蓝玉簪龙胆扦插繁殖初探

本研究旨在筛选蓝玉簪龙胆扦插繁殖的最优前处理方案。设置不同的IBA浓度对不同部位的插穗进行处理后扦插繁殖,通过其生根数、生根率和生根时间选择出最优的插穗材料和插穗前处理浓度。结果表明:以未形成花芽的侧枝作为插穗,100 mg/kg的IBA处理后平均生根数最多和生根率最高。从生根时间上来看,20 mg/L的IBA处理生后平均生根时间最短,其中以主枝作为插穗比侧枝的生根时间更短。

蓝玉簪龙胆治疗慢性支气管炎小鼠有效组分研究

目的:通过比较蓝玉簪龙胆醇提物各极性组分对慢性支气管炎小鼠的治疗效果,筛选出蓝玉簪龙胆治疗慢性支气管炎的有效组分。方法:乙醇浸渍提取蓝玉簪龙胆,提取液浓缩并经石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到极性不同的5部分产物。昆明小鼠分为10组,除正常组外诱导成慢性支气管炎模型,并于造模成功后给药治疗。检测各组小鼠肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)的水平变化,及应用HE染色观察各组小鼠肺组织病理学变化。结果:与模型组比较,正丁醇、水层组动物肺组织T-AOC活性显著升高(P<0.01);乙酸乙酯、正丁醇组动物肺组织SOD活性显著升高(P<0.05或P<0.01),乙酸乙酯组、正丁醇组大鼠血清TNF-α、IL-10水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。HE染色病理切片表明,经蓝玉簪龙胆各极性组分治疗后,乙酸乙酯、正丁醇提取物治疗组小鼠慢性支气管炎气道损伤显著改善。结论:蓝玉簪龙胆治疗慢性支气管炎的活性成分在乙酸乙酯、正丁醇提取物中含量较高,可对这2个组分作进一步的分离筛选研究。

蓝玉簪龙胆提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗菌作用的实验研究

目的研究蓝玉簪龙胆对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体内外抗菌活性。方法体外实验部分:蓝玉簪龙胆分别以乙醇、氯仿、正丁醇、蒸馏水提取,得到极性不同的4部分产物,利用肉汤稀释法测定其对MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的最低抑菌浓度(MIC);体内实验部分:采用腹腔注射MRSA法建立小鼠感染模型,分别给予蓝玉簪龙胆水提液高、中、低剂量,银黄胶囊治疗15 d,并与模型对照组比较,观察存活率。结果体外实验:蓝玉簪龙胆各极性组分对MRSA和MSSA菌株均有不同程度的抑菌作用,其中正丁醇组分抑菌作用最强,其次为乙醇、水层组分;体内试验:除了蓝玉簪龙胆大剂量组,其余各治疗组存活率均高于模型对照组,而蓝玉簪龙胆中剂量组存活率最高。结论蓝玉簪龙胆对MRSA和MSSA均具有一定的抗菌作用,而且敏感性差异无显著性;对MRSA感染小鼠有一定治疗作用。

蓝玉簪龙胆中苷类成分的研究

目的：研究蓝玉簪龙胆Gentiana veitchiorum乙醇提取物中的苷类成分。方法：通过色谱技术进行分离，利用质谱、核磁共振等波谱技术鉴定化合物的结构。结果：从蓝玉簪龙胆的花中分离得到5个苷类成分，分别鉴定为落干酸（1），龙胆苦苷（2），异荭草素3’-甲基醚（3），异牡荆苷（4），异荭草素（5）。结论：化合物1—5为首次从该植物中分离得到。

藏药粗茎秦艽、蓝玉簪龙胆的生药学鉴定

采用原植物、性状、显微、薄层鉴定的方法对藏药粗茎秦艽、蓝玉簪龙胆进行系统的生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。结果表明:通过原植物、性状、显微、薄层色谱图研究能够很好地鉴定原植物。

蓝玉簪龙胆茎段的组织培养技术

采用西藏著名野生花卉蓝玉簪龙胆茎段为组织培养材料、通过多次试验后确定，蓝玉簪龙胆的启动培养中适宜的培养基为ＭＳ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ、＋ＢＡ０．４～０．５ｍｇ／Ｌ、或者为ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ；继代培养阶段的适宜培养基为ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ；生根阶段的适宜培养基为１／２ＭＳ＋ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．５ ｍｇ／Ｌ。为蓝玉簪龙胆在组培条件下大量繁殖幼苗提供了条件，使蓝玉簪龙胆资源得到了有效保护和科学利用。

蓝玉簪龙胆对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化的治疗研究

目的观察蓝玉簪龙胆抗实验性大鼠肝纤维化的作用和可能的作用机理。方法30只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、二甲基亚硝胺(DMN)模型组、蓝玉簪龙胆组、强的松组和蓝玉簪龙胆+强的松组。除正常组外,各组大鼠均腹腔注射DMN,建立大鼠肝纤维化模型。造模的同时,各组给予相应的药物进行灌胃治疗,1次/d,共4周。正常组大鼠及DMN模型组灌胃生理盐水。检测血清中谷丙转氨酶和透明质酸,肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、单胺氧化酶和丙二醛水平。病理学观察苏木素-伊红(HE)和MASSON染色切片,光镜下观察。结果和DMN组相比蓝玉簪龙胆能明显降低DMN诱导的实验性肝纤维化大鼠肝组织中的MAO及MDA含量,升高SOD及GSH的含量;HE和MASSON染色观察到肝纤维化程度改善。结论蓝玉簪龙胆具有预防DMN诱导的肝纤维化作用,可能与它调节体内的脂质过氧化,抑制肝星状细胞(hepatic satellite cells,HSC)活化作用有关。

高速逆流色谱法一次性分离制备藏药蓝玉簪龙胆中的三个化合物

目的:通过高速逆流色谱法(HSCCC)从藏药材蓝玉簪龙胆中分离制备得到三个高纯度化合物.方法:选择乙酸乙酯-正丁醇-水(4:0.5:5,v/v/v)为二相溶剂系统,上下两相分别作为固定相、流动相,主机转速设置为900 r/min,流动相溶剂流速为2 m L/min,紫外检测波长为254 nm,柱温为20℃.所采集的组分减压浓缩后烘干得到龙胆苦苷、异荭草素、异牡荆苷,应用ESI-MS/MS分析鉴定,并用HPLC测定其质量分数.结果:在260 min内可一步纯化150 mg藏药材蓝玉簪龙胆水粗提物中的龙胆苦苷、异荭草素、异牡荆苷,三者完全分离,纯度分别达到98.2%、94.5%、96.0%.结论:利用高速逆流色谱法可快速、简单、高效地富集蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷、异荭草素、异牡荆苷三种化合物.

蓝玉簪龙胆挥发油化学成分气相色谱-质谱联用分析

目的研究蓝玉簪龙胆挥发油的化学成分。方法采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术和NIST质谱库对蓝玉簪龙胆挥发油的化学成分进行分析和鉴定,用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对含量。结果鉴定了其中83个成分,占挥发油总量的69.22%。结论从该植物挥发油中首次发现83个成分,并进行了分析和鉴定。

蓝玉簪龙胆提取液抗呼吸道合胞病毒的初步实验研究

目的:观察蓝玉簪龙胆水煎液及正丁醇、乙酸乙酯、氯仿提取液在体内外的抗呼吸道合胞病毒(RSV)作用。方法:通过观察细胞病变效应(CPE)和MTT比色,评价不同浓度的蓝玉簪龙胆提取液抑制RSV感染HEP-2细胞的病变作用;通过HE染色和免疫荧光染色,评价蓝玉簪龙胆水煎液对RSV感染小鼠肺组织炎性病变抑制效果。结果:体外实验结果与病毒对照组相比,蓝玉簪龙胆水煎液及正丁醇、乙酸乙酯、氯仿提取液分别最高可使RSV感染细胞后活力升至77.3%±7.1%5、8.4%±6.5%、50.4%±3.8%、47.5%±5.2%;体内实验结果与病毒对照组相比,蓝玉簪龙胆水煎液治疗组炎症反应明显轻于病毒对照组;免疫荧光染色示RSV感染小鼠成功。结论:蓝玉簪龙胆不同浓度提取液均可抑制RSV在细胞和动物模型所致病变。

正交试验法优选蓝玉簪龙胆提取工艺

目的研究蓝玉簪龙胆水煎煮工艺,优选最佳水提工艺条件。方法采用正交试验法,以出膏率和龙胆苦苷含量为检测指标,用正交试验考察3种因素(加水量、煎煮次数、煎煮时间)对其含量的影响。结果蓝玉簪龙胆的最佳水提工艺条件为:加20倍量水,煎煮3次,每次1.5h。结论本实验为蓝玉簪龙胆药材及制剂的研究奠定了初步基础。

蓝玉簪龙胆的生态学研究

从蓝玉簪龙胆的功效、分布、生活习性及生长条件等方面对蓝玉簪龙胆进行了介绍,为该药材的栽培种植提供可靠的理论依据,保证药材的质量,最终为进一步开发利用这一藏药提供一定的研究基础。

蓝玉簪龙胆茎段组织培养技术的研究

本试验采用西藏著名野生花卉蓝玉簪龙胆茎段为组织培养材料，通过多次试验后确定：蓝玉簪龙胆的启动培养中适宜的培养基为；MS＋NAA0．5（mg/1，激素单位下同）＋BA0．5－1．0，每茎段平均分化形成4．2个芽；诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+BA0．5＋NAA0．5－1．0；生根阶段的适宜培养基为1／2MS＋BA0．1＋IBA0．5。该技术为蓝玉簪龙胆在组培条件下大量繁殖幼苗提供了条件，也为有效保护和科学利用蓝玉簪龙胆资源提供了条件。

蓝玉簪龙胆提取物在护肤品中的应用

本文选取了西藏蓝玉簪龙胆提取物作为供试物,研究其抑菌能力强弱。以菌大肠杆菌(G-)、金黄色葡萄球菌(G+)和黑曲霉菌作为供试菌,检测蓝花龙胆提取物的抑菌活性。研究发现:蓝花龙胆提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑制作用,对黑曲霉抑菌效果不显著。本研究设计了保湿水和保湿乳两种不同基质的护肤产品基础配方,将提取物在护肤产品中进行应用研究,研究其在护肤产品中的配伍稳定性。结果显示,蓝玉簪龙胆提取物的护肤产品对化妆品中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制效果。

蓝玉簪龙胆花提取物在爽口液中的应用研究

本课题以西藏山南市错那县蓝玉簪龙胆花为原料,通过固液浸提法提取其中有效成分,采用体外抑菌试验评价其抑菌作用,结果显示该龙胆花提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最为显著,MIC的值为99.3 mg/L,;对大肠杆菌(MIC 225.5 mg/L)和白色念珠菌(126.8 mg/L)的抑制作用次之;对沙门氏菌和志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用不明显,MIC均大于250mg/L。将龙胆花提取物应用于爽口液配方中,通过单因素试验,确定了蓝花龙胆提取物、乙醇、丙三醇、枸橼酸、薄荷油、糖精以及氯化钠的添加量;在单因素实验的基础上进行正交试验,确定了产品的最佳配方:龙胆花提取2%,丙三醇8%,乙醇15%,乙酸钠3%,薄荷油0.1%,乳化剂1.8%,发泡剂1.5%,余量为去离子水。

响应面试验优化蓝玉簪龙胆花漱口剂配方的研究

以西藏蓝玉簪龙胆花的提取物等为原料,配制了一款蓝花龙胆提取物漱口水,在单因素试验的基础上,采用响应面分析进行条件优化,以感官评价为指标,探讨了蓝玉簪龙胆花提取物、酒精、薄荷及尿素的添加量对其的影响,优化了配制条件。通过响应面试验,确定了本款漱口水配制的最优条件为:提取物为2.1%,薄荷为0.2%,酒精为15.7%,尿素为16.4%,在此条件下的感官评分达到了为92.5分。

HPLC法测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷含量

目的:测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷的含量。方法:供试品用甲醇超声提取30min,滤过,取续滤液作为供试品溶液,经高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱:Inertsil ODS-sp(5um,4.6mm×150mm);流动相:甲醇:水(36:73);检测波长:270nm;流速:1.0ml/min;柱温:25℃。结果:蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷与其他组分分离良好。保留时间为17.1min。龙胆苦苷对照品线性范围1.68-8.40μg,r=0.9993。结论:本法灵敏度高、操作简便、结果准确,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定。

基于高通量测序分析青藏高原特有植物蓝玉簪龙胆(Gentiana veitchiorum)的SSR和SNP特征

利用Illumina HiSeq ^(TM)2500平台对青海省库泽县的蓝玉簪龙胆(Gentiana veitchiorum)进行高通量测序,共得到SSR序列8 588条,对其SSR重复类型进行分析;三核苷酸重复类型所占的比例最大占54.7%(4696);其次是二核苷酸重复类型占41.3%(3543);四核苷酸重复类型,五核苷酸重复类型和六核苷酸重复类型所占的比例较少(共占4%)。在二核苷酸重复类型中AT/TA重复类型所占的比例最大分别为9.85%和9.5%。在微卫星中重复单元的长度大小和重复次数成负相关,并且微卫星的总长度与重复单元的长度成正相关。在蓝玉簪龙胆的花(GP-F)和叶(GP-L)中分别得到253 789和249 417个SNP位点,其中在非编码区上的比例为51.29%和51.96%。分析发现蓝玉簪龙胆SNP位点在编码区中同义转换所占的比例(48.63%和47.96%)要远远高于非同义转换的比例(0.08%和0.08%),可能与功能基因序列相对稳定有关。

西藏蓝玉簪龙胆黄酮的研究进展

蓝玉簪龙胆是西藏地区广泛使用的传统药材,所含化学成分主要包括烯醚萜类、黄酮类、甾体类等。其中的黄酮类化合物作为蓝玉簪龙胆主要活性成分,具有重要的研究价值。

藏药蓝玉簪龙胆的种子萌发和愈伤繁殖特性

【目的】为保护蓝玉簪龙胆的种质资源,探索其人工繁育方法。【方法】试验采用浸种和组织培养技术,通过不同培养基和不同激素的筛选,讨论蓝玉簪龙胆种子萌发以及愈伤组织分化的最佳策略。【结果】蓝玉簪龙胆种子在200 mg/L GA_(3)处理4 h发芽率最高,为44.84%;在不同基本培养基中培养,B5培养基萌发效果最佳,发芽率达53.21%。以B5培养基为基础,向培养基中添加不同浓度的GA_(3)、NAA和6-BA,得到蓝玉簪龙胆种子萌发的最优培养基为:B5+0.5 mg/L GA_(3)+1 mg/L 6-BA,发芽率达66.01%;诱导愈伤组织生长的最适宜培养基为:B5+0.5 mg/L GA_(3)+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,诱导率为34.28%。以愈伤组织生长最适培养基为基础,添加不同浓度6-BA,进一步优化培养基配方,得到最适合蓝玉簪龙胆愈伤组织继代培养的方案:B5+0.5 mg/LGA_(3)+0.5 mg/L NAA+1 mg/L 6-BA。【结论】愈伤组织继代培养方案可以将蓝玉簪龙胆从种子分化成愈伤组织,再分化成幼苗。