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2021年北京市哨点医院致泻大肠埃希氏菌感染病例特征分析
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作者 王超 牛彦麟 +3 位作者 王同瑜 吴阳博 姜金茹 马晓晨 《中国健康教育》 北大核心 2024年第2期157-162,共6页
目的 通过分析2021年北京市哨点医院致泻大肠埃希氏菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)感染病例的流行趋势和临床特征,为制定有效的健康教育与疾病防控提供依据。方法 收集2021年北京市36家食源性疾病主动监测医院腹泻病例的粪便... 目的 通过分析2021年北京市哨点医院致泻大肠埃希氏菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)感染病例的流行趋势和临床特征,为制定有效的健康教育与疾病防控提供依据。方法 收集2021年北京市36家食源性疾病主动监测医院腹泻病例的粪便或肛拭子标本及其性别、年龄、住址、发病时间、饮食史、临床特征等信息,对采集的粪便或肛拭子标本中的DEC进行分离培养鉴定。采用χ^(2)或Fisher确切概率法检验比较DEC不同分型的阳性检出率。结果 2021年北京市食源性疾病监测共采集腹泻病例粪便或肛拭子标本5697份,DEC阳性检出率为7.65%(436/5697),其中20~39岁年龄组阳性检出率最高(χ^(2)=18.804,P<0.001)。从年龄分布来看,20~39岁年龄组肠产毒性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)阳性病例数高于其他年龄组(χ^(2)=36.769,P<0.001),从地区分布来看,感染肠聚集性大肠埃希菌(Enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)和肠致病性大肠埃希菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的病例多来自远郊(χ^(2)=50.679,χ^(2)=19.659,P均<0.001),感染ETEC的病例主要分布在城区(χ^(2)=13.420,P=0.001)。从季节分布来看,EAEC、ETEC和EPEC夏季感染均高于其他季节(χ^(2)=32.096,χ^(2)=89.339,χ^(2)=16.876,P均<0.001),肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)感染主要发生在春季(χ^(2)=10.976,P<0.001)。自述可疑饮食史信息方面,感染ETEC的病例多食用过酒类及冷冻食品(χ^(2)=41.837,P<0.001),EAEC感染者多食用过婴儿食品(χ^(2)=24.229,P=0.007)。临床特征方面,出现腹痛的病例ETEC检出率更高(χ^(2)=8.017,P=0.005),出现恶心或呕吐的病例中EAEC的检出率更高(χ^(2)=5.701,P=0.017;χ^(2)=4.160,P=0.041)。结论 北京市哨点医院致泻大肠埃希氏菌感染病例具有季节性及人群流行特征,可结合不同分型DEC感染病例的可疑食品暴露信息及临床特征,为食品安全健康宣教和临床诊断提供依据。 展开更多
关键词 哨点医院 致泻大肠埃希氏菌 病例特征 北京市
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河南省人源和食源多重耐药致泻大肠埃希氏菌耐药特征与基因组分析
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作者 戚浩彧 李艳芬 +5 位作者 王钰 邱正勇 崔莹 吴玲玲 张濛 李永利 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期723-731,共9页
目的了解河南省临床和食品来源中多重耐药的致泻大肠埃希氏菌的耐药性和基因组特征.方法对2017-2022年河南省分离的101株多重耐药致泻大肠埃希氏菌,通过微量肉汤稀释法进行抗生素敏感性实验.基于全基因组测序结果分析其耐药基因、多位... 目的了解河南省临床和食品来源中多重耐药的致泻大肠埃希氏菌的耐药性和基因组特征.方法对2017-2022年河南省分离的101株多重耐药致泻大肠埃希氏菌,通过微量肉汤稀释法进行抗生素敏感性实验.基于全基因组测序结果分析其耐药基因、多位点序列分型、质粒类型并基于核心基因组单核苷酸多态性位点(cgSNPs)构建系统发育树.结果101株多重耐药的致泻大肠埃希氏菌对氨苄西林、四环素、萘啶酸的耐药率最高,分别为87.1%、79.2%、64.4%;对头孢噻肟的耐药率为38.6%.全基因组测序数据表明:101株分离株可被分为60种ST型,其中ST10、ST1491、ST38是优势型别;101株分离株共预测出23种质粒类型,其中携带率最高的类型为IncFIB.分离株携带喹诺酮类、氨基糖苷类、βG内酰胺酶类、四环素类等多种耐药基因,其中超广谱βG内酰胺酶基因bla_(CTX-M-14)和bla_(CTX-M-55)上下游遗传环境中均存在插入序列(IS26、IS903B、ISECP1).结论河南省人源和食源多重耐药的致泻大肠埃希氏菌具有较高的遗传多样性,整体耐药水平较高,其bla_(CTX-M)基因的传播可能与插入序列(IS)有关. 展开更多
关键词 多重耐药致泻大肠埃希氏菌 全基因组测序 耐药性 bla_(CTX-M)
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实时荧光环介导等温扩增快速分型致泻大肠埃希氏菌方法的建立
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作者 李芮 黄艳梅 +5 位作者 童晓钰 山珊 刘成伟 谭俣宬 陈芳 刘道峰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期233-240,I0005,I0006,共10页
致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)是一种重要的食源性致病菌,该研究立足DEC目前流行率高、基层分型困难的现状,建立了快速分型5种DEC的实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法... 致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)是一种重要的食源性致病菌,该研究立足DEC目前流行率高、基层分型困难的现状,建立了快速分型5种DEC的实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。针对DEC的8段特征性毒力基因pic、aggR、lt、st、stx 1、stx2、escV、invE及大肠埃希氏菌属特异性基因uidA设计LAMP引物,优化反应体系,并对方法的分析性能及临床菌株分型效果进行了评价。结果显示,所建立的方法对pic和escV的检出限是1 ng/μL,对aggR、stx 1、invE和uidA的检出限是100 pg/μL,对lt、st和stx 2的检出限是10 pg/μL,该方法灵敏度与特异度均为100%,DEC型别间无交叉反应,对临床菌株的分型与实际结果完全一致。方法快速简便、设备要求低,借助恒温荧光读取设备可在40 min内迅速判定待检菌株是否为DEC及其致病类型,可满足各机构现场快速检测的需求。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 实时荧光环介导等温扩增 快速检测 毒力基因 分型 食品安全
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国内外致泻大肠埃希氏菌O157:H7的检测标准比较及建议 被引量:2
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作者 孟静 钟立霞 +3 位作者 郭颖慧 程祥龙 伊廷存 霍胜楠 《中国乳业》 2023年第4期76-81,86,共7页
致泻大肠埃希氏菌O157:H7(STEC O157:H7)是大肠埃希氏菌中致病性最严重的一种食源性致病菌,主要存在于牛肉、牛奶、水果及其制品中,对身体健康造成很大危害,甚至引发死亡。食品中STEC O157:H7检测尤为重要。本文对国内外STEC O157:H7的... 致泻大肠埃希氏菌O157:H7(STEC O157:H7)是大肠埃希氏菌中致病性最严重的一种食源性致病菌,主要存在于牛肉、牛奶、水果及其制品中,对身体健康造成很大危害,甚至引发死亡。食品中STEC O157:H7检测尤为重要。本文对国内外STEC O157:H7的检测标准进行比较,提出我国标准在样品前处理、快速筛选方法的应用等方面需要加强,以便为该菌快速准确检测提供帮助,实现与国际标准化体系建设接轨,满足实验室检测需要。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌(STEC O157:H7) 检验检测 国内外对比
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基于多重PCR检测食品中致泻大肠埃希氏菌
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作者 谭波 黄坤宁 《食品安全导刊》 2023年第8期78-80,84,共4页
目的:提高实验室对食品中致泻大肠埃希氏菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的检测能力与检测效率,验证DEC多重PCR试剂盒的适用性。方法:依据《食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》(GB 4789.6—2016)分离鉴定... 目的:提高实验室对食品中致泻大肠埃希氏菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的检测能力与检测效率,验证DEC多重PCR试剂盒的适用性。方法:依据《食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》(GB 4789.6—2016)分离鉴定样品23-H770、23-X371,用DEC多重PCR检测试剂盒检测5种DEC的12条特征基因。结果:23-H770未检出DEC,23-X371检出STEC/EHEC,阴、阳性对照菌种均检出GB 4789.6—2016中5种DEC目标条带与型别对照表相应基因条带,且空白对照12条目标基因条带均未检出。结论:能力验证样品评价结果为“满意”,多重PCR检测试剂盒能快速准确检测EPEC、EIEC、ETEC、STEC/EHEC和EAEC。 展开更多
关键词 多重PCR 致泻大肠埃希氏菌 电泳 检测
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5种致泻大肠埃希氏菌不同浓度下的国标法检出率分析
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作者 胡春红 陆其聪 《食品安全导刊》 2023年第28期95-97,104,共4页
目的:研究5种致泻大肠埃希氏菌使用GB 4789.6—2016法检测时,不同初始浓度下,二次增菌取不同接种体积的检出率。方法:不同初始浓度下(1~3 CFU·mL^(-1),10~30 CFU·mL^(-1),100~300 CFU·mL^(-1))的5种致泻大肠埃希氏菌加... 目的:研究5种致泻大肠埃希氏菌使用GB 4789.6—2016法检测时,不同初始浓度下,二次增菌取不同接种体积的检出率。方法:不同初始浓度下(1~3 CFU·mL^(-1),10~30 CFU·mL^(-1),100~300 CFU·mL^(-1))的5种致泻大肠埃希氏菌加入营养肉汤增菌后,取不同体积(10μL、50μL、100μL、500μL、1000μL)的预增菌液接种于肠道增菌肉汤管中,培养后划线于伊红美蓝琼脂(Eosin-Methylene Blue,EMB)和麦康凯琼脂(MacConkey Agar,MAC)平板,观察并记录平板中菌落生长情况,计算检出率。结果:5种致泻大肠埃希氏菌接种量在10 CFU及以上时,二次增菌时取10μL预增菌液至肠道增菌肉汤中,均能检出。5种致泻大肠埃希氏菌接种量在1~3 CFU时,二次增菌时取10μL和50μL预增菌液至肠道增菌肉汤中,平均检出率均不能达到100%;二次增菌时接种体积增加到100μL时,肠道集聚性大肠埃希菌EAEC(CICC24186)、肠出血性大肠埃希菌EHEC(CICC24187)、产肠毒素大肠埃希菌ETEC(CICC24190)的检出率能达到100%,而肠道侵袭性大肠埃希菌EIEC(CICC24188)、肠道致病性大肠埃希菌EPEC(CICC24189)的检出率仍不能达到100%。结论:在实际检测工作中,在所检样品中致泻大肠埃希氏菌含量较低时,可以考虑增加二次增菌的接种量,减少漏检可能。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 国家标准方法 检出率
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2017年江苏省食源性疾病中致泻大肠埃希氏菌的感染状况及耐药性分析 被引量:33
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作者 唐震 沈赟 +4 位作者 秦思 郑东宇 马恺 乔昕 周永林 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1371-1375,共5页
目的:了解江苏省食源性疾病病例中致泻大肠埃希氏菌的感染、耐药及病原学特征,为疾病防控及临床治疗提供依据。方法:收集2017年江苏省48家食源性疾病哨点医院腹泻患者粪便或肛拭子标本,采用传统分离培养结合荧光定量PCR方法,检测5种致... 目的:了解江苏省食源性疾病病例中致泻大肠埃希氏菌的感染、耐药及病原学特征,为疾病防控及临床治疗提供依据。方法:收集2017年江苏省48家食源性疾病哨点医院腹泻患者粪便或肛拭子标本,采用传统分离培养结合荧光定量PCR方法,检测5种致泻大肠埃希氏菌并进行分型鉴定,对其感染状况进行流行病学分析;采用微量肉汤稀释法测定266株致泻大肠埃希氏菌对8类14种抗菌药物的耐药性。结果:在9 884份粪便或肛拭子样本中,检出289份致泻大肠埃希氏菌(2.92%),5种病原型别中检出率最高为肠黏附性大肠埃希氏菌(EAEC,1.53%),其次为肠产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC,0.81%)和肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC,0.54%),有2株菌为双重菌合并感染;致泻大肠埃希氏菌夏秋季节检出较高,其中8月份检出率最高;男性、女性检出率分别为2.78%和3.08%,差异无统计学意义(χ2=0.801,P>0.05);在年龄分布上,<1岁组检出最高(4.55%),1~5岁组其次(4.06%),不同年龄组检出率有统计学意义(χ2=45.780,P<0.01);致泻大肠埃希氏菌呈现较高的耐药率(91.35%),耐药率最高的抗菌药物是氨苄西林(64.3%),其次是萘啶酸(60.9%)和四环素(51.9%);多重耐药率达到60.9%,其中1株菌耐受14种抗菌药物。结论:江苏省食源性致泻性大肠埃希菌中EAEC感染率最高,多重耐药情况较为严重,<5岁的婴幼儿需要重点关注。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 食源性疾病 感染 耐药
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2016年江苏省食源性疾病患儿中致泻大肠埃希氏菌毒力基因分布与耐药性特征 被引量:14
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作者 秦思 沈赟 +2 位作者 周翌婧 马恺 霍翔 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第6期2019-2024,共6页
目的了解江苏省食源性疾病患儿中致泻大肠埃希氏菌的流行状况、不同毒力基因型的分布和对抗生素的敏感性特征。方法从江苏省各设区市的三甲医院共收集3566例食源性疾病患儿的粪便或肛拭子标本进行致泻大肠埃希氏菌检测,用实时荧光定量PC... 目的了解江苏省食源性疾病患儿中致泻大肠埃希氏菌的流行状况、不同毒力基因型的分布和对抗生素的敏感性特征。方法从江苏省各设区市的三甲医院共收集3566例食源性疾病患儿的粪便或肛拭子标本进行致泻大肠埃希氏菌检测,用实时荧光定量PCR进行毒力分型,用微量肉汤稀释法进行药敏实验。结果江苏省食源性疾病患儿中,共检出致泻大肠埃希氏菌104株,总检出率为2.9%(104/3566)。在5种毒力基因型致泻大肠埃希氏菌中,肠聚集性大肠埃希氏菌、肠致病性大肠埃希氏菌是主要的毒力基因型,分别占61.5%(64/104)、26.9%(28/104)。致泻大肠埃希氏菌对氨苄西林耐药率最高,达71.2%,其次为四环素和萘啶酸,分别为59.6%和54.8%。未发现亚胺培南耐药菌株。多重耐药率为75.0%。结论肠聚集性大肠埃希氏菌是导致江苏省儿童食源性疾病最主要的致泻大肠埃希氏菌。约95%以上的致泻大肠埃希氏菌对头孢他啶、头孢西丁敏感,100%对亚胺培南敏感。耐药率及多重耐药率高,应加强致泻大肠埃希氏菌耐药性监测及临床抗生素合理使用。 展开更多
关键词 儿童 食源性疾病 致泻大肠埃希氏菌 耐药 毒力基因
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2015~2019年北京市海淀区食源性腹泻患者致泻大肠埃希氏菌型别分布和耐药性分析 被引量:7
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作者 刘伟 白婧 +2 位作者 尹可欣 韩喜荣 施丽飞 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第6期188-191,共4页
目的分析北京市海淀区食源性腹泻患者致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的感染状况、型别分布和耐药情况,为致泻大肠埃希氏菌的防控和临床合理用药提供科学依据。方法对2015~2019年海淀区食源性疾病监测哨点医院送... 目的分析北京市海淀区食源性腹泻患者致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的感染状况、型别分布和耐药情况,为致泻大肠埃希氏菌的防控和临床合理用药提供科学依据。方法对2015~2019年海淀区食源性疾病监测哨点医院送检的1810份腹泻患者粪便标本直接划线接种在麦康凯培养基上培养,挑取可疑菌落进行生化鉴定、毒力基因测定,对确认为致泻大肠埃希氏菌的菌株进行药敏检测。结果1810份粪便标本中检出致泻大肠埃希氏菌214株,检出率为11.8%,各年度的检出率差异有统计学意义(χ^(2)=10.858,P=0.028)。检出的致泻大肠埃希氏菌共有4种型别,其中集聚性大肠埃希氏菌(EAEC)96株(44.9%),产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)89株(41.6%),肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)24株(11.2%),肠道侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)5株(2.3%)。在12种抗生素的药敏试验中,70株(32.7%)全部敏感,144株(67.3%)耐药;氨苄西林的耐药率最高(54.7%),其次是四环素(38.8%)和复方磺胺(36.9%),对3种及以上抗生素的多重耐药率为46.3%。结论北京市海淀区2015~2019年致泻大肠埃希氏菌感染以EAEC和ETEC为主,耐药菌株的多重耐药谱广。应加强对抗生素的使用管理,延缓耐药株的产生和传播。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 毒力基因 型别分布 耐药
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北京市大兴区2018-2020年腹泻病人致泻大肠埃希氏菌检测结果分析 被引量:8
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作者 温静 郑天驰 +3 位作者 马琳 冯光远 胡月 赵颖 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第8期3418-3422,共5页
目的了解北京市大兴区肠道门诊病人中致泻大肠埃希氏菌的感染情况、流行病学和病原学特征及耐药状况。方法收集3年大兴区辖区定点医院肠道门诊腹泻病人的粪便标本进行致泻大肠埃希氏菌检验,依照GB 4789.6—2016《食品安全国家标准食品... 目的了解北京市大兴区肠道门诊病人中致泻大肠埃希氏菌的感染情况、流行病学和病原学特征及耐药状况。方法收集3年大兴区辖区定点医院肠道门诊腹泻病人的粪便标本进行致泻大肠埃希氏菌检验,依照GB 4789.6—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》和WS271-2007《感染性腹泻诊断标准附录B.2肠致泻性大肠杆菌检验》进行检验,在传统生化分离培养基础上采用实时荧光PCR方法对菌株进行鉴定,并对分离出的菌株做出分析。结果三年共检测标本1049件,检出致泻大肠埃希氏菌75株(7.15%),5种基因型别均有检出,肠道集聚性大肠埃希氏菌(Enteroaggregative Esherichia coli,50.7%)构成比最高,其次为产肠毒素大肠埃希氏菌(Enterotgoxigenic Esherichiacoli,24.0%);1~10岁年龄组感染率最高(13.9%,χ2=15.057,P=0.035),男女感染率无差异(χ2=0.103,P=0.749);药敏试验结果显示检出菌株对所检测各抗生素耐药程度差异较大,耐药率最高的抗菌药物为红霉素(100%),其次为氨苄西林(82.7%)。结论致泻大肠埃希氏菌在肠道门诊腹泻病人中感染率较高,其不同型别感染率差异较大,人群年龄组阳性率差异显著,药物敏感性有差异,关注致泻大肠埃希氏菌感染情况对预防和治疗意义更大。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 病人 基因型别 耐药性
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3种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒的研制与效用评价 被引量:4
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作者 周杨 万强 +4 位作者 蔡芷荷 卢勉飞 杨绪伟 吴清平 李健顺 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第12期243-251,共9页
本研究为了研制一种多重PCR检测试剂盒,用于对肠道致病性大肠埃希氏菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)、产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shigatoxin-producing E. coli,STEC)和肠道出血性大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic E. coli,EHE... 本研究为了研制一种多重PCR检测试剂盒,用于对肠道致病性大肠埃希氏菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)、产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shigatoxin-producing E. coli,STEC)和肠道出血性大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic E. coli,EHEC)3种DEC(Diarrheagenic E. coli,DEC)的快速检测。优化所涉及的多重PCR检测体系和构建相应的检测试剂盒,其中的主要检测试剂采用冻干工艺,评价该试剂盒的检测特异性、灵敏度、重复性以及保质期。结果表明,本研究成功建立了针对于3种DEC的检测体系EP和检测体系ST;3种DEC标准菌株和分离菌株均出现明显的目标基因条带,而其他种类DEC标准菌株和分离菌株均未出现目标基因条带;该试剂盒检测管EP和检测管ST的检出限分别可达到1.5×10^3 cfu/mL和2.1×10^3cfu/mL,且二者检测重复率均为100%;该试剂盒可在4℃条件下保存12个月,也可在42℃环境运输120h,期间其检测效力不受影响。本研究研制的试剂盒性能好,检测结果稳定、可靠,适用于食品中3种DEC的快速检测。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 多重PCR检测试剂盒 实效性评价
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基于特征基因的不同类型致泻大肠埃希氏菌的分子鉴定
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作者 郭梁 刘国强 +6 位作者 海小 罗建兴 孙春玲 王东玉 朱静 雅梅 郭元晟 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2020年第17期178-184,共7页
致泻大肠埃希氏菌是引起人体以腹泻症状为主的常见病原菌。将传统微生物学方法和分子鉴定方法相结合鉴定致泻大肠埃希氏菌。根据聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增和测序建立5种不同类型致泻大肠埃希氏菌的分子鉴定标... 致泻大肠埃希氏菌是引起人体以腹泻症状为主的常见病原菌。将传统微生物学方法和分子鉴定方法相结合鉴定致泻大肠埃希氏菌。根据聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增和测序建立5种不同类型致泻大肠埃希氏菌的分子鉴定标准,并对试验过程进行安全性评价,最后通过检测鲜肉中肠道集聚性大肠埃希氏菌验证此方法的适用性。结果显示5种致泻大肠埃希氏菌标准菌株的特征基因都有明显的条带,且与该特征基因的产物条带大小一致。同时,胶回收测序的结果与特征基因的序列一致性为100%,可利用PCR和测序鉴定5种致泻大肠埃希氏菌;在安全性评价试验中,利用细菌裂解液进行涂板,培养后均未发现菌落生成,因此没有生物安全隐患;肉样中的检测结果显示,有astA基因的目的条带,且测序结果与此基因序列一致,说明此方法能够准确鉴定出鲜肉中肠道集聚性大肠埃希氏菌。成功建立5种不同类型大肠埃希氏菌的分子鉴定方法,评价试验过程的安全性,并准确鉴定出肉样中的肠道集聚性大肠埃希氏菌,为实验室相关标准的制定和修订提供理论依据和有益借鉴。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 聚合酶链式反应 测序 安全性评价 肠道集聚性大肠
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多重PCR法在食品中致泻大肠埃希氏菌质控考核中的应用
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作者 史晓娟 魏红霞 贺海花 《食品安全导刊》 2018年第14期74-75,共2页
目的通过多重PCR方法检测质控样本中致泻性大肠埃希氏菌方法:参照GB4789.6-2016《食品安全国家标准食品微生物学致泻大肠埃希氏菌菌检验》进行检验,结果编号15-1样品检出EHEC,15-2样品检出ETEC。本实验室顺利完成考核,结果与考核方一致... 目的通过多重PCR方法检测质控样本中致泻性大肠埃希氏菌方法:参照GB4789.6-2016《食品安全国家标准食品微生物学致泻大肠埃希氏菌菌检验》进行检验,结果编号15-1样品检出EHEC,15-2样品检出ETEC。本实验室顺利完成考核,结果与考核方一致。结论:多重PCR法在质控考核中,能够对目标菌快速鉴别,能够快速顺利完成质控考核,同时了解该实验室检验能力和实验室质控水平,提高检验机构出具检验数据的可靠性和有效性,保证实验室的检测水平。 展开更多
关键词 质控考核 致泻大肠埃希氏菌 多重PCR
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吉林省致泻大肠埃希氏菌分子分型与耐药性研究 被引量:17
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作者 石奔 赵薇 +2 位作者 孙景昱 杨修军 李可维 《中国实验诊断学》 2020年第10期1697-1702,共6页
目的了解吉林省食源性疾病患者中致泻大肠埃希氏菌的毒力基因分布、流行特征、耐药情况、以及PFGE分子分型特征,为致泻大肠埃希氏菌的监测、爆发预警、耐药抗生素规避使用提供依据。方法对2016年从吉林省食源性疾病患者粪便中获得的26... 目的了解吉林省食源性疾病患者中致泻大肠埃希氏菌的毒力基因分布、流行特征、耐药情况、以及PFGE分子分型特征,为致泻大肠埃希氏菌的监测、爆发预警、耐药抗生素规避使用提供依据。方法对2016年从吉林省食源性疾病患者粪便中获得的26株致泻大肠埃希氏菌进行生化鉴定、多重PCR检测毒力基因、MIC微量肉汤稀释法药敏实验以及PFGE脉冲场凝胶电泳分子分型。结果26株致泻大肠埃希氏菌中13株(50%)为EAEC;7株(26.92%)为EPEC;4株(15.38%)为ETEC;2株(7.69%)为EHEC;对四环素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、环丙沙星耐药极为严重,分别高达92.30%、88.46%和84.62%;XbaI酶切后进行PFGE脉冲场凝胶电泳分为23个型别。结论吉林省腹泻患者中致泻大肠埃希氏菌感染类型以EAEC为主,存在混合感染情况;耐药、多重耐药情况较为严重应加强规范抗生素的使用;在DNA水平上呈现出多态性。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 PFGE MIC法药敏实验
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致泻大肠埃希氏菌检验用标准菌株的研究 被引量:12
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作者 张彩文 李金霞 +6 位作者 陈怡文 都海渤 刘佳奇 辛迪 石靓 崔生辉 姚粟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期68-73,共6页
对7株大肠埃希氏菌(Escherichia coli)进行分类学鉴定及毒力基因验证,评价其作为GB 4789.6—2016《食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》标准菌株的可行性。采用细菌多相分类学鉴定方法对7株E.coli进行菌种鉴定,根据GB 4789.6—2016... 对7株大肠埃希氏菌(Escherichia coli)进行分类学鉴定及毒力基因验证,评价其作为GB 4789.6—2016《食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》标准菌株的可行性。采用细菌多相分类学鉴定方法对7株E.coli进行菌种鉴定,根据GB 4789.6—2016标准方法对7株菌进行致泻大肠埃希氏菌相关毒力基因PCR进行确认试验。结果表明,菌株CICC 10003携带uidA基因,CICC 10667携带uidA、sth、lt基因,CICC 10670和CICC 24187携带uidA、escV、stx 1、stx 2基因,CICC 24186携带uidA、pic、astA、aggR基因,CICC 24188携带uidA、invE基因,CICC 24189携带uidA、bfpB、escV基因。CICC 10667、CICC 24186、CICC 24188、CICC 24189分别属于产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道集聚性大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌、肠道致病性大肠埃希氏菌,CICC 10670和CICC 24187属于肠道出血性大肠埃希氏菌,CICC 10003为非致泻大肠埃希氏菌。7株菌毒力基因检测结果均满足GB 4789.6—2016标准中相应E.coli类别性能要求,可作为致泻大肠埃希氏菌检验用标准菌株。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 毒力基因 标准
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5种致泻大肠埃希氏菌实时荧光定量PCR快速检测技术 被引量:7
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作者 王芳妹 钟文涛 +2 位作者 王淑好 卢琳 韩奉玲 《食品与机械》 北大核心 2019年第5期88-95,共8页
将5种致泻大肠埃希氏菌的毒力基因保守序列进行设计并合成了引物和探针,建立的多重实时荧光PCR4种试剂盒可以同时检测5种致泻大肠埃希氏菌。结果表明:4种试剂盒的12对毒力基因通过5种致泻大肠埃希氏菌的标准储备菌株均得到验证;并且12... 将5种致泻大肠埃希氏菌的毒力基因保守序列进行设计并合成了引物和探针,建立的多重实时荧光PCR4种试剂盒可以同时检测5种致泻大肠埃希氏菌。结果表明:4种试剂盒的12对毒力基因通过5种致泻大肠埃希氏菌的标准储备菌株均得到验证;并且12对毒力基因只对对应的致泻大肠埃希氏菌特异性起作用,对常见的食源性致病菌都无扩增曲线;escV、bfpB、stx1、ipaH和invE基因的检出限是10CFU/mL,aggR基因的检出限是102CFU/mL,astA和pic基因的检出限是103CFU/mL,而stx2A、ipaH和stIb基因菌液浓度<10CFU/mL时,均可观察到明显的"S"型扩增曲线,且线形较好;并且对抽查和委托检验的肉类、奶和动物腹泻物以及人工污染样品等40份样品进行检测,共检出11份阳性样本,与GB4789.6-2016标准检测结果相一致,表明建立的4种试剂盒方法具有良好的实用性。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 实时荧光定量PCR 毒力基因
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淮安市2013-2015年致泻大肠埃希氏菌的检测和流行特征分析
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作者 李双姝 刘纯成 +2 位作者 李兵兵 刘晗 朱叶飞 《海南医学》 CAS 2016年第19期3137-3139,共3页
目的了解2013-2015年淮安市致泻大肠埃希氏菌的检出情况和流行特征,为疾病的防治提供依据。方法于2013-2015年从淮安市各哨点医院和社区医院腹泻门诊患者的795份粪便标本中分离大肠埃希氏菌,使用多重PCR方法筛查致泻大肠埃希氏菌,再结... 目的了解2013-2015年淮安市致泻大肠埃希氏菌的检出情况和流行特征,为疾病的防治提供依据。方法于2013-2015年从淮安市各哨点医院和社区医院腹泻门诊患者的795份粪便标本中分离大肠埃希氏菌,使用多重PCR方法筛查致泻大肠埃希氏菌,再结合生化实验验证。结果在795份腹泻标本中共检出致泻大肠埃希氏菌80株,检出率为10.06%。其中ETEC 34株,检出最高,其余依次为EAEC 18株、EPEC 16株、EIEC 7株和EHEC 5株。按季节分布统计,差异有统计学意义(P<0.05),夏秋两季为主要流行时段。城市和农村的地域分布则差异无统计学意义(P>0.05);从人群分布分析,不同性别阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),但不同年龄组之间比较则差异有统计学意义(P<0.05)。结论淮安市致泻大肠埃希氏菌主要流行型别为ETEC,夏秋两季为主要流行时段,≤5岁和6~18岁为易感人群,今后应加强对重点时段和人群的监测。 展开更多
关键词 淮安 致泻大肠埃希氏菌 流行特征
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6类致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测体系的建立 被引量:10
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作者 张明明 梁美丹 +2 位作者 黄志深 劳嘉倩 肖剑 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第14期4667-4672,共6页
目的构建食源性致泻大肠埃希氏菌高效、快速、特异性强的检验方法。方法根据6类致泻大肠埃希菌11种毒力基因引物,采用煮沸法制备细菌基因组DNA作为模板构建致泻大肠埃希氏菌单菌多重PCR检测体系;采用试剂盒法制备细菌基因组DNA作为模板... 目的构建食源性致泻大肠埃希氏菌高效、快速、特异性强的检验方法。方法根据6类致泻大肠埃希菌11种毒力基因引物,采用煮沸法制备细菌基因组DNA作为模板构建致泻大肠埃希氏菌单菌多重PCR检测体系;采用试剂盒法制备细菌基因组DNA作为模板构建6类菌十重PCR检测体系,对2种检测体系进行优化并对其进行特异性、重复性验证。结果构建了6类致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测体系,包括单菌多重PCR、6类菌十重PCR检测体系。仅6类致泻大肠埃希氏菌阳性菌株有特异性条带产生;不同类型致泻大肠埃希氏菌菌株均检出其特异性阳性条带,该多重PCR检测方法重复性好,稳定性强。结论该方法可高效快速地确定待测样是否为大肠埃希氏菌及其致病型,为食品中致泻大肠埃希氏菌的监控、预警及爆发引起食物中毒后溯源等提供参考。 展开更多
关键词 食品 致泻大肠埃希氏菌 多重PCR 毒力基因
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3种方法检测食品中致泻大肠埃希氏菌检测能力验证结果分析 被引量:4
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作者 刘莉 魏海燕 +3 位作者 王紫薇 魏咏新 马丹 曾静 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第17期6086-6092,共7页
目的提高食品中致泻大肠埃希氏菌的检测能力,促进实验室检测能力的提高。方法参照GB4789.6-2016《食品微生物学致泻大肠埃希氏菌检验》方法进行检测,采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定系统进行生化鉴定、血清学鉴定,对可疑菌落进行普通... 目的提高食品中致泻大肠埃希氏菌的检测能力,促进实验室检测能力的提高。方法参照GB4789.6-2016《食品微生物学致泻大肠埃希氏菌检验》方法进行检测,采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定系统进行生化鉴定、血清学鉴定,对可疑菌落进行普通PCR确证试验。同时使用多重实时荧光PCR法以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionizationtime-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析鉴定可疑菌落。结果国标法和多重实时荧光PCR法能准确鉴定出目标菌,MALDI-TOF-MS可以检测大肠埃希氏菌,但无法区分致泻大肠埃希氏菌和肠出血性大肠埃希氏菌。结论3种方法各有优劣,同时使用,综合判断,能确保试验结果准确快速。 展开更多
关键词 GB 4789.6-2016 多重实时荧光PCR 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法 致泻大肠埃希氏菌 能力验证
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一起致泻大肠埃希氏菌引起食物中毒的实验室检测 被引量:1
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作者 赵娣伟 孙立艳 《口岸卫生控制》 2009年第5期16-17,共2页
2008年8月,北辰某酒店发生食物中毒。主要症状为腹痛、腹泻、发热。根据流行病学调查、实验室检验结果分析,认定这是一起致泻大肠埃希氏菌引起的食物中毒。
关键词 食物中毒 致泻大肠埃希氏菌 实验室检测
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