幽门螺杆菌分子生物学药敏检测方法研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)是最常见的人类细菌病原体,与多种消化道疾病相关。根除H.pylori可显著降低消化道溃疡的发病率和癌症的发病风险,但由于抗生素的不规范使用等问题,H.pylori的耐药菌株日渐增多,给临床根除治疗带来极大困难。因此,通过药敏检测结果指导抗菌药物的选择,从而避免因抗菌药物选择不当而导致的治疗失败和耐药菌株的产生显得至关重要。本文主要针对H.pylori的分子生物学药敏检测方法、存在的问题作一梳理,以期为临床和研究提供科学的参考。

拉曼光谱用于细菌快速药敏检测的研究进展

致病菌对人类健康构成重大威胁,抗菌药物的滥用导致了细菌耐药性的发展和传播。目前,临床微生物室常用的药敏试验,如纸片扩散法、浓度梯度纸条扩散法、肉汤稀释法和全自动药敏分析等都是基于细菌生长的方法,且操作流程繁琐,需要8~16 h才能出结果。该文从快速药敏检测(RAST)的研究出发,重点叙述了拉曼光谱在RAST领域的研究进展。利用拉曼光谱对细菌进行基于代谢表型的药敏检测,检测时间明显缩短,优于常规基于细菌生长的药敏方法。但该方法缺少大规模的临床分离株验证,而且难以实现临床标本中细菌的免分离检测。该文对RAST技术的临床验证、可重复性评估、临床适用性评估、准确性评估、拉曼光谱与电阻抗及微流控技术的创新结合及其在复杂临床标本中直接药敏检测等方面进行展望。

病原微生物药敏检测方法分析

抗生素敏感试验在当前病原微生物耐药性持续增长的形势下,已成为指导临床科学合理用药不可或缺的重要环节。因此,药敏检测方法的完善与发展是快速获取科学、准确微生物耐药谱的前提,也是实现有效临床治疗的重要保障。本文旨在探究纸片扩散法、稀释法等多种微生物药敏检测方法的检验原理和优缺点,预测抗菌治疗的效果,帮助临床医师选择合适的抗菌药物,为药敏检测方法的发展提供参考。

微肿瘤模型构建及其药敏检测技术中国专家共识(2023年版)

患者来源类肿瘤细胞簇(Patient-DerivedTumor-LikeCellCluster,PTC)简称微肿瘤或微肿瘤PTC,是一种新型的原代3D肿瘤模型,该模型在病理组织学特征、分子遗传学特征方面保持了跟原始肿瘤组织的高度相似性。同时,该模型在培养过程中保留了原始肿瘤组织中的成纤维细胞和免疫细胞,从而高度还原了原始肿瘤组织微环境特征。微肿瘤PTC模型可广泛的应用于肿瘤基础科学研究、精准治疗和新药研发等领域。然而,由于微肿瘤PTC模型的构建及应用涉及到多种技术,流程多,影响因素多,目前,国内对微肿瘤PTC模型构建、鉴定、药敏检测等操作尚未建立规范标准。为此,特组织编写《微肿瘤模型构建及药敏检测技术中国专家共识(2023年版)》,以利于推动和指导微肿瘤PTC模型构建以及基于此模型药敏检测技术的应用。

胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)的建立及初步临床应用研究

目的建立胶滴肿瘤体外药敏检测技术,探讨其在肿瘤个体化治疗中应用的可行性。方法用人类肿瘤细胞系建立胶滴肿瘤体外药敏检测技术,并用该技术对50例不同肿瘤类型的原代肿瘤标本进行体外药敏检测实验研究,每种肿瘤标本分别进行了4～5种抗肿瘤药物的敏感性测定。结果在体外成功建立了胶滴肿瘤药敏检测技术,标本整体评价率为82.0%(41/50),检测结果与临床经验有效率间有较好的符合性。结论CD-DST体外肿瘤药敏检测技术是一种较好的药敏检测方法,标本可评价率为82.0%(41/50),所需标本量小,可反映病人对不同抗肿瘤药物敏感性的差异,检测结果与临床经验有效率有较好的符合性,对抗肿瘤药物的体外筛选和对个体化治疗具有实际应用价值。

新型吸管式药敏检测盒的制备及在奶牛乳房炎诊治中的初步应用

为探索适于在兽医临床使用的药敏检测方法,本研究根据试管稀释法原理,研制组装新型吸管式药敏检测盒,并对该药敏检测盒的准确性、稳定性进行验证,然后对引起奶牛乳房炎的临床分离病原菌进行药敏检测。结果表明,新型吸管式药敏检测盒准确性高、稳定性好、便于保存,对临床分离病原菌的药敏检测结果与临床治疗情况基本相符,说明新型吸管式药敏检测盒适于在兽医临床使用。

新型吸管式药敏检测盒的应用及山东省禽源病原菌抗药性监测网络的构建

为了适应兽医临床的简陋条件和在分散的养殖场进行联合抗药性监测，按照药敏试验中试管稀释法原理研制灵敏、准确、稳定、操作简单、无需专门仪器设备的原位吸管式药敏检测盒，4-7h快速判断11种药物对目标病原菌敏感性，指导临床用药，并在肉鸡养殖中进行了应用；同时联合六和、中慧、正大、九联、民和、春雪、益生等省内大型养殖企业，借助企业的技术体系建立山东省动物源病原菌抗药性监测网络、数据库、菌种库，利用网络技术对抗药性数据进行收集、汇总，并实现网上查询，对了解跟踪山东省动物源病原茵抗药性发展规律具有重要参考价值。

胶滴肿瘤药敏检测技术的研究进展

胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)是一种体外肿瘤药敏检测技术,其突出特点是能够排除成纤维细胞对实验的干扰,在体外对抗癌药物的特异性杀伤作用做出客观评价。所需标本量小(3×103个细胞/孔)的特点扩大了该技术的应用范围,弥补了目前其他药敏技术的不足。国外临床研究表明此技术的体外检测结果与临床疗效间存在较好的相关性。CD-DST作为一种先进的体外肿瘤药敏检测技术,对化疗药物杀伤肿瘤细胞有效性的评价、化疗方案的筛选以及肿瘤化疗个体化治疗的推广均具有实际意义。国外研究表明,该技术的应用能够提高恶性肿瘤患者的疗效和临床医师用药的科学水平。

南海西沙海域海水细菌学调查及药敏检测

目的了解我国南海西沙海域海面水细菌种类分布及对抗菌药物的敏感性。方法对取样海水进行细菌分离并计数,应用Phoenix-100细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏试验。结果80份海水样本检出12种共84株细菌,其中溶藻弧菌38株(45.24%)、少动鞘氨醇单胞菌11株(13.10%)、土生丛毛单胞菌9株(10.72%)、假单胞菌属7株(8.33%)、莫拉氏菌属6株(7.14%)、西地西菌5株(5.95&),其他细菌(气单胞菌、不动杆菌各2株,成团泛菌、金氏杆菌、腐败西互菌和产吲哚萨顿菌各1株)8株,药敏结果显示,16种抗生素中,除溶藻弧菌、少动鞘氨醇单胞菌和土生丛毛单胞菌对氨曲南、哌拉西林,少动鞘氨醇单胞菌对头孢噻肟、头孢吡肟敏感率较低外,其余抗生素均呈高度敏感性。结论本次调查对了解南海西沙海域海水细菌种类分布及为海上意外伤、战伤早期防治细菌感染的抗菌药物应用有重要意义。

大通量的抗生素药敏检测盒的设计及应用

基于琼脂稀释法,设计制作了96点阵抗生素药敏检测盒。以NCCLS(2007)抗生素最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)微量稀释法为对照,测定了分离自规模化猪场饲养员和幼儿园、中学学生的98株大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星和中药三黄汤的药物敏感性。结果表明,两种方法测定的最低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC)、MIC都表现高度对称,其差值的平均值都在一倍稀释度内,在差值0.5μg/mL范围内都达到90%以上的符合。MBC与MIC高度相关,r=0.94～0.99。这些指标说明两种方法测定的MBC与MIC平行性好。以总体的抗生素敏感性频率比较,两种方法测定值也很相近,符合率为93.93%。本检测盒还可以准确测定中药三黄汤对大肠杆菌的MIC(125～500mg/mL)。96点阵抗生素药敏检测盒是适合于实验室进行大规模抗药性监测的新工具,具有简易、准确、快速、大通量、节约的优点。配合96孔培养板,一次可以测定96株病原菌对一种抗生素或中药的敏感性。

病原微生物药敏检测方法的研究进展

抗生素敏感试验在当前病原微生物耐药性持续增长的形势下,已成为指导临床科学合理用药不可或缺的重要环节。因此,药敏检测方法的完善与发展是快速获取科学、准确微生物耐药谱的前提,也是实现有效临床治疗的重要保障。本研究介绍了当前应用于微生物药物敏感检测的常规方法,如纸片扩散法、稀释法、Etest法等,简要分析了它们之间的优缺特性,并对近年来一些新兴发展的快速药敏检测方法进行了总结以及展望了不同类型药敏检测方法的发展和应用趋势。

济南地区革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的现状及药敏检测

目的 :了解济南地区耐第三代头孢菌素的革兰阴性杆菌中AmpC酶和超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)的状况 ,并对 18种抗菌药物作药敏试验 ,比较产酶菌与非产酶菌对 18种抗菌药物的耐药率。为临床治疗产酶菌引起的感染提供理论依据。方法 :应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶。应用美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐的纸片扩散确证法检测ES BLs。以K B琼脂扩散法做药敏试验。对AmpC阳性者进行质粒接合试验。 结果 :在受检的 2 5 0株革兰阴性杆菌中 ,5 3株(2 1.2 % )产AmpC酶 ,98株 (39.2 % )产ESBLs ,6株 (2 .4 % )同时高产AmpC +ESBLs酶。 5 3株AmpC酶阳性菌中 ,6株临床分离菌的耐药质粒接合转移成功。产酶菌对头孢吡肟、亚胺培南和阿米卡星耐药率低。在 7种喹诺酮类抗菌药物中 ,左氧氟沙星及加替沙星的耐药率较其他喹诺酮类低。结论 :济南地区革兰阴性杆菌耐药性的产生 ,是由于细菌产生AmpC酶和ES BLs引起的 ,以ESBLs为主。AmpC酶既可以染色体介导也可以质粒介导 ,以染色体介导为主。治疗产 2种 β内酰胺酶的细菌引起的感染亚胺培南为首选 ,头孢吡肟、左氧氟沙星、加替沙星和阿米卡星可作为选用药物之一。

大肠癌化疗药敏检测及临床意义

目的 针对大肠癌不同个体术后筛选敏感的化疗药物 ,制定出针对性强、合理的化疗方案。方法 对 30例病理确诊的大肠癌患者术中取出的活体标本制成单细胞悬液 ,用MTT法进行化疗药物敏感性检测。结果 不同肿瘤个体 ,对各种抗癌药物敏感性不同 ,二药联合应用其敏感性明显高于单药。结论 体外药敏实验能指导临床用药 ,避免化疗的盲目性 。

ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术在治疗非小细胞肺癌胸水中的临床应用

目的:研究三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗中的应用,为临床治疗方案的选择提供依据。方法:选择52例伴有胸水的NSCLC患者,根据患者及家属治疗意愿分为经验治疗组和药敏治疗组。经验治疗组20例患者根据经验给予(紫杉醇联合卡铂,PTX+CBP)标准方案全身化疗;药敏治疗组32例患者对胸水标本分别进行顺铂(DDP)、诺维本(NVB)、紫杉醇(PTX)、卡铂(CBP)、健择(GEM)、PTX+CBP、NVB+CBP、GEM+DDP体外药敏检测,根据体外药敏检测结果选用化疗方案,比较2组患者治疗有效率。结果:体外药敏试验,单一用药中NVB和PTX对NSCLC的体外敏感率最高,均为28.1%;GEM的体外敏感率次之,为25%;CBP的体外敏感率为21.9%;DDP的体外敏感率最低,为17.6%。联合用药方案显示较好的治疗效果,其中GEM+DDP的体外敏感率最高,达55.9%;PTX+CBP的体外敏感率次之,达50%;NVB+CBP的体外敏感率最低,为40.6%。药敏治疗组患者有效率为65.6%,经验治疗组有效率为40.0%,两组有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同化疗药物对NSCLC的体外敏感率不同;根据药敏试验结果选择化疗方案可取得更好的临床治疗效果。

解脲脲原体药敏检测的研究进展

解脲脲原体(ureaplasma urealyticum,UU)为泌尿生殖道常见微生物之一,影响细胞蛋白合成的抗菌药物,如大环内酯类、喹诺酮类以及四环素类药物为常用治疗药物,临床上一般将这三类药物作为治疗支原体感染的首选药物。然而UU对此三类药物的耐药性有逐年增加的趋势,本文就UU的药敏试验方法、国内外耐药现状和对UU耐药菌株的治疗策略等作一综述。

ATP生物荧光技术在卵巢癌体外药敏检测中的应用

目的 评价ATP生物荧光肿瘤药敏检测与临床疗效的相关性,探讨其临床应用价值。方法 对34例卵巢癌新鲜瘤组织和腹水进行肿瘤细胞分离、原代培养,以ATP生物荧光体外药敏检测技术进行检测。结果ATP生物荧光法测定细胞数量具有相关性好(r=0.9981),量程宽(10-100000个细胞),敏感性高(最小检测10个活细胞)的优点,其检测结果与其他方法相比有较高的相关性。32例卵巢癌病人体外药敏结果表明,其整体预测值为90.6％;其中阳性预测值为94.7％,阴性预测值为84.6％,敏感性90％,特异性91.7％。各种药物体外药敏检测结果与临床资料基本相符。结论 ATP生物荧光肿瘤药敏检测结果与临床疗效具有较好的相关性。该药敏检测方法对于筛选及临床应用新药,研究和确定新的化疗方案和治疗原则,评估联合用药方案,实现肿瘤病人的个体化化疗具有指导作用。

ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术在乳腺癌化疗中的应用研究

目的 探讨ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术(ATP-TCA)在乳腺癌化疗中的应用价值。方法 取40例乳腺癌改良根治术、淋巴结活检和胸腔积液标本进行ATP-TCA药敏检测。结果 ATP-TCA肿瘤药敏检测技术在乳腺癌标本中的可评价率为90％(36/40);化疗药物对乳腺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性;10种化疗药物的敏感率分别为:氟尿嘧啶(5-Fu)33.3％、顺铂(DDP)37.5％、环磷酰胺(CTX)29.2％、足叶乙苷(VP-16)16.7％、丝裂霉素(MMC)22.0％、表阿霉素(EPI)41.7％、诺维本(NVB)45.8％、阿霉素(ADM)41.70k、泰素(PTX)54.2％、羟基喜树碱(HCPT)25.0％。初步研究表明ATP-TCA体外检测结果与实际临床疗效具有良好的相关性。结论 ATP-TCA检测技术是一种准确、可靠的肿瘤药敏检测技术。该技术检测结果与临床实际疗效具有较好的相关性,可用于指导乳腺癌化疗和化疗药物的新适应证研究。

大肠癌细胞体外培养的化疗药敏检测研究

应用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法进行大肠癌细胞体外培养的化疗药敏检测，结果显示可检测到的２０例大肠癌标本中以５－Ｆｕ最为敏感（ＩＲ＝５４．７％±１４．１％），ＭＭＣ（ＩＲ＝４３．０％±１１．４％，Ｐ＜０．０５）和ＡＤＭ（ＩＲ＝４２．０％±１１．１％，Ｐ＜０．０５）次之，ＤＤＰ为不敏感（ＩＲ＝２５．９％±１２．８％，Ｐ＜０．０１），各药物组间的化疗影响药敏存在显著性差异，Ｐ＜０．００１。研究结果证实ＭＴＴ比色法是一种快速、准确地检测实体瘤化疗药材的有效方法，检测中预防细胞体外培养的微生物污染和增加瘤细胞的获得率是实验成功的关键。同时也为临床选择合适的大肠癌化疗药物提供了可靠的依据。

直肠癌药敏检测102例

目的:通过对直肠癌细胞化疗药物敏感性检测,探讨直肠癌对不同抗癌药物以及不同方案联合药物的敏感性差异,以期对直肠癌围手术期辅助化疗及晚期患者化疗起指导作用.方法:用 MTI 法对102例新鲜人直肠癌标本进行化疗药物敏感性检测.结果:对本组直肠癌敏感的化疗药物依次为:MMC、HCPT、5-FU 等,敏感性好的化疗方案依次为:HCP7+MMC、5-FU+MMC、5-FU+HCPT、CDDP+MMC 等,显示出不同个体对抗癌药物敏感性不同,联合化疗药物其敏感性明显高于单药.结论:结果表明,体外肿瘤细胞药敏实验对临床肿瘤化疗用药有一定的预见性,针对不同个体组合高效、合理的化疗方案,从而提高临床肿瘤的化疗疗效.

ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术在乳腺癌化疗中的应用价值

目的 探讨ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术 (ATP TCA )在乳腺癌化疗中的临床意义及应用价值。方法 选用 10种常用乳腺癌化疗药物 ,应用ATP TCA对 40例乳腺癌改良根治术标本、淋巴结活检和胸腔积液标本进行药敏检测 ,评估肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。结果 ATP TCA对乳腺癌标本的可评价率为 90 .0 % ,化疗药物对乳腺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性 ,10种化疗药物的敏感性分别为 :氟尿嘧啶 ( 5 Fu) 3 3 .3 %、顺铂 (DDP) 3 7.5 %、环磷酰胺 (CTX ) 2 9.2 %、足叶已甙 (VP 16)16.7%、丝裂霉素 (MMC) 2 2 .0 %、表阿霉素 (EPI) 41.7%、诺维本 (NVB) 45 .8%、阿霉素 (ADM ) 41.7%、泰素 (PTX) 5 4.2 %、羟基喜树碱 (HCPT) 2 5 .0 %。初步研究表明ATP TCA体外检测结果与实际临床疗效具有良好的相关性。结论 ATP TCA是准确的、可靠的肿瘤药敏检测技术 ,其检测结果与临床实际疗效具有良好相关性 。