药物敏感性试验与全基因组测序检测抗结核药物耐药性的比较研究

目的通过药物敏感性试验(DST)和全基因组测序(WGS)检测结核分枝杆菌(MTB)的耐药情况,比较二者一致性,探讨全基因测序用于MTB耐药性检测的特点。方法选取2018-2020年留存于四川大学华西医院共71例MTB临床分离株,采用DST(氧化还原指示剂法)和WGS两种方法对菌株进行异烟肼(INH)、利福平(RIF)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、莫西沙星(MFX)、氧氟沙星(OFX)、左氧氟沙星(LFX)、卡那霉素(KAN)、阿米卡星(AMK)、卷曲霉素(CPM)、乙硫异烟胺(ETH)、利福布汀(RFB)、对氨基水杨酸(PAS)和氯法齐明(CLO)共14种药物的耐药性检测,并对结果进行Kappa检验分析。结果两种方法对RIF、RFB、SM、MFX、OFX和LFX 6种药物耐药性检测的符合率均超过90.00%,Kappa值均大于0.80,一致性较好;INH和EMB耐药性检测的符合率分别为84.51%,81.69%,Kappa值分别为0.68和0.54,一致性一般;AMK和KAN两种方法检测的耐药株未超过2株,耐药率小于3.00%;CPM、ETH、PAS、CLO耐药性检测的符合率范围为61.97%~91.55%,Kappa值均小于0.40,一致性较差。结论WGS检测不同抗结核药物耐药性的能力存在差异,其检测RIF、RFB、SM、MFX、OFX和LFX 6种药物耐药性效果较佳,而检测其他抗结核药物耐药性与DST相比较仍存在一定差异,需要进一步明确相关药物的详细耐药机制,并对WGS用于耐药性分析的标准化进行探索。

一例猪源性金黄色葡萄球菌的分离鉴定与药物敏感性试验

本研究旨在鉴定和分析锦州某猪场病死猪脏器中分离出的一株病原菌,以期为该细菌病的临床诊治提供科学依据。通过LB琼脂培养进行革兰氏染色,BP特殊培养基培养、药物敏感性试验、16S rDNA测序及小鼠致病性试验,并制作病理组织切片进行观察。由革兰氏染色镜检结果可知该菌为革兰氏阳性球菌;BP培养皿可见黑色菌落生长及菌落周边透明圈;药敏试验表明该菌对恩诺沙星、氧氟沙星、阿米卡星和卡那霉素非常敏感;经16S rDNA测序,该菌和金黄色葡萄球菌16S rDNA片段相似性高;镜检观察病理切片,可见各组织脏器有明显病理损害。该猪场致病菌经分离鉴定为金黄色葡萄球菌,对部分抗生素产生耐药,小鼠攻毒试验具有一定的致病性。

基因芯片和比例法药物敏感性试验检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的比较研究

目的比较基因芯片和比例法药物敏感性试验在检测结核分枝杆菌(MTB)对利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药性中的应用,探讨快速诊断耐多药结核病(MDR-TB)的方法。方法从改良罗氏培养基上分离的327株菌株,分别用基因芯片检测MTB对RFP和INH耐药相关的rpoB、katG和inhA基因上8个位点的基因突变,从而判断其耐药性;同时用比例法药物敏感性试验检测MTB对RFP和INH耐药性,比较2种方法的符合率。进一步从二者RFP或/和INH结果不符的标本中随机选出16株菌株做DNA序列测定,比较二者与DNA测序的符合率。结果基因芯片和比例法药物敏感性试验检测MTB对RFP耐药性符合率为93.27%,对INH耐药性符合率为95.11%,RFP和INH的总符合率为90.52%;二者对MDR-TB的检出率分别为18.65%和18.96%。基因芯片与DNA测序比较,RFP耐药性符合率为81.25%,INH耐药性符合率为100.00%;比例法药物敏感性试验与DNA测序比较,RFP耐药性符合率为50.00%,INH耐药性符合率为37.50%。结论基因芯片检测MTB对RFP和INH的耐药性较比例法药物敏感性试验有更高的敏感性和特异性,对MDR-TB的快速诊断具有重要临床价值。

恶性脑肿瘤体外化疗药物敏感性试验初步报告

目的 通过对恶性脑肿瘤标本的体外药敏试验 ,指导临床对术后患者进行个体化化疗 ;同时也为研究脑肿瘤耐药相关基因表达与肿瘤耐药之间关系提供最为接近临床的化疗药物敏感性数据。方法 采用MTT法对 11个人脑胶质瘤细胞株和 3 6例恶性脑肿瘤患者的新鲜标本 ,进行了 6种脑肿瘤常用化疗药物的体外敏感性测定。简单机械分离手术标本 ,制成单细胞悬液 ,以每孔 2× 10 4细胞量接种 ,与不同药物的 1×PPC(血浆峰浓度 )作用 72h为适宜的实验条件。结果 11株胶质瘤细胞对 6种抗癌药物在总体上都较患者标本为敏感 ,抑制率 (IR) >80 %的DDP有 3株、VCR有 2株 ,VP -16有 3株 ,VM -2 6有 9株 ;80 %>抑制率 >5 0 %的 ,DDP有 2株 ,VCR有 6株 ,VP -16有 8株 ,VM -2 6有 2株。其敏感顺序可排列为 :VM -2 6>VP -16>VCR >DDP ,榄香烯和MeCCNU都没有达到 5 0 %以上的抑制率。测定 3 6例临床标本血浆峰浓度下的抑制率 ,IR %>5 0 %者 ,DDP有 11例 ,VCR有 9例 ,VM -2 6有 6例 ,VP -16有 2例。其敏感性依次为 :DDP >VCR >VM -2 6>VP -16,榄香烯和MeCCNU也都没有达到 5 0 %以上的抑制率。对 6种化疗药物的任何一种抑制率 >5 0 %(敏感 )者 ,3 6例中只有 16例 ( 4 4%)。

泌尿生殖道支原体药物敏感性试验结果动态分析

目的分析泌尿生殖道感染患者支原体[解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)]的感染情况及其药物敏感性情况,为临床诊疗提供依据。方法将2009年1月至2014年12月1 638例门诊就诊的泌尿生殖道感染患者送检的样本进行支原体培养鉴定及药物敏感性试验。结果 1 638例临床样本中,支原体阳性样本占45.6%(747/1 638),Uu和Mh的阳性率分别为44.4%和9.5%;单纯Uu、单纯Mh、Uu和Mh混合阳性率分别为36.1%、1.2%、8.4%。女性支原体阳性率(48.6%)明显高于男性(20.9%)(P<0.01)。2009至2013年支原体的阳性率呈现逐年上升的趋势,分别为19.3%、29.3%、41.4%、46.9%和56.0%。2014年支原体阳性率为44.2%,明显低于2013年(P<0.05),减少的部分为Uu,Mh感染呈逐年上升的趋势。Uu和Mh对喹诺酮类抗菌药物的敏感性最差,敏感率<20%,而对强力霉素、美满霉素和交沙霉素的敏感性较高,敏感率>70%;Mh对各抗菌药物的敏感率均低于Uu;女性患者Uu、Mh对四环素类和交沙霉素的敏感率明显高于男性患者。结论Mh的感染呈逐年上升的趋势,且Mh多以与Uu混合感染的形式出现,Mh对各抗菌药物的敏感率均低于Uu,这将给支原体感染的治疗带来更大的挑战,应引起临床的高度重视。

鲍曼不动杆菌常用药物敏感性试验方法之间的差异比较

目的:比较鲍曼不动杆菌抗生素敏感性试验全自动微生物鉴定及药敏分析系统VITEK-2、纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测结果之间的差异。方法:收集2011年4月至2012年2月临床分离的非重复鲍曼不动杆菌42株,采用微量肉汤稀释法、纸片扩散法和(或)VITEK-2药敏分析系统对临床常用的头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、多西环素、阿米卡星及替加环素这5种抗生素进行敏感性试验,比较后者检测结果与微量肉汤稀释法的符合性。结果:以微量肉汤稀释法作为参考,利用VITEK-2系统检测时,总误差分别为阿米卡星85.7%,亚胺培南14.3%;利用纸片扩散法检测时,总误差分别为替加环素71.4%,头孢哌酮/舒巴坦26.2%,多西环素19.0%,阿米卡星14.3%,亚胺培南11.9%。结论:鲍曼不动杆菌的药敏检测中VITEK-2系统和(或)纸片扩散法药敏与微量肉汤稀释法之间存在差异,微量肉汤稀释法仍是首选检测手段。

重庆地区耐多药结核患者抗结核药物敏感性试验特征初步分析

目的分析重庆地区耐多药结核病患者抗结核药物的特征,预期为临床药物的选择和耐多药结核病防治规划的完善提供科学依据。方法连续收集重庆市公共卫生医疗救治中心和重庆市第十二人民医院结核内科2013年7月16日至2015年3月11日期间753例临床诊断为耐多药结核病患者的体液标本,采用液体培养法分离培养分枝杆菌,对结核分枝杆菌分离株进行比例法药物敏感性试验,并与全国2007-2008年结核病耐药基线调查结果相比较。采用SPSS 13.0分析软件进行统计学分析,卡方检验以P<0.05为差异具有统计学意义。结果 1.共分离培养出538例分枝杆菌菌株,经鉴定确认结核分枝杆菌有503例,占95.8%(503/538),非结核分枝杆菌有35例。2.503例耐多药结核患者菌株药物敏感性试验结果显示:MDR有428例,XDR有75例。仅对INH和RFP耐药的菌株有34例,仅对一线抗结核药物耐药的菌株有61例,且两种耐药谱在初治与复治分类有显著差异(P值均<0.05)。初治与复治耐多药结核患者在"31-40"和"41-50"年龄组人数分布有显著差异(P<0.05)。EMB耐药率远低于全国2007-2008年结核病耐药基线调查结果。结论重庆地区大部分耐多药结核患者对多数二线抗结核药物耐药,要加强防控,以免进一步发展为广泛耐药患者。对31-50岁左右的初治耐多药结核患者选择用药方案需慎重,以免初治失败。EMB耐药率较低,在重庆地区用于治疗培阳耐多药结核仍有很大的临床抗结核价值,但需予以关注,谨防产生耐药。

奶牛隐性乳房炎的发生规律及其致病菌的分离鉴别与药物敏感性试验

本文对内蒙古大黑河奶牛场的泌乳牛群进行隐性乳房炎的检测 ,及其致病菌的分离鉴别与药物敏感试验 ,其结果 :1共检测泌乳牛 2 83头次 10 78个乳区 ,隐性乳房炎的头阳性率为 6 1.84% ,乳区阳性率为 32 .2 8% ,并且其发生率与管理、挤奶卫生及其程序、泌乳期、年龄、胎次有很大关系 ;2致病菌的总检出率为 92 .31% ,其主要病原菌为金黄色葡萄球菌 ,无乳链球菌和大肠杆菌 ,分别占总检出率的 41.6 6 %、2 0 .83%和 16 .6 7%。 3对所检出的病菌 ,一些新特药物敏感性较好 ,而一些常用药物效果较次。

ATP-生物荧光法在肿瘤体外药物敏感性试验中的应用研究

为探讨ATP生物荧光法在肿瘤体外药敏试验中应用的可行性，采用该法对小鼠纤维瘤细胞株L929、卵巢癌新鲜组织和腹水细胞进行抗癌药物处理后的细胞活性测定。结果显示：该法能测出不同浓度药物对细胞作用的剂量效应关系，以及不同个体对不同浓度药物反应的差异，实验变异系数CV值为1.2%～15.8%。在培养的第5天药物处理组与对照组差异最大，检测效果最好。用混和酶液消化，可有效地制备含＜30个细胞团块的单细胞悬液，活细胞可达90％以上。以上结果表明，ATP生物荧光法的稳定性、重复性、敏感性均较好，用于卵巢癌体外药敏试验是可行的。

药物敏感性试验在耐药结核病治疗中的效果分析

目的:探究药物敏感性试验在耐药结核病治疗中的效果。方法:临床选取28名耐药结核病的病例,将其随机分为两组,即对照组和试验组。对照组采用传统的方式进行治疗。试验组的治疗方案经过药物敏感性试验的测试之后,根据对氨基水杨酸(PAS)、左氧氟沙星(LVF)、异烟肼(INH)、莫西沙星(MOX)的药物敏感性制定合理的治疗方案。观察两组疗效。结果:结果表明对于治疗效果有明显的提升,试验组的痰液转阴率高达91.67%,明显高于对照组的75%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在药物敏感性试验中,莫西沙星对于耐药结核病的敏感程度最高,对氨基水杨酸次之,异烟肼的敏感程度最低,药物敏感性试验对于耐药结核病的治疗效果具有显著的积极作用。

耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感性及药物敏感性试验的临床应用

目的分析耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感性,探索适合临床实验室的用于替加环素体外敏感性检测的方法。方法收集2013年11月—2014年2月同济大学附属第十人民医院临床分离的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌,经Vitek 2 compact全自动微生物分析系统(简称Vitek 2)、纸片扩散法确认为耐碳青霉烯类药物的菌株,其中肺炎克雷伯菌20株、鲍曼不动杆菌41株。采用微量肉汤稀释法、最低抑菌浓度(MIC)法、纸片扩散法分别检测菌株对替加环素的敏感性。结果对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌,微量肉汤稀释法检测替加环素的MIC50和MIC90分别为2和4 mg/L,按照美国食品与药品监督管理局(FDA)的判断标准,耐药率为7.3%、中介率为29.3%、敏感率为63.4%;与微量肉汤稀释法比较,MIC法的基本一致性(EA)和分类一致性(CA)分别为97.6%和87.8%,未出现非常重大误差(VME)和重大误差(ME),小误差(mE)为12.2%;纸片扩散法的CA为24.4%,未出现VME,ME为7.3%,mE为68.3%。对耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌,微量肉汤稀释法检测替加环素的MIC50和MIC90分别为1和2 mg/L,按照FDA的判断标准,耐药率为5.0%、中介率为0.0%、敏感率为95.0%;与微量肉汤稀释法相比较,MIC法的EA和CA均为95.0%,未出现VME和ME,mE为5.0%;纸片扩散法的CA为30.0%,未出现VME和ME,mE为70.0%。结论替加环素对耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌有较好的抗菌活性,而对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌的抗菌活性下降;对于耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌,MIC法可用于替加环素敏感性的临床常规检测或复核确认,而对于耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌,MIC法检测结果需谨慎对待,必要时用微量肉汤稀释法确认;各项评价指标不支持使用纸片扩散法进行替加环素敏感性分析。

SRB显色法用于抗癌药物敏感性试验的研究

采用 SRB显色法对在 96孔培养板中短期培养的人大肠癌细胞株 Colo2 0 5、人骨肉瘤细胞株 OS732、人舌癌细胞株 Tca81 1 3经 5- FU、顺铂、蟾酥等药物处理后的活性进行了研究 .结果表明 ,SRB法对这些细胞株的体外抗癌药物敏感试验结果稳定 ,该法与其它细胞毒试验相比有一定优点 。

鸭大肠杆菌的药物敏感性试验

采用纸片扩散法测定了 14株鸭大肠杆菌对 10种抗菌药物的敏感性 ,结果鸭大肠杆菌对头孢唑啉、头孢噻肟、丁胺卡那霉素最为敏感 ,敏感率均为 10 0 % ;其次为庆大霉素 ,敏感率为 78.6 % ;对其他抗菌药物均产生不同程度的耐药性 ,耐药性最为严重的是四环素、复方新诺明及多西环素 ,耐药率分别为 92 .9%、85 .7%、78.6 % ,对阿莫西林、氯霉素、环丙沙星的耐药率分别为 5 7.1%、5 0 .0 %、6 4.3% ;78.6 %的菌株对 10种抗菌药物表现为多重耐药性。耐阿莫西林菌株经碘 -淀粉测定法测定均为产 β 内酰胺酶菌株 ,阿莫西林对它们的最小抑菌浓度范围为 2 5 6～10 2 4mg/L。

抗菌药物敏感性试验执行标准解读

抗菌药物敏感性试验(药敏试验)在个体化治疗和经验治疗方面具有重要作用。规范药敏试验操作方法,减少试验误差,为临床提供准确的检验报告非常重要。目前我国多数临床实验室根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)的"抗菌药物敏感性试验执行标准"进行药敏试验。本文对该标准中的重点内容进行解读,以便检验界同道能更好地理解和应用。

应用配对四格表资料的X^2检验对比例法和绝对浓度法检测结核分枝杆菌药物敏感性试验的评价

目的应用配对四格表资料的X^2检验对比例法与绝对浓度法检测结核分枝杆菌的药物敏感性试验作评价。方法用比例法与绝对浓度法分别对60株WHO质控菌株和66株临床菌株进行四种药物(INH、SM、RFP、EMB)耐药性的测定。

张家口地区甲癣病原真菌分布及药物敏感性试验研究

目的为张家口地区甲癣病原真菌的临床诊疗提供参考。方法采用描述性研究,选取医院2019年3月1日至2021年3月31日收治的甲癣患者512例,分析张家口地区甲癣病原真菌的培养与鉴定及药物敏感性试验(简称药敏试验)结果。结果共有甲癣患者366例,检出病原菌366株,其中以红色毛癣菌(19.95%)、犬小孢子菌(21.86%)、念珠菌(11.48%)及絮状表皮癣菌(10.66%)为主。犬小孢子菌(50例)、铁锈色小孢子菌(10例)以男性为主,青霉菌(4例)、念珠菌(32例)以女性为主;主要以31~40岁(138例)的感染人群为主;培养阳性菌群患者对克霉唑、咪康唑的耐药率分别为25.96%和21.86%,对两性霉素和特比萘芬的耐药率分别为12.57%和3.28%。结论张家口地区甲癣病原真菌以犬小孢子菌、红色毛癣菌为主,对两性霉素、特比萘芬的耐药性较低。

肺炎链球菌不同药物敏感性试验系统检测结果准确性比较

目的用E-test法作为参比方法,比较肺炎链球菌在不同药敏系统检测结果的准确性,以期为临床治疗提供准确、可靠的科学依据。方法随机选取2016-2017年昆明医科大学附属儿童医院分离的35株肺炎链球菌为研究对象,分别用E-test、Vitek-2 compact GP68、珠海迪尔DL-96 Strep2药敏分析系统进行药敏试验。结果与E-test法比较,Vitek-2 compact GP68、珠海迪尔DL-96 Strep2对红霉素、左氧氟沙星、万古霉素的检测结果分类符合率为100%;对头孢曲松和美罗培南的分类符合率<90%;珠海迪尔DL-96 Strep2对青霉素的检测分类符合率为97.1%,而在Vitek-2 compact GP68对青霉素的检测中,有22株(62.9%)未能输出有效结果,系统提示无法判断其敏感性。结论肺炎链球菌3种药物敏感系统试验显示:与E-test方法比较,Vitek-2 compact GP68及珠海迪尔DL-96 Strep2的检测准确性存在一定缺陷,药敏报告需要对青霉素、头孢曲松、美罗培南等抗菌药物的准确性进行进一步测定。

通辽地区奶牛乳房炎主要病原菌分离及药物敏感性试验

目前治疗临床型乳房炎主要采取抗生素疗法。但是长期使用抗生素又带来严重的“乳中残留”和“耐药菌产生”等严重的公共卫生问题。如用青霉素治疗奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎的初次治愈率达50％，第2次治愈率为25％，第3次治愈率为15％以下。因此，抗生素治疗率降低，病原产生普遍的耐药现象，使该病的治疗变得更加被动。试验在对通辽地区科尔沁奶牛及蒙古奶牛乳房炎主要病原菌进行分离的基础上，对药物敏感性进行了调查，为当地有效治疗该病，乃至科学合理地使用治疗药物，减少由乳房炎造成的生产损失提供试验依据。