羟基磷灰石法和葡聚糖活性炭法测定雌激素受体的比较

目的：建立一种比葡聚糖活性炭（ＤＣＣ）法更灵敏、准确、简便的羟基磷灰石（ＨＡＰ）法测定雌激素受体（ＥＲ）的含量。方法：以ＳＤ雌性大鼠子宫胞浆抽提液为材料，用ＨＡＰ法多点饱和分析和单点饱和分析ＥＲ含量；比较在测定反应中总蛋白量对ＨＡＰ法和ＤＣＣ法测定值的影响，并比较两者在３０例乳腺癌和３０例子宫肌瘤中ＥＲ测定值的差异。结果：大鼠子宫胞浆ＥＲ含量为１３５ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，Ｋｄ＝０．５８ｎＭ。当测定反应中总蛋白量低于２００μｇ时，ＤＣＣ法测定值严重失真，而ＨＡＰ法在总蛋白量为５０μｇ时仍能准确测出真实值。在３０例乳腺癌和３０例子宫肌瘤ＥＲ测定值中，当ＥＲ含量较低时，ＤＣＣ法测定值偏低甚至有假阴性．而ＥＲ含量高时两者接近。在ＥＲ含量较高时，两者测定值相近。结论：ＨＡＰ法比ＤＣＣ法灵敏、可靠。用以测定甾体激素高非特异性结合的靶组织与非靶组织中的ＥＲ低含量时，ＨＡＰ法更有价值。

超声辅助酸性乙醇法制备高纯度魔芋葡甘聚糖的工艺优化及其理化分析

采用超声辅助酸性乙醇沉淀法制备高纯度白魔芋葡甘聚糖(Konjac Glucomannan,KGM),以白魔芋KGM纯度为评价指标,通过单因素和响应面优化制备高纯度白魔芋KGM的最佳工艺条件,并分析其理化性质和结构。结果表明,超声辅助酸性乙醇法制备KGM的最佳条件为:超声时间28 min、溶剂pH值为3.7、70%体积分数的乙醇、料液比1:75、超声温度为60℃,在此条件下进行的验证试验KGM纯度为97.08%,与常规超声辅助乙醇提取法相比有较大提高。与白魔芋原粉相比,KGM的持水力(51.39 g/g)、膨胀力(17.05 mL/g)、黏度(34600 mPa·s)、阳离子交换能力和色度均得到提高,持油力(2.69 g/g)约为原粉的1.5倍。与95 wt.%KGM标品相比,以上理化性质无显著差异。微观结构显示,KGM表面杂质少,有大量类似蜂窝状的细小孔隙结构;傅里叶红外谱图显示KGM分子结构中具有多糖的特征吸收峰;热重分析表明,试验制备的样品纯度高,热稳定性好。此法制备的KGM具有较好的理化功能特性,研究结果可为高纯度魔芋葡甘聚糖的深入开发应用提供参考。

大麦籽粒β-葡聚糖含量的全基因组关联分析及候选基因预测

利用高通量SNP芯片对238份不同来源的大麦种质资源进行基因型分析,并测定2年的籽粒β-葡聚糖含量,通过基于PCA模型的一般线性模型(general linear model,GLM)进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)。结果表明,238份大麦材料的β-葡聚糖含量分布在1.23%~6.55%和1.79%~6.64%之间且均呈正态分布。GWAS分析共检测到19个显著的SNP标记,分布在1H、2H、3H、4H和5H染色体上,可解释表型变异的7.39%~10.29%。在显著关联的SNP位点上下游各300 kb范围内进行候选基因挖掘,共寻找到37个基因,基于前人研究和BLAST基因注释共筛选到4个最有可能与β-葡聚糖合成相关的候选基因,在最显著SNP位点B1_1033963上游89 kb处找到候选基因HORVU.MOREX.r3.1HG0000140,该基因可能是与β-葡聚糖合成过程紧密相关的基因。本研究可为大麦β-葡聚糖含量遗传改良提供理论指导与优异基因资源。

燕麦β-葡聚糖分析检测方法研究进展

燕麦作为世界上最重要的功能性谷物食品之一,对其研究与开发已引起广泛关注,其中,燕麦中富含的膳食纤维——燕麦β-葡聚糖更是当前研究的热点。通过对国内外燕麦β-葡聚糖分析检测方法研究成果的归纳、总结,其中包括含量分析、相对分子质量分析和结构分析,提出了燕麦β-葡聚糖研究过程中各阶段较为有效的分析方法。

刚果红法检测β-1,3-葡聚糖和β-1,3-1,6-葡聚糖条件优化

为了快速高效的检测微生物所产β-1,3-葡聚糖和β-1,3-1,6-葡聚糖含量,通过单因素试验及响应面试验优化刚果红法反应条件,并进行方法学考察。结果表明,最佳反应条件为刚果红质量浓度0.2 g/L,反应温度20℃,反应时间35 min,反应pH 7。在此优化反应条件下,β-1,3-葡聚糖、β-1,3-1,6-葡聚糖吸光度值分别为0.645和0.734。两种葡聚糖的检出限和定量限分别为0.1 g/L、2.0 g/L及0.1 g/L、0.8 g/L。两种β-葡聚糖的精密度试验结果相对标准偏差(RSD)分别为1.09%和1.15%,平均加标回收率为99.6%和100.74%,加标回收率试验结果的RSD分别为2.27%和2.94%。结果显示,刚果红法精密度、准确度良好,适用于微生物产两种β-葡聚糖的定量分析。

改良刚果红法检测分析羌族咂酒中的β-葡聚糖

分别采用标准酶法和改良刚果红法,以市售啤酒为参照酒样,对2种传统羌族咂酒和2种新型咂酒（工业化咂酒）中的β-葡聚糖进行了检测及分析。结果表明,羌族咂酒富含β-葡聚糖,其中传统咂酒中β-葡聚糖含量较高,为61.68~70.33μg/m L,高于普通型新型咂酒（52.48~56.38μg/m L）和清爽型新型咂酒（42.23~45.86μg/m L）的含量（P〈0.05）;参照酒样百威啤酒和雪花啤酒的β-葡聚糖含量较低,分别为32.83~34.63、15.49~16.29μg/m L。分析比较两种测定方法的结果,发现与标准酶法相比,除了传统咂酒TZW-W的刚果红法检测数据偏高超过10%以外,其他5个酒样的检测数据偏差均小于10%,表明改良刚果红检测法有较高的准确性和可信度,且具快速、简便的优点,是一种适合于工厂批量检测酒品中β-葡聚糖含量的方法。

蛹虫草β-葡聚糖提取工艺优化及抗氧化活性

以β-葡聚糖得率得率为主要评价指标,通过单因素和响应面试验优化蛹虫草β-葡聚糖超声辅助水提工艺,采用红外扫描分析提取物的化学键及官能团信息,测定其中各组分含量及其体外抗氧化活性。结果表明,蛹虫草β-葡聚糖最优提取工艺为超声时间1 h、料液比1∶31(g/mL)、水浴温度90℃。最优条件下提取得率为(1.94±0.28)%,与预测值1.95%一致。经过纯化试验得出α-葡聚糖去除最优条件为α-淀粉酶添加量2%、孵育时间60 min、温度50℃,经过纯化处理后β-葡聚糖纯度由19.82%提高至33.93%;红外扫描结果表明,蛹虫草β-葡聚糖具有典型的多糖结构,并含有硫酸根基团。蛹虫草β-葡聚糖对DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基的清除能力与浓度呈正相关(2.00~10.00 mg/mL),IC_(50)值分别为1.17、2.17、4.35 mg/mL,清除率在浓度为8.34、9.88、9.97 mg/mL时,可达100%。综上,优化后的蛹虫草β-葡聚糖超声辅助水提工艺稳定可行,提取获得的β-葡聚糖具有较好的抗氧化活性。

响应面法优化魔芋葡甘聚糖饮用型酸奶发酵工艺

本文以生鲜牛乳为主要原料,通过添加魔芋葡甘聚糖(KGM)取代传统的稳定剂作为膳食纤维补充元,采用响应面实验设计探究KGM饮用型酸奶的最佳制备工艺。结果表明,最佳制备工艺为:菌种的添加量4%、发酵温度43℃、蔗糖添加量7.2%,KGM添加量1.7%,发酵时间7h。在此最优条件下,制备的KGM酸奶清爽细腻,风味香醇。

生物信息学分析葡聚糖蔗糖酶的结构和功能特性

葡聚糖蔗糖酶是一种重要的糖基转移酶(Glucosyltransferase,GTF),对于乳酸菌合成胞外多糖具有关键作用,能够以蔗糖为底物合成葡聚糖或低聚糖,是乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)合成胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)的关键酶蛋白。然而乳酸菌代谢系统复杂,EPS生物合成机制未得到全面解析,限制了EPS的应用。为了进一步解析乳酸菌EPS的生物合成机制,表征不同来源葡聚糖蔗糖酶的结构,探明酶的催化调控机制是必要手段。本研究以肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)DRP105的葡聚糖蔗糖酶gtfB基因为目标序列,利用生物信息学技术对葡聚糖蔗糖酶GtfB结构和功能进行了预测分析。研究结果显示:GtfB属于GH70家族,是一种胞外酶,不存在跨膜区,含有7个保守区域和39条重复序列。其理论分子量为308986.21,理论等电点为4.59,属于酸性蛋白质。磷酸化位点含110个Thr、89个Ser、53个Tyr,GtfB含有5个结构域,呈U型折叠,活性中心在A结构域,含有(β/α)8桶状结构。分子对接预测分析表明,蔗糖与GtfB的活性口袋结合紧密。这些结果初步探明了GtfB具有葡聚糖蔗糖酶的特征结构和功能,证明其在乳酸菌EPS合成途径中的关键调控作用,为其在EPS生产过程中的应用提供了理论基础。

青稞酒糟中β-葡聚糖的提取方法

葡聚糖具有显著的健康益处,能改善肠道健康与免疫调节。本文阐述青稞酒糟中β-葡聚糖的常用提取方法,对传统溶剂提取、酶解法提取及微波辅助提取技术进行深入分析与优化,实现了提取效率与质量的显著提升,推动了农业副产品的高值化利用,为β-葡聚糖在食品及医药领域的应用提供了重要的科学依据和技术支持。

酵母细胞壁β-D-葡聚糖定量测定方法的比较分析

通过对酵母胞壁不溶性β-D-葡聚糖的几种定量测定方法的比较分析,表明经酸水解法处理后得到的测定结果偏高,经酸-酶水解法处理后的测定结果更准确;对水解后产生的葡萄糖采用生物传感仪法定量,结果稳定,操作时间短,更适合在生产过程和质量控制中使用;待测样品中的α-葡聚糖对测定结果有明显的干扰,β-D-葡聚糖含量应为总葡聚糖含量与α-葡聚糖含量之差。

响应曲面法优化酵母β-葡聚糖酶解工艺及产物分析

采用β-葡聚糖酶对酵母β-葡聚糖进行酶解,利用单因素和响应面实验,以水溶性酵母β-葡聚糖得率为指标优化酶解工艺,并对水溶性酵母β-葡聚糖与原酵母β-葡聚糖的结构和热稳定性进行了研究。最佳酶解条件:底物质量浓度1.14 g/100 mL,酶活浓度0.16 U/mL,温度44℃,pH 4.2,水溶性酵母β-葡聚糖得率为39.89%。红外光谱分析结果表明,水溶性酵母β-葡聚糖与原酵母β-葡聚糖的糖苷键型均为β构型,分子构象相同。热稳定性分析表明,水溶性酵母β-葡聚糖和原酵母β-葡聚糖的特征分解温度分别为356℃和360℃,终止分解温度分别为740℃和780℃,热稳定性差异不大。

酸量法及碘量法测定氧化葡聚糖的醛基差异性分析

通过高碘酸钠氧化葡聚糖,制备不同氧化度的葡聚糖,采用酸量法和碘量法测定其醛基含量,但所得结果差异大。结合葡聚糖的氧化机理,以甘油的氧化反应结果作为对照,对借助化学滴定分析的酸量法和碘量法所得数据的差异性进行了分析。结果表明这种差异是由葡聚糖氧化存在的中间反应及其分支结构造成的,当高碘酸钠与葡聚糖的糖单元的物质的量比控制在2以内,操作简单的酸量法所得结果是可靠的。

响应面分析法优化高含量青稞β-葡聚糖饼干工艺及品质评价

为制备品质优良的高含量青稞β-葡聚糖饼干,以普通酥性饼干配方为基础,添加高含量青稞β-葡聚糖提取物,采用单因素和响应面法,以感官评分为指标,对制作方法进行优化,并对最优产品品质进行质构分析和货架期预测。结果表明,高含量青稞β-葡聚糖饼干的最佳制备工艺条件为低筋小麦粉110 g,高含量青稞β-葡聚糖提取物17 g,起酥油30 g,食盐0.55 g,木糖醇25 g,鸡蛋25 g,小苏打0.4 g,烘烤温度166℃,烘烤时间15 min。在这个最佳制备工艺条件下高含量青稞β-葡聚糖饼干硬度为(953.83±35.14)g,弹性为(0.57±0.13)mm,咀嚼性为(0.78±0.15)mJ,胶着性为(51.48±3.72)g。利用POV加速试验得出高含量青稞β-葡聚糖饼干在常温下货架期为153 d。

超声提取法测定魔芋精粉葡甘露聚糖含量的实验研究

目的 :探索超声波处理对提取魔芋精粉中葡甘露聚糖 (konjacglucomannan ,KGM )的影响。 方法 :用超声波清洗器除去魔芋精粉中的游离还原糖后超声水提KGM ,分光光度法测定水解液中KGM含量。结果 :固定超声波频率 40kHz,功率 1 0 0W时 ,超声水提 30～ 45min ,KGM含量与常规法相当 ;超声水提 1h ,KGM含量明显高于常规水提 4h(P <0 .0 1 ) ,提高率为 6 .5 %。本法标准葡萄糖量在 0 .2～ 1 .6mg线性关系良好 (r =0 .9996) ,加样平均回收率为 97.8% ,重现性为 1 .2 7%。结论 :超声水提法省时、可靠 ,能提高魔芋精粉中KGM的提取效率。

姬松茸多糖中β-葡聚糖含量的酶法测定

探讨了酶法测定姬松茸多糖中 β 葡聚糖含量的方法 ,测得它的 β 葡聚糖含量在 3 7%～3 9%之间 ,标样的平均回收率为 86.8%。实验结果表明 ,此方法灵敏度高 ,测定结果可靠。

响应曲面法优化酸法魔芋葡甘露聚糖水解工艺

目的:探讨酸解法制备魔芋葡低甘聚糖工艺。方法:选定时间、水料比和温度作为影响因素,以魔芋葡甘低聚糖的特性黏度作为评价指标。在单因素试验的基础上,通过3因素3水平Box-Behnken组合试验,建立魔芋葡甘低聚糖特性黏度的二次多项式回归方程,经响应面回归分析得到优化组合条件。结果:最佳酸解条件为6mol/L HCl溶液与95%乙醇体积配比为3.8:96.2、反应时间50min、反应温度82℃。在此条件下特性黏度为55.613cm3/g,与理论最佳得率相近。结论:曲线回归方程与结果拟合性好,此模型合理可靠,具有现实意义。

半干法酶解制备魔芋葡甘低聚糖工艺及其抗氧化性能研究

目的:以魔芋胶为原料优化半干法酶解制备魔芋葡甘低聚糖的工艺。方法:在单因素实验的基础上,通过3因素3水平Box-Behnken组合实验,建立魔芋胶水解率的二次多项式回归方程,经响应面回归分析得到魔芋胶和缓冲液的固液比、酶添加量、反应时间三个因素的优化组合条件;并对产物的抗氧化性能进行了测定。结果:最佳酶解条件为pH6、反应温度为55℃、酶解时间4.2h、固液比1∶1.63、β-甘露聚糖添加量1500U/g;产物对·OH的半抑制率(IC50)为0.4331mg/mL,对O-2·的IC50为15.7mg/mL;其还原能力为同浓度下抗坏血酸(V C)的73.82%。结论:在优化条件下魔芋胶水解率为52.67%,与预测值近似,优化结果的可信度较高具有现实意义;该工艺下的魔芋葡甘低聚糖具有良好的抗氧化能力。

燕麦及其制品β-葡聚糖含量测定方法比较

为了准确测定燕麦及其制品中β-葡聚糖的含量,筛选品质更为突出的燕麦品质提供实验依据,分析比较了测定β-葡聚糖的多种方法。分别用刚果红法、酶法和荧光法测定了国内11种燕麦的β-葡聚糖含量,并分析了3种方法之间的相关性。结果表明,3种测定方法所得结果不一致,但其之间具有较好的线性关系,刚果红法与酶法的相关系数为0.9921,刚果红法与荧光法之间的相关系数则为0.9837,而酶法与荧光法之间的相关系数则达0.9914。

响应面法优化青稞β-葡聚糖提取条件的研究

在青稞β-葡聚糖的提取体系中,利用响应面法对在单因素实验基础上选取的乙醇回流时间、水提时间、水提温度、醇析体积比四个主要因素,以青稞β-葡聚糖得率为响应值,利用Box-Behnken中心组合实验和设计相应面分析法对其工艺进行了优化。青稞β-葡聚糖最优提取条件为乙醇回流时间3h,水提时间2.5h,水提温度85℃,醇析体积5倍于提取液。此工艺条件下提取青稞β-葡聚糖得率为7.75%,回归模型的预测值7.81%。