西藏牦牛瘤胃源产纤维素酶菌株筛选鉴定及产酶条件探究

为提高纤维素的利用率,寻找到安全性能好、产酶效率高的菌株添加剂添加到饲料中,以提升动物对饲料的利用率,从牦牛瘤胃中分离高产纤维素酶菌株,进行16S rDNA的鉴定,并探究其在不同温度、pH、接种量和发酵阶段产内切型-β-葡聚糖酶、外切型-β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶的特性。结果表明:通过形态学鉴定以及16S rDNA基因序列测定,最终确定高产菌株M1为克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)。M1产内切型-β-葡聚糖酶活性大于外切型-β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶;M1在35℃、pH为7、接种量为2%的条件下产内切型-β-葡聚糖酶的效率最高,在30℃、pH为6、接种量为2%的条件下产外切型-β-葡聚糖酶的效率最高,在30℃、pH为6、接种量为1%条件下产β-葡萄糖苷酶的效率最高;在M1生长过程中,先产生了β-葡萄糖苷酶,其次是外切型-β-葡聚糖酶、内切型-β-葡聚糖酶,并且外切酶活性远远大于内切酶和β-葡萄糖苷酶活性。

蒙古黄芪内生细菌产IAA菌株筛选与培养条件优化

【目的】探寻蒙古黄芪内生菌的促生功能,挖掘优异微生物资源。【方法】采用前期从蒙古黄芪品系甘芪1号根中分离纯化的20株内生细菌菌株(B1~B20,GenBank序列收录号OM938262~OM938281)为研究对象,以纯培养液为对照(CK),利用Salkowski显色法对产吲哚乙酸(IAA)功能菌株鉴定,然后对优异菌株的培养条件进一步进行优化研究。【结果】甘芪1号根可培养内生细菌菌株,有12株菌株较CK有明显Salkowski显色反应,测量各菌株产IAA浓度依次为B16>B18>B10>B20>B8>B13>B11>B3>B4>B6>B1>B17,产IAA浓度范围为2.74~26.48 mg/L,平均10.10 mg/L,其中B16高稳产IAA(GenBank OM938262),平均产IAA浓度高达26.48 mg/L,极显著高于其他菌株产IAA的水平。培养条件优化显示,B16菌株培养最适温度为15~25℃,在浓度为0.1%~7%的NaCl培养基均能正常生长,最适NaCl浓度为1%,最适pH为7.0,最适碳、氮源分别为酵母提取物和蛋白胨。培养条件优化后B16增殖及IAA产能较优化前分别极显著提高28.6%和53.5%。【结论】蒙古黄芪根内生细菌中产IAA菌株比例较高,是优异豆科药用植物微生物资源宝库,且筛选到一株高稳产IAA菌株B16,经过培养条件优化可达到40.658 mg/L,是有较大的生态调控利用潜力的菌株。

一种适宜秸秆栽培的金针菇菌株筛选方法

以一株野生黄金针菇菌株为试验材料,研究了在试管内进行适宜秸秆栽培的金针菇菌株的筛选方法,对栽培的黄金针菇进行组织分离和孢子分离,并对分离后的菌株进行了栽培试验。结果表明:在密闭试管内以秸秆为栽培基质栽培黄金针菇可以顺利出菇,继而进行的组织分离与孢子分离操作方便、成功率高,可用于适宜秸秆栽培的菌株初步筛选。

一种适宜秸秆栽培的金针菇菌株筛选方法

以一株野生黄金针菇菌株为试验材料,研究了在试管内进行适宜秸秆栽培的金针菇菌株的筛选方法,对栽培的黄金针菇进行组织分离和孢子分离,并对分离后的菌株进行了栽培试验。结果表明:在密闭试管内以秸秆为栽培基质栽培黄金针菇可以顺利出菇,继而进行的组织分离与孢子分离,操作方便,成功率高,可用于适宜秸秆栽培的菌株初步筛选。

达州市夏栽秀珍菇的优质菌株筛选

为筛选适合达州夏季栽培的优良秀珍菇菌株,共收集了12个来源不同的秀珍菇品种,通过拮抗试验、菌丝生长试验、出菇试验,对12个秀珍菇的菌丝生长速度、子实体农艺性状、产量、生物学效率等指标进行综合比较,根据拮抗试验结果选取不同分类菌株进行ITS-PCR鉴定。结果表明,拮抗试验可以将12个菌株分为3类,从3类菌株中各选取1株菌株进行ITS测序,结果显示3个菌株间的碱基差异不大,均为秀珍菇。出菇试验结果显示,京秀1号产量最高,头三潮菇产量达278.5 g/袋,生物学效率为62.2%,综合表现优良,适合在达州推广栽培。

猪肚菇设施化栽培菌株筛选

为筛选猪肚菇设施化栽培模式的优良菌株,试验以不同地区的12个猪肚菇菌株为材料,通过拮抗试验分析了菌株间的差异,并对各菌株的菌丝生长特性、子实体农艺性状和产量进行统计分析。结果表明,2号、5号、11号这3个菌株适合在设施控温条件下栽培。3个菌株的菌丝生长正常、稳定性好,单个子实体的质量为35~45 g,大小适中,较符合市场的需求;且出菇均比对照菌株早,单袋产量也高。其中2号和11号菌株的出菇时间较一致,采收时间较短。以栽培特性为指标,所筛选的3个菌株各有优势,可作为设施化栽培的种质资源进行进一步试验。

适宜福州地区栽培的草菇菌株筛选

为筛选出适宜福州地区栽培的草菇品种,对6个草菇菌株从蛋形期和成熟期农艺性状、产量、商品性等方面进行综合比较。结果表明,菌株V1172、V1295、V1296在农艺性状、产量、商品性状等方面综合表现较好,可作为福州地区生产应用菌株。

非酿酒酵母Nakazawaea ishiwadae GDMCC 60786产乙酸乙酯的诱变菌株筛选及其安全性评价

为提升Nakazawaea ishiwadae GDMCC 60786产乙酸乙酯的能力,通过物理诱变常压室温等离子体和化学诱变甲基磺酸乙酯、亚硝基胍筛选突变菌株。利用三丁酸甘油酯初筛、摇瓶发酵二筛和外加底物发酵三筛。同时,对突变菌株进行遗传稳定性、溶血性和耐药性体外安全性评价。结果表明:对出发菌株进行诱变处理,最终获得1株高产乙酸乙酯、遗传稳定性良好及体外安全性良好的突变菌株N5,将该诱变菌连续传代5次,得到乙酸乙酯含量的平均值为764.52 mg/L,葡萄糖转化率达到38.22%,与出发菌株相比,乙酸乙酯提高了1.90倍,葡萄糖转化率提高了25.03%。外加乙醇后,突变菌株N5乙酸乙酯质量浓度为1426.81 mg/L;但外加乙酸后,该菌株不生长,并失去产酯能力,表明其对乙醇耐受性强于乙酸。同时发现24 h时,突变菌株N5的酯酶、乙酰辅酶A和醇酰基转移酶活性均达到最大值。本研究构建了一套适用于该菌株的诱变体系。

高抗氧化活性黑皮鸡枞优良菌株筛选

通过观察8株黑皮鸡枞菌株固体、液体发酵过程中菌丝生长情况,比较其发酵液营养成分,以ABTS自由基清除率、DPPH自由基清除率、羟自由基清除率等抗氧化能力指标对菌株进行筛选。结果:菌株HP1的菌丝活力强,菌球干重大,为0.8271 g·(100 mL)^(-1);发酵液还原糖含量为50.29 mg·mL^(-1),可溶性蛋白含量为38.47μg·mL^(-1);抗氧化物质含量高,总酚、总黄酮含量为240.12、23.23μg·mL^(-1);抗氧化能力最强,其稀释液对ABTS自由基、DPPH自由基、羟自由基的清除率为54.28%、78.08%、66.06%,对铁离子的还原能力最强,吸光度为0.598。结果表明,黑皮鸡枞HP1菌株长势优良、菌丝浓密,富含黄酮、总酚等活性物质,抗氧化能力强,可用于后续黑皮鸡枞抗氧化产品的开发利用。

基于微生物转化得到7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸的优良菌株筛选

目的以7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸为目标产物,通过微生物转化筛选优良菌株。方法使用10种真菌(CGMCC 3.149、CGMCC 3.193、CGMCC 3.3402、CGMCC 3.739、CGMCC 3.2462、CGMCC 3.2886、CGMCC 3.3400、CGMCC 3.577、CGMCC 3.970、Zw-4)进行转化菌株的初筛和复筛实验,采用高效液相色谱法测定转化液中7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸含量,将7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸转化率作为评价指标,选择转化率较高且初筛和复实验结果一致的菌株作为优良菌株。结果7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸在2.56~81.79μg/ml范围内呈良好的线性关系;初筛实验中转化率最高的菌株是CGMCC 3.3400;复筛中转化率最高的菌株是CGMCC 3.970。结论优良菌株为CGMCC 3.970。

羊肚菌菌株筛选比较试验

以羊肚菌母种F1,两株子囊孢子单胞菌株Fa2、Fa67及其对应的组织分离菌株Ft2、Ft67五株六妹羊肚菌菌株为试验材料,比较其菌丝培养基最适宜碳氮源、菌核量、产量,以期筛选优良的羊肚菌栽培菌株。结果表明,由子囊孢子选育优良羊肚菌栽培菌株的方法可行,试验为人工栽培羊肚菌优势菌株筛选与保种提供参考。

东北酸菜品质评定及发酵优良菌株筛选

东北三省不同地区采集的酸菜的感官评定及理化分析结果表明:不同纬度的东北酸菜品质存在较大差异,纬度较低即冬季温度相对较高的地区发酵制作的酸菜感官得分较高;感官得分高的酸菜其酸度和氨基酸含量较高,而其亚硝酸盐含量却相对较低。推测酸菜品质与其发酵过程中的微生态菌群之间有很大的联系,感官品质较高的酸菜有益菌含量和种类较丰富,腐败菌系较少。为了进一步研究酸菜感官与其微生态菌群之间的关系,从得分高的酸菜样品中筛选出8株乳酸菌,分别是6株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、1株鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)和1株布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri),这些菌株在酸菜风味形成过程中起到重要作用。

适合以水稻秸秆为栽培基质主要成分的平菇菌株筛选及配方优化

【目的】以实现水稻秸秆的资源化利用为目的,为常规农法栽培平菇的产业升级提供更加科学的技术保障,也为秸秆基质化利用提供了坚实有效的科学基础。【方法】以平菇(Pleurotus ostreatus)为试材,采用代料栽培方式,比较了10个常规平菇菌株在高水稻秸秆含量基质上的生长情况;同时在测定栽培原料营养物质基础上,以筛选的优良平菇菌株优化得到水稻秸秆栽培基质最佳碳、氮源配方和最适颗粒度。【结果】相对于棉籽壳和玉米芯,水稻秸秆含有更丰富的氮、磷、可溶性糖、总蛋白质、游离氨基酸等营养物质以及更低的木质素含量,同时常规氮源辅料中的麦麸营养最为全面、均衡;在高水稻秸秆含量的基质上,菌株S1菌丝生长速度最快、生物学效率最高且农艺性状最好;颗粒度F4基质上菌盖直径最大,颗粒度F5基质上菌丝生长速度最快,且生物学效率均较高;菜籽饼、麦麸、玉米粉、尿素对栽培基质总碳氮比值的影响依次增大,氮源配方N8上菌丝满袋时间最短,单袋子实体产量最高;随水稻秸秆替代比例增大,栽培成本逐渐降低,配方C3、C4的总收入、单袋效益最高,C4的产投比值最大。【结论】水稻秸秆营养丰富,适宜栽培平菇,最适菌株为‘杂优一号’,最佳颗粒度为铡断呈30 mm段状和粉碎后过20 mm孔筛后的丝绒状,最适碳氮源复配配方为61.5%水稻秸秆,21.5%棉籽壳,15%玉米粉,2%石灰。

高温分解纤维素的易变糖丝菌菌株筛选及其特性

从陈年堆积的畜粪堆中筛选出一个耐高温能高效分解纤维素等有机物的菌株。经鉴定 ,该菌株属于糖丝菌属易变糖丝菌种中具有分解纤维素能力的菌株 ,至少可耐 80℃高温 ,在 4 0～ 5 0℃下能够有效地分解纤维素 ,在 2 0～

安梨酒发酵菌株筛选及工艺优化

目的以简化生产工艺、提高发酵型安梨果酒品质为出发点,对发酵工艺进行优化及对发酵用菌株进行筛选。方法通过不同榨汁方式、添加酶制剂及抗氧化剂对安梨汁进行预处理,以发酵周期、残糖、酒精转化率、透光率、酒体品质等为考察指标,研究不同预处理方法及发酵条件对安梨酒的影响。结果在制汁过程添加0.015%的D-异抗坏血酸钠可有效防止果汁褐变。用清汁发酵生产安梨果酒在酒体澄清度方面优于果浆发酵。发酵过程加入果酒专用酶制剂,可使发酵周期缩短1 d,酒精转化率提高2.32%,透光率提高4%。通过不同菌株在不同温度下发酵试验,确定酵23#为发酵安梨酒最佳菌株,发酵温度为25℃。结论以上研究为开发安梨资源开辟了新途径,为安梨的加工利用提供技术参考。

二点委夜蛾幼虫高毒力球孢白僵菌菌株筛选与生物学特性初步研究

本研究对分离自二点委夜蛾Athetis lepigone(Moschler)越冬幼虫僵虫上分离的43株球孢白僵菌菌株进行生物测定,筛选到致病力较强的4株菌株,并对这4株菌株的菌落形态、菌株生长速度、产孢量和萌发率等生物学性状进行了测定。同时以二点委夜蛾2龄幼虫为供试虫源,测定了这4株白僵菌菌株对二点委夜蛾的致病力,从中筛选出具有生长速度快、萌发率高、产孢量大等培养性状优及毒力较强的球孢白僵菌Ed-41菌株。该菌株在浓度为1×107孢子.mL-1悬浮液喷雾接种处理后,在26℃条件下,第8 d供试幼虫的死亡率达85%,显示出对靶标害虫的具有较好的毒力,在二点委夜蛾害虫生物防治中将有潜在的的应用价值。

适合茶枝屑代料栽培的优良食用菌菌株筛选

为筛选到适宜茶枝屑代料栽培的食用菌优良菌株,对灵芝、平菇、香菇、杏鲍菇以及榆黄菇等11个食用菌菌株在茶枝屑和常规杂木屑栽培基质配方上的菌丝生长状况、产量和商品经济性状等筛选指标进行比较试验。结果表明,与杂木屑配方相比,平菇菌株在茶枝屑配方上的菌丝生长状况更好、产量更高、商品经济性状更优;灵芝菌株在茶枝屑栽培配方上除菌丝生长速度显著低于杂木屑配方外,其他菌丝生长状况指标、产量以及商品经济性状指标间均差异不显著,其他食用菌菌株在茶枝屑配方上的筛选指标均显著差于杂木屑配方组,因此以灵芝和平菇分别作为复筛菌株。菌株复筛试验结果表明,在茶枝屑代料栽培配方上夏灰1号和灵芝92菌株菌丝长势最好,生长速度最快,分别为0.92、0.45 cm/d,产量最高,分别达436、45 g/棒,商品经济性状最优。经综合比较分析,筛选得到夏灰1号平菇以及灵芝92是适宜茶枝屑代料栽培的优良食用菌菌株。

工厂化栽培杏鲍菇优良菌株筛选

以菌丝生长速度、生长势、产量、子实体栽培性状及栽培周期为指标对13个杏鲍菇菌株进行筛选,旨在筛选出适合工厂化栽培的杏鲍菇菌株。试验结果表明,3号菌株菌丝生长速度快且生长势旺盛;单瓶产量达145.3g,比对照增产14.3g;栽培周期52d,比对照缩短2d;子实体各项栽培性状优良,是适应杏鲍菇工厂化栽培的优良菌株。

高产磷酯酶C菌株筛选及其抗血小板功能的研究

在湖北省、湖南省、江苏省、山东省、广东省 15 6个点采土样 12 6 8份 ,利用卵黄琼脂的LB培养基初筛获得产生乳白色晕圈的菌株 6 48株 ;再用卵黄琼脂滤纸圆片检测获得产生乳白色晕圈和透明圈菌株 2 6 6株 ;这些菌株用卵黄琼脂杯蝶法筛选出产生大于 13 0mm乳白色晕圈及少量透明圈共 73株 ,经过菌生物量、卵黄杯碟法和抗兔血小板聚集率的测定 ,从 73株菌中筛选出 15株 ,菌号为 :183,198,2 47,42 4,5 87,5 96 ,6 92 ,744 ,75 4 1,791 2 ,779,970 ,998,110 7,1182 ;将此 15菌株经菌生物量、卵黄琼脂杯碟法、NPPC法和抗人血小板聚集率的测定 ,从中选出 75 4 1,779,970 ,110 7四株菌进行分类鉴定和已知菌CW W 90 3菌对照比较的研究。

一株可利用甘蔗渣水解液发酵酒精的菌株筛选

甘蔗渣是一种制糖工业废料 ,主要含有丰富的纤维素类物质 ,纤维素类物质由五碳糖和六碳糖组成 ,通过粉碎 ,用 1%NaOH碱预处理 2 4h ,在 12 1℃、pH1 0的条件下水解 1h ,不同的酵母利用水解液发酵生产酒精的研究结果表明 :假丝酵母 1779能高效地利用水解液中的葡萄糖、木糖 ,转化生产酒精 ,发酵 4 8h ,测得发酵液中的酒精含量达 0 978g/ 10 0mL ,折合成干物质转化率为 13 0 4 %。