间接免疫荧光抗体技术检测凡纳滨对虾红体病病原——副溶血弧菌

建立了凡纳滨对虾红体病病原——副溶血弧菌的间接免疫荧光抗体检测方法。确定免疫血清和荧光抗体的最适工作浓度分别为1∶1000和1∶200;交叉反应和阻断试验表明该方法具有较高的特异性。用该方法检测了10份人工感染后发病的凡纳滨对虾和10份感染后外观健康的凡纳滨对虾,阳性检出率分别为100%和60%,表明该技术不仅能够检测已发病的凡纳滨对虾,而且能够检测带菌的凡纳滨对虾,这对于水产养殖业中疾病的早期诊断有着重要意义,而且该方法具有快速、特异、简单的优点,适合于现场应用推广。

应用间接荧光抗体技术快速检测花鲈病原菌——鳗弧菌

以花鲈 (Lateolabrax japonicus)弧菌病的病原菌——鳗弧菌 (Vibrio anguillarum) W-1为抗原 ,制备兔抗血清 ;利用异硫氰酸荧光素标记的羊抗兔免疫球蛋白 (FITC-Ig G)为荧光标记二抗 ,并以罗丹明标记的牛血清白蛋白为背景染色 ,建立检测鳗弧菌的间接荧光抗体快速检测技术。应用该技术对人工感染后的花鲈组织 (肌肉、鳃、肠、肾 )样品和养殖水体样品进行了鳗弧菌检测 ,结果显示间接荧光抗体技术不仅可以用于诊断发病的感染花鲈 ,也可用于检测带菌状态或未发病的感染花鲈。

应用间接荧光抗体技术检测林蛙嗜水气单胞菌

以感染嗜水气单胞菌的林蛙各组织脏器为抗原,以热灭活的嗜水气单胞菌为免疫原,免疫家兔制备兔抗嗜水气单胞菌血清为第一抗体,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗兔IgG作为二抗,建立了间接荧光抗体试验方法。分别采用2.5%戊二醛5 min、甲醇10 min、冷丙酮1 h 3种固定方法固定抗原,然后滴加不同稀释倍数的兔抗嗜水气单胞菌血清、羊抗兔IgG-FITC,于荧光显微镜下观察。结果表明,2.5%戊二醛固定腹水5 min,兔抗血清抗体效价为1∶80,荧光二抗的最佳稀释倍数为1∶4000。

免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血CTCs的方法建立和应用

目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性富集技术来检测卵巢上皮性癌(卵巢癌)患者外周血循环肿瘤细胞。方法体外培养卵巢癌SKOV-3细胞,按一定比例掺入到2 ml健康人外周静脉血中,应用免疫磁珠为基础的负性富集结合免疫荧光抗体技术对循环肿瘤细胞进行定量检测。评价该方法富集靶细胞的回收率,并用上述方法检测32例卵巢癌患者和10例对照者外周血中的循环肿瘤细胞。结果①在健康志愿者2 ml外周血掺入不同数目SKOV-3细胞的条件下,肿瘤细胞的回收率在64%~80%之间,掺入细胞间回归方程为Y=0.782X-1.408,相关系数为0.998。②10例对照者外周血中未检测到CK8/18+,18例卵巢癌患者的外周血中检测到CK8/18+,阳性率为56.3%(18/32,X^2=7.681,P<0.01)。③CTCs阳性与远处转移密切相关(X^2=5.776,P<0.05)。结论免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞的方法可能具有一定的临床应用价值。

应用间接免疫荧光抗体技术检测鸡传染性贫血病毒抗体

用 MDCC－ MSB1细胞增殖鸡传染性贫血病毒 (CAV)CuX－ 1毒株制备抗原，建立了检测 CAV抗体的间接免疫荧光的方法。应用该方法检测 CAV基因工程亚单位苗首免、二免和三免后鸡体内的 CAV抗体，结果表明首免一个月后，鸡血清中 CAV抗体的滴度很低或几乎测不到抗体；二免一个月后，鸡血清中可测到较高的 CAV抗体；三免一个月后，鸡血清中的 CAV抗体滴度更高。另外，应用此方法调查了某禽场 3个批次鸡体内的 CAV抗体，其中 32日龄黄鸡和 1日龄乌骨鸡体内的 CAV抗体为阴性，而 1日龄黄鸡体内的 CAV抗体为阳性。

荧光抗体技术在犬瘟热诊断中的应用

犬瘟热是犬的重要传染病之一。本病临床表现不一,危害严重,因此及时确诊对控制其发生和传播十分重要。本文应用犬瘟热病毒(CDV)荧光抗体(FA)技术,对某犬群流行的犬瘟热进行了诊断,现报告如下。材料和方法一、CDV荧光抗体:Bioveta Nitra公司制,工作浓度1:26。二、免抗CDV阴。

病毒分离结合荧光抗体技术与抗原捕获ELISA检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原的敏感性比较研究

本研究通过体外增毒,再测定病毒的TCID50,然后将病毒培养物作系列稀释,比较了细胞传两代进行荧光抗体染色法与三种商品化的抗原捕获ELISA试剂盒(包括IDEXX公司生产的BVDV抗原检测试剂盒、POURQUIER生产的P80检测试剂盒及NSP2-3/E0检测试剂盒)检测病毒抗原的敏感性。结果表明,传两代进行荧光抗体染色的方法可检出10-6稀释的50μL细胞毒(0.12个TCID50),而三种商品化进口ELISA试剂盒分别只能达到10-2(1.2×103个TCID50)和10-1(1.2×104个TCID50)稀释的50μL细胞毒。尽管传两代进行荧光抗体染色的方法相对繁琐,但这种方法的敏感性是抗原捕获ELISA难以比拟的,因而更适合于血清中BVDV病毒抗原的检测。

荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用

荧光抗体技术(FAT)是一种灵敏而又特异的诊断方法,被世界各国作为猪瘟的法定诊断方法.采用FAT对猪瘟病毒进行控制和净化,其方法简单、快速、技术可靠,检测成本相对较低.2005～2007年笔者采用FAT对规模化猪场猪瘟进行2～3次净化,可以稳定地控制猪瘟,使猪瘟的阳性率下降至3%左右,大大降低了各阶段猪群的死亡率,并明显提高了母猪的繁殖性能,取得了良好的经济效益.

免疫荧光抗体技术用于海南省毛阳疟疾防治试点流行监测

目的 为了评价毛阳地区疟疾防治试点的发病率降至较低水平后的防治效果。方法 于 1999年再次应用 IFAT进行流行病学监测及原虫率考核。结果 什益管区和牙合管区居民抗体阳性率分别为 7.7%和 13.9% ;低年龄组抗体率为 3.1%和 7.8% ;原虫率相为 0 .6 0 %和 2 .6 0 %。结论 提示前一管区抗疟措施较有力 ,疟疾已降至低度 ,但低年龄组仍有阳性 ,传播尚未阻断 ;后一管区疟疾乃存在一定程度的流行 。

间接荧光抗体技术在家兔大肠杆菌病诊断中的应用

家兔大肠杆菌病有腹泻或败血性感染等类型。败血性感染一般无特征性症状和病变,而腹泻病例易与其它某些致腹泻病原感染相混淆或混合感染,如魏氏梭菌性下痢、沙门氏菌感染、泰泽氏病、肠球虫感染等。因此,确诊本病有赖于病原的分离与鉴定。鉴于败血症病死兔实质脏器中能检出大肠杆菌,而腹泻型病例肠内容物(尤其是小肠段)大肠杆菌异常增殖,部分腹泻兔尚能在实质脏器中检出大肠杆菌。笔者用常规间接荧光抗体技术对本病进行快速诊断,结果较为满意。报道如下:

应用荧光抗体技术检测牙鲆体内的河流弧菌

用灭活的河流弧菌(Vibrio fluvialis)抗原,注射免疫实验兔,制得凝集价为1∶5 120的抗血清。用试管凝集法检测了抗血清的特异性,再用免疫吸附法去除交叉反应,从而得到高效价、高特异性的抗河流弧菌血清。用所制备的抗血清在实验室中建立起河流弧菌荧光抗体检测技术(FAT),在荧光显微镜下可清楚地看到被标记的病原菌,整个检测过程只需3h。用河流弧菌感染牙鲆(Paralichthys olivaceus),24 h后,用FAT测定牙鲆的血液、肾脏和肝脏中的河流弧菌,在血液中河流弧菌的检出率最高,其次是肾脏,肝脏的检出率最低。以上结果表明:荧光抗体技术可以快速、灵敏、准确地检测出牙鲆体内的河流弧菌。

免疫荧光抗体技术快速诊断阴道加德纳菌感染的实验研究

目的制备可用于临床检测阴道加德纳菌的免疫荧光抗体。方法用特异性免疫荧光抗体对阴道加德用菌、已知不同种细菌和部分临床标本进行测定。结果发现阴道加德纳菌与其它细菌有明显的差别。结论用免疫荧光机体技术诊断阴道加德纳菌感染具有快速、特异、可靠准确等优点。

直接荧光抗体技术在规模猪场检测净化猪瘟中的应用

猪瘟目前在生产实践中多以所谓非典型、温和性或亚急性的症状出现．以及猪瘟病毒的持续感染、胎盘垂直感染、初生仔猪耐受和妊娠母猪带毒综合症等。对规模化猪场除实行兽医生物安全措施，减少和切断病原微生物侵入猪群外，还应采取有效的方法快速查出病原体并淘汰“带毒猪”．控制净化规模猪场猪瘟病毒，彻底清除带毒种猪对控制猪瘟持续感染尤为关键。

两种成分联合的直接荧光抗体技术对细菌性炭疽的快速诊断

炭疽杆菌作为生物武器的潜在威胁,已被人们所重视,因此快速诊断在爆发期间起十分重要的作用。虽然也有一些标准的微生物检测方法可以用于鉴别诊断,但均存在出结果的时间问题。早期研究认为多克隆荧光抗体效果较好,但此法建立在针对炭疽杆菌细胞表面抗原的多克隆抗体基础上,因此存在交叉问题,即相近的细胞如蜡样芽胞杆菌也可被检出。

Mesh词表词汇实用例句：荧光抗体技术,间接-Fluorescent Antibody Techniques,Indirect

1：A series of methods such as fluorescent antibody technique,immunoenzymatic histochemistry,western blot and flow cytometrey were used to make sure that HMCD59 protein expressed on cell membrane．

荧光抗体技术及其在植物病原细菌和其它病原物检测中的应用

一、引言血清学作为一门技术学科是植物病原生物研究的重要工具之一。自从1918年首次应用于植物病原细菌研究以来,之后的几十年先后相继有不同特点的血清学方法和不同特异性的免疫源开始应用于植物病原细菌的研究,目前已广泛应用于植物病原细菌的鉴定和分类,不同环境、植物材料和传病介体中病原细菌的检测。血清学技术对植病学的最大影响就是用于病原物的检测,其中尤以荧光抗体技术是最为推崇的方法。

荧光抗体技术及其对分割沙门氏菌的检验

分割肉品(猪、兔、鸡)沙门氏菌检验是加工出口肉品的法定检验项目。由于沙门氏菌常规细菌学检验手续繁琐,费时长,给加工生产带来困难。同时检验抽样数量较多,需要花费一定人力物力。故分割肉品沙门氏菌检验快速化,势在必行。应用荧光抗体技术检验食品沙门氏菌已在国际上得到公认。我国外贸商检部门经多年探索试验,应用荧光抗体作为沙门氏菌的检验积累了大量数据。但是由于荧光标记抗体市上缺少供应,而加工厂实验室以自己免疫动物提取多价沙门氏菌抗血清,并进行异硫氰酸荧光黄(FITC)标记尚有很多困难,影响推广应用。鉴于生产部门的迫切需要,故对有关抗体制作及荧光抗体技术等方面进行探索和研究,现介绍方法如下: