液相色谱仪测定配制酒中苋菜红的方法研究

方法:利用液相色谱仪(DAD检测器),对配制酒中的苋菜红做色剂进行检测,将样品进行加热超声除醇,再经过p H=6.0的乙醇氨水反复提取出来,经过PA SPE净化柱利用固相萃取装置萃取净化,最后经过氮吹浓缩、流动相乙酸铵(20 mmol/L)复溶后,过0.22μm滤膜上机检测。结果:本方法按信噪比方式确定检出限(S/N≥3)为0.5 mg/kg;线性范围为0.5μg/m L~5.0μg/m L,线性相关系数为0.998;重复性和再现性相对偏差0.37%~2.97%(n=6);样品加标浓度分别为1.0 mg/kg、2.5 mg/kg和4.5 mg/kg,样品加标回收率在89%~114%范围之间。结论:本方法优化了前处理损失大的问题,且前处理后样品基质干扰小,灵敏度高,适用于配制酒中苋菜红的快速检测。

荧光光谱法结合分子对接研究多酚和苋菜红与β-乳球蛋白结合的竞争作用

功能性乳制品中富含包括多酚类物质等对人体有益的生物活性成分,然而,为改善食品外观,添加合成偶氮类色素苋菜红(Ama),在一定程度上增加了食品的健康风险。通过荧光光谱法结合分子对接研究5种多酚类物质和Ama与β-乳球蛋白(β-Lg)结合的竞争作用。结果表明:姜黄素(Cur)、白藜芦醇(Res)、槲皮素(Que)、咖啡酸-β-苯乙醇酯(CAPE)、绿原酸(CGA)和Ama均可与β-Lg形成复合物,几种配体与β-Lg的结合常数均在105~107 L/mol数量级,结合能力较强。其中,Ama和CGA通过氢键和范德华力与β-Lg结合,Cur、Res、Que、CAPE则通过疏水相互作用结合β-Lg。酸性条件下Ama和5种多酚与β-Lg结合于不同位点,均无明显竞争结合作用。中性条件下Ama与Cur竞争结合于β-Lg的结合位点;而多酚先与β-Lg结合时,Res影响Ama与β-Lg位点的结合,即配体添加顺序影响竞争作用。此时,Cur与Ama均结合位于β-Lg疏水空腔入口处的位点,共同竞争Asn90,且竞争作用较Res更强。通过对小分子间与乳蛋白结合的竞争作用的科学探讨,为利用加工手段控制某些食品添加剂在人体吸收方面的应用提供理论基础。

高聚物萃取双波长法测定胭脂红及苋菜红含量的研究

利用水溶性高聚物的水溶液在无机盐存在下可分成两相的特点,将胭脂红和苋菜红转入高聚物相,消除了其它物质的干扰。加入硼砂缓冲溶液,调节溶液pH约为8,用双波长等吸收法测定胭脂红和苋菜红的含量。结果显示,胭脂红在0.80～60μg/ml,苋菜红在1～70μg/ml范围内有良好的线性关系,相关系数均大于0.999,回收率为96%～105%,该方法检测快速、准确,无毒,而且易于操作。

高效液相色谱法同时测定食品中的苏丹红、苋菜红和胭脂红

建立了高效液相色谱法同时测定食品中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ与苋菜红、胭脂红的分析方法,考察了流动相组成及配比、缓冲溶液浓度及pH、柱温、流速等因素对分离的影响,确定了最佳洗脱条件和最佳检测条件。在最佳的色谱条件下6种化合物的标准曲线线性关系良好(r为0.9990～0.9999),检出限在0.12～0.15μg/mL,相对标准偏差在2.0%～2.6%,样品加标回收率为76.8%～105.9%。已用于食品中苏丹红、苋菜红及胭脂红的检测。

高效液相色谱法测定葡萄酒中苋菜红的不确定度评定

通过对高效液相色谱法测定葡萄酒中合成色素苋菜红质量浓度的全过程分析，确定了测定结果不确定度的来源。采用计量学不确定度传递模型，对引入的不确定度分量进行评定，确定了葡萄酒中苋菜红质量浓度标准不确定度由标准物质、标准溶液配制、标准曲线拟合、样品制备、测量重复性和回收率等6部分不确定度合成得到。2个不同质量浓度样品测定结果不确定度被评定，其相对扩展不确定度分别为2．6％和2．2％（k=2），由不确定度评价结果分析得到，样品重复性测定和标准溶液配制是测定结果不确定度的主要来源。

改良聚酰胺吸附-高效毛细管电泳内标法测定饮料中的亮蓝和苋菜红

以日落黄为内标物,建立了碳酸饮料中亮蓝和苋菜红的高效毛细管电泳内标测定方法。毛细管有效长度40cm,内径75μm,分离电压20kV,进样量14kPa×3s,室温下分离,缓冲溶液为10mmol/L磷酸氢二钠(pH8.56),检测波长390nm。亮蓝与苋菜红的相对校正因子分别为0.832 9(相对标准偏差(RSD)为3.3%)和1.225 3(RSD为2.6%);定量限(S/N=10)分别为1.629mg/L和4.160mg/L;回收率分别为97.87%～102.1%(RSD为1.8%)和94.07%～103.8%(RSD为4.1%);方法的精密度分别为3.2%和2.0%。对样品预处理的优化使该法更适用于碳酸类饮料中亮蓝和苋菜红的高效毛细管电泳分析。以样品空白为基液进行内标法定量测定,基本上消除了背景带来的系统误差。将该方法应用于实际样品的测定,结果准确。

苋菜红-蛋白质体系的共振光散射光谱研究及其分析应用

研究了染色剂苋菜红与蛋白质的结合反应。在pH 3.87的Clark Lubs缓冲介质中 ,苋菜红与蛋白质通过分子间作用力形成复合物。使最大波长约为 364nm的共振光散射光谱得到加强。以苋菜红为标记物根据其共振光散射的增强程度 ,可用于蛋白质的定量测定 ,其线性响应范围为 0～ 5.0mg L。方法的稳定性及选择性良好 ,用于人血清试样中总蛋白的测定 ,结果与经典的考马斯亮兰法一致。

离子液体双水相萃取分离苋菜红的研究

建立了由亲水性离子液体四氟硼酸1-丁基-3-甲基咪唑（[Bmim]BF4）和NaH2PO4形成的双水相体系萃取分离苋菜红的新方法.研究了盐的浓度、离子液体浓度、溶液酸度、其它共存物质对苋菜红萃取率的影响.结果表明,NaH2PO4加入量在2～2.5 g,离子液量在1.0～2.0 mL,苋菜红溶液量在1.5 mL,溶液酸度在pH 4～6范围,离子液体双水相体系对苋菜红有较高的萃取率（E%＞90）.用加入无机离子、不同类型表面活性剂和吸收光谱探讨了离子液体与苋菜红之间的作用.

苋菜红在掺杂氟的二氧化锡导电玻璃上的电化学降解

构建了一套可以实时监测苋菜红降解情况的设备,探讨了苋菜红在掺杂氟的二氧化锡导电玻璃上的电化学降解方法.考察了支持电解质、外加电压、溶液pH、降解时间等因素对染料去除率的影响.结果表明,控制外加电压为6 V,用含0.03 mol.L-1氯化钠为支持电解质(pH 8.0),电解苋菜红溶液(12.0 mg.L-1)10 min后,苋菜红的去除率可达到87%.同时,通过紫外可见吸收光谱仪、荧光光谱仪、总有机碳测定仪等初步探讨了苋菜红的降解行为,其降解符合一级反应的特性,并有部分有机碳转变成为无机碳.

影响白腐真菌J610-D对染料苋菜红脱色降解的培养因素

建立白腐真菌J610-D与苋菜红的共培养体系，研究培养参数对染料脱色降解的影响。结果表明：（1）在含缓冲成分的系统中，菌种J610-D在pH值4．5的培养液比pH值3．0有利于反应进行，浅层培养较深层培养好，缓冲成分差别的作用不明显。（2）在不舍缓冲成分的系统中，生长与反应阶段培养液均为pH值4．5时，效果最佳；生长于pH值4．5，反应在pH值3．0脱色率和降解率高于生长及反应都在pH值3．0的情况，但仍有25％～40％的苋菜红牢固地结合在菌体上；pH值4．5生长，pH值6．0反应，导致反应启动滞后约4～6d，最终结果尚好。

高效毛细管电泳法测定葡萄酒中的苋菜红及亮蓝

建立了高效毛细管电泳法直接分离测定葡萄酒中苋菜红及壳蓝的方法。研究了缓冲体系种类、pH值、缓冲溶液浓度及有机添加剂对分离效果的影响。确定的最佳实验条件：未涂层石英毛细管柱（50cm×75μm），分离缓冲溶液10mmol／L柠檬酸-5mmol／L∥一环糊精（pH2．6），检测波长220nm，电泳电压20kv，压力进样（20kPa×3s），电泳温度为室温。该方法测定的苋菜红及亮蓝质量浓度在2-200mg／L范围内线性良好，苋菜红及亮蓝的检出限分别为0．58，0．50mg／L，线性相关系数-≥0．9994，回收率在93．9％～107．2％之间。该方法无需样品预处理，操作简便，测定准确，能满足实际样品的分析需求。

苋菜红表面增强拉曼光谱的密度泛函理论研究

苋菜红(Amaranth)作为一种人工合成食品添加剂,常被添加于汽水、山楂和糖果等当中,但苋菜红是由煤焦油中分离出来的苯胺染料为原料制成,过量食用会导致基因突变甚至致癌,严重危害身体健康。因此,对其检测至关重要。表面增强拉曼光谱技术具有样品前处理简单、分析速度快和准确性高等优点,已在化学、生物和医学领域越来越显示出巨大的潜能。目前,用拉曼光谱技术对苋菜红检测的理论与实验研究还未见报道。而对拉曼光谱及表面增强理论机理的研究可以为在食品中检测及鉴定苋菜红提供可靠的科学依据。所以利用密度泛函理论全面探究苋菜红的表面增强拉曼机理并与实验结果进行对比,对食品中的苋菜红检测研究有很好的预测及指导意义。一方面,利用共聚焦显微拉曼光谱仪对苋菜红粉末进行拉曼光谱检测,得到其拉曼光谱;另一方面,搭建苋菜红分子结构,并基于密度泛函理论对分子结构进行优化处理,从前线轨道、静电势、极化率及自然键轨道布局分析四个角度进行计算分析,得出偶氮基团处(-N15=N16-)是苋菜红分子与Ag原子配位的最佳位置。在此基础上,使用B3LYP/6-31++G(d,p)基组(C,H,O,N,S,Na)和B3LYP/Sdd基组(Ag)对苋菜红分子与1个Ag原子及3个Ag原子团簇的复合物(Amaranth-Ag1,Amaranth-Ag3)进行结构优化和表面增强拉曼光谱计算。将苋菜红分子的实验与理论拉曼光谱进行比较,发现二者吻合较好,且在1228,1329,1467和1529 cm-1处苋菜红分子的拉曼活性很明显。另外,苋菜红与Ag的复合物有明显的拉曼增强效应,增强效果随着Ag原子个数的增多而愈加明显,不仅拉曼光谱的峰值个数有增多,而且其对应光谱峰位强度也有增强。进一步通过振动模式的归属,得到鉴定和识别苋菜红的拉曼特征峰。该研究为利用表面增强拉曼光谱技术检测食品中的苋菜红提供了一定的实验参考和理论依据。

基于还原型石墨烯/四氧化三铁磁固相萃取检测食品中的亮蓝和苋菜红

采用紫外-可见分光光度法,以还原型石墨烯/四氧化三铁磁性材料作为磁固相萃取食品中合成色素的吸附剂,建立了一种测定饮料、酒、糖果和果冻中的亮蓝和苋菜红的分析方法.在优化条件下,亮蓝和苋菜红的含量与吸光度值呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9994和0.9998,线性范围分别为0.6~60μg/L和3~250μg/L,检出限分别为0.012μg/L和0.05μg/L,样品的加标回收率为92.19%~98.30%.结果表明,该方法可以成功地应用于食品样品中的亮蓝和苋菜红的测定.

荧光光谱法测定饮料中的苋菜红与亮蓝

采用荧光光谱法测定饮料中的苋菜红与亮蓝。样品经柠檬酸溶液调节酸度至pH 6.0,用聚酰胺粉吸附待测物,解析后,以320nm为激发波长、425nm为发射波长测定苋菜红,以382nm为激发波长、445nm为发射波长测定亮蓝,苋菜红和亮蓝的浓度分别在2.5×10-6~2.50×10-5 mol·L-1,5.0×10-6~5.00×10-5 mol·L-1范围内与其荧光强度呈线性关系,检出限(3s)分别为2.0×10-7 mol·L-1和1.0×10-6 mol·L-1。本法用于测定市售饮料中的苋菜红与亮蓝,加标回收率在102%~104%之间,测定值的相对标准偏差均小于5%。

食用色素苋菜红与牛血清白蛋白的相互作用研究

在模拟动物体生理条件和不同温度下,采用荧光、紫外光谱法来研究苋菜红(AMR)与牛血清白蛋白(BSA)结合反应。用Stern-Volmer和Lineweaver-Burk方程分别处理试验数据,发现BSA与AMR发生反应,生成新的复合物,属于静态荧光猝灭。实验求出反应时复合物的形成常数KLB、热力学参数与结合位点数,证明苋菜红与牛血清白蛋白的结合主要为静电作用力。位点竞争实验结果显示AMR与BSA的作用位置主要在BSA的Site I(sub-domain IIA)位。通过同步荧光光谱和三维荧光光谱法,探讨AMR对BSA构象的影响,实验结果表明,AMR使BSA酪氨酸残基和色氨酸残基所处微环境的极性减弱,疏水性增强。本文为探讨AMR的染色机理、毒理效应和生物学效应提供了重要信息。

胭脂红和苋菜红分子结构与光谱性质的对比研究

应用英国Edinburgh FLS920P稳态-瞬态荧光光谱仪,对互为同分异构体的胭脂红、苋菜红分子的吸收光谱和荧光光谱实验检测,得到二者的光谱特性参数,并进行对比。分别采用密度泛函理论(DFT)和含时密度泛函理论(TD-DFT)对这两种分子的基态和激发态结构进行优化,将所得基态分子构型进行频率计算,结果显示均无虚频存在,进而比较两分子构型在不同能态下的差异。在此基础上,应用TD-DFT并结合极化连续介质模型(PCM)在6-311++G(d,p)水平上分别计算二者的吸收光谱和荧光光谱,对两种分子的发光机制、荧光光谱特性差异与分子结构的关系进行了分析。结果表明,两种分子的基态结构均为非平面,它们中的两个萘环不共面,存在一定的夹角;苋菜红含有分子内氢键,且氢键所在萘环的平面性要优于胭脂红分子对应的萘环部分;激发态时二者各自的两个萘环均共平面。量子化学计算得到的光谱理论值与实验结果较为吻合,说明优化所得胭脂红与苋菜红的分子构型基本合理。与苋菜红相比,胭脂红右侧萘环结构的平面性稍差,分子从激发态跃迁回到基态经历了更多的振动和转动,损耗了更多的能量,导致用来产生荧光光子的能量减少,因此,胭脂红的荧光发射波长更长。本文首次得到胭脂红、苋菜红分子基态与激发态下的分子结构信息,并找出二者光谱特性差异的原因,结果可为研究同分异构体分子的光谱特性与分子结构的关系提供参考。

苋菜红褪色光度法测定痕量铜

本文研究了在 NH3- NH4Cl介质中 ,铜催化过氧化氢氧化苋菜红的褪色反应及其动力学条件 ,测定了反应级数和表观活化能 ,建立了测定痕量铜的新方法。该方法的检出限为 1 .6× 1 0 - 1 0 g/ m L,线性范围为0 - 2 .0 μg/ 2 5 m L,用于测定水中痕量 Cu,与原子吸收法的测定结果一致。

Fe(Ⅲ)-KIO_4-苋菜红体系催化动力学单扫描示波极谱法测定痕量铁

研究了在H2SO4介质中，痕量Fe（Ⅲ）催化KIO4氧化苋菜红的褪色反应。提出了催化动力学单扫描示波极谱法测定痕量铁的新方法。在1．6×10^-3。mol／LH2SO4介质中，苋菜红在汞电极上产生1个还原峰，峰电位为-0．186V（vs．SCE）左右。氧化剂KIO4存在时，在-0．186V处的峰电流的降低与加入Fe（Ⅲ）离子在0～0．04μg／mL范围内呈良好的线性关系，检出限4．2×10^-9g／mL。同时研究了该方法适宜的反应条件，应用本方法测定中草药和水中铁的含量，回收率在98％～101％之间，结果满意。

石墨烯量子点作为荧光探针定量分析糖果中苋菜红的含量

建立了一种利用石墨烯量子点荧光猝灭定量分析糖果中苋菜红含量的方法.讨论了溶液p H值和反应时间对苋菜红与石墨烯量子点相互作用的影响.在最优条件下,石墨烯量子点荧光强度降低(F0/F)与苋菜红浓度(0.5~3μg/L)之间具有良好的线性关系.通过变温实验、紫外吸收光谱和计算荧光猝灭常数对猝灭机理进校了讨论,结果显示苋菜红与石墨烯量子点之间的作用为基于石墨烯量子点与苋菜红生产复合物的静态猝灭过程.此外,该方法被用来定量分析糖果样品中苋菜红的含量,表明该方法可用于实际食品样品中苋菜红的定量分析.

支持向量回归分光光度法同时测定苋菜红和果绿

[目的]建立支持向量回归分光光度法同时测定苋菜红和果绿的模型。[方法]在波长300.0600.0 nm,测定了苋菜红和果绿2种色素混合溶液的吸光度,采用支持向量回归（SVR）方法进行建模,建立了支持向量回归分光光度法同时测定苋菜红和果绿的方法,并对模拟样品进行了测定。[结果]光谱扫描结果表明,2种色素的吸收光谱相互重叠且有较大差异。在300.0-600.0 nm,苋菜红和果绿均有较大吸收。苋菜红和果绿的平均回收率分别为99.996%和99.263%,说明该方法的加和性良好。模拟样品中2种色素的平均回收率分别为98.997%和99.676%。[结论]该试验建立了支持向量回归分光光度法同时测定苋菜红和果绿的模型,达到了预期目的。