ+Ⅱ级组织,CINⅢ级组织及CINⅠ+Ⅱ级组织中Notch3的阳性表达率高于正常宫颈组织(P均<0.01)。Notch3表达与宫颈鳞癌肌层浸润深度、组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。Notch3表达阳性者和Notch3表达阴性者中位生存期分别为43、62.3个月,两者相比,P<0.05。Notch3表达阳性者1年生存率为93.4%、3年生存率为60.7%、5年生存率为31.1%,Notch3表达阴性者分别为98.2%、83.6%、60.0%,二者1、3、5年生存率相比,P均<0.05。结论宫颈鳞癌组织中Notch3阳性表达率升高,Notch3表达与肿瘤肌层浸润深度、组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移及预后有关,Notch3可能参与了宫颈鳞癌的发生及发展。

双参数流式细胞术检测Molt-4和Jurkat细胞膜受体途径凋亡的始动位点

目的：建立稳定的膜受体途径的细胞凋亡模型，探讨Cyclin／DNA双参数流式细胞术检测膜受体途径细胞凋亡的周期特异性的方法。方法：用典型的受体途径诱导剂TNF-α分别处理Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞；应用膜联蛋白V（AnnexinV）／碘化丙啶（PI）、API和Cyclin／DNA双参数流式细胞术等方法检测细胞凋亡。结果：AnnexinV／PI法检测早期凋亡细胞，早期凋亡率控制在8％～18％的周期特异性凋亡模型最典型；API法显示膜受体介导的细胞凋亡主要发生在细胞周期的G，期。Cyclin／DNA双参数流式细胞术显示受体途径的细胞周期特异性细胞凋亡的始动位点为G．早期。结论：应用AnnexinV／PI和API法能为建立稳定而典型的受体途径周期特异性细胞凋亡模型提供技术支撑；Cyclin／DNA双参数流式细胞术能够精确显示受体途径的细胞周期特异性细胞凋亡的始动位点。

褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响

目的：探讨褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响。方法：应用小鼠MFC前胃癌细胞建立荷胃癌小鼠模型，不同浓度褪黑素干预后，运用免疫组织化学、实时荧光定量PCR、免疫印迹定位定量检测MT1、MT2表达的变化。结果：移植瘤肿瘤细胞表达褪黑素膜受体MT1、MT2，褪黑素促进肿瘤组织膜受体MT1、MT2表达，并呈剂量依赖关系。结论：褪黑素上调褪黑素膜受体MT1、MT2的表达，说明褪黑素可能通过膜受体信号通路抑制胃癌生长。

雌激素膜受体-α信号通路与乳腺癌的相关性

雌激素受体α和β是一类转录因子，产生多种生理功能，雌激素受体α和β调控靶基因转录是配体依赖性的，然而，近来研究表明雌激素受体仅还存在另外一条信号途径，也称作非基因组或膜启动途径，能够快速地被雌激素激活，这种雌激素受体α位于细胞膜，因此也称作膜雌激素受体α，已经报道膜雌激素受体α与多种肿瘤的发生相关，本文阐述了近年来雌激素受体α的研究成果以及与乳腺癌的相关性。

基于7次跨膜受体的药物发现基本方法——细胞检测

随着检测技术进步,含7个跨膜α螺旋结构的受体性质已渐为人们所了解。7次跨膜(7TM)受体不仅具有开关功能,更类似于信息微处理器;特定配体只能参与特定受体介导的部分信号机制,这就为药物发现开拓了一个新领域。为进一步发现7TM受体与配体间的新行为并量化评价药物对这一复杂系统的作用效能,进而指导药物化学研究,药理学检测已成为关注焦点。本文阐述从还原重组体到整体系统测定方法的回归,讨论药物效价与评价其效应的特定检测方法间的联系,强调新的检测方法在药物发现过程中的价值。

血小板膜受体P2Y12基因多态性与冠心病患者氯吡格雷抵抗的相关性研究

目的研究血小板膜受体P2Y12(C34T、G52T、i744TC)基因的遗传多态性与冠心病患者氯吡格雷抵抗间的关系。方法选取50例2012年1月—2013年8月就诊于我院的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者为病例组,其中15例患者接受完整氯吡格雷治疗,将其设为治疗组;另选取健康人群16名为对照组。应用多聚酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对所有参与者检测P2Y12受体基因(C34T、G52T、i744TC)的多态性分布频率进行检测,比较治疗组基因型与氯吡格雷抵抗之间的关系。结果所有参与者血小板膜受体P2Y12基因的突变位点C34T、G52T及i744TC等位基因分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡法则(P>0.05),样本人群具有代表性。对于15例接受完整氯吡格雷治疗的患者分析结果显示:治疗后血小板聚集率降低幅度为(15.37±10.41)%,对治疗组全部成员进行C34T、G52T、iT744C基因分型,其中C34T中CC型6例、CT型4例、TT型5例,氯吡格雷抵抗发生率由低到高为:CC型33.33%(2/6)、CT型50%(2/4)、TT型60%(3/5);G52T不同基因分型患者血小板聚集率在治疗后下降幅度和氯吡格雷抵抗发生率之间差别无统计学意义;iT744C基因型中CC型患者其治疗后血小板聚集率降低程度、实验室氯吡格雷抵抗发生率均有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者发生氯吡格雷抵抗可能与C34TC>T的突变有关;G52T的基因突变与氯吡格雷抵抗的发生无关;iT744CCC型基因可能与实验室氯吡格雷抵抗有关。