食含镉大米黄粉虫的存活率及虫体镉含量研究

黄粉虫(Tenebrio molitor Linnaeus)取食含镉大米后其虫体镉含量关系到该资源昆虫的安全利用和稻米资源的安全有效使用。采用镉含量0.25、0.40、0.79、1.10 mg/kg自然含镉大米饲喂黄粉虫三龄幼虫测定其30 d内的存活率,并将上述自然含镉大米与调制镉含量至0.20、0.40、0.80、1.20 mg/kg含镉大米对比测定了黄粉虫幼虫取食后相应的虫体、虫蜕和空肠3 d后的虫体镉含量,并计算了相应虫体中污染物生物蓄积因子(BAF值)。结果发现,用镉含量0.25、0.40 mg/kg的自然含镉大米饲喂30 d后黄粉虫三龄幼虫存活率与接近不含镉的对照大米饲喂的其三龄幼虫存活率无显著差异,用镉含量0.79、1.10 mg/kg自然含镉大米饲喂30 d时三龄幼虫存活率在87%以上。黄粉虫三龄和六龄幼虫取食镉含量0.25 mg/kg的自然含镉大米和镉含量0.20 mg/kg的调制含镉大米至10 d时,虫体镉含量高于对照大米饲喂相应幼虫虫体镉含量的近10倍,大米中镉含量增大和饲喂时间延长使幼虫体内镉含量相应地显著增加。采用镉含量分别为1.10、1.20 mg/kg自然含镉和调制含镉大米饲喂30 d后三龄幼虫取食体镉含量分别达1.03、1.73 mg/kg,存活幼虫体内镉累积明显。幼虫取食含镉大米相同时间后测得的BAF值随大米中镉含量增加相应变小。黄粉虫幼虫取食含镉大米后镉多数滞留于虫体内,少量进入虫蜕,未检测到经过排泄途径排出。取食镉含量0.40 mg/kg以下的大米后黄粉虫幼虫存活率未受影响,在30 d内大多数(存活率在87%及以上)幼虫个体取食镉含量1.10 mg/kg自然含镉大米可存活、发育、蜕皮、生长等,含镉大米被幼虫取食后镉未经排泄途径排出,幼虫蜕皮会携带部分摄入虫体的镉,饲喂同样镉含量调制含镉大米与自然含镉大米后前者饲喂的黄粉虫体内镉聚集量更多。

敲低多房棘球蚴let-7-5p可抑制BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长

旨在明确敲低多房棘球蚴emu-let-7-5p对小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长的影响。构建表达多房棘球蚴emu-let-7-5p海绵序列的重组腺相关病毒载体,并在293T细胞上验证其抑制效果和特异性。70只清洁级BALB/c小鼠分别经尾静脉注射AAV8-si-let-7-5p、AAV8-control和PBS后两周,每组随机选取2只小鼠分别用Western blot和qRT-PCR分析肝组织中GFP、let-7-5p及其靶基因C/EBP δ的表达。随后,所有小鼠每只腹腔接种1 000个原头蚴,3个月后qRT-PCR检测腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p、C/EBP δ、M1型(IL-1β、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、IL-4和IL-10)相关分子的转录水平,并统计各组小鼠多房棘球蚴的包囊重量和原头蚴数量。结果表明,注射后第15天,AAV8-si-let-7-5p成功靶向小鼠肝脏,并引起emu-let-7-5p的敲低和C/EBP δ的上调表达。感染后3个月,AAV8-si-let-7-5p组小鼠腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p和M2型相关分子Arg-1均显著下调,而C/EBP δ和M1型相关分子IL-1β和iNOS均显著上调。此外,AAV8-si-let-7-5p组IL-4和IL-6下调表达,而IL-10上调表达,且小鼠肝脏包囊重量和原头蚴数量显著低于对照组。敲低多房棘球蚴感染小鼠体内emu-let-7-5p,可促进C/EBP δ的表达,进而抑制M2型极化和虫体生长。

绵羊螨虫病的诊断、虫体检查和防治方法

绵羊螨虫病作为绵羊养殖期间较为常见的一种传染性寄生虫病,在绵羊染病后会表现出脱毛、瘙痒、湿疹性皮炎等症状,严重影响绵羊养殖的经济效益。基于此,本文将结合绵羊螨虫病的病原特征、流行病学、临床症状等进行分析,提出几点高效鉴别虫体的检查措施及防治管理办法,以期能够为绵羊螨虫病提供有效的防治措施。

贵州都匀牛带绦虫亚洲亚种的调查和虫体内元素及氨基酸的检测

目的 了解贵州省都匀市牛带绦虫病的流行因素及病原虫种 ,并对成虫体内氨基酸组分及元素进行检测。 方法 ①对该市河阳乡的米秀村等 6个村寨进行牛带绦虫病流行病学调查 ,对 70名现症患者 (男性 67,女性 3 )的感染原因、临床症状进行了解分析并作驱虫治疗。②对驱出的成虫作形态学鉴定和测量。③采用氨基酸分析仪、原子吸收光谱仪及分子荧光仪等分别测定成虫体内游离氨基酸组分及各种元素的含量。 结果 ①当地牛带绦虫感染主要是因群众喜吃生的或不熟的猪肝引起 ,患者的临床表现以排节片、肛门瘙痒、腹痛、腹泻等为主。 70位有临床症状的成人中 ,有 2 5人驱出成虫 (男性 2 4人 ,女性 1人 )。②成虫外形与牛带绦虫极其相似 ,头节上无顶突及小钩 ;但虫体较短 ,大小在 0 .61～ 2 .5 8m之间 ,节片较薄而且数量少。③检测了成虫的 16种氨基酸及 12种元素。 结论 贵州省都匀有牛带绦虫病局部流行 ,患者的临床表现与传统的牛带绦虫病相似。根据感染原因和对虫体的测量结果 ,认为病原体应当是牛带绦虫亚洲亚种 (Taeniasaginataasiatica)。

竹横锥大象对寄主及虫体挥发物的行为和触角电位反应

为了探明竹横锥大象Cyrtotrachelus buqueti Guerin-Meneville是否存在两性间的引诱作用,以及寄主植物慈竹Neosinocalamus affinis笋对两性行为的影响,采用Y型嗅觉仪测定了竹横锥大象雌、雄成虫对4种虫体及寄主挥发物不同处理(雌、雄成虫,慈竹笋与雌、雄成虫的复合体)的行为反应,测定了触角不同部位对雌雄成虫3种虫体的提取物(整体、鞘翅、后肠)及其与寄主植物挥发物质联合作用的触角电位反应(EAG)。结果表明:雌成虫挥发物对雄虫有较高的引诱活性,对雌虫有驱避作用;雄成虫挥发物对雌虫有一定的引诱作用。雌、雄成虫对虫体与竹笋复合体气味的行为和电生理反应均显著或极显著高于对相应虫体挥发物的反应。经EAG测定,触角各部位对虫体不同部位挥发物的EAG值差异明显,触角端部对虫体与植物挥发性物质的联合作用EAG反应差异极其显著(P<0.01)。竹横锥大象对沾染雌雄成虫虫体提取物的玻璃棒有一定的兴奋表现,雌虫兴奋率为6.67%,雄虫为26.67%。结果提示,竹横锥大象种内存在信息素,雌虫释放的信息素对同类雄虫有很强的引诱作用,而雄虫所释放的信息素对同类雌虫有引诱作用,添加寄主植物能够增强两性间的引诱效果。

猪弓浆虫病的诊治与虫体分离

江西某农场的猪场种猪和肥猪几乎同时暴发以高热为特征的疫病 ,病理变化主要为淋巴结出血、肿大 ,脾脏、肝脏肿大 ,肺炎 ,心脏出血。肺门淋巴结触片见多量弓浆虫滋养体 ,病猪血清的弓浆虫抗原、抗体均为阳性。接种病料的小鼠于接种后 2 5天死亡 ,分离出一株弓浆虫。因此诊断该猪场种猪和肥猪暴发的疫病为弓浆虫病 ,并推测本次弓浆虫病的病原来自饲料中的鱼粉。

松阿扁叶蜂越冬幼虫体内氨基酸含量变化与抗寒性的关系

本文测定了不同时期松阿扁叶蜂Acantholyda posticalis Matsumura越冬幼虫虫体、血淋巴内氨基酸含量,并对影响幼虫抗寒的氨基酸进行了探讨。结果表明:越冬幼虫体内含有常见的17种氨基酸。从越冬初期至越冬期,氨基酸种类并没有发生变化,但各种氨基酸含最变化不同,丙氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸和胱氨酸随着温度的下降呈增加趋势。幼虫虫体氨基酸含量增幅最大的为丙氨酸,比越冬初期增加了28.8％,其次是脯氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸,分别比越冬初期增加了9.4％、6.4％和5.4％,其他氨基酸增加不明显;幼虫血淋巴内氨基酸中的丙氨酸、胱氨酸和谷氨酸含量分别比越冬初期增加了94.6％、80.2％和19.6％。因此认为这些氨基酸与低温抗寒密切相关。

日本血吸虫信号蛋白14-3-3的虫体免疫定位

目的 研究抗重组日本血吸虫信号蛋白 1 4 3 3(rSj1 4 3 3)单克隆抗体对天然Sjl4 3 3的结合活性 ,观察Sj1 4 3 3在虫体内的定位。 方法 从阳性钉螺体内逸出尾蚴 ,感染家兔 ,分别于感染后 1 5d和 4 2d剖杀 ,静脉灌注法收集童虫和成虫制备冰冻切片。利用rSj1 4 3 3单克隆抗体 ,间接免疫荧光法探讨信号蛋白 1 4 3 3虫体内的分布。 结果 免疫荧光染色结果显示 ,rSj1 4 3 3单克隆抗体可特异性地结合天然Sj1 4 3 3抗原表位 ,背景清晰 ,Sj1 4 3 3广泛分布在雌、雄成虫的皮层、皮下层、肌层和实质层 ,前三种组织中特异性荧光呈线状分布 ,实质中特异性荧光弥散 ;童虫中Sj1 4 3 3也广泛的分布在皮层、皮下层、肌层和实质层。 结论 免疫荧光染色成功地确定了Sj1 4 3 3蛋白在成虫和 1

黄褐油葫芦虫体营养成分与发育阶段的相关性研究

对黄褐油葫芦不同发育阶段虫体蛋白质、脂肪和矿物质元素等营养成分进行了测定与分析。结果表明该虫为高蛋白低脂肪昆虫,各发育阶段虫体的蛋白含量平均为15.92%,脂肪含量为5.40%,PG值平均为3.45,蛋白质、脂肪含量随着个体发育逐渐增加,但卵期蛋白含量较高。虫体含有7种主要脂肪酸,不饱和脂肪酸达57.3%,其中亚油酸的含量高达25.47%;富含矿物质元素,其中以Ca,Fe,Zn的含量较高,分别为1164,320.3和107.9μgg。5种脂肪酸和8种矿物质元素含量与发育阶段呈负相关。

二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原的观察

用间接免疫荧光抗体法,对鼠体内两种类型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原做了检测。结果显示两类型童虫与感染同源卫氏并殖吸虫小鼠血清反应后,虫体抗原存在于体表皮层、肠管上皮细胞上;两类型童虫与兔抗鼠红细胞抗体血清反应后,主要在表皮层看到宿主抗原,荧光强度比虫体抗原所示为弱;三倍体型童虫的宿主抗原荧光反应有52.6～60％呈(++),而二倍体型大部只是(+)反应;这种荧光强度的差别在非免疫状态所获的童虫切片上也被看到。

旋毛虫肌幼虫虫体蛋白对小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响

目的探讨旋毛虫肌幼虫虫体蛋白对小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响及其作用的可能机制。方法将H446细胞与0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2 mg/mL虫体蛋白分别培养并设为实验组,不处理的H446细胞设为对照组,采用噻唑兰(MTT)比色法检测旋毛虫肌幼虫虫体蛋白对H446细胞增殖活性的抑制作用;采用流式细胞术(FCM)检测旋毛虫肌幼虫虫体蛋白诱导H446细胞株凋亡的情况;采用Real-timePCR及Western blot法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)和凋亡蛋白酶活化因子(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1)mRNA及蛋白的表达。结果 MTT比色法结果表明虫体蛋白能够抑制H446细胞增殖活性;流式细胞术结果表明虫体蛋白作用于H446细胞24h后,有明显的促凋亡作用;Real-timePCR及Western blot法结果显示,与阴性对照组相比,促凋亡基因Cyt-C和Apaf-1表达均上调。结论旋毛虫肌幼虫虫体蛋白能够抑制H446细胞增殖活性,并诱导细胞凋亡,其作用可能与Cyt-C和Apaf-1表达上调有关。

广西寒武纪三叶虫Dictyella完整虫体的发现及其意义

Dictyella属自 1933年T .Kobayashi建立以来至今未发现完整虫体 ,最近在广西靖西果乐发现的Dic tyellalongispinaZhou的完整虫体标本以及其尾部的内模、外模对其分类位置的确定有重要的意义。依据其面线(为等称虫型面线 )及头鞍、尾部特征 ,把Dictyella归于Asaphacea超科Asaphidae科和Isotelinae亚科较为合适。

中国棉铃虫核型多角体病毒不同基因型的虫体克隆

首次利用虫体克隆技术，对野生型中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶＷ）的不同基因型进行了分离纯化。以较低浓度的ＨａＳＮＰＶＷ感染三龄初中国棉铃虫幼虫，病毒致死幼虫单虫收集，分别提取相应的病毒核酸，进行限制性内切酶分析，得到了ＨａＳＮＰＶ的七个不同基因型（ＨａＳＮＰＶＧ１至Ｇ７），其ＥｃｏＲＩ酶切图谱均不相同。用ＢａｍＨＩ酶切分析，七个基因型的酶切图谱只在一个片段上有显著区别：Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３、Ｇ４ＤＮＡ的ＢａｍＨＩｈ片段大小是３．３０ｋｂ，Ｇ５、Ｇ６的这一片段的大小为３．５ｋｂ，而Ｇ７的这一片段为２．７ｋｂ。结果表明，野生型ＨａＳＮＰＶ至少包含七个不同的基因型。

日本血吸虫虫体抗原导致的保护性免疫及其免疫特征的分析

本实验分别将日本血吸虫(大陆株)雌、雄、合抱虫体可溶性抗原制剂,佐以卡介苗,一次性皮内免疫小鼠。结果,免疫后的小鼠对血吸虫的攻击产生相当的保护作用(保护率分别为42.3％、42.6％和44.5％)。经SDS-PAGE和Western Blot对虫体可溶性抗原进行分析,免疫血清为1:300时,仅有一条蛋白带出现强而明显的反应,其反应蛋白带的分子量为94/90kD。

卡氏肺孢子虫虫体负荷与肺损伤的关系研究

为研究卡氏肺孢子虫 (Pneumocystis carinii,PC)虫体负荷与肺损伤的关系 ,采用清洁级 Sprague- Dawley(SD)大鼠 (5 0只 )每周两次皮下注射醋酸可的松 ,连续 8～ 12 wk,建立卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)模型。共计 14只大鼠 PCP诱导成功。测定支气管肺泡灌洗液 (BAL F)细胞计数及分类、总蛋白 (TP)、白蛋白 (AL B)、碱性磷酸酶(AL P)、乳酸脱氢酶 (L DH)、 型胶原酶 (MMP- 2、MMP- 9)等肺损伤的活性指标。并根据病理组织观察计数虫体累及肺泡数多少 ,将 PC虫体负荷分为轻度组 (每 10 0个肺泡中被虫体累及肺泡数 <2 5 % ,A组 ,n=6 ,)和中重度组(每 10 0个肺泡中被虫体累及肺泡数≥ 2 5 % ,B组 ,n=8) ,比较 PC虫体负荷与肺损伤的关系。 6只清洁级 SD大鼠作为正常对照组 (C组 )。结果在 PC虫体负荷中重度组的 BAL F中白细胞总数 (6 .8× 10 6 /L± 1.7× 10 6 /L)较轻度组 (3.8× 10 6 /L± 1.2× 10 6 /L)明显增加 ,但分类差异不明显。中重度组 BAL F中 AL B为 (892 .7± 46 8.9) μg/ml,较轻度组的 (2 6 2 .2± 16 9.3) μg/ml明显为高 (P<0 .0 1) ;正常对照组仅为 (2 6 .3± 2 1.0 ) μg/ml。中重度组 TP为(175 5 .6± 70 5 .6 ) μg/m l、L DH为 (2 5 .8± 5 .5 ) U/dl,显著高于轻度组 [TP(783.5± 5 5 3.0 )

黄褐油葫芦虫体氨基酸组分与发育阶段的相关性分析

对黄褐油葫芦不同发育阶段的氨基酸成分和含量进行了分析。结果表明:黄褐油葫芦富含18种氨基酸,除胱氨酸外,其它氨基酸在若虫期与发育阶段呈正相关,必需氨基酸的含量达45.56%,仅在某些发育阶段体内表现有2种限制性氨基酸,分别为赖氨酸和苏氨酸。黄褐油葫芦属优质蛋白源。

片形吸虫分泌排泄抗原和虫体抗原的分析

用牛源肝片吸虫 (南京 )、牛源大片吸虫 (广西 )和羊源肝片吸虫 (实验感染 )制备可溶性虫体抗原 (BA)和分泌排泄抗原 (ES) ,以 SDS- PAGE电泳分析比较 ,结果显示 ,3株虫体可溶性虫体抗原至少有 2 0条以上的主要蛋白条带 ,分子量集中于 10～ 90 KD之间 ,它们之间无显著差异。而 3株分泌排泄抗原蛋白成分较简单 ,明显可分的条带不超过 5条 ,分子量集中于 10～ 30 KD之间 ,且均拥有 2 6～ 2 8KD的蛋白成分 ,提示该蛋白应为片形吸虫 ES抗原的主要免疫成分。

试论利用青海湖介形虫体长定量恢复湖水古盐度的可靠性

以青海湖东南部湖盆钻取的长475 cm沉积岩芯(QH-2005)为材料,基于6个层位14C年代(4个总有机碳(BOC)样品年代和2个木质素样品年代)建立了晚冰期以来QH-2005钻孔的"深度—年代"模型,并对BOC样品14C年代的硬水效应(732～2475年)进行了校正。挑选沉积物中成年介形虫(Limnocythere inopinata或Eucypris inflata)壳体,对其测定了δ18O值;同时测定了L.inopinata壳体体长,在此基础上利用经验公式定量恢复了青海湖湖水古盐度;此外还对QH-2005钻孔沉积物进行了红度指标的测定。结果表明:QH-2005孔沉积物红度和介形虫壳体δ18O指标所揭示的晚冰期以来气候演化模式与前人研究结果基本一致,而L.inopinata壳体体长定量重建的湖水古盐度只在较长时间尺度上(对应较大的湖水盐度变化)与气候演化模式较为一致,但在千/百年尺度上并不能很好指示气候突变事件,可见青海湖湖水盐度是L.inopinata壳体体长变化的一个重要影响因素,但并非唯一的决定性因素。

日本血吸虫不同时期虫体蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，比较日本血吸虫不同发育时期虫体的蛋白质组成。尾蚴、雌虫、雄虫和虫卵各分离出２６、５１、５６和６０条蛋白带，其主带也不相同。雌、雄虫比较有９处蛋白带呈明显差异。日本血吸虫蛋白质组成有期和性的特异性，尾蚴、雌虫、雄虫和虫卵不仅有各自的特异蛋白，而且还有大量相同蛋白带。

伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株虫体食物泡和疟色素形态及形成的比较

目的:了解伯氏疟原虫氯喹敏感株(N)和抗性株(RC)红内期虫体在抗药性、致病力和诱导免疫应答方面差异的形态学基础。方法:应用超薄切片和透射电镜技术,比较N株和RC株虫体食物泡和疟色素形态及形成的差异。结果:N株滋养体具有单一的、大型的食物泡,疟色素位于滋养体周边的质膜下;在裂体生殖中,疟色素发生聚合和中心化。RC株滋养体食物泡少见,其中多数虫体形成多个微型单层膜的食物泡样结构;疟色素形成明显少于N株滋养体;而且在裂体生殖中,未见疟色素聚合和中心化。结论:伯氏疟原虫RC株长期在氯喹压力下,形成了微型食物泡样结构的摄食方式,具有与N株疟原虫不同的对游离血红素的解毒机制,这可能是伯氏疟原虫N株和RC株在抗药性、致病力和诱导宿主免疫应答方面差异的基础。