茶黄素体外抑菌作用研究

通过体外试验研究茶黄素对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、肠球菌、禽肺炎克雷伯、鸭源鸡杆菌、禽肠炎沙门氏菌、野鸟黏质沙雷氏菌、禽巴氏杆菌的抑菌作用。采用最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)测定法研究茶黄素的抑菌作用及杀菌作用。结果显示,茶黄素对禽巴氏杆菌、鸭源鸡杆菌等具有抑菌作用,并与其浓度呈正相关,而对大肠埃希氏菌、禽肠炎沙门氏菌、黏质沙雷氏菌等无作用;茶黄素浓度为128μg/mL时,其对鸭源鸡杆菌生长具有抑制作用,当茶黄素浓度为512μg/mL时,其对禽巴氏杆菌C48-1生长具有抑制作用;当茶黄素浓度为512μg/mL时,其对禽巴氏杆菌和鸭源鸡杆菌具有杀菌作用。茶黄素在MBC浓度时能抑制生物被膜的形成能力。结果表明,茶黄素是一种天然抗菌剂,具有优良的替抗前景,促进绿色健康养殖。

基于单宁酶处理原料制备的高茶黄素速溶红茶品质分析

目的研究基于单宁酶发酵加工的红茶原料,制备高茶黄素含量的速溶红茶。方法以速溶红茶中的茶黄素含量为主要评价指标,对红茶原叶和红茶粉碎叶进行两种提取溶剂处理,分析制备得到速溶红茶的感官品质及主要化学成分含量。结果研究发现,用60%乙醇提取红茶粉碎叶制备得到的速溶红茶中,茶黄素含量显著高于水提取工艺,速溶红茶茶黄素含量达到2.3%,是传统红茶原料中茶黄素的3倍,并且速溶红茶得率达到了38%,其感官品质以水提取工艺较佳。结论以高茶黄素茶叶为原料,将其磨成粉,用60%乙醇为提取剂制备的速溶红茶,富含茶黄素。研究结果为速溶红茶的生产加工提供了一定的理论依据,也可以为夏秋茶资源的开发利用提供新方法。

茶黄素对ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响

[目的]探索茶黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响及机制。[方法]使用50μmol/L茶黄素、10μmol/L核因子E2相关因子2(NRF2)抑制剂ML385预处理THP-1来源的巨噬细胞,随后加入100 mg/L ox-LDL刺激细胞24 h建立泡沫细胞模型。通过CCK-8法和LDH释放量检测茶黄素对THP-1巨噬细胞活力的影响。通过RT-qPCR和Western blot检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达;ELISA法检测炎症因子的释放。采用油红O染色检测细胞内脂质积累,DiL标记氧化型低密度脂蛋白(DiL-ox-LDL)染色检测脂质摄取,DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平。通过Western blot和RT-qPCR检测脂质摄取、胆固醇外排及氧化应激相关蛋白的表达。[结果]经100 mg/L的ox-LDL处理,THP-1巨噬细胞活力明显降低,脂质摄取、积累明显增加,脂质摄取相关蛋白表达增加,胆固醇外排相关蛋白表达明显减少,炎症与ROS水平明显增加,髓过氧化物酶(MPO)和NADPH氧化酶2(NOX2)表达增加(P<0.05);加入茶黄素后,细胞活力升高,细胞内脂质积累明显减少,脂质摄取相关蛋白的表达明显减少,胆固醇外排相关蛋白表达明显增多,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达与释放明显降低,ROS水平降低,MPO与NOX2表达减少(P<0.05)。茶黄素预处理改变了NRF2信号通路中NRF2、血红素加氧酶1(HO-1)、Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)的表达,增加了NRF2核易位,减缓了细胞内氧化应激。ML385预处理细胞后,NRF2、HO-1、KEAP1和CD36蛋白表达水平明显降低。[结论]茶黄素可以显著抑制THP-1巨噬细胞泡沫化,抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞炎症并通过NRF2/HO-1信号通路减缓了氧化应激。

HPLC-MS/MS法测定茶叶中儿茶素类、茶黄素类物质

针对同时测定茶叶中儿茶素、茶黄素的方法较少的现状,该研究建立了同时定性和定量测定茶叶中8种儿茶素类和4种茶黄素类物质的高效液相色谱-串联质谱法。研究采用Agilent Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱,甲酸-乙腈为流动相,流量为0.2 mL/min进行梯度洗脱,采用ESI源正、负离子扫描模式,多反应监测(MRM)。结果表明,儿茶素类和茶黄素类物质分别在10~10000μg/L和25~5000μg/L范围内线性关系良好,相关系数R>0.99,回收率在96.53%~106.08%之间,精密度的相对标准偏差均小于10%。相较于分别检测儿茶素类和茶黄素类物质的国家标准方法,该方法提高了检测效率且具有更低的检出限和定量限,能够提供更加准确、全面的检测结果。

茶黄素-3,3’-双没食子酸酯对α-葡萄糖苷酶的抑制机制

利用酶抑制动力学、多光谱、分子对接分析了茶黄素-3,3’-双没食子酸酯(theaflavin-3,3’-digallate,TFDG)对α-葡萄糖苷酶的抑制机制,结果表明抑制是可逆的,并呈现竞争型和非竞争型混合抑制;TFDG与α-葡萄糖苷酶形成复合物猝灭其固有荧光;热力学参数表明结合是自发吸热、熵增的,且疏水相互作用是主要驱动力;结合增强了酪氨酸残基附近的疏水性和色氨酸残基周围的极性,降低了α-螺旋、β-折叠和β-转折的含量。分子对接显示TFDG结合在酶活性位点附近,并与附近氨基酸残基Phe450、Trp406之间存在两种疏水相互作用,且与Asp203、Phe450、Gln603形成3个氢键。本研究揭示了TFDG抑制α-葡萄糖苷酶的分子机理,为治疗糖尿病提供一种可行的候选功能因子。

茶黄素在代谢综合征中相关作用机制的研究进展

代谢综合征(metabolic syndrome,MetS)是代谢系统疾病中一组慢性进行性疾病,其发生与发展过程涉及多种代谢因子和信号网络。可食用的天然植物成分由于其安全性和良好的耐受性,被广泛应用于代谢性疾病的预防和控制。茶黄素作为茶叶中天然成分,具有多种生理活性,已有较多研究表明其食用价值。综述近年来茶黄素在预防和缓解代谢综合征中应用的研究结果,并总结其主要的作用机制,以期为茶黄素在代谢综合征相关疾病中更进一步的应用提供理论支撑。

天然染料茶黄素对棉布的染色工艺研究

茶黄素作为红茶的一种色素,可以起到预防心血管疾病和调节血脂的作用。除此之外,茶黄素作为一种天然染料,在纺织印染领域也发挥着重要作用。文章通过对天然染料茶黄素染液pH、温度、染色时间、不同质量分数与染色性能之间关系的研究,得到了茶黄素染料对棉布的最优染色工艺条件。实验结果表明,茶黄素染料具备较好的发展前景。

基于网络药理学及分子对接探究茶黄素干预代谢综合征的作用机制

为研究4种主要茶黄素干预代谢综合征的作用机制,采用网络药理学与分子对接模拟方法,通过PharmMapper、SwissTargetPrediction、GeneCards、DisGeNET等数据库筛选相关靶点,利用David进行GO富集及KEGG通路分析,采用Cytoscape 3.10软件构建茶黄素干预代谢综合征的“成分-靶点-通路图”,最后通过Autodock Vina软件对核心靶点进行分子对接实验验证。结果表明,通过数据库筛选得到73个茶黄素与代谢综合征交集靶点基因。GO富集分析显示,有293个生物过程、35个细胞组分和75个分子功能被富集;KEGG通路富集分析显示,有105个信号通路被富集。经过PPI互作得到ALB、IGF1、HIF1A、AKT1、PPARG、EGFR、PPKACA、NOS3等14个核心靶点。分子对接表明茶黄素与核心靶点(NOS3、EGFR、ALB)之间具有较高结合亲和力。同时茶黄素主要通过氢键、π-π共轭作用与靶点蛋白结合,进而达到干预代谢综合征的目的。这表明茶黄素可通过多个靶点以及多条通路干预代谢综合征。

茶黄素通过调节Wnt/β-catenin和Hedgehog信号通路对HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨茶黄素对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及Wnt/β-catenin和Hedgehog信号通路的影响。方法 肝癌HepG2细胞用0、2.5、5、10、20、40、80、160、320μmol/L的茶黄素分别培养24、48、72 h,采用CCK-8法检测HepG2细胞活性。根据HepG2细胞活性实验结果将后续实验分为空白对照组,茶黄素低剂量(20μmol/L)组、中剂量(40μmol/L)组和高剂量(80μmol/L)组,细胞培养24 h。克隆形成实验检测HepG2细胞增殖;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡;Western blot检测HepG2细胞中Ki67、PCNA、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、GLi1、SMO、PTch1、β-catenin、c-myc和Cyclin D1的蛋白表达量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HepG2细胞中GLi1、SMO、PTch1、β-catenin、c-myc和Cyclin D1 mRNA相对表达量。结果 与空白对照组相比,茶黄素组HepG2细胞增殖显著降低(P<0.05)、凋亡率显著增加(P<0.05),GLi1、SMO、PTch1、β-catenin、c-myc和Cyclin D1 mRNA相对表达量均显著下调(P<0.05),Ki67、PCNA、GLi1、SMO、PTch1、β-catenin、c-myc和Cyclin D1的蛋白表达量显著下调(P<0.05),而cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白表达量显著上调(P <0.05)。结论 茶黄素可通过调控Wnt/β-catenin和Hedgehog信号通路抑制HepG2细胞的增殖并促进其凋亡。

茶黄素制备的研究进展

茶黄素是红茶的主要成分,在食品和医药等领域具有很大的应用价值和开发前景。本文以茶黄素的形成机理为立足点,综述了制备茶黄素的主要方法,包括直接提取法和体外制备法。其中,体外制备法可分为化学氧化法,酶促氧化法和仿生合成法。并针对以上合成方法的主要问题,如无法实现工业化,提出未来可行的研究方向,有望为为茶黄素的制备和开发应用研究提供科学借鉴依据。

基于荧光光谱法研究酪蛋白与茶黄素类的相互作用

蛋白质和茶多酚是常见的互作体系,本项目旨在通过荧光光谱法研究酪蛋白和茶黄素类的相互作用,并通过不同温度下模型拟合确定其互作机制。结果表明,茶黄素类能够猝灭酪蛋白的自身荧光,猝灭类型为静态猝灭。当茶黄素类浓度为0.028 mg/mL时,在29℃、37℃和45℃温度下,酪蛋白的荧光强度分别下降了66.7%、55.6%、52.2%,且最大发射波长有轻微红移现象。在不同的温度下,酪蛋白均可自发地与茶黄素类结合,结合位点数约为1,结合方式主要以氢键和范德华力为主导。研究结果可为酪蛋白-茶黄素类复合物在功能食品中的应用提供参考。

茶黄素调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对A549细胞增殖凋亡及自噬的影响

目的:探讨茶黄素调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对A549细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法:测定0、2.5、5、10、20、40、80、160μmoL/L茶黄素干预A549细胞后增殖率,筛选出合适的作用浓度。将A549细胞分为control组、低-茶黄素组(20μmoL/L茶黄素)、中-茶黄素组(40μmoL/L茶黄素)、高-茶黄素组(80μmoL/L茶黄素)、高-茶黄素+740Y-P组(80μmoL/L茶黄素+30μmoL/L的PI3K/Akt/mTOR信号通路激活剂740Y-P)。CCK-8法、平板集落形成实验测定A549细胞增殖;流式细胞术、MDC法分别测定A549细胞凋亡及自噬空泡生成;Western blot测定A549细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白及自噬蛋白表达。结果:与0μmoL/L茶黄素对比,2.5、5、10、20、40、80、160μmoL/L的茶黄素均可抑制A549细胞增殖,经计算茶黄素对A549细胞的IC50值为36.72μmoL/L。与control组比较,低-茶黄素组、中-茶黄素组、高-茶黄素组A549细胞增殖率、集落形成率、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR均降低,凋亡率、自噬空泡相对含量、LC3II/LC3I、Beclin-1蛋白表达均升高,且均呈茶黄素剂量依赖性变化(P<0.05)。与高-茶黄素组对比,高-茶黄素+740Y-P组A549细胞增殖率、集落形成率、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR均升高,凋亡率、自噬空泡相对含量、LC3II/LC3I、Beclin-1蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:茶黄素可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活,诱导保护性自噬,进而促进肺癌细胞凋亡,抑制其增殖。

信阳绿茶中糖蛋白和茶黄素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

以信阳绿茶为原料,采用温水浸提和醇析法提取、脱蛋白、大孔树脂纯化茶多糖和茶黄素,以α-葡萄糖苷酶促动力学为筛选模型,研究其对α-葡萄糖苷酶的抑制效果。研究结果表明,粗多糖和脱蛋白多糖的提取率分别是3.03%和1.93%,茶黄素得率是0.42%。0.035 mg/mL的茶黄素与茶多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为33.15%和9.74%,茶黄素的抑制率明显高于茶多糖。茶多糖纯化程度增大,相对抑制率减少,茶叶多糖的抑制活性可能是不同分子的糖或糖与其他物质共同作用的结果。

茶黄素提取物及茶黄素片的急性毒性

以茶黄素提取物及终端产品茶黄素片为原料,采用急性毒性试验方法,研究试验小鼠对茶黄素提取物和茶黄素片的急性毒理特性。结果表明,茶黄素提取物对雌性小鼠的急性经口LD50为2710.0mg/kg体重,是成人日用量的(10~20 mg/kg)136~271倍;对雄性小鼠LD50为3160.0 mg/kg体重,是成人日用量的(10~20 mg/kg)158~316倍。茶黄素片对雌性小鼠的急性经口LD50为20000.0 mg/kg体重,是成人日用量的(40~50 mg/kg)400~500倍;对雄性小鼠的急性经口LD50为14700.0 mg/kg体重,是成人日用量的(40~50 mg/kg)294~368倍。茶黄素提取物和茶黄素片对雄性小鼠和雌性小鼠的急性经口LD50,均大于成人日用量的100倍,说明茶黄素提取物和茶黄素片的毒性较小,符合保健食品的急性毒性评价标准。

“EGCG和茶黄素稳态修饰活性保鲜膜的制备应用”等六项科技成果通过评价

浙江省茶叶学会在杭州组织专家对中华全国供销合作总社杭州茶叶研究所完成的“EGCG和茶黄素稳态修饰活性保鲜膜的制备应用”“基于微生物代谢的茶-沙棘叶复合发酵产物制备及应用”“龙游黄茶茶粉对大米淀粉和发糕品质特性的影响研究”“龙游黄茶精深加工关键技术与产品研发”“抹茶及其加工在制品微生物分析及控制技术研究”“不同县域‘白叶1号’品质特征研究与产品开发”等六项科技成果进行了评价。

茶黄素研究进展

概述了茶黄素的发展现状,预测了其前景;根据当前研究状况分析得出茶黄素的研究还停留在试验阶段,不够深入,茶黄素作为一种药物,有很多功效但是还未达到医学治疗的要求,也分析列举了研究茶黄素的提取和制备方法,同时分析说明了茶黄素的发现历程、来源、结构及功效研究的进展。

茶黄素-3,3’-没食子酸酯修饰的纳米羟基磷灰石/聚已内酯复合多孔支架修复骨缺损

背景:茶黄素-3,3’-没食子酸酯(theaflavin-3-gallate,TF-3G)可明显抑制骨吸收,在预防骨质疏松方面具有明显的效果,但是将其应用于成骨方面的研究并不多见。目的:将TF-3G负载于纳米羟基磷灰石/聚己内酯(nano-Hydroxyapatite/Polycaprolactone,nHA/PCL)复合支架中,观察其成骨作用。方法:配制不同质量浓度的TF-3G溶液,通过CCK-8实验检测其细胞毒性。根据细胞毒性实验结果选择适宜质量浓度(0,0.86,4.30,8.60,17.20,34.4,68.8,86,106 mg/L)的TF-3G溶液干预骨髓间充质干细胞,采用CCK-8法检测其成骨分化过程中的增殖活性。选择一定质量浓度的TF-3G溶液诱导骨髓间充质干细胞向成骨方向分化,进行碱性磷酸酶活性检测与茜素红染色。利用选择性激光烧结快速成型技术制备nHA/PCL复合多孔支架,采用溶液浸渍与冷冻干燥法将TF-3G负载于nHA/PCL复合多孔支架中。在成年新西兰大白兔桡骨部位制作1.5 cm的骨缺损,空白对照组不植入任何材料,两实验组分别植入nHA/PCL、TF-3G/nHA/PCL复合多孔支架,术后分别进行影像学检查与组织学观察。结果与结论:(1)CCK-8检测显示,0.86,4.30,8.60 mg/L的TF-3G可促进骨髓间充质干细胞的增殖,17.20,34.4,68.8,86,106 mg/L的TF-3G抑制骨髓间充质干细胞的增殖,选择0.86,4.30,8.60 mg/L质量浓度进行骨诱导实验。(2)碱性磷酸酶活性检测与茜素红染色显示,随着TF-3G溶液质量浓度的增加,促成骨效果增强。(3)术后4,12周的Lane-Sandhu X射线评分显示,两支架组高于空白对照组(P<0.05),并且TF-3G/nHA/PCL组高于nHA/PCL组(P<0.05)。(4)术后12周,结合苏木精-伊红、Masson染色结果进行Huddleston组织学评分,两支架组高于空白对照组(P<0.05),并且TF-3G/nHA/PCL组高于nHA/PCL组(P<0.05)。(5)结果表明,TF-3G可促进骨髓间充质干细胞的增殖与成骨分化,负载TF-3G的nHA/PCL复合多孔支架可促进骨缺损的修复。

高效液相色谱法测定红茶中的茶黄素

建立了一种用于分析红茶中茶黄素的高效液相色谱法。该方法采用反相C18柱;流动相A为2%醋酸,流动相B为乙腈 乙酸乙酯(体积比为21∶3),梯度洗脱,流速0 8mL/min;紫外检测波长280nm;柱温40℃;外标法定量。结果表明,所采用的标准曲线有良好的线性关系(r=0 9990～0 9992),加标回收率为96 88%～103 57%,方法的精密度良好(平均RSD<1 5%)。该方法简便、快速、准确,可用于实际样品的测定。

茶黄素的制备、分析、分离及功能活性研究进展

茶黄素是一种重要的功能因子,具有很好的应用价值和开发前景,已成为国内外研究的热点。作者对茶黄素的分子结构、理化性质进行了介绍,并对茶黄素的形成机理、制备、分析测定方法、分离纯化和功能活性的研究进行了综述,为茶黄素的进一步研究提供一定的理论基础。

茶黄素、茶红素与茶褐素对高脂饮食大鼠肠道菌群的影响

以茶黄素、茶红素以及茶褐素为研究对象,研究其对高脂饮食大鼠肠道菌群的影响。即以高脂饮食饲养的方法造模成立营养性肥胖大鼠模型的同时,连续9周灌胃茶黄素、茶红素和茶褐素,其后测定各组大鼠体重、Lee’s指数、脂重及血脂水平,通过高通量测序技术,对大鼠肠道内容物肠道菌群进行生物信息学分析。结果表明,和模型对照组相比,灌胃茶黄素、茶红素和茶褐素均可抑制大鼠体重增长(p <0.05)与Lee’s指数(p <0.01),降低其脂肪重量(p <0.01或p <0.05),使其血清内TC、HDL-C、LDL-C、TG含量以及AI指数下降(p <0.05或p <0.01),能起到抑制大鼠肥胖效果。进一步分析显示,茶黄素、茶红素和茶褐素能够抑制高脂饮食导致的大鼠肠道内容物肠道菌群丰度及多样性的降低。且从其肠道菌群结构上看,各组大鼠厚壁菌门的相对丰度降低,拟杆菌门的相对丰度得以增加,F/B比值显著降低(p <0.05)。此外,茶黄素、茶红素和茶褐素还使各组大鼠肠道内属水平上瘤胃球菌相对丰度下降,而乳杆菌、Akkermansia菌和毛螺菌相对丰度存在不同程度回升。即茶黄素、茶红素和茶褐素对高脂饮食大鼠肠道菌群具有正向的调节作用。