生理病理状态下大鼠体内荭草花抗心肌缺血再灌注损伤活性成分筛选

目的基于生理病理状态筛选大鼠体内荭草花抗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的潜在活性成分。方法将SD大鼠分为正常对照组、正常给药组、MIRI对照组和MIRI给药组,每组5只。经药物干预或造模、药物干预后,收集各组大鼠的血浆样品,使用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术进行色谱分离和质谱数据采集,经比对对照品图谱、各血浆样品图谱并参考相关文献后,对原型入血成分和代谢产物进行分析;同时,确定正常给药组和MIRI给药组大鼠血浆样品中的共有峰,结合主成分分析和“有监督”的正交偏最小二乘法-判别分析,以变量重要性投影(VIP)值>1为标准,筛选差异移行成分,并推测生理病理状态下荭草花抗MIRI的潜在活性成分。将SD大鼠分为对照组、MIRI组、阳性对照组(复方丹参片0.2 g/kg,每天3次)、各潜在活性成分组(各潜在活性成分均为10 mg/kg,每天2次),每组5只。各药物组大鼠灌胃相应药液,连续3 d。末次给药后,对各组大鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)泄漏量进行检测、比较。结果从荭草花提取物总离子流图中获取主要色谱峰26个,确定了其中14个色谱峰,包括没食子酸、儿茶素、原儿茶酸等。从正常大鼠血浆样品中检测到移行成分15个,其中原型入血成分6个、代谢产物9个;从MIRI大鼠血浆样品中检测到移行成分19个,其中原型入血成分6个、代谢产物13个。两者共有移行成分8个,其中山柰酚的葡萄糖醛酸化代谢产物、槲皮素的羰基化代谢产物和N-p-香豆酰酪胺对应色谱峰的VIP值均大于1。与MIRI组比较,各潜在活性成分组大鼠血浆SOD活性均显著升高(P<0.01),LDH、CK-MB、cTnⅠ泄漏量均显著降低(P<0.01)。结论N-p-香豆酰酪胺、槲皮素、山柰酚和山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷可能是荭草花提取物抗MIRI的潜在活性成分。

心肌缺血再灌注损伤大鼠体内荭草花活性成分的PK-PD研究

目的建立药代动力学-药效动力学(PK-PD)结合模型,探讨荭草花提取物在心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型大鼠体内活性成分的动态变化与其药效消长之间的关系。方法荭草花药材经水煮醇沉、正丁醇萃取得荭草花提取物;取SD大鼠6只,采用冠脉结扎法制备MIRI模型,术前大鼠灌胃荭草花提取物86 g/kg,3次/d、连续5 d,于末次给药后5 min、10 min、15 min、30 min、1.0 h、1.5 h、2.0 h、4.0 h、6.0 h、8.0 h、10.0 h、12.0 h、24.0 h、36.0 h及48.0 h经尾静脉取血,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测血浆样本中6种活性成分(原儿茶酸、槲皮苷、花旗松素、N-p香豆酰酪胺、山奈素-3-O-β-D-葡萄糖苷及山奈素-3-O-α-L-鼠李糖苷)的质量浓度,获取各成分血药浓度-时间曲线;采用试剂盒测定血浆样本中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及心肌钙蛋白I(cTn-I)的浓度,获取效应-时间曲线;通过Winnonlin 6.4软件分别对药物浓度-时间与效应-时间进行拟合,建立PK-PD模型。结果荭草花提取物中各有效成分均能够较好地与各药效指标拟合,以SOD为药效指标时,各成分的PK-PD模型以Sigmoid E_(max)拟合较优;以LDH、CK-MB及cTn-I为药效指标时,各成分的PK-PD模型以Inhibitory Effect拟合较优。结论荭草花提取物中的原儿茶酸、槲皮苷、山奈素-3-O-β-D-葡萄糖苷及山奈素-3-O-α-L-鼠李糖苷、花旗松素、N-p香豆酰酪胺具有心肌缺血保护作用,其浓度与药效指标SOD、LDH、CK-MB及cTn-I的水平有相关性。

UPLC-MS法测定大鼠血浆中荭草花的3个指标成分及其药动学研究

目的建立UPLC-MS法测定大鼠口服荭草花提取物后血浆中原儿茶酸、山柰素-葡萄糖、槲皮苷的分析方法,并用该方法研究原儿茶酸等3个指标成分的药物代谢动力学。方法血浆样品选择酸化后甲醇沉淀蛋白,Waters BEH C18（2.1 mm×100 mm,1.7μm）柱,流速：0.30 m L·min-1,流动相：0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,扫描方式为多反应离子监测（SIR）。结果 3种成分分别在2.74-677、0.69-186、0.82-200μg·L-1呈良好线性关系。提取回收率、精密度、准确度和稳定性均良好达到测定要求。原儿茶酸、山柰素-葡萄糖和槲皮苷3个指标成分的Tmax（h）分别为0.46±0.1、0.79±0.33和2.63±4.6,Cmax（μg·L-1）分别为463.8±207.81、18.53±7.82和137.38±71.09。结论建立的UPLC-MS检测方法具有特异、快速、准确和灵敏的特点,能够同时测定生物样品中原儿茶酸等3种成分的血药浓度,并成功应用于荭草花在正常大鼠体内这3个指标成分的药动学研究。

荭草花中五种成分在Caco-2细胞中的吸收特性研究

目的 利用Caco-2单层细胞模型研究荭草花提取物的吸收摄取特性。方法 采用UPLC-MS/MS考察荭草花提取物在不同浓度、时间、温度、pH、P-糖蛋白抑制剂(维拉帕米)和环孢菌素A条件下Caco-2细胞的吸收差异。结果 荭草花提取物在Caco-2细胞中的吸收具有浓度和时间依赖性,其中槲皮素等5个成分在摄取90min后逐渐降低;且在37℃条件下吸收最好;槲皮素pH为5条件下,利于其吸收,其余成分均在pH为6有利于吸收;加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米和环孢菌素A后发现,槲皮素和山奈酚受P-糖蛋白抑制剂维拉帕米影响,摄取量明显增加。结论 荭草花提取物中槲皮素等5种成分的吸收机制主要表现为被动扩散,P-糖蛋白参与其槲皮素和山奈酚的摄取过程。

荭草花不同制备工艺样品对犬急性心肌缺血的保护作用

目的:观察荭草花不同制备工艺的样品对犬急性心肌缺血的影响。方法:采用冠状动脉左前降支结扎所致犬急性心肌缺血模型,通过心外膜电图描记、硝基蓝四唑(NBT)组织化学染色,考察不同制备工艺的荭草花样品对冠脉结扎所致麻醉犬心肌缺血程度(ΣST)、缺血范围(NST)、心肌梗死面积以及血清中LDH、CK水平的影响。结果:与模型组比较,荭草花经水提醇沉后正丁醇萃取部位可显著降低犬冠脉结扎所致心肌缺血的程度和损伤范围,降低冠脉结扎犬血清中CK、LDH水平(P<0.05或P<0.01)。结论:荭草花经水提醇沉后正丁醇萃取的样品对犬心肌缺血具有显著的保护作用。

荭草花提取物中5种成分在大鼠体内的肠吸收动力学

目的研究荭草花Polygonum orientale L.提取物中原儿茶酸、花旗松素、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷、山柰素-鼠李糖苷在大鼠体内的肠吸收动力学特征。方法采用在体肠灌流模型,超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLCESI-MS/MS)法测定这5种成分质量浓度。结果这些成分对p H值均不敏感,可能不是药物转运蛋白P-gp的底物;原儿茶酸、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷和山柰素-鼠李糖苷在高质量浓度下存在饱和现象;胆汁对原儿茶酸的吸收具有抑制作用,而对山柰素-葡萄糖苷的吸收具有促进作用。结论荭草花提取物中这5种成分在整个肠段都有吸收,而且小肠优于结肠,符合一级动力学特征。

响应面法优化荭草花提取工艺研究

目的:利用响应面分析法优化荭草花的最佳提取工艺。方法:以荭草花中花旗松素的含量为指标,选取乙醇浓度、提取时间、液料比3个因素进行Box-Behnken中心组合设计,采用响应面法对荭草花的提取工艺参数进行优化。结果:荭草花的最佳提取工艺为:乙醇浓度为65%,提取时间为129 min,液料比为18,在该条件下平均提取量为2.79 mg/g。结论:采用响应面法优化提取工艺合理,方法简单,且具有较好的预测性。

荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的:探究荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用氯化钴(CoCl_2)建立缺氧复氧损伤H9c2细胞模型,实验分正常对照组、模型组及荭草花提取物不同浓度组。应用MTS检测细胞存活率;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)释放量及细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot测定cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:利用800μmol/L CoCl_2缺氧22 h,复氧2 h可建立缺氧复氧损伤心肌细胞模型。与模型组比较,荭草花提取物能显著升高心肌细胞存活率,降低LDH、CK释放量及细胞内MDA含量,提高细胞内SOD、CAT活性,并呈浓度依赖性抑制CoCl_2诱导的缺氧复氧损伤。荭草花提取物能下调促凋亡蛋白cleaved Caspase-3、Bax的表达,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡。结论:荭草花提取物对心肌细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增强细胞清除自由基能力及抑制细胞凋亡有关。

UPLC-MS/MS同时测定静脉注射荭草花提取物大鼠血浆中3种成分及其药代动力学研究

目的:建立UPLC-MS/MS测定大鼠尾静脉注射荭草花提取物后的大鼠血浆中3种成分(原儿茶酸、山柰素-葡萄糖苷、檞皮苷)含量的分析方法,并研究这3种成分在大鼠体内药代动力学特征。方法:采用Waters BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;质谱采用电喷雾电离源(ESI);扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果:静脉注射荭草花提取物后原儿茶酸、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷在大鼠体内的半衰期分别为(41.9±12.3)min、(71.3±56.8)min和(90.3±74.8)min,达峰浓度(1.7±0.7)μg/m L、(2.1±0.9)μg/m L和(8.7±3.7)μg/m L。结论:实验结果表明建立的方法快速、准确、灵敏,精密度回收率均符合生物样品的测定要求,适用于原儿茶酸、山柰素-葡萄糖苷、檞皮苷3个成分在大鼠血浆中浓度的测定,3个成分在大鼠体内的药动学特征均符合二室模型。

荭草花有效组分在人肠道菌群中体外代谢特征分析

为考察荭草花有效组分在离体人肠道菌群中的代谢特征。通过在离体培养的人肠道菌液中,加入荭草花有效组分,并在厌氧环境下进行培养,孵育的代谢产物采用超高效液相串联电喷雾飞行时间质谱仪进行检测。运用Metabolite ToolsTM分析平台对样品中的代谢产物进行预测分析,结合Mass Defect Filter技术并运用Data Analysis中的Smart Formula功能推测代谢产物化学式。结果表明从药物-肠菌孵育液中共检测出14个代谢产物,主要包括N-p-香豆酰酪胺,N-trans-对羟基苯乙基阿魏酰胺的氢化、氢化羟基化、甲基化羟基化代谢产物,山柰酚的双脱氧、C2-C3双键还原、脱氧氢化代谢产物,槲皮素的羟基化、O-C2键开环裂解脱氧化、C2-C3双键还原O-C2键开环裂解代谢产物,儿茶素的氢化代谢产物和没食子酸的脱羧、甲基化代谢产物。上述结果表明荭草花有效组分在人离体肠道菌群中主要发生还原、氧化、水解Ⅰ相反应和甲基化Ⅱ相反应,为进一步研究其在体内的作用机制提供实验依据。

荭草花HPLC特征指纹图谱研究

目的:建立荭草花HPLC特征指纹图谱,为该药材的品质评价提供参考。方法:以花旗松素为参照物,采用HPLC法,Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱);检测波长为280 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为30℃。结果:12个不同产地的荭草花药材指纹图谱标定出18个共有峰,其中指认出4个共有峰,分别为花旗松素、儿茶素、没食子酸、3,3'-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷。通过"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件计算,12个不同产地荭草花指纹图谱相似度均大于0.9。结论:本实验方法重现性好,指纹图谱专属性强,可为荭草花药材的鉴别及质量控制提供科学依据。

荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的改善作用

目的:研究荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的的改善作用及机制。方法:将H9c2心肌细胞为正常对照组、模型组和荭草花提取物低、中、高浓度组(20、40、80μg/mL),除正常对照组外,其余各组细胞以800μmol/L CoCl_(2)复制缺氧复氧损伤模型,然后观察细胞凋亡情况,并分别检测细胞中ROS水平、钙离子水平(细胞质中)、线粒体膜电位(MMP)水平、ATP酶(Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶)活性、细胞质中细胞色素c(Cyto c)/线粒体中Cyto c比值、再灌注补救激酶(RISK)信号通路相关蛋白[蛋白激酶B(Akt)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)]的磷酸化水平以及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达水平。另取细胞分为正常对照组、模型组、荭草花提取物组(80μg/mL)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002+CoCl_(2)组(15μmol/L LY294002+800μmol/L CoCl_(2))、LY294002+荭草花提取物组(15μmol/L LY294002+80μg/mL荭草花提取物)、丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)抑制剂PD98059+CoCl_(2)组(25μmol/L PD98059+800μmol/L CoCl_(2))、PD98059+荭草花提取物组(25μmol/L PD98059+80μg/mL荭草花提取物),同法培养后,测定细胞中Akt蛋白和ERK1/2蛋白的磷酸化水平,以验证荭草花提取物对RISK信号通路的激活作用。结果:与模型组比较,荭草花提取物各浓度组细胞的细胞核固缩现象减轻,凋亡小体数量减少;细胞中ROS水平、钙离子水平(低浓度组除外)、MMP、细胞质中Cyto c/线粒体中Cyto c比值和HIF-1α的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);ATP酶活性(低浓度组除外)、Akt蛋白和ERK1/2蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.01)。加入抑制剂LY294002、PD98059后,细胞中Akt蛋白和ERK1/2蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:荭草花提取物可改善H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤,其作用机制可能与抑制心肌细胞凋亡、提高ATP酶活性、保护线粒体、调节RISK信号通路相关蛋白和HIF-1α蛋白表达有关。

荭草花提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:筛选荭草花中的抗肿瘤活性部位。方法:采用MTT法观察荭草花的各提取部位对人宫颈癌HeLa细胞、人肝癌SMMC-7721细胞株生长的影响。结果:荭草花的乙酸乙酯部位及正丁醇部位对人宫颈癌HeLa细胞的抑制率约分别为60%及40%;对人肝癌SMMC-7721细胞均约为60%,并具有明显的量效关系。结论:荭草花对人宫颈癌HeLa细胞及人肝癌SMMC-7721细胞的增值具有一定的抑制作用,是一类具有开发前景的抗肿瘤中药。

荭草花提取物对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用研究

目的:研究荭草花提取物对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型大鼠的保护作用,为其药用资源的深度开发提参考。方法:将24只大鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、复方丹参片组(阳性对照,0.17 g/kg)和荭草花提取物组(以生药计为86 g/kg),每组6只。每天灌胃给药1次,剂量均为2 m L/100 g。连续给药4 d后,除假手组外,其余各组大鼠均采用左冠状动脉前降支法复制MIRI模型。再灌注24 h后再给药1次,给药结束后监测各组大鼠心电图ST段变化,检测各组大鼠血浆中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、心肌钙蛋白(cTn-I)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)水平,计算各组大鼠心肌梗死率并观察其心肌组织病理形态学变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心电图ST段显著抬高(P<0.01);血浆中LDH、CK、CK-MB、cTn-I水平显著升高(P<0.01),SOD、NO水平显著降低(P<0.01);心肌梗死率显著升高(P<0.01),心肌组织发生炎性细胞浸润、心肌细胞胞质结构疏松等病理形态学改变。与模型组比较,复方丹参片组和荭草花提取物组大鼠心电图ST段显著下移(P<0.05);血浆中LDH、CK、CK-MB、cTn-I水平显著降低(P<0.05),SOD、NO水平显著升高(P<0.05);心肌梗死率显著降低(P<0.05),心肌组织中炎性细胞浸润、组织水肿等病变不同程度减轻。结论:荭草花提取物可能通过抗氧化损伤发挥其对MIRI的保护作用。

荭草花提取物对H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用研究

该文首先建立了人脐静脉内皮细胞（HUVEC）过氧化氢（H2O2）氧化损伤模型，并筛选了荭草花提取物的低、中、高给药剂量来评价荭草花提取物对H2O2所致HUVEC细胞氧化损伤的保护作用并探讨其机制。采用MTS法检测HUVEC细胞活力；生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出量，细胞内丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力；qRT-PCR和Westernblot法分别测定Bcl-2，Bax的mRNA及蛋白水平；Westernblot法测定cleaved caspase-3的蛋白水平。结果表明，120μmol·L^-1H2O2作用0．5h后，HUVEC细胞存活率下降至55％左右，并且使HUVEC细胞的LDH漏出量、MDA含量增加，SOD及CAT活性降低。此外，H2O2还能上调HUVEC细胞中促凋亡蛋白cleavedeaspase-3蛋白水平和Bax的mR-NA及蛋白水平，下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平。与H2O2模型组相比，50～200mg·L^-1荭草花提取物预处理24h能明显增加氧化损伤后细胞存活率，降低LDH漏出量、MDA含量，提高SOD及CAT活性，下调促凋亡蛋白cleavedcaspase-3蛋白水平和Bax的mRNA及蛋白水平，并上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平。实验结果提示，荭草花提取物对H2O2所致的HUVEC细胞氧化损伤具有一定的保护作用，其机制可能与增强细胞清除自由基能力及抑制细胞凋亡有关。

超高效液相色谱测定大鼠口服荭草花后入血成分

目的:通过对荭草花提取物血清药物化学研究方法的建立,探讨荭草花提取物口服吸收后的入血成分。方法:采用血清药物化学研究方法,在建立荭草花提取物超高效液相(UPLC)特征图谱的基础上,通过比较荭草花提取物、荭草花给药后含药血清、空白血清UPLC特征图谱,鉴定荭草花口服给药后的血中移行成分。结果:口服荭草花提取物后,从血清中发现了15个入血成分,其中6个为荭草花提取物中原型吸收入血的成分,其余入血成分可能为原型成分的代谢产物。结论:15个入血成分可能是荭草花的体内直接作用物质,对其进行深入研究将有助于为荭草花的药效物质基础及药效机制奠定基础。

基于UHPLC-Q-TOF-MS分析荭草花提取物在H9c2心肌细胞中效应物质

目的:利用H9c2心肌细胞和UHPLC-Q-TOF-MS技术筛选荭草花抗心肌缺血作用的活性成分。方法:用心肌细胞选择性地结合荭草花提取液中的活性成分,洗去未结合的其他成分后,使细胞靶点失活,被结合的活性成分从心肌细胞中释放出来,采用Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~2 min,95%~79%A;2~5 min,79%A;5~6.5 min,79%~60%A;6.5~7.5 min,60%~55%A;7.5~9.5 min,55%~0%A;9.5~10 min,0%~95%A),电喷雾离子源(ESI)正、负离子模式下扫描采集数据,通过采用对照品比对及二级碎片离子对化学成分进行鉴定。结果:检测出荭草花提取物中可与心肌细胞结合的17个成分,采用对照品比对后,确定8个色谱峰所表征的化学成分,依次为原儿茶酸,儿茶素,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷,槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷,山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷,N-p-香豆酰酪胺,槲皮素和山柰酚。结论:通过分析心肌细胞破碎液中与活性细胞相结合的成分,筛选出了荭草花提取物中能与心肌细胞有相互作用的成分,为明确荭草花的药效物质基础提供了科学依据。

UPLC-Q-TOF-MS/MS分析荭草花有效组分在大鼠血清和尿液中的原型成分及其代谢产物

应用超高效液相色谱串联电喷雾飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析SD大鼠灌胃给予荭草花有效组分后所得血清和尿液中的原型成分及代谢产物。采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),以0. 1%甲酸水(A)-0. 1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾正负离子模式下获取生物样品中化学成分的质谱数据,通过比较空白样品、给药样品和两者的差异图谱确认灌胃后大鼠血清和尿液中原型成分及其代谢产物。利用TOF/MS得到的准确相对分子质量,多级质谱裂解信息,结合对照品及相关文献报道结果对比,对尿液和血清中荭草花原型成分和代谢产物进行鉴定。结果发现,在大鼠血清、尿液中分别检测到12,26个代谢产物(含交叉成分),代谢途径主要包括以氢化还原、开环裂解、羟基化、甲基葡萄糖醛酸化、葡萄糖醛酸化、硫酸化等。该实验建立的方法可靠、有效,可用于荭草花有效部位在血清和尿液中的代谢研究,研究结果为该药材今后的药效物质基础研究提供了理论参考。

UPLC同时测定荭草花中7种指标成分的含量

目的:本研究采用UPLC建立了同时测定贵州产荭草花药材中没食子酸、儿茶素、高朦胧木素、花旗松素、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷7种指标成分的含量测定方法。方法:采用ACQU-ITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.3mL.min-1,梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温45℃。结果:7个指标成分在选定的范围内线性关系良好(r≥0.999 9),平均加样回收率(n=6)在97.90%～101.4%,RSD 2.3%～3.8%。结论:试验结果显示贵州产荭草花药材所含化学成分基本相同,但被测成分的含量有一定差异,8月中下旬采收的药材中被测成分的含量相对较高,质量较好。

离体外翻肠囊法研究荭草花提取物中9个成分的肠吸收特征

研究荭草花提取物中原儿茶酸、异荭草素、荭草素、牡荆素、木犀草苷、花旗松素、山柰素-3-O-α-D-葡萄糖苷、槲皮苷和山柰素-3-O-β-L-鼠李糖苷9种主要有效成分在大鼠小肠的吸收特征。采用外翻肠囊法进行离体肠吸收试验,以UPLC-MS/MS法测定各成分含量,分析各成分在不同部位的吸收特性。荭草花提取物中上述9种成分在不同肠段的吸收均呈线性吸收,且符合零级吸收速率,肠吸收速率常数(Ka)随提取物给药剂量的增加而增加,表明其为被动吸收,各成分在各肠道的吸收趋势均为十二指肠、空肠、回肠优于结肠。