虎尾轮根提取物对肾阳虚模型小鼠的影响

目的探讨虎尾轮根不同提取部位对肾阳虚模型小鼠的影响。方法采用氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,对小鼠体征、抗氧化能力、应激能力、睾丸质量进行测定。结果虎尾轮根提取物的总膏、乙酸乙酯部位、正丁醇部位可明显提高小鼠食欲,增加体质量,促进生长发育,增加脾脏、胸腺质量,提高脾脏和胸腺指数,明显减轻肾阳虚小鼠生殖器官萎缩,有明显的抗疲劳作用,可提高小鼠的应激能力。结论虎尾轮根可改善肾阳虚小鼠的生存质量,其乙酸乙酯部位、正丁醇部位是其抗肾阳虚主要的药效部位。

虎尾轮根黄酮类提取物影响结直肠癌细胞SW620增殖、克隆形成、凋亡及PI3K/AKT通路的研究

目的:探讨虎尾轮根黄酮类提取物对体外培养的人结直肠癌细胞SW620增殖、克隆形成、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:用不同质量浓度(0、10、25、50、100、250、500μg/mL)的虎尾轮根黄酮类提取物处理结直肠癌SW620细胞24 h,采用细胞计数(CCK-8)法检测虎尾轮根黄酮类提取物对SW620细胞增殖抑制的影响,筛选半数抑制浓度(IC_(50))作为后续实验干预浓度;实验分为4组,空白对照组、虎尾轮根黄酮类提取物(100μg/mL)组、通路特异性抑制剂LY294002(25μmol/L)组和虎尾轮根黄酮类提取物(100μg/mL)+LY294002(25μmol/L)组。克隆形成实验、流式细胞术和AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测细胞克隆形成、周期进程和凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测增殖细胞核抗原(PCNA)及凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达量,蛋白免疫印迹法(Western blot)分析PI3K/AKT信号通路蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平。结果:虎尾轮根黄酮类提取物可呈浓度依赖性抑制结直肠癌SW620细胞增殖,其干预SW620细胞24 h的IC_(50)为104.5μmol/L。与空白对照组比较,虎尾轮根黄酮类提取物组、LY294002组和虎尾轮根黄酮类提取物+LY294002组细胞克隆形成率显著降低、凋亡率及G_(0)/G_(1)期细胞比例显著升高,PCNA、Bcl-2 mRNA表达显著降低,Bax mRNA表达显著升高,AKT磷酸化水平显著降低(P<0.05);与虎尾轮根黄酮类提取物组及LY294002组比较,虎尾轮根黄酮类提取物+LY294002组上述各指标均显著改善(P<0.05)。结论:虎尾轮根黄酮类提取物可抑制结直肠癌SW620细胞增殖和克隆形成,并诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

虎尾轮根提取物对大黄致脾虚模型小鼠的干预作用研究

目的:研究虎尾轮根提取物对大黄致脾虚模型小鼠的干预作用。方法:采用大黄水煎液灌胃建立小鼠脾虚模型。采用系统溶剂提取法对虎尾轮根进行提取,分离得水饱和正丁醇层,配成高、中、低3个浓度溶液给药。各实验组小鼠给药7 d后,计算小鼠的胸腺指数、脾脏指数,并观察胸腺、脾脏的形态学变化。结果:虎尾轮根提取物各剂量组小鼠的胸腺指数、脾脏指数均明显高于脾虚模型组(P<0.01);胸腺、脾脏的萎缩现象得到改善,淋巴细胞数量增多;能改善其大便软化、畏寒,毛发疏松等症状。结论:虎尾轮根提取物对大黄脾致虚模型小鼠有一定的治疗作用。

虎尾轮根黄酮类化合物对小鼠肝脏功能影响

以小鼠为动物模型,在饲料中添加分离纯化虎尾轮根的黄酮类化合物,研究其对小鼠肝脏功能的影响。取体重为(20±2)g小鼠84只,随机分为6组,即:空白对照组,模型组,阳性对照组即联苯双酯组(150 mg/kg),以及虎尾轮黄酮高、中、低剂量组(450,300,150 mg/kg),连续给药21 d。以四氯化碳(CCl4)进行建模,采集小鼠血清及肝组织匀浆液进行T-AOC、ALB、TP、AST、ALT、MDA、SOD、GSH-Px等指标的检测;取小鼠肝脏进行组织切片观察。结果表明,(1)与模型组比较,虎尾轮黄酮各剂量组均能分别显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地提高小鼠SOD、T-AOC、GSH-Px、ALB、TP水平和降低AST、ALT、MDA水平;(2)各剂量组肉眼观察无明显的病理变化,对各试验组的肝脏组织显微结构进行比较,发现虎尾轮黄酮各剂量组对CCl4引起的肝损伤有不同程度的恢复,保肝护肝作用明显。可见虎尾轮黄酮对小鼠的肝损伤有显著保护作用。

虎尾轮根化学成分及其体外抗肾间质纤维化活性

目的研究虎尾轮根Uraria crinita(L.)Desv.ex DC的化学成分及其体外抗肾间质纤维化活性。方法虎尾轮根乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH⁃20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法进行体外抗肾间质纤维化活性筛选。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为divaricataester A(1)、pyrrolezanthine⁃6⁃ethyl ether(2)、5,7⁃二羟基⁃2′⁃甲氧基⁃3′,4′⁃亚甲基二氧异黄酮(3)、dehydroespeleton(4)、pleuchiol(5)、1,6⁃desoxypipoxide(6)、p⁃coumaroyl⁃β⁃phenethylamine(7)、isolugrandoside(8)、紫苜蓿烷(9)、二氢木豆异黄酮(10)、8⁃O⁃4⁃dehydrodiferulic acid(11)、8,9⁃dehydropellitorine(12)、6⁃O⁃(E)⁃肉桂酰基⁃α/β⁃D⁃吡喃葡萄糖苷(13)、trans⁃3′,4′⁃diacetylkhellacton(14)、3⁃甲氧基⁃4⁃O⁃β⁃D⁃吡喃葡萄糖基苯甲酸甲酯(15)、euparone(16)。化合物5、8对胶原纤维Ⅳ、Ⅲ型前胶原蛋白、层粘连蛋白;化合物11、14对胶原纤维Ⅳ、Ⅲ型前胶原蛋白;化合物2、7对Ⅲ型前胶原蛋白;化合物4、12对胶原纤维Ⅳ、层粘连蛋白均具有体外抑制作用。结论除化合物3外,所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物2、4~5、7~8、11~12、14对肾间质纤维化指标有不同程度的抑制作用。

虎尾轮根提取物对脾虚小鼠的影响

目的:筛选虎尾轮根健脾固胃的有效部位。方法:采用系统溶剂提取法对虎尾轮根进行提取、分离得到不同部位的提取物,并采用大黄所致脾虚模型及饮食失节型脾虚模型,以各组提取液灌胃给药,观察各种提取液对脾虚模型小鼠的影响。结果:虎尾轮根的乙醇提取总浸膏、乙酸乙酯部位、水饱和正丁醇部位可增加脾虚小鼠体质量,提高胸腺和脾脏指数,改善小鼠脾虚症状,具有健脾固胃的功效,对小鼠脾虚模型有较好的抗脾虚作用,其他部位活性较弱。结论:虎尾轮根的总浸膏、乙酸乙酯、水饱和正丁醇部位有较好的抗脾虚的作用。

虎尾轮根化学成分研究

目的研究虎尾轮(Uraria crinita)根的化学成分。方法采用硅胶、大孔树脂、Sephadex LH-20和ODS等色谱手段进行化学成分的分离纯化;依据理化性质、波谱数据和相关文献进行结构鉴定。结果分离并鉴定了14个化合物,分别为β-谷甾醇(β-sitosterol,1),硬脂酸(octadecanoic acid,2),软脂酸(palmitic acid,3),β-胡萝卜苷(β-daucosterol,4),(24R)-5α-豆甾-7,22(E)-二烯-3α-醇[(24R)-stigmast-7,22(E)-dien-3α-ol,5],2-(乙酰胺基)-苯甲酸甲酯[2-(acetylamino)benzoic acid,methyl ester,6],白桦脂醇(betulin,7),间羟基苯甲酸(m-hydroxybenzoic acid,8),5,7-二羟基-2'-甲氧基-3',4'-亚甲基二氧异黄酮(5,7-dihydroxy-2'-methoxy-3',4'-methylenedioxyisoflavanone,9),蔗糖(sucrose,10),槐二醇(sophoradiol,11),染料木素(genistein,12),染料木苷(genistin,13)和水飞蓟宾(silybin,14)。结论化合物5,6,7,8,9,10,11,13,14为首次从虎尾轮根中得到。