膜联蛋白A1在脑缺血-再灌注损伤中作用的研究进展

脑缺血-再灌注损伤是急性缺血性卒中血管再通治疗过程中继发且不可避免的病理生理变化,可导致神经元受损,影响认知功能和行为功能,甚至发生死亡。炎症反应是导致脑缺血-再灌注损伤的重要机制之一。膜联蛋白A1是一种强大的生理性抗炎症蛋白质,作者对近年来膜联蛋白A1与脑缺血-再灌注损伤的关系进行综述,以期为后续研究提供参考。

膜联蛋白A1在肿瘤中的研究进展

膜联蛋白(ANX)是以钙离子浓度依赖性方式结合膜磷脂的细胞内蛋白质家族,在各种细胞类型中广泛表达。ANXA1属于ANX家族成员之一,在细胞生物学中发挥重要作用。既往研究表明ANXA1可调节细胞炎症反应、细胞凋亡和细胞信号转导。近年来,研究表明ANXA1的失调和突变与肿瘤的发生及发展有关。本文综述ANXA1对不同肿瘤恶性行为的调节作用,包括恶性增殖、迁移、侵袭、凋亡抑制及对肿瘤微环境影响等,为后续研究ANXA1在肿瘤中的作用、诊断治疗和预后评估提供基础。

膜联蛋白A1激活FPR2/ALX依赖性AMPK/mTOR通路改善创伤性脊髓损伤的机制研究

目的探讨膜联蛋白A1(ANXA1)是否通过激活甲酰受体2/脂蛋白A4受体(FPR2/ALX)依赖的单磷酸腺苷活化蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)通路改善创伤性脊髓损伤(SCI)。方法将24只10周龄雄性SD大鼠按随机数表法分为A组(假手术组)、B组(SCI组)、C组[SCI+ANXA1模拟肽(Ac2-26)处理组]、D组(SCI+Ac2-26+WRW4处理组),各6只。建模前3 d,C组大鼠的脊髓T 10段蛛网膜下腔注射1 mg/kg Ac2-26,D组的脊髓T 10段蛛网膜下腔注射1 mg/kg Ac2-26和2.2 mg/kg WRW4,A组和B组注入等量的生理盐水,使用脊髓打击器(参数:高度6 cm,重量10 g)制备成年大鼠SCI模型,通过Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分检测大鼠的运动功能,活性氧(ROS)试剂盒检测脊髓组织中ROS的含量,ELISA检测脊髓组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平,蛋白免疫印迹法检测脊髓组织中单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化单磷酸腺苷活化蛋白激酶(p-AMPK)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、微管相关轻链蛋白3(LC3)及选择性自噬接头蛋白1(p62)的表达水平。结果与A组比较,B组大鼠BBB评分显著降低(P<0.05);与B组比较,C组大鼠BBB评分[(7.8±1.9)分vs.(16.4±2.5)分]显著升高(P<0.05);与C组相比,D组大鼠BBB评分[(16.4±2.5)分vs.(10.1±1.5)分]升高(P<0.05);与A组比较,B组ROS含量、TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著上升(P<0.05);与B组比较,C组ROS含量[(152.33±26.56)%vs.(106.00±22.76)%]、TNF-α[(490.77±13.50)ng/g vs.(268.19±10.94)ng/g]、IL-6[(356.48±13.20)ng/g vs.(194.23±11.60)ng/g]、IL-1β水平[(334.65±9.73)ng/g vs.(153.15±11.61)ng/g]降低(P<0.05)与C组比较,D组ROS含量[(106.00±22.76)%vs.(133.01±28.70)%]、TNF-α[(268.19±10.94)ng/g vs.(394.20±15.24)ng/g、IL-6(194.23±11.60)ng/g vs.(305.77±12.92)ng/g]、IL-1β水平[(153.15±11.61)ng/g vs.(258.74±10.02)ng/g]上升(P<0.05)。与A组比较,B组p-AMPK/AMPK、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平下调(P<0.05),p-mTOR/mTOR、p62表达水平上调(P<0.05);与B组比较,C组p-AMPK/AMPK(0.32±0.06 vs.0.53±0.09)、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平(0.21±0.04 vs.0.66±0.08)上调(P<0.05),p-mTOR/mTOR(1.38±0.14 vs.0.76±0.06)、p62表达水平(1.27±0.09 vs.0.79±0.06)下调(P<0.05);与C组比较,D组p-AMPK/AMPK(0.53±0.09 vs.0.43±0.08)、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平(0.66±0.08 vs.0.57±0.06)下调(P<0.05),p-mTOR/mTOR(0.76±0.06 vs.1.22±0.12)、p62表达水平(0.79±0.06 vs.1.10±0.11)上调(P<0.05)。结论ANXA1具有改善SCI的作用,其机制可能是通过激活FPR2/ALX依赖的AMPK/mTOR通路上调自噬水平、抑制ROS和炎症介质释放介导。

膜联蛋白A1拟肽AC2-26调控ERK/NF-κB信号通路改善体外循环血清诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤

目的探究AC2-26对体外循环(CPB)血清诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的影响及其作用机制。方法收集16例风湿性心脏病手术患者CPB停机后的无菌血液并分离血清,建立体外循环血清诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤模型。提取健康SD大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞,培养72 h后,随机分为5组即对照组(C组),肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)损伤组(M组),AC2-26+AECⅡ损伤组(A组),AECⅡ损伤+Boc2组(B组),AC2-26+AECⅡ损伤+Boc2组(A+B组)。CCK-8、流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;免疫荧光检测各组肺泡Ⅱ型上皮细胞甲酰肽受体2(FPR2)和肺泡表明活性物质(SPC)表达情况;透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞板层小体的影响;Western blot检测各组肺泡Ⅱ型上皮细胞ERK、NF-κB表达情况。结果应用AC2-26后,CPB血清诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖率明显升高,凋亡率明显降低(P<0.05),AC2-26明显抑制ERK及NF-κB蛋白的磷酸化(P<0.05),促进SPC的表达,改善细胞内板层小体结构及形态,这一现象可被甲酰肽受体抑制剂Boc2阻断。结论AC2-26可以减轻CPB血清诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤,其作用机制可能与FPR2调节ERK、NF-κB信号通路有关。

膜联蛋白A1在肿瘤中作用及免疫逃逸机制的研究进展

膜联蛋白A1(ANXA1)是一种参与多种细胞过程的Ca^(2+)调节的磷脂结合蛋白。ANXA1最初在抑制炎症方面被广泛研究,但后来发现其在多种肿瘤中过表达,且该蛋白可能在肿瘤的各个阶段(发生、发展、浸润、转移和肿瘤细胞凋亡)中发挥多种作用。这是因为ANXA1可定位于细胞膜、细胞质和细胞核,不同亚细胞定位的ANXA1发挥的生物学功能也不一样。而且,在多种实体瘤中,ANXA1均可以通过抑制抗原特异性细胞毒性T细胞的功能、促进调节性T细胞(Treg)功能等方式诱导构建促进肿瘤生长、侵袭、转移以及免疫逃逸的肿瘤微环境。本文旨在阐述ANXA1在肿瘤亚细胞定位中的功能及其促进肿瘤免疫逃逸的机制。

膜联蛋白A1水平与急性心力衰竭病人利尿效果及近期预后的关系

目的:探讨血清膜联蛋白A1(AnxA1)水平与急性心力衰竭(AHF)病人利尿后肾功能的相关性以及与近期预后的关系。方法:纳入2019年1月—2020年12月从我院出院的急性心力衰竭病人130例,所有病人均接受规范的利尿、扩血管、强心等治疗,收集病人临床资料,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定病人入院时血清AnxA1水平。根据90 d内是否发生主要心血管不良事件(MACE)分为MACE组和非MACE组,对比两组病人临床资料、利尿效果、肾功能指标;采用多因素Cox回归模型分析影响急性心力衰竭病人近期预后的相关因素;采用Pearson相关模型分析AnxA1水平与利尿效果的相关性。结果:122例完成随访。截至随访结束共40例病人发生MACE,发生率为32.79%。MACE组使用袢利尿剂总剂量、基线血清AnxA1含量、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量高于非MACE组,估计肾小球滤过率(eGFR)水平低于非MACE组,差异有统计学意义(P<0.05)。高AnxA1(HR=7.661)、高低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(HR=5.091)是AHF病人发生MACE的独立影响因素(P<0.05),eGRF水平(HR=0.949)是AHF病人发生MACE的独立保护因素(P<0.05)。AnxA1水平与入院3 d内24 h平均尿量呈负相关(r=-0.562,P<0.001),与入院3 d袢利尿剂使用总量呈正相关(r=0.621,P<0.001)。结论:AnxA1水平与AHF病人利尿效果及预后存在明显的相关性。

膜联蛋白A1在心血管疾病中的作用

心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)具有高发病率、高致残率、高病死率的特点,根据《中国心血管健康与疾病报告2021》显示,我国现有CVD患者约3.3亿,CVD仍为城乡居民首位死因,其疾病负担仍将持续增加^([1])。因此,CVD的临床防治迫切需要新的干预手段或治疗药物。已有大量研究表明,炎症在动脉粥样硬化、心肌梗死等CVD的发生发展中发挥重要作用。

血清膜联蛋白A1、集落刺激因子2受体α水平与急性心肌梗死患者预后的关系

目的探讨急性心肌梗死患者血清膜联蛋白A1(AnxA1)、集落刺激因子2受体α(CSF2RA)的表达水平与预后的关系。方法选取2018年1月至2021年12月在荆门市中医医院接受治疗的急性心肌梗死患者141例,根据患者预后是否发生不良心血管事件,将141例急性心肌梗死患者分为预后良好组57例和预后不良组84例。采用酶联免疫吸附法检测各组血清AnxA1和CSF2RA的表达水平;采用Pearson相关性分析血清AnxA1和CSF2RA表达水平的相关性,应用Logistic回归分析急性心肌梗死患者预后的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线评估血清AnxA1与CSF2RA水平预测急性心肌梗死患者预后不良的价值。结果预后不良组左心室射血分数低于预后良好组,差异有统计学意义(t=4.516,P<0.01);预后不良组肌钙蛋白I高于预后良好组,差异有统计学意义(t=11.546,P<0.01)。与预后良好组相比,预后不良组血清AnxA1、CSF2RA表达水平升高,差异有统计学意义(t=9.225、8.672,P<0.01)。采用Pearson相关性分析结果显示,急性心肌梗死患者AnxA1与CSF2RA表达呈正相关(r=0.497,P<0.01)。ROC曲线结果发现,血清AnxA1与CSF2RA预测急性心肌梗死患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.897、0.887,敏感度为78.60%、76.20%,特异度为94.70%、93.00%,两者联合预测急性心肌梗死患者预后不良的AUC为0.956,高于两者单一预测(Z=2.106、1.899,P<0.01)。Logistic回归分析结果显示,AnxA1、CSF2RA高表达均是影响急性心肌梗死预后的危险因素(OR=1.546、1.723,P<0.05)。结论急性心肌梗死患者血清中AnxA1、CSF2RA的表达水平升高,与患者预后不良密切相关,且两者联合对于预测AMI患者的预后不良具有较高的临床价值。

急性脑梗死患者颈动脉粥样斑块稳定性与单核细胞趋化因子4、膜联蛋白A1水平的关系

目的探讨急性脑梗死患者颈动脉粥样斑块稳定性与单核细胞趋化因子4、膜联蛋白A1水平的关系。方法选择西安交通大学医学院神经内科2008年1月至2010年12月住院的124例急性脑梗死患者,男性73例,女性51例,年龄41～88(60.8±12.9)岁,健康对照组35例,其中男性21例,女性14例,年龄42～79(59.3±12.1)岁。采用彩色多普勒超声仪测量颈动脉内中膜厚度及斑块类型,颅脑CT检查计数颅内分布区的梗死病灶。脑梗死患者分为颈动脉正常组(n=26)、稳定型斑块组(n=38)、不稳定型斑块组(n=60)。用酶联免疫法测定单核细胞趋化因子4,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测膜联蛋白A1基因的mRNA表达水平,免疫组化法测膜联蛋白A1的表达,Western blot检测膜联蛋白A1蛋白质表达水平。对检查结果进行比较。结果①颈动脉正常组、稳定型斑块组、不稳定型斑块组的颈内动脉分布区病灶数、颈动脉内中膜厚度差异显著(F=21.36、24.5,P<0.05);②健康对照组、颈动脉正常组、稳定型斑块组和不稳定型斑块组单核细胞趋化因子4的含量比较差异显著(F=19.8,P<0.05);不稳定型斑块组颈动脉粥样斑块组织膜联蛋白A1的mRNA、蛋白表达水平、蛋白表达率明显少于稳定型斑块组(t=2.19、2.876,χ2=9.23,P<0.05)。结论单核细胞趋化因子4、膜联蛋白A1水平与颈动脉粥样斑块不稳定性密切相关,并参与了急性脑梗死的发生。

DNA甲基化抑制鼻咽癌细胞系膜联蛋白A1基因表达

为了研究不同分化程度和转移潜能鼻咽癌(NPC)细胞系膜联蛋白A1(ANXA1)mRNA和蛋白质表达情况及其与基因甲基化的关系.培养NPC细胞系CNE1、CNE2、5-8F、6-10B和永生化非癌性人鼻咽黏膜上皮细胞NP69细胞用于实验,用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测ANXA1基因甲基化状态,同时利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ANXA1基因的mRNA表达水平.然后用不同浓度的5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2dC)对NPC细胞进行去甲基化处理,MSP和RT-PCR方法检测处理组和对照组细胞ANXA1基因甲基化状况和mRNA表达水平,并用Western-blotting方法检测ANXA1基因蛋白质表达水平.结果发现,NP69细胞ANXA1基因无甲基化,4株NPC细胞系ANXA1基因都存在不同程度的甲基化,甲基化程度与细胞的分化程度和转移潜能相关.NPC细胞ANXA1基因mRNA表达水平降低,低于NP69细胞,其降低的程度与基因的甲基化程度相关.5-aza-2dC能够剂量依赖性地引起ANXA1基因去甲基化,经去甲基化处理后,NPC细胞系ANXA1基因的mRNA和蛋白质的表达水平相应提高.研究证明,NPC细胞系ANXA1基因的mRNA和蛋白质表达水平出现下调,甲基化是导致表达下调的主要原因,5-aza-2dC去甲基化处理能够恢复ANXA1基因的表达水平.

血清膜联蛋白A1与冠状动脉狭窄程度的相关性研究

目的探讨血清膜联蛋白A1在不同冠状动脉狭窄程度冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者中的表达差异及其意义。方法选择2014年1—8月首都医科大学附属北京安贞医院急诊危重症中心收治的行冠状动脉造影的患者152例为研究对象,根据冠状动脉造影结果分组,冠状动脉狭窄〈50%（A组）30例,冠状动脉狭窄50%~70%（B组）61例,冠状动脉狭窄〉70%（C组）31例,冠状动脉造影结果阴性（D组）30例,检测4组患者血清膜联蛋白A1水平。结果患者血清膜联蛋白A1水平分别为：A组0.50（1.61）μg/L,B组1.62（2.68）μg/L,C组3.34（1.14）μg/L,D组0.32（1.56）μg/L。B组和C组患者血清膜联蛋白A1水平均高于A组和D组,C组患者血清膜联蛋白A1水平高于B组（P〈0.05）;A组与D组血清膜联蛋白A1水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论血清膜联蛋白A1水平升高可能与冠状动脉狭窄程度相关,检测血清膜联蛋白A1水平有助于评估冠心病病情及指导治疗。

片仔癀调控膜联蛋白A1/VEGF通路对人肝癌细胞系HepG2作用的影响

目的 研究片仔癀对人肝癌细胞系 HepG2 作用的影响,并探讨其作用机制。方法 培养人肝癌细胞HepG2,将细胞分为空白对照组(Normal)、片仔癀不同浓度剂量组(浓度分别为1、10、100 mg·L -1 ),药物作用24 h后,收集细胞进行以下相关检测:MTT比色法检测不同浓度片仔癀对HepG2细胞活性的影响;集落形成实验观察细胞存活能力;Western blot法检测凋亡相关指标Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达,膜联蛋白A1/VEGF通路相关指标(ANXA1、VEGF、VEGFR、NF-κB p50);结果 与空白对照组比较,不同浓度片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株HepG2细胞活性,抑制细胞集落形成,促进HepG2细胞凋亡蛋白表达,促进细胞ANXA1蛋白表达,抑制VEGF、VEGFR表达,及抑制核蛋白NF-κBp50表达;结论 片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株HepG2活性,其主要作用机制与促进HepG2细胞凋亡蛋白,促进细胞ANXA1蛋白,抑制VEGF/VEGF受体,及NF-κB信号通路相关。

慢性胃炎及胃癌组织中膜联蛋白A1mRNA的表达变化及意义

目的观察慢性胃炎及胃癌组织中膜联蛋白A1(ANXA1)mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用q-PCR方法检测40例胃癌组织、20例慢性胃炎组织中的ANXA1 mRNA,并分析其与胃癌临床病理参数的关系。结果在胃癌组织中90%(36/40)高表达ANXA1 mRNA,慢性胃炎组织中75%(15/20)高表达,P>0.05。ANXA1 mRNA表达与胃癌临床病理特征之间无显著相关性(P均>0.05)。结论 ANXA1 mRNA在胃癌组织及慢性胃炎组织中均高表达,慢性胃炎与胃癌的发生发展可能有潜在相关性。

植物雌激素通过缺氧诱导因子-1α与核因子-κB下调缺氧肺泡上皮细胞膜联蛋白A1的表达

目的从人肺泡上皮细胞甲酰肽受体激动剂——膜联蛋白A1(Annexin A1,AnxA1)的表达变化,探讨植物雌激素影响缺氧肺部炎症浸润的机制。方法人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)接种于60 mm培养皿中常规培养,待培养皿中细胞长满约70%,根据是否用药分为:对照组(溶剂DMSO对照)、染料木黄酮(genistein,Gen)组、大豆苷元(daidzein,DD)组,每组细胞再根据是否缺氧再分为常氧组(N)、缺氧组(H)。Gen组、DD组于缺氧处理前分别加入Gen及DD,终浓度均为15μmol/L。缺氧组细胞置于缺氧培养箱(1%O2)24 h。取细胞培养上清及细胞裂解离心上清,结合甲酰肽受体特异性抑制剂tBoc2,通过趋化实验,检测其甲酰肽受体激动活性。用Western blot分析AnxA1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)在蛋白水平的变化,用RT2-PCR法分析其mRNA水平的变化。结果缺氧后的细胞冻融上清及培养上清趋化活性显著高于常氧组(P<0.05),而植物雌激素处理后,两种上清的趋化活性均显著高于对照组(P<0.05)。Western blot与RT2-PCR检测结果显示,缺氧组AnxA1在蛋白水平和mRNA水平均高于常氧组(P<0.05),两种植物雌激素不同程度地削弱了缺氧对AnxA1的上调效果,同时对HIF-1α、NF-κB的蛋白水平也产生同样的影响。结论植物雌激素削弱了缺氧对AnxA1基因表达的上调效应,其机制与HIF-1α、NF-κB信号途径有关。

膜联蛋白A1对糖尿病大鼠心功能及炎症反应的影响

目的探讨膜联蛋白A1(Annexin A1)对糖尿病大鼠心功能及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的影响。方法将24只SD大鼠随机均分为正常对照组、糖尿病组;利用高糖高脂饮食饲养及较小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)诱导造成2型糖尿病模型,2组分别予以普通喂食、高糖高脂喂食;于第8周末用彩色多普勒超声检测左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、二尖瓣舒张早期峰值速度/二尖瓣舒张晚期峰值速度(e/a)比值、左心室射血分数(LVEF)、每搏射血量(SV);第0、4、8周采用实时PCR测定血中Annexin A1表达,采用酶联免疫分析法测定血中TNF-α、IL-1β。结果与正常对照组对比,糖尿病组LVEDV、e/a、SV明显下降,Annexin A1明显上升(P<0.05),8周后糖尿病组Annexin A1显著下降(P<0.01);与正常对照组对比,糖尿病组TNF-α、IL-1β上升明显(P<0.05),8周后上升更明显(P<0.01);糖尿病组Annexin A1与TNF-α、IL-1β负相关(r分别为-0.73、-0.71,P<0.01)。结论 Annexin A1可改善糖尿病大鼠心功能,Annexin A1改善糖尿病大鼠心功能可能与炎症反应有关。

沉默膜联蛋白A1基因影响兔骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化能力

背景:膜联蛋白A1蛋白参与细胞的增殖和分化的调控。激素性股骨头坏死与骨髓间充质干细胞增殖和分化能力的改变相关。目的:观察沉默膜联蛋白A1基因对兔骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力的影响。方法:将新西兰大白兔的骨髓间充质干细胞分离培养后分为RNA干扰组,用携带针对膜联蛋白A1基因的短发夹RNA慢病毒载体LV-shANXA1感染骨髓间充质干细胞下调膜联蛋白A1基因的表达;阴性对照组,用携带无义基因序列的慢病毒载体LV-shANXA1-NC感染骨髓间充质干细胞;空白对照组,不加任何干预措施。结果与结论:纯化后的骨髓间充质干细胞CD44和CD105表达阳性率分别为97.2%和95.8%,而CD45阳性率为2.5%。经嘌呤霉素筛选后,感染复数为50时,LV-shANXA1对骨髓间充质干细胞感染效率为80%;感染复数为100时,感染效率为95%。实时PCR和Western blot检测显示感染复数为50时,LV-shANXA1对膜联蛋白A1基因的沉默效率效率可达72.4%以上。膜联蛋白A1表达下调后,骨髓间充质干细胞出现明显生长抑制,在随后成骨分化诱导后,细胞的碱性磷酸酶染色阳性率和碱性磷酸酶活性明显降低,且茜素红染色呈阴性反应。表明沉默膜联蛋白A1基因降低骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力,这可能是激素性股骨头坏死发病机制之一。

低密度脂蛋白胆固醇对人单核细胞膜联蛋白A1表达水平的影响

目的探讨LDL-C对人外周血单核细胞中膜联蛋白(annexin)A1表达水平的影响,为LDL-C致动脉粥样硬化机制提供新的视点。方法在体外分离培养人外周血单核细胞,随机分为对照组、不同浓度组(0.7、1.3、2.6、3.9 mmol/L LDL-C处理)和不同时间组(2、8、1 6、24 h用3.9 mmol/L LDL C处理),应用流式细胞仪检测annexinA1表达水平。结果与对照组比较,各浓度组annexin A1表达水平下降,且随浓度增加其抑制作用增强(P<0.01)。8 h后各时间组annexin A1表达水平明显下降,且随时间延长其抑制作用增强(P<0.05)。结论LDL-C可以通过降低人单核细胞annexin A1表达而影响单核细胞与内皮细胞黏附,进而启动动脉粥样硬化的发生发展,但具体机制有待进一步阐明。

小鼠睾丸膜联蛋白A1的克隆、表达及定位

目的:克隆、表达小鼠睾丸膜联蛋白A1,并研究其在睾丸中的定位。方法:利用RT-PCR技术从小鼠睾丸组织中扩增膜联蛋白A1的cDNA序列,将该基因插入GST融合表达载体pGEX-5T。以亲和层析法纯化蛋白免疫家兔制备多抗,并做睾丸切片免疫组织化学检测。结果:重组质粒测序结果表明,插入片段与小鼠膜联蛋白A1的序列完全一致。K802重组菌高效表达出相对分子质量为63 000的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的30%。多抗效价达1∶102 400,可特异识别重组蛋白。免疫组织化学显示膜联蛋白A1主要分布于精原细胞核、精子细胞顶体帽及精子胞质残余体内。结论:成功克隆、表达了小鼠膜联蛋白A1基因;膜联蛋白A1在睾丸生精细胞中的不同分布预示其可能与生精过程有关。

膜联蛋白A1与炎症、肿瘤、纤维化关联的研究综述

膜联蛋白A1（ANXA1）属于Annexis家族中第一个被发现的蛋白,其开始被认为是糖皮质激素调节的磷脂酶A2抑制蛋白,随后被认为是应激蛋白在增殖、分化、凋亡中起作用[1]。近年来,ANXA1的一些研究涉及到了许多疾病,研究较多的是炎症和肿瘤。同时ANXA1与相应疾病的研究也扩展到抗纤维化、丙肝病毒的调节[2]、肌营养不良膜修复作用[3]等。

膜联蛋白A1及其模拟肽Ac2-26对高糖诱导大鼠心肌细胞炎症反应的影响

目的探讨膜联蛋白A1及其模拟肽Ac2-26对高糖诱导大鼠心肌细胞炎症反应的影响。方法培养大鼠心肌细胞并随机分为正常对照组(葡萄糖5.5 mmol/L)、正常干预组[葡萄糖(5.5 mmol/L)+Ac2-26 (0.1 mg/mL)]、高糖模型组(葡萄糖30 mmol/L)、高糖治疗组[葡萄糖(30 mmol/L)+Ac2-26 (0.1 mg/mL)];采用实时PCR测定心肌细胞膜联蛋白A1、磷脂酶A2 (PLA2) mRNA表达,采用酶联免疫分析法测定心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平。结果与正常对照组比较,正常干预组膜联蛋白A1、PLA2 mRNA,TNF-α、IL-1β水平下降,但差异无统计学意义(P> 0.05)。与正常对照组比较,高糖模型组膜联蛋白A1、PLA2 mRNA表达,TNF-α、IL-1β水平显著升高(P <0.01)。与高糖模型组比较,高糖治疗组PLA2 mRNA表达,TNF-α、IL-1β水平明显下降(P <0.01);但膜联蛋白A1表达下降不显著(P> 0.05)。结论膜联蛋白A1与高糖诱导大鼠心肌细胞炎症反应明显相关,Ac2-26能够明显改善高糖诱导大鼠心肌细胞的炎症反应。