一株野生柳生田头菇菌株分离鉴定及驯化栽培

以采自柳树腐木上的野生食用菌菌株KEFI-010为试材,通过形态学特征和ITS序列分析进行鉴定,并开展了驯化栽培试验研究,以期为柳生田头菇优良菌种选育及栽培技术研究提供参考依据。结果表明:该菌株为柳生田头菇(Agrocybe salicacicola),其菌丝生长速度快、洁白、浓密、整齐,栽培周期较短,出菇整齐、健壮,菌盖光滑,大小均匀,菌肉厚,菌柄粗,农艺性状较好,生物学效率为51.49%。子实体营养成分分析发现,该菌株蛋白质含量高,粗纤维、矿物质和氨基酸非常丰富,还含有人体必需的微量元素硒,具有较高的保健价值,是一种开发潜力巨大的食药用菌。

粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的研究Ⅰ—Serratia marcescens9-2菌株分离、分类鉴定和形态特征

9-2菌株为革兰氏阴性短杆菌,周生鞭毛,菌落红色,经自动微生物鉴定系统(VITECK-AMS-CC2)鉴定9-2菌株为粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens),鉴定为99%;9-2菌株对丁氨卡那、强力霉素、复方新诺明、氟哌酸和庆大霉素敏感,对卡那霉素中敏,对呋喃唑酮、头孢唑啉、氯霉素、链霉素、呋喃妥因、红霉素、青霉素G、氨苄青霉素和四环素不敏感;能产生灵杆菌素.

暗褐网柄牛肝菌菌株分离研究

通过对培养基、分离材料2个方面5个因素进行研究,结果表明,分离培养暗褐网柄牛肝菌菌株以采集的中熟子实体的菌肉分离效果最好,采后到分离时间不宜超过24 h,培养基以M1配方为最好。

金福菇菌株分离留种研究

研究不同培养基和不同培养温度对金福菇菌株分离留种的影响。结果表明,适合金福菇菌株分离留种的最佳培养基配方为:葡萄糖20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁1g,蛋白胨3g,维生素B120mg,琼脂粉8g,另加200g玉米煮出液;最适培养温度为28℃。利用该培养基和该培养温度分离、培养的金福菇母种组织块萌发和菌丝生长都比较快,而且菌丝生长势好,色泽亮白,可以用于金福菇生产栽培。

一株降解杀虫剂啶虫脒的细菌菌株分离鉴定及降解性能测试

桑园中残留的大量农药,有通过桑树富集最终对家蚕造成不良影响的潜在风险。采用富集培养和平板划线分离的方法,从长期被农药污染的桑园土壤中筛选分离到一株可降解对家蚕有极高风险性的杀虫剂啶虫脒的细菌菌株H2。对分离菌株H2进行形态和生理生化特征及16S r DNA序列分析,鉴定其为产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)。该菌株对啶虫脒的最高耐受浓度为1 200 mg/L;菌株在含300 mg/L啶虫脒的无机盐培养基中培养,0~1 d为生长延迟期,1~4 d为对数生长期,4~6 d为稳定期,6 d后进入衰亡期;菌株在啶虫脒初始质量浓度为300 mg/L的无机盐培养基中培养9 d,对啶虫脒的降解率为62.7%。同时发现H2菌株在分别含1 000 mg/L吡虫啉、1 000 mg/L烯啶虫胺、1 000 mg/L噻虫啉和500 mg/L辛硫磷的无机盐培养基中也能够生长,说明H2菌株能有效降解多种烟碱类农药和有机磷类农药,有望进一步开发为桑园残留烟碱类及有机磷类农药的微生物降解制剂。

乳酸粪链球菌菌株分离与鉴定

乳酸粪链球菌(Streptococcus faecalis)是链球菌属中的一个菌组,用于生产“乳酶生”药片和畜禽用的饲料保健添加剂等。一、菌株分离和培养根据我们分离对象的需要,选择(GPY)培养基,采取稀释法和画线法,在平板上挑选单独菌落,以厌氧条件和普通常法,于温度为37℃进行培养观察。选取纯种菌株,编号为M-741,S171。菌种冷冻干燥保存,供研究之用。二、菌性鉴定用中国科学院微生物所引进的乳酸粪链球菌(Streptococcus faecalis)AS1.101作对照,进行以下鉴定。

神农架原始森林高毒力苏云金芽孢杆菌菌株分离鉴定研究

目的 :调查湖北神农架原始森林苏云金芽孢杆菌 (简称B .t)天然资源 ,以期发现新的B .t亚种或毒力特异性菌株。方法 :B .t的分离采用热处理筛选法 ,高毒力菌株的筛选采用常规生物测定程序。B .t亚种鉴定采用血清学反应和常规生理生化反应方法。结果 :从神农架原始森林 160份不同生态类型的土壤样品中 ,共分离出B .t 18株 ,从中筛选出 8株高毒力菌株 ,较国内对棉铃幼虫高毒力生产菌株HD - 1而言 ,菌株A3 、B4、C5 、C6 、D2 和E6 对夜娥科 3种害虫 (棉铃幼虫、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾 )均具有相对较高毒力 ,其中A3 、B4对棉铃幼虫具显著高毒力水平 ,毒力指数分别为 2 .98和 4.2 6,C5 和C6 对斜纹夜娥和甜菜夜蛾有较高毒力 ,菌株F3 和F8对致倦库蚊较国内生产高毒株HD - 5 67有相对较高的毒力水平 ,毒力指数分别为 13.7和 16.4,经生理生化反应和血清学反应鉴定 ,A3 属于H3abc型 ,F3 和F8属H1 4 型 ,A3 、B4、C5 、C6 、D2 、E6 属H7型。结论 :神农架原始森林高毒力B .t菌株分离 ,进一步丰富了我国B .t的天然资源 。

山东省部分地区鸡大肠杆菌的菌株分离与耐药性分析

对来自山东省部分发病区的10株鸡大肠杆菌分离株,按Kirby-Bauer法(纸片扩散法)进行了药敏试验研究。结果表明,丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素、庆大霉素等对鸡大肠杆菌为最佳高敏药。

产聚γ-PGA菌株分离与产物鉴定

从豆酱中分离筛选一株产聚γ-PGA的菌株SK-3,依据菌落的外观形态、菌体镜下形态及其部分生理生化特性,初步鉴定菌株为枯草芽孢杆菌。该菌株固态发酵大豆所提产物经紫外光谱扫描、傅里叶红外光谱扫描,结果显示与聚γ-PGA标准品的图谱基本一致,说明产物归属于聚酰胺类化合物;所提产物水解后经纸上层析法检测,仅为单一氨基酸——谷氨酸,说明产物是谷氨酸聚合物。

猪苓优良菌株分离及培养基筛选研究

比较研究了不同产地、不同取材部位的猪苓菌丝生长状况并结合产地、品质等条件优选出优良的菌株并对该菌株进行了培养基筛选试验。结果表明:盂县1号优于其它品种,最适培养基为HBL:马铃薯200 g,小麦麸皮50 g,磷酸二氢钾3 g,硫酸镁1.5 g,维生素B110 mg,琼脂20 g,蛋白胨5 g,水1000 m L,p H值自然。

舟山市城区内河道地表水菌株分离与鉴定

运用平板涂布法和基因测序结合对舟山地区部分河道的菌株进行分离提纯并进行基因测序,以研究各河道菌株主要分布及组成。调查发现:城关河、城西河、洋岙河、庆丰河、蓬莱河、环南河、解放河、盛家塘等8处河道中各分离出10、7、7、3、5、6、5、4种菌株,合计共47种菌株,其中共有6种特征菌株,其基因测序结果分别为金黄杆菌(Chryseobacterium cucumeris sp. strain)(1-8)、三价砷氧化细菌(Acidovorax sp. strain)(2-1)、寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp. strain)(3-3)、假单胞菌(Pseudomonas sp. strain) P41(3-4)、苍白杆菌(Ochrobactrum sp. strain) JZ28(5-5)、根瘤菌(Rhizobium sp. strain) SCAU410(8-3)。其中各典型菌株的菌落特征、细菌形貌及革兰氏染色结果与各细菌特征一致,表明检测结果可信度较高,可作为舟山市周遭河道治理的实验依据。

遵义市习水县虫草属药用真菌的菌株分离与鉴定

目的:对遵义习水县虫草属药用真菌的菌株进行分离与鉴定,为进一步开发利用虫草奠定基础。方法:以遵义习水县所采集到的虫草属子实体为研究对象,采用组织分离法分离虫草菌株并纯化,ITS基因序列鉴定结合子实体标本鉴定分离的纯培养物。结果:从遵义习水共得到6株虫草属药用真菌菌株,编号56b-1、SW57b两株菌株为高雄山虫草(Cordyceps takaomontana Yakush.&Kumaz);编号67、CZ270、SL215三株菌株为蝉花(Cordyceps cicadae(Miq.)Massee);编号SL219为爪哇虫草(Cordyceps javanica(Bally)Kepler, B.Shrestha&Spatafora)。结论:遵义习水县野生虫草属药用真菌资源丰富。

一起肠炎沙门菌引起食物中毒菌株分离鉴定

研究分析不同检测程序,以缩短实验室检测时间,达到快速确定引起食物中毒的病因。方法:按照食物中毒诊断标准及处理原则、食品卫生检验方法(微生物部分)对采集到的24份疑似食物中毒标本分别按增菌后再作分离培养和直接分离培养进行沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、致泻性大肠埃希氏菌、蜡样芽胞杆菌、变形杆菌检测,并对标本行增菌后分离和直接分离的检出率、菌株生化反应及血清学凝集情况进行对比性分析。结果:24份标本(18份患者肛试标本和5份剩余食物标本、1份饮用水)经增菌后分离培养和直接分离培养共检出肠炎沙门氏菌31株(增菌后分离培养检出16株,直接分离培养检出15株),未检出其他致病菌,31株菌来自于15份肛试标本和1份猪肉凉片标本,经增菌培养和直接分离培养的阳性率分别为66.67%和62.50%,(χ2=0.091,p>0.05,差异无统计学意义。所有检出的菌株生化反应相同,血清学凝集反应有2株经增菌后得到的菌株和1株直接分离得到的菌株存在鞭毛抗原不凝集的现象,其余菌株菌体抗原和鞭毛抗原的凝集力是一致的。结论:此次食物中毒事件是由肠炎沙门氏菌污染猪肉凉片引起。对食物中毒标本的检测没必要进行增菌后再培养,可直接进行分离培养,能减少一半的工作量,提前一天报告结果。

两株耐热有机质降解芽孢杆菌分离鉴定

试验旨在筛选得到耐高温可降解多种有机质的芽孢杆菌。在中国农业科学院特产研究所左家试验基地采集貉子粪堆样,经富集培养后在高温条件下分离得到两株芽孢杆菌,通过形态学鉴定、生理生化试验、16S rRNA测序分析确定分离株种属,并对分离菌株进行生长曲线、抗逆性、耐药性和有机质分解测试。结果表明:两株芽孢杆菌分别为解硫胺素芽孢杆菌(ZJFD007)和暹罗芽孢杆菌(ZJFD011),具有较好的生长性能、耐高温和蛋白质水解能力,其中暹罗芽孢杆菌表现出对pH变化的适应性、耐盐以及水解蛋白质、淀粉、纤维素的能力,药敏试验显示,两株分离株均对多黏菌素B耐药,解硫铵素芽孢杆菌还对丁胺卡那、卡那霉素耐药,暹罗芽孢杆菌还对青霉素、氨苄西林、哌拉西林和呋喃唑酮具耐药性。表明两株芽孢杆菌在制备有机废弃物降解高效复合菌剂上,具有良好的应用前景和经济价值。

产乙偶姻菌株的分离鉴定及其对固态混菌发酵产物的影响

乙偶姻(ACT)是白酒中重要功能物质四甲基吡嗪(TTMP)的关键前体物,该研究从酱香型大曲中筛选分离产乙偶姻菌株,结合形态学观察及分子生物学技术对其进行鉴定,并将其应用于固态混菌发酵,考察其对发酵产物理化指标、有机酸及挥发性风味物质的影响。结果表明,分离筛选出一株产乙偶姻菌株A12F_C118,经鉴定其为索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)。添加菌株A12F_C118混菌发酵产物中,水分、还原糖、总酸、pH值分别比空白组分别提高了39.40%、38.46%、127.63%、11.93%;添加菌株A12F_C118混菌发酵产物中共检出挥发性风味物质51种,其中正戊醇、苯乙酸乙酯、己酸乙酯、四甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪和三甲基吡嗪等重要风味物质含量均有所增加。菌株A12F_C118对固态混菌发酵过程中草酸、L-苹果酸、L-乳酸、乙酸、柠檬酸的合成皆有促进作用,但对琥珀酸的影响不明显。

产微生物絮凝剂菌株的分离及絮凝特性研究

从某环保公司的污水处理设备好氧活性污泥和广西民族大学思源湖周边土壤中共分离出64个株菌,经过初筛和复筛得到14个絮凝率大于50%的株菌,最后对其中3个絮凝率最高的菌株进行了鉴定,分别属于蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、阿氏芽孢杆菌(Priestia aryabhattai)、拉尔宽假单胞菌(Pseudomonas lalkuanensis)。每50 mL 2.5 g/L高岭土悬液只需投加1.0 mL发酵液,蜡状芽孢杆菌在发酵时间为36 h、发酵pH为7.0时,絮凝率最高可达87.7%;阿氏芽孢杆菌在发酵时间为48 h、发酵pH为7.0时,絮凝率最高可达91.1%;拉尔宽假单胞菌在发酵时间为84 h、发酵pH为8.0时,絮凝率最高可达91.0%。3个产微生物絮凝剂菌株发酵条件比较温和,所需发酵液投加量少,表现出较高的絮凝率。因此,3个产微生物絮凝剂菌株具有实现工业化生产的潜在价值。

一个厌氧甲烷氧化菌菌株的分离、纯化和特征研究

首次报道浙江象山市郊青紫泥水稻田土壤中一个能厌氧氧化甲烷的细菌菌株AMOB3的分离、纯化及其部分生理生化特性.该菌株革蓝氏染色阴性,细胞极小,仅(0.3～0.5)μm×(0.7～0.8)μm,在厌氧滚管琼脂上可形成细小透明直径约为0.2mm的菌落.能较好地利用甲烷和甲醇,但仅微弱利用甲酸.电镜显微表明细胞具有周生于胞质的与好氧性甲烷氧化菌相同的囊膜结构.试管培养时该菌株的甲烷氧化活性为2.4nmol/mL.Cu2+、Mo6+、Mn4+等离子可提高该菌株氧化甲烷的能力,但Cr3+具有抑制作用.经将菌株AMOB3的特性与现有报道的好氧性甲烷氧化菌比较,认为这是一个不同于现有甲烷氧化菌的新种.

阿特拉津降解菌株的分离和鉴定

从农药厂废水中分离到６株能以除草剂阿特拉津为唯一氮源生长的细菌，即假单胞菌（Ｐｓｅｕ－ｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．）ＡＤ１、ＡＤ２和 ＡＤ６，土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．）ＡＤ４，黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）ＡＤＳ，欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａ ｓｐ．）ＡＤ７。ＡＤ１菌株能使无机盐培养基中的 ０．３ｇ／Ｌ阿特拉津在７２ｈ内降解９９，９％。当以ＡＤ１、ＡＤ２、ＡＤ４、ＡＤ５、ＡＤ６和ＡＤ７菌株的总ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增时，除ＡＤ２菌株以外，均得到了与文献报道的假单胞菌ＡＤＰ菌株的阿特拉津氯水解酶基因（ａｔｚＡ）同源的ＰＣＲ产物。

三株菲降解细菌的分离、鉴定及降解特性的研究

从石油污染土壤中分离纯化到 3株能以菲为唯一碳源和能源生长的革兰氏阴性杆菌、好氧、不形成芽孢、端生或侧生单根鞭毛 ,分别命名为菌株ZX4、ZX6和EVA17.据部分片段长度的 16SrDNA序列比对分析和生理生化试验结果 ,确认此 3株菌均为鞘氨醇单胞菌属 (Sphingomonas)细菌 ,菌株ZX4为少动鞘氨醇单胞菌 (S .paucimobilis) ,菌株ZX6为溶芳烃鞘氨醇单胞菌 (S .aromaticivorans) ,菌株EVA17尚不能确定 .分析了各菌株在系统发育中的分类地位 .菌株ZX4在 14d内对含量为 10 0 0mg·L-1的菲降解率可达 98 74%.不同底物实验结果表明 ,菌株EVA17可能同时拥有两条菲降解途径 .