基于网络药理学与GEO差异基因芯片数据探讨芦丁治疗脊髓损伤的作用机制

为了探究芦丁治疗脊髓损伤的作用机制,基于网络药理学和GEO差异基因芯片数据分析,结合体内实验,筛选芦丁对脊髓损伤的作用靶点.首先通过TCMSP、Swiss Target Prediction和SuperPred数据库获得芦丁的作用靶点,同时采用GEO差异基因、CTD、OMIM、PharmGkb疾病数据库获取脊髓损伤的疾病靶点;然后应用Cytoscape软件采用蛋白互作的方式筛选芦丁治疗脊髓损伤的核心靶点,并采用R语言对核心靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析;最后采用Rutgers MASCIS脊髓损伤撞击器建立大鼠急性脊髓损伤模型,芦丁干预3 d后采用BBB运动评分法对大鼠后肢运动功能进行评价,采用酶联免疫吸附测定法检测脊髓中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和NF-κB的表达水平以及ROS和MDA含量.结果发现:(1)芦丁共有56个对应的蛋白靶点,脊髓损伤筛选到4 624个疾病靶点,合并后得到5个核心靶点,即CASP3、ESR1、GSK3B、IL-6、MTOR;(2) GO功能主要集中在对氧化应激的反应、活性氧代谢过程、NF-κB结合等,KEGG通路分析显示,芦丁治疗脊髓损伤相关的通路包括PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路、HIF-1信号通路等;(3)分子对接实验和分子动力学模拟表明,芦丁与5个核心靶点均有良好且稳定的结合;(4)体内实验结果显示,脊髓损伤后使用芦丁进行药物干预处理可以降低脊髓的含水量,减少炎性因子和氧化应激因子的产生.上述结果证实,芦丁可以通过多个靶点以及多条通路在治疗脊髓损伤中发挥抗炎和抗氧化作用.

单宁和芦丁氧化前、后对河鲀鱼皮明胶特性的影响

为改善鱼皮明胶性能,通过添加不同比例的单宁、芦丁及其氧化态(0%,0.5%,1%,2%,4%),探究其对河鲀鱼皮明胶性质、颜色、水分分布、蛋白结构和蛋白条带的效应。结果表明,添加单宁、氧化单宁和芦丁,显著提高了河鲀鱼皮明胶强度、凝胶和融胶温度(P<0.05),而氧化芦丁的作用不显著。单宁酸、氧化单宁酸对河鲀鱼皮明胶的颜色影响不显著,而芦丁、氧化芦丁有显著影响,尤其是氧化芦丁,导致胶冻样品的L*值显著降低(6.07%~8.26%),提高了a*值(88.89%~93.88%)和b*值(85.94%~91.67%)。低场核磁共振结果显示,加入两种多酚及其氧化态,缩短了T2弛豫时间,促进了明胶与水分子的结合。冷场电镜显示,添加单宁、芦丁及其氧化态,有利于形成致密的凝胶网络结构。SDS-PAGE结果显示,明胶的蛋白条带无明显变化,多酚与明胶分子共价交联不显著,主要通过非共价方式相互作用。红外光谱显示,酰胺-A带和酰胺-I带均向蓝移,表明形成氢键数量增加。综合分析,单宁、芦丁及其氧化态可能通过非共价方式(氢键)与明胶分子结合,从而提高河鲀鱼皮明胶凝胶特性。本研究为提升河鲀鱼皮明胶性能贡献了一定依据。

聚芦丁合成实验在高分子材料课程中的教学实践

本文尝试将聚芦丁合成实验与《高分子材料》专业课教学进行有机融合,旨在培养学生对高分子合成有一个全面的认识,提高学生的学科素养。

基于网络药理学探讨千斤拨-芦丁对乳腺发育作用分子机制

采用网络药理学探讨千斤拔和芦丁对乳腺发育的分子成分解析。方法 借助TCMIP、BATMAN-TCM数据库筛选千斤拔和芦丁相关活性成分及作用靶点;OMIM、Pharmg Kb、Gene Cards数据库筛选乳腺发育相关靶点;STRING 数据库构建药物成分靶点与疾病靶点PPI网络;在 Cytoscape 软件中选择Network Analysis 插件对PPI 网络进行拓扑分析,筛选核心节点;Venny 软件获得千斤拨-芦丁活性成分靶点、乳房发育靶点和核心节点的交集靶点,进一步拓扑分析筛选得到关键成分和关键靶点;DAVID 数据库进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。结果 获得千斤拨-芦丁与乳腺发育相交靶点126个,在MCODE聚类分析中获得7个核心基因和 7 个基因簇,6种关键活性成分,GO富集分析得到175项生物过程,66项分子功能,48项细胞组成,KEGG通路富集后得到97条相关信号通路。结论 初步判断千斤拨-芦丁以多组分、多靶点、多通路干预乳腺发育的分子机制,为进一步药效学研究奠定基础。

高精料日粮添加芦丁对奶牛血清生化、免疫、抗氧化指标及瘤胃发酵参数的影响

试验旨在研究高精料日粮中添加芦丁对奶牛血清生化指标、免疫指标、抗氧化指标及瘤胃发酵参数的影响。采用单因素完全随机设计,将12头健康和泌乳状况相近的荷斯坦泌乳中期奶牛随机分为2组,每组6头。饲喂精粗比为60∶40的高精料日粮,一组诱导奶牛亚急性瘤胃酸中毒(SARA组),另一组在SARA组基础上添加1.8 g/d芦丁(芦丁组)。试验期为75 d,其中预试期15 d,正试期60 d。于正试期第60天晨饲前采集血液和瘤胃液样本,测定血清生化、抗氧化、免疫指标和瘤胃发酵参数。结果表明:与SARA组相比,芦丁组奶牛血清生化指标没有显著变化(P>0.05),血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著提高(P<0.05),血清总抗氧化能力(T-AOC)有提高趋势(0.05<P<0.10),丙二醛(MDA)含量降低(P>0.05),血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)含量显著提高(P<0.05)。与SARA组相比,芦丁组奶牛瘤胃乳酸(LD)含量降低,总挥发性脂肪酸(TVFA)含量和pH提高(P>0.05)。综上所述,高精料日粮中添加芦丁能提高瘤胃pH,增强机体抗氧化、免疫能力,在一定程度能缓解SARA对奶牛机体代谢损伤。

饲粮添加不同水平芦丁对肉鸡肉品质和抗氧化功能的影响

[目的]本试验旨在研究饲粮添加不同水平芦丁对肉鸡肌肉品质和抗氧化功能的影响。[方法]试验选取1日龄健康且体重相近的雄性肉鸡256只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复8只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加250、500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁。试验期第42天,每个重复取1只接近平均体重的肉鸡屠宰取样测定肉鸡肉品质、水分分布、脂肪酸含量、抗氧化等相关指标。[结果]与对照组相比,饲粮中添加250、500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁显著降低了胸肌宰后24和48 h的滴水损失(P_(T)<0.05),添加250与500 mg·kg^(-1)芦丁分别降低胸肌的蒸煮损失与剪切力值(P_(T)<0.05),添加500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了胸肌pH_(24 h)值(P_(T)<0.05),添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著降低了肉鸡胸肌中自由水的弛豫时间(T_(22))值(P_(T)<0.05);饲粮中芦丁的添加量与pH_(24 h)值、24和48 h的滴水损失呈线性或二次相关(P_(T)<0.05)。在脂肪酸含量方面,饲粮中添加250和500 mg·kg^(-1)芦丁显著增加了肉鸡胸肌中硬脂酸含量(P_(T)<0.05),添加500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉鸡胸肌中花生一烯酸和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量(P_(T)<0.05),同时500 mg·kg^(-1)芦丁组胸肌中棕榈油酸和二十四碳一烯酸含量显著增加(P_(T)<0.05),1 000 mg·kg^(-1)芦丁组胸肌中γ-亚油酸含量显著降低(P_(T)<0.05)。在抗氧化能力方面,饲粮中添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著降低了胸肌中MDA含量(P_(T)<0.05),提高了T-SOD活性(P_(T)<0.05),并显著增加胸肌中Nrf2和SOD mRNA的表达量(P_(T)<0.05),250 mg·kg^(-1)芦丁能够显著提高SOD mRNA的表达量(P_(T)<0.05)。饲粮中芦丁的添加量与MDA含量、Nrf2和GSH-Px mRNA表达量呈线性或二次相关(P<0.05)。[结论]肉鸡饲粮中添加芦丁可通过增强肌肉的保水性,提高胸肌pH_(24 h)值并调节肉鸡胸肌中脂肪酸比例从而提高了肉鸡肉品质,这与芦丁激活肌肉中Nrf2信号通路并增强其抗氧化能力有关。在本试验条件下,芦丁的适宜添加量为500 mg·kg^(-1)。

饲粮添加芦丁对断奶仔猪回肠形态结构和屏障功能的影响

旨在研究饲粮添加芦丁对断奶仔猪肠道形态结构、黏膜屏障、抗氧化功能、炎症和细胞凋亡等方面的影响。试验选取28日龄健康且体重相近的断奶仔猪16头,随机分为2组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验(芦丁)组在基础饲粮中添加500 mg/kg芦丁,试验期14 d。结果表明:与对照组相比,饲粮添加500 mg/kg芦丁对仔猪回肠形态结构无显著影响(P>0.05),但显著提高了仔猪回肠黏膜中过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),显著提高了B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)以及闭合小环蛋白-1(ZO-1)mRNA的表达量(P<0.05),显著提高了闭合蛋白(Occludin)mRNA和蛋白的表达量(P<0.05),显著降低了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达量(P<0.05)。结果提示:饲粮添加500 mg/kg芦丁可提高断奶仔猪抗氧化能力和肠屏障功能,减少炎症发生和细胞凋亡,这可能是其抑制断奶仔猪腹泻的重要原因之一。

芦丁调控miR-155和HMGB1/RAGE通路对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响

目的:探讨芦丁对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响及其机制。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液灌胃)和芦丁低、中、高剂量组[分别以50、100、150 mg/(kg·d)芦丁灌胃],并取正常大鼠作为对照组(0.9%氯化钠溶液灌胃),每组20只,持续给药12周后,比较各组大鼠视网膜组织中伊凡斯兰渗透量、神经节细胞凋亡和微小RNA(miR)-155、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达水平,以及炎症因子水平。结果:对照组、模型组和芦丁低、中、高剂量组中伊凡斯兰渗透量分别为(1.61±0.31)μg/g、(12.84±1.24)μg/g、(9.85±0.62)μg/g、(6.80±0.53)μg/g、(2.87±0.51)μg/g,神经节细胞凋亡指数分别为(1.09±0.45)%、(30.96±2.50)%、(24.65±2.48)%、(18.61±1.41)%、(8.36±0.54)%,miR-155表达水平分别为(0.38±0.03)、(1.92±0.15)、(1.55±0.12)、(1.09±0.10)、(0.55±0.05),HMGB1 mRNA表达水平分别为(0.26±0.03)、(0.77±0.05)、(0.68±0.04)、(0.57±0.04)、(0.34±0.03),RAGE mRNA表达水平分别为(0.18±0.02)、(0.67±0.04)、(0.58±0.03)、(0.45±0.03)、(0.23±0.02)。模型组和对照组比较,伊凡斯兰渗透量、凋亡指数和miR-155、HMGB1、RAGE mRNA水平均升高(均P<0.05);芦丁低、中、高剂量组中上述指标呈剂量依赖性降低(均P<0.05)。模型组、对照组与芦丁低、中、高剂量组,芦丁各组的炎症因子水平低于模型组(均P<0.05)。结论:芦丁可保护糖尿病大鼠视网膜损伤,延缓视网膜炎症效应,其作用机制可能与抑制miR-155和HMGB1/RAGE通路有关。

改性瓜尔胶/乳清蛋白/芦丁复合膜的制备、表征及其对双孢菇贮藏品质的影响

以改性瓜尔胶和乳清蛋白为原料复合成膜,研究发现当两者质量配比为1∶0.6时,综合复合膜的机械性能、阻隔性能和热稳定性能表现最优,此时膜的拉伸强度为39.92MPa,断裂伸长率为31.13%,热分解温度为147.85℃,通过两者间的复合可有效弥补单体膜的缺陷。另外,扫描电子显微镜和红外光谱的测试结果表明该膜具有光滑、透明的特征,且两者间的相容性好。通过向膜中添加芦丁,制备出改性瓜尔胶/乳清蛋白/芦丁复合膜(G’/W-R),结果表明,芦丁的加入可赋予膜良好的抗氧化性。同时,将复合膜应用于保鲜实验时,发现G’/W-R可有效延缓双孢菇褐变并维持较高的硬度,抑制呼吸速率,呼吸峰值仅为2.8×10^(3)mL/(kg·h),而整体质量损失率仅为对照组的25%。同时该处理有效抑制了过氧化氢、超氧阴离子自由基及丙二醛水平,有利于维持细胞膜的完整性和稳定性;终止自由基链反应,维持过氧化物酶、超氧化物歧化酶以及过氧化氢酶的活性,有效清除菇体中多余的活性氧,延长其保鲜期。

饲粮添加芦丁对肉仔鸡免疫功能和空肠形态、黏膜屏障、抗氧化功能的影响

[目的]前期研究发现饲粮添加250~1000 mg·kg^(-1)芦丁可提高21日龄肉鸡生长性能,本试验进一步研究芦丁对其肠道形态结构、黏膜屏障和抗氧化功能的影响。[方法]试验选取1日龄健康且体重(43±1)g相近的雄性AA肉鸡256只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复8只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加250、500和1000 mg·kg^(-1)芦丁。21日龄时每个重复取1只肉鸡屠宰取样测定肠道屏障功能、免疫炎症、抗氧化等相关指标。[结果]与对照组相比,饲粮添加250 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡脾脏器官指数、空肠黏膜总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC),以及空肠黏膜中闭合小环蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(OCLN)、核因子E2相关因子2(Nrf 2)和SOD mRNA的表达水平,同时显著降低了血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和D-乳酸(D-LA)水平、空肠黏膜TNF-αmRNA的表达水平(P T<0.05);与对照组相比,饲粮添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡法氏囊器官指数、空肠VH/CD值,空肠黏膜T-SOD活性和T-AOC,空肠黏膜中B细胞淋巴瘤基因2(Bcl-2)、ZO-1和Nrf 2 mRNA的表达水平,并显著降低了血清TNF-α水平(P T<0.05);与对照组和250、500 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加1000 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了血清中免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)含量(P T<0.05);与500 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加250 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡脾脏器官指数、血清脂多糖(LPS)水平和OCLN mRNA表达水平,并显著降低了血清D-LA水平(P T<0.05);与1000 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加250 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡脾脏器官指数,同时降低了空肠黏膜TNF-αmRNA的表达水平(P T<0.05);与1000 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡空肠黏膜中Bcl-2 mRNA的表达水平,并显著降低了血清中LPS水平(P T<0.05)。[结论]饲粮添加250 mg·kg^(-1)或500 mg·kg^(-1)芦丁均可以促进免疫器官发育,增强免疫能力和改善肉仔鸡空肠形态结构,提高空肠屏障功能,其对肉仔鸡空肠抗氧化功能的改善作用可能与激活Nrf2信号通路有关。本试验条件下推荐芦丁适宜添加剂量为250 mg·kg^(-1)。

饲粮中添加芦丁对努比亚山羊体尺指标、瘤胃发酵和器官发育的影响

为研究饲粮中添加芦丁对努比亚山羊体尺指标、瘤胃发酵和器官发育的影响,试验选择2月龄健康、体重相近的努比亚山羊母羊36只,随机分为3组,每组12只羊。分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+25 mg/kg芦丁(试验Ⅰ组)和基础饲粮+50 mg/kg芦丁(试验Ⅱ组)。试验预饲期10 d,正试期60 d。饲养结束后进行屠宰。结果表明:(1)与对照组相比,正试期第10天试验Ⅰ组和Ⅱ组山羊管围分别显著提高5.57%(P<0.05)、6.93%(P<0.05),正试期第60天试验Ⅱ组管围和体高分别显著降低6.54%(P<0.05)、8.23%(P<0.05),试验Ⅱ组体长相对于Ⅰ组显著提高3.69%(P<0.05)。(2)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊丙酸和总挥发性脂肪酸浓度分别显著降低42.14%(P<0.05)、21.62%(P<0.05)。试验Ⅱ组乙酸和总挥发性脂肪酸浓度分别显著降低29.23%(P<0.05)、29.43%(P<0.05)。(3)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊瘤胃产琥珀酸丝状杆菌、溶纤维丁酸弧菌、乳酸菌和黄色瘤胃球菌基因相对表达量分别提高271.57%(P<0.01)、1686.09%(P<0.05)、280.00%(P<0.01)和16226.73%(P<0.01),试验Ⅱ组白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌、栖瘤胃普雷沃菌、乳酸菌和黄色瘤胃球菌基因相对表达量分别提高130.56%(P<0.01)、381.74%(P<0.05)、188.00%(P<0.01)、546.00%(P<0.01)、25624.75%(P<0.01),嗜淀粉瘤胃杆菌基因相对表达量降低57.89%(P<0.05)。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组嗜淀粉瘤胃杆菌、产琥珀酸丝状杆菌、白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌、栖瘤胃普雷沃菌和乳酸菌基因相对表达量对比差异极显著(P<0.01)或显著(P<0.05),黄色瘤胃球菌基因相对表达量对比差异不显著(P>0.05)。(4)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊心脏重量、瓣胃重量和指数分别显著降低14.50%(P<0.05)、24.00%(P<0.05)、20.00%(P<0.05),试验Ⅱ组肝脏重量和指数分别提高12.54%(P<0.01)、14.95%(P<0.01),瓣胃重量和指数分别显著降低29.41%(P<0.05)、28.57%(P<0.05)。(5)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊十二指肠VH/CD和回肠VH分别显著降低0.13%(P<0.05)、15.42%(P<0.05),试验Ⅱ组十二指肠VH、CD、回肠VH、VH/CD分别显著降低29.19%(P<0.05)、20.92%(P<0.05)、18.23%(P<0.05)、26.14%(P<0.05),空肠CD显著提高15.63%(P<0.05)。综上所述,本试验条件下,饲粮中添加高剂量芦丁可以增加努比亚山羊部分瘤胃菌群的数量,影响瘤胃发酵,对胃肠道发育产生负面影响。

不同工艺槐米茶中芦丁冲泡溶出率比较的研究

本研究采用紫外分光光度法对12款槐米茶冲泡液中的芦丁含量进行了测定,研究了不同制作工艺对槐米茶的芦丁冲泡溶出率的影响。结果表明:12款槐米茶经过5次冲泡后,芦丁总溶出率在4.06%~13.13%。不同制作工艺对槐米茶中芦丁的冲泡溶出率有较大影响,芦丁整体溶出率由高到低分别是:熏蒸杀青10 min、晒干、微波炉低火模式处理10 min;熏蒸杀青10 min、晒干、炒黄;挤压破坏槐米结构,大火炒制杀青4 min,继而炒干、炒黄;90℃直接烘干。

ZIF-67@AB-8的制备及对芦丁的吸附研究

黄酮类化合物主要存在于自然界的植物中,属于植物的次生代谢产物,黄酮类化合物对治疗心脑血管疾病有着显著的效果,因此对黄酮类化合物的分离利用显得尤其重要。目前,大孔吸附树脂和金属有机框架材料被认为是吸附分离黄酮类化合物的有效材料。本研究利用大孔吸附树脂AB-8为模板,制备了ZIF-67,并以芦丁为标准样品,研究了ZIF-67@AB-8对黄酮类化合物的吸附效果,对吸附条件进行了优化,考察了ZIF-67和树脂的比例以及吸附时间对黄酮类化合物吸附效率的影响。结果表明:以3 g二甲基咪唑与3 g六水硝酸钴制备的ZIF-67@AB-8(2 g)对芦丁具有良好的吸附效果。在浓度为80 mg/L的芦丁溶液中,加入0.025 g ZIF-67@AB-8并在摇床中以220r/min的转速充分搅拌8 h,其对芦丁的吸附效率高达97.76%。研究结果为黄酮化合物的分离开辟了新的途径。

水溶性芦丁/羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其抗氧化活性、稳定性研究

芦丁具有多种药理活性,为解决其水溶性差导致的应用缺陷。本文通过溶剂蒸发法制备了芦丁/羟丙基-β-环糊精(Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin,HPCD)包合物,分析了包合物的结构、溶解性、抗氧化活性和稳定性。结果表明,HPCD能够有效包埋芦丁,包合物中二者摩尔比为1:1,其包封率和载药率分别为89.33%、26.67%,包合物在水中的溶解度是游离芦丁的51倍。芦丁被包合后,其晶体衍射峰完全消失,提高了最大失重速率温度(266℃到318℃),且固态包合物呈现出不规则的片状结构,表明HPCD成功包合了芦丁。包合物清除DPPH和ABTS^(+)自由基的IC_(50)显著低于芦丁(P<0.05),并且其铁离子还原能力是芦丁的1.2倍。稳定性实验表明,自然光处理6 d后游离芦丁和包合芦丁保留率分别为31.80%、66.70%,50℃热处理15 d后保留率分别为66.91%、87.38%。因此HPCD不仅提高了芦丁的水溶性,也提升了其抗氧化活性和稳定性,使芦丁可在不同环境中发挥其保健功能。

曲克芦丁脑蛋白水解物联合rt-PA治疗急性脑梗死的疗效研究

目的:探究曲克芦丁脑蛋白水解物联合重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)治疗急性脑梗死的疗效。方法:选取193例急性脑梗死患者为研究对象,按照治疗方式不同分组,接受曲克芦丁脑蛋白水解物联合rt-PA治疗的患者为观察组(n=98),接受rt-PA静脉溶栓治疗的患者为对照组(n=95)。比较两组患者治疗期间的死亡情况和药物不良反应发生情况;治疗前和治疗后的脑血流动力学指标、脑血流灌注[脑血流容积(CBV)、脑血流量(CBF)、平均通过时间(MTT)]、血清因子水平和预后效果[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良Rankin量表(mRS)]。结果:在治疗期间,两组患者的药物不良反应发生率无统计学差异(P>0.05)。治疗后,两组患者的脑血流动力学指标、CBV、CBF和血清因子水平均提高,且观察组高于对照组(P<0.05);MTT、NIHSS和mRS值均较治疗前下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:采用曲克芦丁脑蛋白水解物联合rt-PA治疗急性脑梗死具有较好的疗效,能改善患者脑血流动力学指标,使脑组织血流灌注水平和血清因子水平恢复,提高预后效果。

以丙酮为溶剂提取纯化槐米中芦丁的工艺研究

以丙酮作为有机溶剂,采用加热回流的方法对槐米中的芦丁进行提取纯化。并对工艺条件如水浴温度、水浴时间、丙酮浓度以及料液比四个因素进行单因素试验和四因素三水平响应面试验设计的优化。通过碱溶酸沉和丙酮挥发两次重结晶析出的方法进行粗芦丁的纯化,进而采用高效液相色谱和核磁氢谱检测纯化后的芦丁样品。结果表明,响应面优化试验结果极显著,提取工艺的最佳条件为水浴时间29 min、丙酮浓度54%、料液比8.6 g/L、水浴温度70.4℃,芦丁提取率为(79.17±0.91)%。芦丁样品和标品核磁氢谱图基本一致,芦丁纯化结果为纯度为(96±0.81)%,纯品得率为(71±2.49)%。

芦丁在BV2细胞中抗弓形虫的作用及机制分析

本研究旨在分析芦丁在BV2细胞中的体外抗弓形虫作用及其潜在机制。首先通过CCK8法、间接荧光染色法等测定芦丁的细胞毒性、弓形虫抑制率及增殖情况以探究芦丁在BV2细胞中的抗弓形虫作用;随后,将细胞分成4组,分别为:空白组(Normal)、感染对照组(T.gondii)、感染后低剂量芦丁治疗组(Rut 50)和感染后高剂量芦丁治疗组(Rut 100),进行弓形虫感染及芦丁处理试验,并用ELISA等方法检测细胞培养液上清液中抗氧化酶SOD、GSH及脂质氧化产物MDA水平,炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β水平,用Western blot检测BV2细胞中PI3K/AKT/Nrf2/HO-1、TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3信号通路中关键蛋白表达量。结果表明,在BV2细胞中,50和100μg·mL^(-1)的芦丁具有明显的抗虫效果,可显著抑制弓形虫感染率、入侵能力和增殖(P<0.05)。50和100μg·mL^(-1)的芦丁还可显著增多上清液中的SOD、GSH含量并降低MDA含量(P<0.05),且降低TNF-α、IL-6及IL-1β水平(P<0.05),并显著上调抗氧化通路PI3K/AKT/Nrf2/HO-1、下调炎症通路TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3中关键蛋白表达量(P<0.05)。结果提示,芦丁在BV2细胞中具有明显的抗弓形虫作用,这可能与其可以通过激活PI3K/AKT/Nrf2/HO-1通路从而增强细胞抗氧化能力、以及抑制TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3通路从而减弱炎症反应有关。研究结果可为后续探究芦丁体内抗虫效果及分析其对弓形虫性脑损伤保护机制相关研究提供一定的理论参考,并为将芦丁开发成治疗人畜弓形虫病的潜在药物提供科学依据。

芦丁分子印迹聚合物的制备及其应用

本文以MCM-48为载体,为芦丁(RT)为模板分子,3-羧酸苯硼酸(CPBA)为功能单体制备芦丁分子印迹聚合物(RT-MIPs),使用紫外-可见分光光度计进行含量测定。优化制备条件,当CPBA为50 mg、间苯二酚与甲醛用量摩尔比为1∶2、pH为8.5时,RT-MIPs对目标分子RT的吸附能力最佳,吸附量为14.80 mg/g。对实际样品(槐花、荞麦、玉米须、红枣)进行加标回收实验,回收率为95.43%~106.07%,该方法设计合理。表明RT-MIPs具有较好的实际应用前景,有望用于天然药物活性成分RT的快速选择性分离提取,为其分离和富集提供了一条新的途径。

从中药材中提取有效成分芦丁实验教学设计及实践

为培养中药学专业学生的实践能力和药学思维,设计了采用多种中药材和不同的实验方法提取芦丁的实验教学案例,将‘教、学、做’融为一体,并进行了实践。在教学中突出学生的主体地位,将实验技能、科研思维、思政教育进行有机地融合。实践证明,实验教学的开展,不仅让学生掌握了实验技能,还极大地激发了学习兴趣,提升了分析和解决问题的能力。

一锅水热法合成磷掺杂碳点用于芦丁的检测

芦丁常用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、紫癜和急性出血性肾炎等疾病,因此迫切需要开发高效快速检测芦丁的方法。以4,4’-联吡啶为碳源和氮源、磷酸为磷源,采用一锅水热法制备得到水溶性好、选择性强、绿色、低毒的碳点。通过透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外(FT-IR)光谱仪、X射线衍射仪(XRD)、X射线光电子能谱仪(XPS)、紫外-可见(UV-Vis)光谱仪和荧光光谱仪表征了该磷掺杂碳点(P-CD)的粒径、官能团种类、元素组成及光学性质。该P-CD的最大激发波长为390 nm,最大发射波长为516 nm;碳点整体呈球形,且粒径小于10 nm。基于芦丁对P-CD荧光的猝灭现象,构建了高选择性与高灵敏度的荧光碳点检测芦丁的方法。结果表明,在芦丁浓度为10~100μmol·L^(-1)时,芦丁浓度与P-CD的荧光强度之间具有良好的线性关系,线性相关系数(R^(2))为0.9960。