BTH处理诱导葡萄悬浮细胞防卫反应对其蔗糖代谢的影响

【目的】为研究BTH处理诱导的葡萄悬浮细胞防卫反应对细胞蔗糖代谢的影响。【方法】以‘巨峰’葡萄(Vitis vinifera L.×V.labrusca L.‘Kyoho’)悬浮细胞为试材,将悬浮细胞继代培养一次后在其B5液体培养基中添加BTH,使培养液中BTH浓度达到0.3 mmol·L-1,随后振荡培养15 d。培养期间每隔3 d测定细胞生长量、蔗糖代谢酶活性以及H2O2、植保素单体、尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和可溶性糖组分含量。【结果】0.3 mmol·L-1BTH处理对葡萄悬浮细胞生长无明显促进作用,但可诱导细胞内信号分子H2O2的迸发以及促进细胞中植保素白藜芦醇和白藜芦醇脱氢二聚体的积累,从而有效提高细胞防卫能力;同时,BTH处理可有限抑制葡萄细胞悬浮培养期间SPS和SS1(蔗糖合酶合成方向)活性的上升并提高SS2(蔗糖合酶分解方向)活性,从而使经BTH处理的葡萄悬浮细胞内蔗糖含量明显低于而果糖和UDPG含量却显著高于对照水平。【结论】BTH诱导的葡萄悬浮细胞的SAR反应可明显影响细胞中蔗糖代谢酶活性的平衡,减慢蔗糖合成速率并降解蔗糖以为植保素的合成提供底物UDPG,从而引起细胞中可溶性糖含量的变化。

响应面法优化超声波辅助提取葡萄悬浮细胞花色苷

采用响应面法对葡萄悬浮细胞花色苷的提取工艺参数进行优化。在单因素实验基础上,选取酸化乙醇浓度(含体积分数为0.1%的盐酸)、超声功率、提取时间和提取温度为自变量,以花色苷含量为响应值,利用Box-Behnken中心组合设计原理和响应面分析法,研究各自变量及其交互作用对花色苷含量的影响,并优化提取工艺。结果表明,提取的最佳工艺条件为:料液比1∶9、酸化乙醇浓度85%、超声功率300W、提取时间38min、提取温度42℃。在此条件下获得的花色苷提取产量预测值为3.96mg/L,与实测值3.93mg/L相符。超声波技术适用于葡萄悬浮细胞花色苷的提取,所拟合的统计模型可信度高。本研究结果对工厂化生产葡萄花色苷的研究具有较好的借鉴意义。