芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激损伤的保护作用

背景:间充质干细胞移植治疗脊髓损伤有一定效果,但仍存在局部氧化应激环境导致移植细胞存活率低、细胞移植效率不佳等问题。目的:探究芒果苷在氧化应激状态下对骨髓间充质干细胞的保护作用。方法:取第3代大鼠骨髓间充质干细胞,按浓度梯度0,20,40,80,160μmol/L加入芒果苷孵育2 h,然后加入含400μmol/L H_(2)O_(2)的无血清L-DMEM培养基及相应浓度的芒果苷继续培养12 h及24 h,以常规培养的大鼠骨髓间充质干细胞为正常对照组。MTT法检测各组细胞存活情况,按照试剂盒操作方法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶、丙二醛及过氧化氢酶水平。结果与结论:与正常对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞的存活能力显著降低(P<0.01),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶水平显著降低(P<0.01),丙二醛水平显著升高(P<0.01);与H_(2)O_(2)组相比,芒果苷组细胞的存活能力显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶水平显著升高(P<0.01),丙二醛水平显著降低(P<0.01)。芒果苷在20μmol/L浓度以上表现出浓度依赖性的抗氧化应激保护活性,且在160μmol/L以下无细胞毒性。结果表明,抗氧化剂芒果苷可增加骨髓间充质干细胞的抗氧化活性,为骨髓间充质干细胞移植提供一种新的预处理策略。

芒果苷通过调节miRNA-483-3p减轻良性前列腺增生腺体纤维化

目的研究芒果苷对良性前列腺增生(BPH)腺体纤维化的改善作用和调节微小RNA(miRNA)-483-3p的作用机制。方法雄性小鼠随机分为5组:正常对照组、BPH模型对照组、非那雄胺组、芒果苷组和芒果苷+miRNA-483-3p拮抗剂组。通过摘除睾丸和皮下注射丙酸睾酮建立BPH模型。30 d后通过前列腺组织切片行masson和天狼猩红染色,以及检测组织中羟脯氨酸含量评价胶原沉积,实时荧光定量PCR检测前列腺转化生长因子-β1(TGF-β1)、丝裂原活化蛋白激酶2(MK2)和丝裂原活化蛋白激酶6(MKK6)的mRNA水平以及miRNA-483-3p的水平,Western blotting检测前列腺TGF-β1、MK2、磷酸化MK2(p-MK2)、MKK6和磷酸化MKK6(p-MKK6)的蛋白水平,并采用荧光素酶报告评估miRNA-483-3p与MK2的靶向结合能力。结果与正常对照组比较,BPH模型对照组小鼠的前列腺胶原沉积明显,且TGF-β1、MK2和MKK6的mRNA水平,以及TGF-β1、p-MK2和p-MKK6的蛋白水平均显著性升高(P<0.01),而miRNA-483-3p水平显著性下降(P<0.01)。与BPH模型对照组比较,芒果苷组能够上调前列腺miRNA-483-3p的水平,降低TGF-β1、MK2和MKK6的mRNA水平,以及TGF-β1、p-MK2和p-MKK6的蛋白水平,减轻胶原沉积。与芒果苷组比较,联合使用芒果苷和miRNA-483-3p拮抗组显著性降低miRNA-483-3p水平,升高TGF-β1、MK2和MKK6的mRNA水平,以及TGF-β1、p-MK2和p-MKK6的蛋白水平(P<0.01)。荧光素酶报告显示miRNA-483-3p能够靶向结合MK2。结论芒果苷能够通过调节miRNA-483-3p,抑制MK2减轻前列腺纤维化。

芒果苷的药效作用研究进展

芒果苷是一种天然存在的C-葡萄糖基黄酮,是有效的药用化合物,可以从多种植物中分离提取。研究表明,芒果苷具有治疗糖尿病、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、治疗眼部疾病、神经系统保护、肾脏保护、改善心血管疾病等作用。其具有众多的生物活性,对预防和治疗多种疾病有巨大潜力。本文对近年来芒果苷的药效学研究进展及其作用机制进行综述,以期为芒果苷的进一步研究和利用提供科学依据。

超声辅助提取芒果核中芒果苷的工艺优化

本研究旨在探究超声辅助提取芒果核中芒果苷的工艺。通过单因素实验和Box-Behnken响应面设计,探究料液比、乙醇浓度、超声温度、超声时间和超声功率5个因素对芒果苷提取率的影响。结果显示,最佳提取参数为乙醇浓度为75%,料液比为1:50 g/mL,超声温度为45℃,超声时间为40 min和超声功率为288 W。在此最优工艺条件下,芒果苷得率为4.78%,预测值为4.75%。该研究可为芒果核中芒果苷的提取提供理论参考依据。

芒果叶中芒果苷抗氧化及抗紫外能力的研究

本文针对芒果叶中的芒果苷进行了体外抗氧化和抗紫外线辐射作用的研究。抗氧化结果显示,芒果苷能有效清除DPPH自由基和ABTS+自由基,并展现出优异的总抗氧化能力。抗紫外线辐射作用结果表明,芒果苷具有一定的紫外线吸收能力。

芒果苷抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及炎性因子的表达

背景:芒果苷是一种从芒果叶、树皮、根中提取的双苯吡酮类化合物,前期研究表明芒果苷可以通过NF-κB、JAK/STAT等转录因子的活化发挥抗全身性炎症作用。目的:探讨芒果苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synovial cells,RA-FLS)增殖、迁移和炎症因子表达的影响及机制。方法:RA-FLS分为空白组、R848(TLR7/8激动剂)刺激组、芒果苷低、中、高浓度组(2,4,8μg/mL)、阳性对照组(Cu-CPT8,TLR8通路抑制剂)。CCK-8法检测不同质量浓度芒果苷对RA-FLS毒性的影响并筛选最终细胞用药质量浓度,细胞克隆形成实验检测RA-FLS的增殖能力,划痕实验及Transwell迁移实验检测RA-FLS的迁移能力,qRT-PCR检测RA-FLS中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果与结论:①与空白组比较,2-10μg/mL的芒果苷干预组对RA-FLS活力有抑制趋势,但差异不显著(P>0.05),说明对RA-FLS的毒性影响很小;②与R848刺激组比较,芒果苷低、中、高浓度组RA-FLS克隆数、划痕愈合率及迁移细胞数均降低(P<0.01);芒果苷中浓度和高浓度组白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子αmRNA的表达降低(P<0.01);③与R848刺激组比较,阳性对照组细胞克隆数、划痕愈合率及迁移细胞数以及白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);白细胞介素1βmRNA表达水平无明显差异;④结果表明,芒果苷可能通过TLR7/8信号通路抑制RA-FLS增殖、迁移以及炎症因子表达发挥抗类风湿关节炎的作用。

基于基因表达综合数据库芯片挖掘结合网络药理学与分子对接探讨芒果苷治疗口腔黏膜下纤维化的机制研究

目的基于基因表达综合(GEO)数据库芯片挖掘、网络药理学及分子对接技术探讨芒果苷(MF)治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的核心作用靶标及潜在作用机制。方法基于GEO芯片挖掘OSF的潜在治疗靶点,利用数据库预测MF潜在作用靶标和收集OSF疾病靶标,使用EVenn平台绘制维恩图,STRING数据库绘制蛋白质互作(PPI)网络,DAVID平台进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,Cytoscape 3.10.1软件绘制药物—靶标—通路—疾病网络图,AutoDocktools 1.5.6软件进行分子对接分析及可视化。结果从多种数据库挖掘得到MF潜在靶标356个,OSF疾病靶标360个,选取PPI网络中排名前15个关键靶蛋白,GO功能及KEGG通路富集分析结果显示,MF治疗OSF主要涉及高级糖基化终末产物-受体(AGE-RAGE)、表皮生长因子受体(EGFR)等信号通路。分子对接显示,MF与丝氨酸蛋白激酶(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)等核心靶点有较佳结合活性。结论MF可能通过多靶点、多途径的方式对OSF发挥治疗作用。

基于Nrf2-GPX4铁死亡途径探讨芒果苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的:探讨芒果苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护机制。方法:60只无特定病原体(SPF)级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、MIRI组、芒果苷低剂量组、芒果苷高剂量组、芒果苷+核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组,每组12只。除假手术组外,其余组大鼠通过结扎左冠状动脉前降支建立MIRI模型。再灌注4 h后,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清肌钙蛋白I(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)分析心肌细胞凋亡情况;二氢乙锭(DHE)荧光法检测心肌组织活性氧(ROS)水平;比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe^(2+))含量;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织Nrf2、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)的基因和蛋白表达。结果:与假手术组比较,MIRI组大鼠血清cTnI、CK和LDH水平,心肌细胞凋亡率,ROS、MDA、Fe^(2+)含量,ACSL4 mRNA和蛋白水平升高;SOD活性和GSH含量,Nrf2、GPX4、FTH1 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05);心肌细胞肿胀,心肌纤维排列紊乱,大量炎性细胞浸润。与MIRI组比较,芒果苷低剂量组、芒果苷高剂量组血清cTnI、CK和LDH水平,心肌细胞凋亡率,ROS、MDA和Fe^(2+)含量,ACSL4 mRNA和蛋白水平降低;SOD活性和GSH含量,Nrf2、GPX4、FTH1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);心肌细胞水肿减轻,少量心肌纤维断裂和炎性细胞浸润。使用Nrf2抑制剂ML385抑制Nrf2的核易位可明显阻断芒果苷对心肌铁死亡的抑制作用(P<0.05)。结论:芒果苷可通过激活Nrf2-GPX4轴抑制铁死亡对MIRI发挥保护作用。

芒果苷通过调控Wnt/β-catenin信号通路对大鼠髋部骨折愈合的作用

目的:探讨芒果苷(MGF)通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对大鼠髋部骨折愈合的作用,阐明其相关作用机制。方法:建立SD大鼠髋部骨折模型,造模成功后将大鼠分为模型组、MGF组和MGF+XAV-939(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂)组,另设假手术组,每组15只。术后第1天各组大鼠按分组方法给予MGF或XAV-939干预,每2 d给药1次,共14次。采用Lane-Sandhu X射线评分法评估术后第2和4周各组大鼠骨折愈合情况,显微CT(Micro CT)检测各组大鼠骨显微结构参数骨体积(BV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁厚度(Tb.Th),HE染色观察各组大鼠骨痂组织形态表现,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中成骨标志物骨碱性磷酸酶(BALP)和Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)及破骨标志物抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和Ⅰ型胶原羧基末端肽(CTX)水平,Western blotting法检测各组大鼠骨痂组织中β-catenin、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠骨折后第2和4周骨折线清晰,骨折部位存在较多纤维组织,未发现骨性骨痂,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均降低(P<0.05),血清中BALP水平降低(P<0.05),PINP、TRACP-5b和CTX水平升高(P<0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,MGF组大鼠骨折后第2周新生骨痂明显增多,第4周骨折线基本消失,骨折愈合较快,骨折部位大量纤维组织被骨组织替代,骨性骨痂量明显增多,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均升高(P<0.05),血清中BALP水平升高(P<0.05),PINP、TRACP-5b和CTX水平降低(P<0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。与MGF组比较,MGF+XAV-939组大鼠骨折后第2和4周骨折部位仅有少量新生骨痂,髓腔未形成,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均降低(P<0.05),血清中BALP水平降低(P<0.05),PINP、TRACP-5b和CTX水平升高(P<0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:MGF可促进大鼠髋部骨折愈合,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

芒果苷抑制脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的机制研究

【目的】探究芒果苷抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症反应作用机制,为筛选治疗脓毒症的候选药物提供科学依据。【方法】选取小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)为研究对象,通过CCK-8试剂检测芒果苷对MH-S细胞的毒性作用,根据细胞毒性试验确定芒果苷的作用浓度为100μg/mL,以正常培养的MH-S细胞为对照,使用10μg/mL LPS处理24 h构建体外炎症模型(LPS组),再以100μg/mL芒果苷干预24 h(干预组);通过ELISA检测MH-S细胞上清液中的炎症因子(IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18)含量,采用实时荧光定量PCR检测IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因表达情况,并以Western blotting和免疫荧光法检测TLR4/NF-κB信号通路的变化。【结果】芒果苷浓度低于287.60μg/mL时,对MH-S细胞无明显的毒性作用。与对照组相比,LPS组MH-S细胞中的IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因相对表达量极显著升高(P<0.01,下同),细胞上清液中的IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18含量显著(P<0.05,下同)或极显著升高;但以芒果苷干预后,IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因的相对表达量及其分泌水平均显著降低,表明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞的炎症反应。此外,LPS组MH-S细胞中的NF-κB基因相对表达量与蛋白表达水平极显著高于对照组,经芒果苷干预后NF-κB基因相对表达量与蛋白表达水平均显著下降,表明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞中核转录因子的表达;LPS组MH-S细胞表面的TLR4表达水平明显升高,但经芒果苷干预后MH-S细胞表面的TLR4表达水平明显降低,说明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞表面TLR4的表达。【结论】芒果苷对MH-S细胞的增殖无明显抑制作用,其半数增殖抑制率(IC50)为287.60μg/mL;芒果苷对LPS诱导的MH-S细胞炎症反应具有良好的保护作用,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活而减少炎症因子的分泌有关。

芒果苷对心肌细胞损伤的保护作用及对NFATc4表达的影响

目的研究芒果苷对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,以及对活化T细胞核因子c4(NFATc4)表达的影响。方法体外培养心肌H9c2细胞,分为空白组、H_(2)O_(2)组和芒果苷50、100、150μmol/L组,芒果苷组细胞在经不同浓度芒果苷作用12 h后,再与H_(2)O_(2)组一同经H_(2)O_(2)(200μmol/L)刺激12 h,检测各组细胞的相对存活率,细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平,细胞中活性氧(ROS)水平,以及细胞中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)]、核蛋白NFATc4的表达情况。转染NFATc4干扰序列,考察NFATc4对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞中氧化应激指标和凋亡相关蛋白的影响。结果与空白组比较,H_(2)O_(2)组细胞的相对存活率,SOD、CAT水平,Bcl-2的相对表达量均显著降低;MDA、ROS水平,Bax、cleaved caspase-3和核蛋白NFATc4的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与H_(2)O_(2)组比较,芒果苷100、150μmol/L组细胞的上述指标均得以显著逆转(P<0.05)。转染NFATc4干扰序列后,核蛋白NFATc4的表达显著下调,MDA、ROS水平和Bax、cleaved caspase-3蛋白的表达均较H_(2)O_(2)组显著降低/下调,SOD、CAT水平和Bcl-2蛋白的表达均较H_(2)O_(2)组显著升高/上调(P<0.05)。结论芒果苷能够减轻H_(2)O_(2)诱导的H9c2细胞氧化应激,减少细胞凋亡,抑制NFATc4蛋白入核,进而缓解心肌细胞损伤;降低NFATc4蛋白的核内水平与减轻H_(2)O_(2)诱导的氧化应激、细胞凋亡有关。

芒果苷对急性血瘀大鼠血液流变性的影响

目的研究芒果苷对急性血瘀大鼠血液流变性的影响。方法大鼠随机分为正常组(0.5%DMSO)、模型组(0.5%DMSO)、阿司匹林组(9 mg/kg)、复方丹参滴丸组(73 mg/kg)和芒果苷低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg),每组8只,灌胃给予相应药物7 d。给药第6天,除正常组外,其余各组大鼠皮下注射0.8 mL/kg 0.1%盐酸肾上腺素注射液,2 h后将大鼠放置于0~4℃冷水中5 min,2 h后再次注射盐酸肾上腺素建立大鼠急性血瘀模型。于末次(第7天)给药0.5 h后腹主动脉取血,分别测定血液流变学、血栓素B_(2)(TXB_(2))、6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF_(1α))、内皮素-1(ET-1)水平和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,通过HE染色观察芒果苷对血瘀大鼠心脏、肺组织病理的影响。结果与模型组比较,芒果苷可降低急性血瘀大鼠全血粘度、血浆粘度、全血还原粘度、血沉、血沉方程K值、血小板数、TXB_(2)和ET-1水平(P<0.05,P<0.01),升高血小板压积、6-keto-PGF_(1α)水平和eNOs活性(P<0.05,P<0.01);HE染色显示芒果苷能减轻心肌细胞加宽、肺间质水肿程度。结论芒果苷对血液流变性及心脏、肺组织损伤有明显的改善作用,其可能与降低急性血瘀大鼠血清TXB_(2)和ET-1水平,升高6-keto-PGF_(1α)水平和eNOs活性有关。

芒果苷通过抑制炎症、肺泡化阻滞和肺微血管受损来减轻高氧诱导的新生小鼠肺损伤

目的:研究芒果苷对高氧诱导的支气管肺发育不良(BPD)新生小鼠中肺损伤的治疗作用。方法:通过高氧暴露构建新生小鼠BPD模型,并通过ELISA法检测肺组织纤维蛋白的沉积水平以确定最佳芒果苷浓度。将新生小鼠随机分为对照组、芒果苷组、高氧组和高氧+芒果苷组,每组10只小鼠。芒果苷组和高氧+芒果苷组新生小鼠分别每天灌胃给予50 mg/kg芒果苷,连续14 d。第15天,新生小鼠称重,麻醉后处死,取肺脏并称重,并计算肺脏/体重比。通过HE染色评估各组肺组织的形态学改变情况;通过Ly-6B.2和CD68免疫组化标记法对各组肺组织中嗜中性粒细胞和巨噬细胞计数;通过ELISA法检测各组肺组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ含量变化;通过von Willebrand因子免疫荧光标记法对肺组织中微血管计数;通过Western blot检测各组肺组织中NF-κB信号相关蛋白表达情况。结果:芒果苷在0~50 mg/kg剂量范围内可呈剂量依赖地降低高氧导致的新生小鼠肺部纤维蛋白沉积,其中50 mg/kg剂量时效果最显著(P<0.01)。与高氧组比较,高氧+芒果苷组小鼠肺/体重比显著降低(P<0.01),肺组织中中性粒细胞和巨噬细胞数量以及炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ的水平显著降低(P<0.05),辐射状肺泡数和微血管密度显著增加(P<0.05),p-NF-κB p65和p-IκBα的表达显著降低(P<0.01)。结论:芒果苷可通过改善新生小鼠肺泡结构异常、抑制炎症发生并促进血管生成,从而减轻高氧环境引起肺损伤。

芒果苷对CCI大鼠神经病理性疼痛的改善作用

目的:探究芒果苷对慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用及机制。方法:采用成年SpragueDawley大鼠构建CCI模型,以模拟临床神经病理性疼痛。将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CCI组、CCI+Man组[手术后立即用40 mg/(kg·d)芒果苷灌胃,连续治疗17 d],10只/组。术后连续17 d观察缩爪机械阈值(PWMT)和缩爪热潜伏期(PWTL);术后17 d,处死大鼠,ELISA检测脊髓中细胞因子IL-1β、IL-6及趋化因子CCL2、CCR2表达水平;免疫荧光法检测脊髓神经元中Cleaved caspase-3和pJNK蛋白表达水平;免疫组化法和Western blot分析脊髓中c-Fos蛋白表达水平。结果:与Sham组相比,CCI组大鼠术后第1~17天的PWMT和PWTL显著降低,脊髓中促炎因子IL-6、IL-1β,趋化因子CCL2、CCR2及c-Fos蛋白水平明显升高(P<0.001);脊髓神经元细胞中Cleaved caspase-3和pJNK蛋白水平明显升高(P<0.001)。经芒果苷治疗后,CCI组大鼠术后第1~17天的PWMT和PWTL显著升高,脊髓中促炎因子IL-6、IL-1β,趋化因子CCL2、CCR2及c-Fos蛋白水平明显降低(P<0.01);脊髓神经元细胞中Cleaved caspase-3和pJNK蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:芒果苷对CCI大鼠的神经病理性疼痛具有改善作用,其可能与降低脊髓炎症、凋亡、c-Fos及pJNK蛋白表达有关。

芒果苷通过MMP9调控巨噬细胞M2极化对胰腺癌的作用及其机制研究

目的:探讨芒果苷通过MMP9调控M2型巨噬细胞极化治疗胰腺癌的作用及机制。方法:在体内水平绘制肿瘤生长曲线,免疫组化染色评价芒果苷对胰腺癌的治疗效果;免疫荧光、ELISA检测芒果苷对胰腺癌中M2型巨噬细胞表达的影响;免疫荧光、ELISA、Western blot及qRT-PCR检测芒果苷对MMP9以及下游M2型巨噬细胞极化相关信号通路表达的影响。在体外水平利用MTT检测M2型极化巨噬细胞对胰腺癌的作用及芒果苷对胰腺癌的治疗效果;ELISA检测芒果苷对M2型极化巨噬细胞的影响;免疫荧光及Western blot检测芒果苷对MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路表达的影响。结果:小鼠胰腺癌模型中,芒果苷可抑制胰腺癌生长,且可抑制胰腺癌中M2极化巨噬细胞表达;同时芒果苷可抑制胰腺癌中MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路表达。在M2型极化巨噬细胞-胰腺癌细胞共培养模型中,芒果苷抑制胰腺癌细胞增殖,抑制巨噬细胞M2型极化,同时抑制MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路表达。结论:芒果苷可通过抑制MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路抑制巨噬细胞M2极化治疗胰腺癌。

红花龙胆药材的UPLC指纹图谱研究与芒果苷含量测定

目的为红花龙胆药材的质量控制提供参考依据。方法以52批红花龙胆药材为研究对象,采用超高效液相色谱(UPLC)法,以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》对52批药材样品进行相似度评价,并测定药材中芒果苷含量,再进行化学计量学分析[聚类分析、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)]。结果建立了52批红花龙胆药材样品的UPLC指纹图谱,标定了17个共有峰,指认了其中6个,分别为马钱苷酸(1号峰)、新芒果苷(3号峰)、獐牙菜苦苷(5号峰)、当药苷(6号峰)、芒果苷(7号峰)与异荭草苷(9号峰)。52批药材样品的相似度均大于0.9;聚类分析结果显示,S1~S46、S48~S52聚为一类,S47单独为一类;PCA结果显示,前6个主成分的累计方差贡献率为82.928%;OPLS-DA结果显示,獐牙菜苦苷、芒果苷以及4、14、15、16号峰所代表的化学成分是影响红花龙胆药材质量差异的主要标志性成分。52批药材样品中芒果苷的含量在18.2~101.0 mg/g之间,大多符合2020年版《中国药典》规定。结论所建立的UPLC指纹图谱和化学计量学分析方法结合芒果苷含量测定方法,能较为全面地评价红花龙胆药材的质量。

芒果苷改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱的作用及机制研究

为探讨芒果苷改善大鼠2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)糖脂代谢紊乱的作用及潜在机制,将T2DM大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍组(100 mg/kg)及芒果苷低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg),另设正常对照组,10只/组;灌胃给药,1次/d,持续8周。评价空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,HOMA-IR)及血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)等指标,并检测肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,Glut4)信号通路相关m RNA和蛋白表达。结果发现,芒果苷可以改善T2DM大鼠毛色、活动及精神等一般状态,减缓体重下降趋势;与模型对照组比较,经芒果苷治疗8周后,各治疗组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR及血清FFA、TG、TC含量均显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01);各治疗组大鼠肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力显著或极显著高于模型对照组(P<0.05,P<0.01),而MDA含量极显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,芒果苷低、中、高剂量组大鼠肝组织IRS-1 mRNA表达无显著差异(P>0.05),Akt、Glut4 mRNA及p-IRS-1(Tyr)、Akt、Glut4蛋白表达显著或极显著增加(P<0.05,P<0.01),而p-IRS-1(Ser)蛋白表达显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01)。上述结果表明,芒果苷具有改善T2DM大鼠糖脂代谢紊乱的作用,该作用与抗氧化应激及调节IRS-1/Akt/Glut4信号通路有关。

芒果苷对亚硒酸钠所致大鼠白内障的影响

目的探讨芒果苷对亚硒酸钠所致大鼠白内障的改善作用。方法将新生9 d龄的40只Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组(CG)、模型组(MG)、芒果苷低剂量组(L-MAN)、芒果苷高剂量组(H-MAN),每组10只。MG、L-MAN、H-MAN组通过一次性皮下注射2.46 mg/kg亚硝酸钠建立大鼠白内障模型,CG组皮下注射等量0.9%氯化钠注射液。L-MAN、H-MAN组大鼠在造模1 h后,分别进行连续7 d的10、40 mg/kg芒果苷腹腔注射,CG、MG组仅给予等量0.9%氯化钠注射液。21 d后,对大鼠晶状体进行形态学检查,根据晶状体混浊程度进行分级评分,检测大鼠晶状体中钙离子浓度、晶状体总水溶性蛋白、丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)水平。结果(1)晶状体混浊评分:与CG组比较,MG组晶状体混浊评分升高(t=22.136,P=0.000);与MG组比较,L-MAN、H-MAN大鼠晶状体混浊评分降低(t_(L-MAN)=4.833,t_(H-MAN)=7.691,均P=0.000),差异均有统计学意义。(2)晶状体钙离子浓度:与CG组比较,MG组大鼠晶状体钙离子浓度升高(t=22.046,P=0.000);与MG组比较,L-MAN、H-MAN组大鼠晶状体钙离子浓度降低(t_(L-MAN)=13.706,t_(H-MAN)=16.982,均P=0.000),差异均有统计学意义。(3)晶状体总水溶性蛋白:与CG组比较,MG组的大鼠晶状体总水溶性蛋白水平降低(t=8.741,P=0.000);MG组比较,L-MAN、H-MAN组大鼠晶状体总水溶性蛋白水平升高(t_(L-MAN)=3.061,P=0.007;t_(H-MAN)=9.742,P=0.000),差异均有统计学意义。(4)氧化应激:与CG组比较,MG组大鼠晶状体MDA水平升高(t=31.917,P=0.000),GSH水平降低(t=27.540,P=0.000);与MG组比较,L-MAN、H-MAN组大鼠晶状体MDA水平降低(t_(L-MAN)=11.988,t_(H-MAN)=20.427,均P=0.000),GSH升高(t_(L-MAN)=9.229,t_(H-MAN)=33.772,均P=0.000),差异均有统计学意义。结论芒果苷可能通过维持大鼠晶状体内钙离子稳态,抑制亚硒酸钠引起的晶状体内总水溶性蛋白减少,减轻大鼠白内障。

芒果苷通过Nrf-2/HO-1/HMGB1/NF-κB通路减轻链脲佐菌素诱导的大鼠视网膜病变的机制探讨

目的:探讨芒果苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠视网膜病变的影响。方法:采用1%STZ腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。采用酶联免疫吸附法检测血清和视网膜组织细胞因子水平,并采用试剂盒测量口服葡萄糖耐量(OGTT),以及血清和视网膜组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。采用苏木精伊红染色法(HE)染色评价视网膜组织病理变化。Western blot检测糖尿病大鼠视网膜组织核因子相关因子2(Nrf-2)及其下游信号通路的变化。结果:芒果苷可显著改善糖尿病大鼠OGTT,增加血清和视网膜组织中的SOD,降低MDA水平。芒果苷还可显著降低糖尿病大鼠的血清和视网膜组织细胞因子水平,调节视网膜组织中Nrf-2、血红素加氧酶-1(HO-1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达。结论:芒果苷可能通过Nrf-2/HO-1/HMGB1/NF-κB通路改善STZ诱导的大鼠视网膜组织视网膜病变、氧化应激和炎性反应。

芒果苷作用于COX-2和5-LOX双靶点改善良性前列腺增生炎症

目的研究芒果苷对良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)炎症的治疗作用及其潜在的作用机制。方法Western Blot和q-PCR技术检测大鼠前列腺组织中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在蛋白水平上和mRNA水平上的表达,并用计算机分子对接技术加以佐证。此外,对前列腺湿质量(prostate weight,PW)、前列腺指数(prostate index,PI)、前列腺组织学形态进行考察。结果Western Blot和q-PCR结果表明,芒果苷可抑制大鼠前列腺组织中COX-2和5-LOX在蛋白水平和mRNA水平上的表达,分子对接技术结果表明芒果苷与COX-2和5-LOX受体模型均有结合能力。同时,PW、PI及组织病理学切片结果均表明芒果苷可明显改善BPH炎症。结论芒果苷同时作用于COX-2和5-LOX双靶点,通过下调COX-2和5-LOX的表达,从而改善BPH炎症。