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新型桶形芋螺毒素BtIIIB的分离纯化、氨基酸序列测定及二硫键定位研究 被引量:11
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作者 赵听友 曹瑛 +2 位作者 代先东 范崇旭 陈冀胜 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期163-168,共6页
采用凝胶色谱、高效液相色谱等方法从栖息于我国南海的桶形芋螺的毒液中纯化出一个新的芋螺毒素BtIIIB.采用氨基酸组成分析、质谱分析和Edman降解测定BtIIIB为15肽,其氨基酸序列为:CCELPCHGCVPCCWP.结构中含有6个半胱氨酸,形成3对分子... 采用凝胶色谱、高效液相色谱等方法从栖息于我国南海的桶形芋螺的毒液中纯化出一个新的芋螺毒素BtIIIB.采用氨基酸组成分析、质谱分析和Edman降解测定BtIIIB为15肽,其氨基酸序列为:CCELPCHGCVPCCWP.结构中含有6个半胱氨酸,形成3对分子内二硫键.采用部分还原的方法,分步还原毒素中的二硫键,用氰基化试剂衍生生成巯基,然后在碱性条件下将衍生的产物进行裂解,用MALDI-TOFMS测定裂解后片段的分子量,确定了其二硫键的配对方式为Cys1-Cys13,Cys2-Cys9,Cys6-Cys12的部分交叉式结构,是芋螺毒素中比较特别的配对方式. 展开更多
关键词 芋螺毒素 二硫键 氨基酸序列 半胱氨酸 MS 高效液相色谱 毒液 MALDI-TOF 栖息 分离纯化
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从织锦芋螺中克隆α芋螺毒素序列 被引量:14
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作者 卢柏松 于芳 +3 位作者 王建华 赵东 赵四清 黄培堂 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期413-416,共4页
为了从我国南海产织锦芋螺(Conustextile)中分离新的毒素序列并研究其应用价值,进行了织锦芋螺毒素基因的分离工作.从织锦芋螺毒管中提取mRNA,以A族芋螺毒素的信号肽编码部分和3′端非翻译部分的保守序列为引物... 为了从我国南海产织锦芋螺(Conustextile)中分离新的毒素序列并研究其应用价值,进行了织锦芋螺毒素基因的分离工作.从织锦芋螺毒管中提取mRNA,以A族芋螺毒素的信号肽编码部分和3′端非翻译部分的保守序列为引物,通过RT-PCR扩增和序列分析方法获得新的芋螺毒素序列.结果得到两种不同的α芋螺毒素序列,两者都属于α4/7亚型芋螺毒素,预测其成熟肽序列分别为Pro-Glu-Cys-Cys-Ser-Asp-Pro-Arg-Cys-Asn-Ser-Ser-His-Pro-Glu-Leu-Cys-Gly(C端Gly可能被酰胺化)和Pro-Glu-Cys-Cys-Ser-His-Pro-Ala-Cys-Asn-Val-Asp-His-Pro-Glu-Ile-Cys-Arg.采用传统的生化分离手段尚未从织锦芋螺中获得过α芋螺毒素序列,这两种α芋螺毒素作用的种属特异性。 展开更多
关键词 织锦 RT-PCR α芋螺毒素
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鞘内注射ω-芋螺毒素S03对大鼠慢性神经痛的镇痛作用及对DRG细胞内Ca^(2+)含量的影响 被引量:10
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作者 王红 周晓巍 +1 位作者 张宏 黄培堂 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期693-697,共5页
目的ω-芋螺毒素SO3是通过分子生物学手段从海洋生物线纹芋螺中提取的一种多肽,为新型、特异性N型电压敏感性钙离子通道阻滞剂。观察鞘内注射(it)ω-芋螺毒素SO3对大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CC I模型)所致神经痛的镇痛作用,以及对背... 目的ω-芋螺毒素SO3是通过分子生物学手段从海洋生物线纹芋螺中提取的一种多肽,为新型、特异性N型电压敏感性钙离子通道阻滞剂。观察鞘内注射(it)ω-芋螺毒素SO3对大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CC I模型)所致神经痛的镇痛作用,以及对背根神经节(DRG)细胞内Ca2+含量的影响。方法♂SD大鼠40只,随机均分为5组,即正常对照组(N组)、CC I后14 d组(C组)、CC I 14 d it生理盐水组(CN组)、CC I 14 d it SO3 600 ng组(CS 1组)和CC I 7 d后连续鞘内注射SO3 30 ng.h-1共7 d组(CS 7组)。观察各组动物热痛觉过敏及机械刺激痛觉异常的反应阈值,并测定DRG细胞内Ca2+含量。结果CC I 14 d时结扎侧与非结扎侧热及机械刺激痛阈值均下降,同时DRG细胞内Ca2+含量也升高。it SO3后,结扎侧及非结扎侧痛阈值均升高,而DRG细胞内Ca2+含量降低。结论it SO3对慢性神经痛有镇痛作用,同时可以抑制CC I引起的DRG细胞内Ca2+含量增加,提示DRG细胞N型Ca2+电流在此伤害性信息传递中起作用。 展开更多
关键词 ω-芋螺毒素SO3 神经痛 背根神经节 细胞内钙含量 N型钙通道
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芋螺毒素研究进展 被引量:9
4
作者 王承忠 蒋辉 戚正武 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期537-545,共9页
芋螺毒素是近年来国际上的一个研究热点 .它属于一类海洋生物活性多肽 ,多数由 12~ 4 6个氨基酸残基所组成 ,能特异性地作用于体内各种离子通道和细胞膜上神经递质和激肽的受体 .具有分子质量小、结构多样、作用靶点广泛、功能专一、... 芋螺毒素是近年来国际上的一个研究热点 .它属于一类海洋生物活性多肽 ,多数由 12~ 4 6个氨基酸残基所组成 ,能特异性地作用于体内各种离子通道和细胞膜上神经递质和激肽的受体 .具有分子质量小、结构多样、作用靶点广泛、功能专一、组织特异性强等优点 ,因而较之其他生物来源的活性多肽有更多的优越性 .芋螺毒素是一待挖掘的“富矿区” ,可作为体内一些具有重要生理功能靶点的探针和“解密器” ,亦可作为新药的先导化合物或直接开发成新药 。 展开更多
关键词 芋螺毒素 活性多肽 离子通道 神经递质 拮抗剂 激动剂
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ω-芋螺毒素的研究进展 被引量:10
5
作者 林秋金 罗素兰 +1 位作者 彭世清 长孙东亭 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2005年第4期41-48,共8页
芋螺毒素(conotoxin,CTX)化学结构新颖,生物活性强,对电压门控或配体门控离子通道(包括少数G-蛋白相关受体等)的作用靶位选择性极高,已成为药理学和神经科学的有力工具和新药开发的新来源。其中ω-芋螺毒素(ω-CTX)能特异地阻断并区分... 芋螺毒素(conotoxin,CTX)化学结构新颖,生物活性强,对电压门控或配体门控离子通道(包括少数G-蛋白相关受体等)的作用靶位选择性极高,已成为药理学和神经科学的有力工具和新药开发的新来源。其中ω-芋螺毒素(ω-CTX)能特异地阻断并区分不同的电压敏感性钙离子通道亚型,已广泛作为神经生物学上的重要分子探针,正应用于相关靶受体的基础研究中,并作为特异的诊断试剂及疗效特异的新药应用于临床,是芋螺毒素研究的热点,本文从芋螺毒素的分类、应用领域、电压门控离子通道、ω-芋螺毒素的结构特征、获得ω-芋螺毒素的途径及其应用前景方面,系统地概述了ω-芋螺毒素的研究进展,以供参考。 展开更多
关键词 ω-芋螺毒素 进展 开发应用
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芋螺毒素分子生物学研究进展 被引量:11
6
作者 王建华 黄培堂 黄翠芬 《中国海洋药物》 CAS CSCD 1997年第4期30-34,共5页
从海洋软体动物芋螺中分离纯化的芋螺毒素是一类具有特异生物活性的小肽神经毒素。目前芋螺毒素一方面作为神经生物学的重要分子探针正广泛应用于相关靶受体的基础研究中,另一方面则用于研制特异诊断试剂及疗效特异的新药,并作为分子模... 从海洋软体动物芋螺中分离纯化的芋螺毒素是一类具有特异生物活性的小肽神经毒素。目前芋螺毒素一方面作为神经生物学的重要分子探针正广泛应用于相关靶受体的基础研究中,另一方面则用于研制特异诊断试剂及疗效特异的新药,并作为分子模型用于新药设计。研究涉及蛋白质化学、化学、药理学、电生理及分子生物学等诸多领域。本文综述了近年芋螺毒素分子生物学研究的进展。 展开更多
关键词 芋螺毒素 基因特征 CDNA文库 分子生物学
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虎纹蜘蛛毒素-Ⅰ对大鼠急性内脏疼痛的抑制性效应及与ω-芋螺毒素的比较研究(英文) 被引量:5
7
作者 陈嘉勤 陈威华 +3 位作者 邓梅春 黎冠 康园 梁宋平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期24-29,共6页
研究一种新型的N型电压敏感性钙通道阻断剂虎纹蜘蛛毒素 Ⅰ (HWTX Ⅰ ) ,硬脊膜外腔用药对福尔马林结肠壁粘膜下注射诱导的大鼠急性炎性内脏疼痛的抑制性效应 .5 %福尔马林溶液15 0 μl快速注入SD大鼠乙状结肠壁粘膜下层 ,可产生几种... 研究一种新型的N型电压敏感性钙通道阻断剂虎纹蜘蛛毒素 Ⅰ (HWTX Ⅰ ) ,硬脊膜外腔用药对福尔马林结肠壁粘膜下注射诱导的大鼠急性炎性内脏疼痛的抑制性效应 .5 %福尔马林溶液15 0 μl快速注入SD大鼠乙状结肠壁粘膜下层 ,可产生几种可评估的反映内脏疼痛的固定性行为 .在此伤害性刺激反应前 30min ,经留置的导管向大鼠硬脊膜外腔分别注入各待测药品和试剂 ,观察其对该模型疼痛行为的影响 .与生理盐水阴性对照组 ,美国同类镇痛新药ω 芋螺毒素 (ω CTX MVIIA)和吗啡两个阳性对照组比较 ,HWTX Ⅰ五个剂量组 ,进行大鼠硬脊膜外腔注药 ,均能以剂量依赖方式明显抑制福尔马林结肠壁注射诱导的伤害性行为反应 .HWTX Ⅰ和ω CTX MVIIA在 2 0μg kg体重剂量时 ,其抑制效果是稳定和明显的 ;在 5 0 70 μg kg体重剂量下 ,抑制效果更为显著 .HWTX Ⅰ量 效实验发现 ,在等剂量下 ,ω CTX MVIIA镇痛效果略高于HWTX Ⅰ .但在 5 0~ 75 μg kg较高剂量下 ,ω CTX MVIIA可能引起大鼠产生明显的运动能力障碍 ,而HWTX Ⅰ在该剂量范围内则未见类似的毒副作用 .盐酸吗啡镇痛作用起效快于HWTX Ⅰ和ω CTX MVIIA ,但维持时间较后二者短 .实验结果表明 :同为多肽类N型电压敏感性钙通道拮抗剂 ,HWTX Ⅰ和ω CTX MVIIA大鼠硬脊? 展开更多
关键词 虎纹蜘蛛毒素-Ⅰ ω-芋螺毒素(ω-CTX—MVIIA) N-型电压敏感性钙通道 内脏痛 抗伤害作用 大鼠模型
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芋螺毒素ImI的化学合成及其杀虫活性研究 被引量:9
8
作者 吴小英 安婷婷 高炳淼 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2203-2206,2179,共5页
为研究芋螺毒素Im I的杀虫活性,本研究采用化学方法合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定获得芋螺毒素Im I,采用MTT法和昆虫注射法研究其杀虫活性。结果表明采用化学合成法可以成功合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定形成2个... 为研究芋螺毒素Im I的杀虫活性,本研究采用化学方法合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定获得芋螺毒素Im I,采用MTT法和昆虫注射法研究其杀虫活性。结果表明采用化学合成法可以成功合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定形成2个二硫键;活性实验表明芋螺毒素Im I具有抑制昆虫细胞sf9生长的活性,半数有效量为0. 13 n M;对黄粉虫具有杀虫活性,半数致死剂量为0. 11μg/mg。通过化学合成法可以有效合成芋螺毒素Im I,其具有良好的杀虫活性,可为研发新型多肽类生物杀虫剂奠定基础。 展开更多
关键词 芋螺毒素 化学合成 氧化折叠 杀虫活性
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α-芋螺毒素构效关系与分子设计 被引量:3
9
作者 胡亚兰 黄锋 +3 位作者 蒋辉 范崇旭 陈常英 陈冀胜 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期474-478,共5页
α-芋螺毒素(琢-conotoxins)是从芋螺毒液中提取到的一类活性多肽.与其它家族的芋螺毒素相比,它们含二硫键少,结构相对简单,由于作用于神经肌肉接头的N-乙酰胆碱受体(nAChRs)的不同亚型,拮抗乙酰胆碱,可作为鉴定nAChRs亚型及其亚基的有... α-芋螺毒素(琢-conotoxins)是从芋螺毒液中提取到的一类活性多肽.与其它家族的芋螺毒素相比,它们含二硫键少,结构相对简单,由于作用于神经肌肉接头的N-乙酰胆碱受体(nAChRs)的不同亚型,拮抗乙酰胆碱,可作为鉴定nAChRs亚型及其亚基的有效工具,已成为芋螺毒素结构改造的最佳先导化合物.利用HyperChem软件包的量子化学半经验方法AM1对8个具有代表性的琢-芋螺毒素进行了量子化学计算,研究了它们的电子结构及构效关系.结果表明,空间结构的相似性使它们作用于同一受体,局部结构差异而导致的电子结构的较大差别是它们能作用于不同受体亚型的重要原因.在此基础上,以琢-芋螺毒素GI为模型设计了7个类似物并进行了量子化学计算,比较了类似物与GI在空间结构及电子结构方面的特征. 展开更多
关键词 α-芋螺毒素 乙酰胆碱受体 电子结构 构效关系 分子设计
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一种新型独特芋螺毒素的分离与结构鉴定 被引量:3
10
作者 刘尚义 曹瑛 +4 位作者 赵听友 代先东 钟明鼐 范崇旭 陈冀胜 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1482-1484,共3页
Cone snails are tropical marine predatory molluscs,and there is an unprecedented variety of neuropharmacologically active peptide.Over seventy living species of cone snails are distributed in China.The ve-nom of Conus... Cone snails are tropical marine predatory molluscs,and there is an unprecedented variety of neuropharmacologically active peptide.Over seventy living species of cone snails are distributed in China.The ve-nom of Conus caracteristicus collected from South China Sea was studied in this work.A new conotoxin,cr5a,was isolated from the venom through Sephadex G-25 chromatography and HPLC,and then was identified by(amino) acid analysis,mass spectrometry,N-terminal sequence.The primary structure of cr5a was CCKFQFLNFCCNE,it shared a conserved T-superfamily of conotoxins arrangement of cysteine residues(CC-CC).Total chemical synthesis of the two possible disulfide linkages of cr5a was achieved,and the result of HPLC co-elution showed that cr5a was a tridecapeptide with a disulfide connectivity of Cys1-Cys10, Cys2-Cys11.So cr5a is a new member of the T-superfamily conotoxins. 展开更多
关键词 芋螺毒素 T-超家族 独特 结构鉴定
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鞘内注射ω-芋螺毒素SO_3对神经痛大鼠脊髓Fos及Jun蛋白表达的影响 被引量:4
11
作者 王红 周晓巍 +1 位作者 张宏 黄培堂 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第8期892-897,共6页
目的ω-芋螺毒素SO3是从海洋生物线纹芋螺中提取的一种多肽,为新型、特异性N型电压敏感性钙离子通道阻滞剂。通过研究鞘内注射ω-芋螺毒素SO3对坐骨神经慢性挤压伤(CCI模型)大鼠脊髓Fos、Jun蛋白表达的影响,探讨N型钙通道在伤害性信息... 目的ω-芋螺毒素SO3是从海洋生物线纹芋螺中提取的一种多肽,为新型、特异性N型电压敏感性钙离子通道阻滞剂。通过研究鞘内注射ω-芋螺毒素SO3对坐骨神经慢性挤压伤(CCI模型)大鼠脊髓Fos、Jun蛋白表达的影响,探讨N型钙通道在伤害性信息传递中的作用。方法雄性SD大鼠72只,随机均分为9组,其中3组为假手术或单纯制作CCI模型后3、14d;3组为单次鞘内注射生理盐水或不同剂量SO3;另3组为持续鞘内注射生理盐水或不同剂量SO3共7d。在预定时间点,经左心室灌注4%多聚甲醛,取L4-L6段脊髓制备石蜡切片。用相应抗体行免疫组织化学染色,检测各组动物脊髓标本中Fos样或Jun样免疫反应阳性细胞的数量。结果大鼠CCI后脊髓背角Fos样或Jun样免疫反应阳性细胞数量显著升高;单次或持续鞘内注射生理盐水对其无明显影响;单次或持续鞘内注射SO3均可剂量依赖性抑制其上升。结论神经损伤后脊髓Fos、Jun蛋白表达增加,鞘内注射SO3可以减轻此种反应,提示N型钙通道阻滞剂在脊髓水平可以部分阻断伤害性信息传递。 展开更多
关键词 ω-芋螺毒素SO3 坐骨神经慢性挤压伤 鞘内注射 N型钙通道阻滞剂 FOS JUN
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海南产芋螺毒素在疼痛与成瘾治疗中的应用前景 被引量:2
12
作者 罗素兰 长孙东亭 +3 位作者 吴勇 胡远艳 朱晓鹏 J.Michael McINTOSH 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期439-446,共8页
芋螺毒素(conotoxin,conopeptide,CTX)是热带海洋软体动物芋螺分泌的一类用于麻醉猎物的神经毒素肽,是当今国际生物药物研究的热点,被誉为海洋药物宝库,已跃居动物神经毒素研究的首位。其结构新颖,多样性高,活性强,选择性高,能区分各种... 芋螺毒素(conotoxin,conopeptide,CTX)是热带海洋软体动物芋螺分泌的一类用于麻醉猎物的神经毒素肽,是当今国际生物药物研究的热点,被誉为海洋药物宝库,已跃居动物神经毒素研究的首位。其结构新颖,多样性高,活性强,选择性高,能区分各种离子通道的不同亚型,广泛应用于神经药理学的研究、及作为诊断试剂与治疗药物。不同芋螺种类的毒素互不相同,且同一种类不同个体之间的毒素成份及其活性也差异很大,特别是对神经系统疾病有非常重要的研究与诊断治疗作用。在我国,芋螺是海南特有的药用海洋生物资源,其毒素具有特异结合动物体内各种离子通道受体的特殊功能,在镇痛和戒烟戒毒,以及治疗帕金森症、精神病等重大疾病方面具有极好的应用前景。芋螺毒素大多是由7~50个氨基酸残基组成的、富含半胱氨酸(Cys)的神经肽毒素。芋螺毒素按其前体蛋白的内质网信号肽序列的相似性,以及半胱氨酸模式,分为不同的基因家族,至今,所有已知的芋螺毒素可分为17个超家族,分别为A,C,D,S,M,I1,I2,I3,J,L,O1,O2,O3,P,T,V,Y。按其受体靶位可分为α,ω,μ,δ等多种药理学家族。每个超家族根据受体靶类型,又可分为α,αA,κA(A-超家族),ω,δ,κ,μO(O-超家族),μ,ψ,κM(M-超家族)等家族(亚型)。其中的α-家族类芋螺毒素(α*-CTX)特异阻断哺乳动物的烟碱乙酰胆碱受体(nAChRs)。nAChRs是动物界普遍存在的具有重要生理作用和临床研究意义的离子通道型受体,其介导众多中枢和外周神经系统的生理功能,包括学习、记忆、应答、镇痛和运动控制等。nAChRs激活多巴胺、去甲肾上腺素、五羟色胺、γ-氨基丁酸等多种神经递质的释放。已证实nAChRs是筛选诊断和治疗一大类重要疾病药物的关键靶点,这些疾病包括成瘾、疼痛、癌症、智障、帕金森症、精神病、抑郁、重症肌无力等疑难杂症。至今对于上述疾病还没有对症治疗的药物。常用的非选择性的nAChRs激动剂如烟碱,虽然可以缓解上述神经疾病的症状,但它们对心脏和胃肠道产生强烈的副作用,且有成瘾性。因此,开发针对nAChRs各种亚型具有高选择性的配体药物是治疗上述疾病的关键所在。研究表明,α9α10 nAChR是治疗神经痛、癌症化疗、乳腺癌、肺癌、伤口愈合等的新靶点;阻断脊髓神经上的α3β2nAChR,通过抑制C-纤维释放谷氨酸进行疼痛信号的传递,可产生镇痛效应。α9α10 nAChR阻断剂具有治疗神经痛和加速受伤神经恢复的功能。角化细胞上的α9α10 nAChR在伤口愈合的病理生理学过程中起着很重要的作用。α9nAChR亚基在乳腺癌组织中过表达。α9亚基变体影响支气管细胞的转化与增殖,该亚基在乳腺癌与肺癌的治疗中具有非常重要的意义。表达在多巴胺能神经元上的α6β2*-nAChRs能被内源乙酰胆碱(Ach)或外源烟碱(尼古丁)及其类似物激活,也就是说,α6β2*-nAChRs的激活在中枢神经系统的胆碱能信息传递通路中起着至关重要的作用,包括运动行为以及药物成瘾的调节。阻断含有α6β2*的nAChRs可有效防止烟瘾、可卡因和吗啡毒瘾的发作,显著抑制吸烟和吸毒的欲望,预示α-芋螺毒素在戒烟、戒毒新药的研发领域具有巨大的潜力。能治疗成瘾的α-芋螺毒素的预期经济和社会效益无可限量。已证实α6/α3β2β3 nAChR是烟碱和其他药物,如可卡因和吗啡等成瘾治疗的新靶点。另外,阻断α3β4 nAChRs可有效减少鸦片与其他刺激物的自身给药欲望和行为。α3β4 nAChR基因敲除的小鼠明显减少烟瘾的发作。因此,α6/α3β2β3与α3β4 nAChRs阻断剂在戒烟戒毒新药的研发领域具有非常重要的价值。我们从海南产芋螺中研究发现了5个特异阻断nAChRs的新颖芋螺毒素及其突变体,分别是αB-CTX VxⅩⅩⅢA,αO-CTX GeⅩⅣA,3个α-CTXs LvⅠA,Txd4和TxIC突变体。其中,αB-CTX VxⅩⅩⅢA来自菖蒲芋螺(Conus vexil-lum),是我们首次发现的一个新超家族芋螺毒素,其半胱氨酸模式和信号肽、以及前肽的组成区域均与以往发现的芋螺毒素完全不同,我们将之定名为B-超家族芋螺毒素,第23种(ⅩⅩⅢ)半胱氨酸模式(4个Cys)的第一个毒素肽。含有40个氨基酸的αB-CTX VxⅩⅩⅢA的前体肽只含有信号肽和成熟肽,而没有其他已知超家族普遍含有的前肽区部分。我们成功合成了αB-CTX VxⅩⅩⅢA的3种可能的异构体,经活性检测发现,αB-CTX VxⅩⅩⅢA是α9α10 nAChR的特异阻断剂。来自将军芋螺(C.generalis)的新芋螺毒素αO-CTX GeⅪⅤA,与O-超家族芋螺毒素前体蛋白信号肽具有很高的同源性,αO-CTX GeⅪⅤA前体由信号肽、前肽和成熟肽3部分组成,推导的含有28个氨基酸的成熟肽含有与J-超家族芋螺毒素相同的半胱氨酸模式。高浓度的αO-CTX GeⅪⅤA既是nAChRs的阻断剂,也是NMDA受体〔N-methyl-D-aspar-tic acid receptor(NMDAR)〕的阻断剂,低浓度的αO-CTX GeⅪⅤA对α9α10 nAChR具有很好的选择性和最强的生物活性,其半阻断剂量(IC50)仅为4.6 nmol·L-1。系统研究了αO-CTX GeⅪⅤA对18个α9α10 nAChR与配体结合界面的关键氨基酸突变型的阻断活性,以及确定结合部位的竞争性试验。3个新的α-芋螺毒素(α-CTX)属于A-超家族芋螺毒素成员,分别是来自疣缟芋螺(Conus lividus)的LvIA,来自织锦芋螺(C.textile)的Txd4与TxIC突变体。它们对相应的nAChRs亚型具有极好的选择性和很强的生物活性。α-CTXLvIA特异阻断α3β4 nAChR,其半阻断剂量(IC50)为12.5nmol·L-1;α-CTX Txd4特异阻断α6/α3β2β3 nAChR,其半阻断剂量(IC50)为28 nmol·L-1;α-CTX TxIC突变体特异阻断α3β2 nAChR,其半阻断剂量为14.5 nmol·L-1。这些新的海南产α-家族类芋螺毒素的作用靶点清楚,活性强,选择性高,是开发镇痛和戒烟戒毒等新药的原创先导药物,蕴涵着巨大的经济价值和社会效益。 展开更多
关键词 成瘾 疼痛 芋螺毒素 神经毒素 软体动物 海洋药物 生物药物 多样性
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鞘内注射ω-芋螺毒素SO3对神经痛大鼠脊髓CGRP和P物质表达的影响 被引量:3
13
作者 王红 周晓巍 +1 位作者 张宏 黄培堂 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期305-308,共4页
目的通过研究鞘内注射新型N型钙通道阻滞剂ω-芋螺毒素SO3对坐骨神经慢性挤压伤(CCI)模型大鼠脊髓降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)含量的影响,探讨N型钙通道在伤害性信息传递中的作用。方法雄性SD大鼠72只,随机均分为9组,其中3组为... 目的通过研究鞘内注射新型N型钙通道阻滞剂ω-芋螺毒素SO3对坐骨神经慢性挤压伤(CCI)模型大鼠脊髓降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)含量的影响,探讨N型钙通道在伤害性信息传递中的作用。方法雄性SD大鼠72只,随机均分为9组,其中3组为假手术和单纯制作CCI模型后3、14天组,3组为单次鞘内注射生理盐水和不同剂量SO3组,另3组为持续鞘内注射生理盐水和不同剂量SO3共7天组。用免疫组织化学染色法检测各组动物脊髓标本中免疫反应阳性物质CGRP-LI、SP-LI的阳性面积比例、目标光密度和积分光密度。结果大鼠CCI后脊髓背角CGRP-LI、SP-LI阳性面积比例、目标光密度和积分光密度均显著升高,单次或持续鞘内注射生理盐水对其无明显影响,单次或持续鞘内注射SO3均可剂量依赖性地抑制其上升。结论神经损伤后脊髓CGRP、SP释放增多,鞘内注射SO3可以减轻此反应,提示N型钙通道阻滞剂可在脊髓水平部分阻断伤害性信息传递。 展开更多
关键词 芋螺毒素 坐骨神经痛 慢性挤压伤 注射 脊髓 N型钙通道阻滞剂 降钙素基因相关肽 P物质
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ω-芋螺毒素MVIIC的N及C端修饰对折叠及活性影响 被引量:2
14
作者 戴秋云 刘凤云 +4 位作者 周艳荣 程度胜 陈添弥 黄培堂 黄翠芬 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期66-70,共5页
合成了 ω-芋螺毒素 MVIIC的三种 N及 C端修饰肽 ,应用高压液相色谱、CD及生物体内活性实验 ,研究了其 N及 C端修饰对折叠及活性的影响 .结果表明 :MVIIC N端用 Phe及 Ser修饰后降低其线性肽形成正确折叠的比例及结构的稳定性 ,对小鼠... 合成了 ω-芋螺毒素 MVIIC的三种 N及 C端修饰肽 ,应用高压液相色谱、CD及生物体内活性实验 ,研究了其 N及 C端修饰对折叠及活性的影响 .结果表明 :MVIIC N端用 Phe及 Ser修饰后降低其线性肽形成正确折叠的比例及结构的稳定性 ,对小鼠的脑室给药活性也相应降低 ;C端酰胺转为电负性羧基端后活性降低 ,CD谱存在显著差异 . 展开更多
关键词 ω-芋螺毒素 MVⅡC 修饰 折叠 活性 N端 C端
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ω-芋螺毒素的定量构效关系与虚拟筛选 被引量:2
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作者 丁俊杰 丁晓琴 +2 位作者 李大禹 潘里 陈冀胜 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2157-2167,共11页
ω-芋螺毒素属于海洋生物活性多肽,由24-31个氨基酸残基组成.特异性作用于电压敏感的钙离子通道(VGCCs),能够直接开发成药物或作为先导化合物进行新药开发.本文应用新型氨基酸残基结构描述符cscales和遗传偏最小二乘算法,对ω-芋螺毒素... ω-芋螺毒素属于海洋生物活性多肽,由24-31个氨基酸残基组成.特异性作用于电压敏感的钙离子通道(VGCCs),能够直接开发成药物或作为先导化合物进行新药开发.本文应用新型氨基酸残基结构描述符cscales和遗传偏最小二乘算法,对ω-芋螺毒素进行定量构效关系(QSAR)研究,并设计、构建了容量为2244个化合物的N-型和P/Q-型VGCC拮抗剂虚拟组合多肽库,然后分别采用QSAR模型预测和相似性搜索方法对组合多肽库进行了虚拟筛选.研究结果表明,建立的N-型和P/Q-型VGCC拮抗剂QSAR模型均具有较好的预测能力,交叉验证相关系数(CV-r2)均大于0.89.主成分分析和聚类分析结果表明,虚拟组合多肽库中化合物具有较好的结构多样性和差异性.通过虚拟筛选,得到了具有高预测活性的6个N-型和19个P/Q-型钙离子通道拮抗剂,为进一步的合成和活性评价奠定了理论基础.同时,本文建立的多肽QSAR预测模型和虚拟筛选策略,为其它多肽类化合物的定量构效关系研究和虚拟筛选提供了参考. 展开更多
关键词 ω-芋螺毒素 钙离子通道拮抗剂 QSAR 虚拟筛选
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芋螺毒素基因资源研究进展 被引量:2
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作者 李宝珠 郑晓冬 +8 位作者 高炳淼 陈琴 陈心 长孙东亭 胡碧煌 温珍昌 张英霞 李军 罗素兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期29-36,共8页
芋螺毒素和微生物的次生代谢产物与植物的生物碱一样,具有生物多样性的特点。芋螺毒素特有的二硫键骨架和化学修饰后特异的空间结构,使其具有特异的稳定性和药理学活性。对芋螺毒素基因的分析和新型基因的克隆筛选,是深入研究各种受体... 芋螺毒素和微生物的次生代谢产物与植物的生物碱一样,具有生物多样性的特点。芋螺毒素特有的二硫键骨架和化学修饰后特异的空间结构,使其具有特异的稳定性和药理学活性。对芋螺毒素基因的分析和新型基因的克隆筛选,是深入研究各种受体、离子通道及其亚型,进而在克隆表达的靶受体上设计和筛选高效新药的前提。芋螺毒素基因资源的研究在芋螺毒素新基因及其编码产物毒素肽的发现与利用方面发挥了重要作用。现对该领域的新进展进行论述。 展开更多
关键词 芋螺毒素 基因资源 研究进展
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ω-芋螺毒素及其衍生物的合成 被引量:3
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作者 周艳荣 刘凤云 戴秋云 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第3期72-76,共5页
研究ω 芋螺毒素及衍生物的结构与生物活性的关系。采用固相多肽合成法合成了ω 芋螺毒素及其衍生物。结果显示 ,ω 芋螺毒素衍生物结构稳定性和生物活性均比ω 芋螺毒素差。
关键词 ω-芋螺毒素 衍生物 固相多肽合成 活性
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化学合成ω-芋螺毒素MⅦA的复性与质谱分析 被引量:5
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作者 王贤纯 梁宋平 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期121-126,共6页
为了探讨质谱分析在合成多肽氧化复性和分离纯化研究中的应用 ,用固相多肽合成方法合成ω -芋螺毒素MⅦA ,在含谷胱甘肽的缓冲体系中进行氧化复性后 ,经离子交换和RP HPLC分离纯化。利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS... 为了探讨质谱分析在合成多肽氧化复性和分离纯化研究中的应用 ,用固相多肽合成方法合成ω -芋螺毒素MⅦA ,在含谷胱甘肽的缓冲体系中进行氧化复性后 ,经离子交换和RP HPLC分离纯化。利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)和电喷雾串联质谱 (ESI MS/MS)分析ω -芋螺毒素MⅦA氧化复性和分离纯化的效果 ,最后用电生理学实验测定复性ω -芋螺毒素MⅦA的生理活性。其结果表明 ,获得的ω -芋螺毒素MⅦA纯化复性样品具有与天然ω 展开更多
关键词 ω-芋螺毒素MⅦA 氧化复性 质谱分析
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芋螺毒素与钙离子通道相互作用的计算机模拟 被引量:4
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作者 岳俊杰 戴秋云 +3 位作者 王国力 梁龙 俞炜源 黄培堂 《生物技术通讯》 CAS 2002年第4期281-285,共5页
电压门控N-型钙离子通道是与神经元中释放的神经信号传递有关的跨细胞膜的特殊蛋白质分子。它由好几个蛋白质亚基组成,其中的α1亚基包含了电压敏感器和钙离子的选择性孔道。该亚基的一级结构已经发表,一般认为α1亚基包含4个重复单位(... 电压门控N-型钙离子通道是与神经元中释放的神经信号传递有关的跨细胞膜的特殊蛋白质分子。它由好几个蛋白质亚基组成,其中的α1亚基包含了电压敏感器和钙离子的选择性孔道。该亚基的一级结构已经发表,一般认为α1亚基包含4个重复单位(Ⅰ~Ⅳ),每个重复单位包括6段跨膜区(S1~S6)。其中跨膜区S4上有很多正电荷,被认为是通道的电压敏感器。S5和S6之间的连接区(P区)被认为是形成通道的门孔的部分。N-型钙离子通道能够被一些ω-芋螺毒素特异性地阻断,这些ω-芋螺毒素的三维结构已经由二维核磁共振方法测定。尽管还没有被证实,但一般认为ω-芋螺毒素占据了通道的孔道。有实验证明,钙离子第三个重复单位的P区(ⅢP区)是通道和芋螺毒素结合的主要部位。在本文中,我们用分子模拟程序模建了ⅢP区的结构。为了对通道的阻断机理有一个清楚的了解,我们利用分子对接程序模拟了ⅢP区和三种芋螺毒素GⅤA、MⅦA和SO3作用的理论模型。在我们的模型中,GⅥA与钙通道的作用方式可能与MⅦA不同,而MⅦA和SO3与钙通道的作用方式可能相同。我们还讨论了这些芋螺毒素中的关键残基的作用。 展开更多
关键词 芋螺毒素 钙离子通道 相互作用 计算机模拟
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μ-芋螺毒素及其类似物的定量构效关系研究 被引量:1
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作者 丁晓琴 陈常英 +4 位作者 李玉林 陈冀胜 罗宇 来鲁华 徐筱杰 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期485-490,共6页
μ-芋螺毒素是肌肉型钠离子通道的专一性阻断剂,本文主要采用PLS(PartialLeastSquare)多元数学分析方法对μ-芋螺毒素及其17个类似物进行了定量构效关系研究,建立了QSAR模型,其模型的交叉验证值R2=0.813,Y实验值与Y预测值的相... μ-芋螺毒素是肌肉型钠离子通道的专一性阻断剂,本文主要采用PLS(PartialLeastSquare)多元数学分析方法对μ-芋螺毒素及其17个类似物进行了定量构效关系研究,建立了QSAR模型,其模型的交叉验证值R2=0.813,Y实验值与Y预测值的相关系数0.903.计算结果表明,对分子活性影响比较大的是13位精氨酸残基和分子中的电荷变化,增加分子的正电荷,将提高分子的活性,其次是19,2,12,9,和17位氨基酸残基. 展开更多
关键词 μ-芋螺毒素 PLS QSAR 钠离子通道 多肽
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