硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤中的研究进展

硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)是中枢神经系统细胞外基质的组成部分,在中枢神经系统发育、正常维持及病理过程中都发挥着关键的作用。脊髓损伤后,损伤部位CSPGs的表达明显上调,这主要源于病变部位活化的星形胶质细胞。CSPGs的上调会限制脊髓损伤部位的轴突再生、传导和再髓鞘化,并且可以促进脊髓损伤中的炎症反应,不利于脊髓损伤后神经功能恢复。因此,抑制CSPGs可能是促进脊髓损伤后轴突再生和功能恢复的有效治疗方法。本文对CSPGs在脊髓损伤中的研究现状进行综述。

透明质酸对人髓核细胞聚集蛋白多糖和ADAMTSs表达的影响

目的通过研究透明质酸(hyaluronic acid,HA)对人髓核细胞中聚集蛋白多糖及ADAMTSs(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs)表达的影响,探讨HA调节ADAMTSs减缓椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)的作用机制。方法根据Pfirrmann分级获取正常及退变人椎间盘髓核,采用组织块法培养髓核细胞。将患者手术后的髓核组织标本分为正常组(正常椎间盘)、正常治疗组(正常椎间盘)、退变组(退变椎间盘)、退变治疗组(退变椎间盘),每组各10个标本。正常组和退变组髓核细胞不行HA干预;正常治疗组和退变治疗组在加压前1 h行HA 1 mg/ml干预。各组髓核组织细胞均构建IDD模型。采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组髓核细胞中聚集蛋白多糖和ADAMTSs的mRNA表达;采用Western blot检测ADAMTSs蛋白的表达。结果经HA干预后,正常治疗组及退变治疗组的聚集蛋白多糖mRNA相对表达量均较干预前升高(P均<0.05),ADAMTS-4、ADAMTS-5的mRNA相对表达量均较干预前明显降低(P均<0.05),而ADAMTS-1 mRNA相对表达量较干预前无显著变化(P>0.05)。Western blot结果显示,正常治疗组和退变治疗组髓核细胞ADAMTS-4和ADAMTS-5蛋白水平较干预前明显降低(P均<0.05)。结论HA可能通过减少ADAMTSs的表达,降低其对聚集蛋白多糖的降解,从而减缓IDD。

加味四妙方通过调控蛋白多糖降解治疗大鼠痛风性关节炎的机制研究

目的:基于蛋白多糖降解探讨加味四妙方对单钠尿酸盐(MSU)诱导的大鼠痛风性关节炎(GA)的作用及其作用机制。方法:将6只SD大鼠随机分为空白组和模型组,每组3只,模型组向关节腔内注射0.1 mL MSU溶液(100 mg/mL)建立GA模型,对照组注射等体积生理盐水。24 h后对两组大鼠的滑膜组织进行转录组测序,筛选出差异表达基因。体外培养家兔膝关节软骨细胞,甲苯胺蓝染色、RT-PCR法检测不同代数软骨细胞中蛋白多糖(PGs)的表达。采用Western blot与qRT-PCR法检测不同浓度MSU(200、500、1000µmol/L)处理后MMP-3的蛋白及mRNA表达。将33只SD大鼠随机分为空白组、模型组、给药组,每组11只。膝关节注射0.1 mL MSU溶液(100 mg/mL)制备大鼠痛风性关节炎模型,免疫组化检测滑膜组织中MMP-3的表达,番红固绿染色法检测大鼠关节软骨细胞蛋白多糖的表达。结果:MMP-3是显著上调的差异表达基因,与Jak/STAT信号通路、TGF-β信号通路、趋化因子信号通路、IL-17信号通路等密切相关。体外验证发现,与空白组比较,经250、500、1000µmol/L MSU刺激24 h后,MMP-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与空白组比较,MMP-3 mRNA表达水平经250µmol/L MSU刺激后明显升高(P<0.01),经500、1000µmol/L MSU刺激后其表达显著升高(P<0.001)。与空白组比较,经250、500µmol/L MSU刺激后,各组软骨细胞蛋白多糖表达均显著降低(P<0.05);与250µmol/L MSU组比较,10%和20%加味四妙方含药血清(MSM)组均能有效逆转上述结果(P<0.001)。与500µmol/L MSU组比较,20%MSM能够有效上调蛋白多糖的表达(P<0.05)。与空白组比较,模型组软骨细胞蛋白多糖mRNA表达显著降低(P<0.001);与模型组相比,10%MSM与20%MSM均能有效增加其mRNA表达(P<0.001,P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠膝关节肿胀明显(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组能明显抑制其关节肿胀(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组MMP-3表达增加且关节软骨表层蛋白多糖丢失;与模型组相比,各给药组对上述现象均有明显改善作用。结论:加味四妙方通过抑制MMP-3生成调控蛋白多糖降解从而治疗痛风性关节炎。

XELOX化疗联合肠益方治疗对老年晚期结直肠癌患者生存质量、免疫功能及血浆硫酸类肝素蛋白多糖2、胞裂蛋白9水平的影响

目的观察奥沙利铂联合卡培他滨(XELOX)化疗联合肠益方治疗老年晚期结直肠癌的临床疗效及其对患者生存质量、免疫功能及血浆硫酸类肝素蛋白多糖2(SDC2)、胞裂蛋白9(SEPT9)水平的影响。方法回顾性分析2021年1月至2022年6月期间在海南医学院第二附属医院接受治疗的84例老年晚期结直肠癌患者,按治疗方案不同分为两组,每组各42例。观察组在XELOX化疗基础上结合肠益方治疗,对照组仅予以XELOX化疗治疗,均3周为1个周期,治疗4个周期。比较两组患者的临床疗效、生存质量、免疫功能及SDC2、SEPT9阳性率。结果观察组患者的近期总有效率为78.57%,明显高于对照组(52.38%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者的CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平分别为(40.58±2.51)%、1.68±0.37,均明显高于对照组[(30.22±2.39)%、1.25±0.31],差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后CD8^(+)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者的生存质量改善率为73.81%,明显高于对照组(42.86%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后的SDC2阳性率、SEPT9阳性率分别为9.52%、16.67%,均明显低于对照组(30.95%、38.10%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论XELOX化疗联合肠益方治疗老年晚期结直肠癌可取得满意的近期疗效,有助于改善患者的机体免疫功能,并可提高患者的生存质量,且有助于下调SDC2、SEPT9阳性表达。

血清和房水核心蛋白多糖水平与糖尿病视网膜病变的关系

目的:分析血清和房水核心蛋白多糖(decorin, DCN)水平与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。方法:纳入2020年2月至2021年10月中国人民解放军空军第986医院收治的133例2型糖尿病(T2DM)患者,根据眼科检查结果分为非DR组(n=39)和DR组(n=94),另纳入同期35例白内障患者作为对照组。使用酶联免疫吸附夹心法检测血清和房水DCN水平。结果:DR组血清和房水DCN水平显著高于对照组和非DR组(P<0.001)。经Spearman及多元线性回归分析,房水DCN水平与DM病程及血清DCN水平均呈正相关(r值分别为0.200、0.360,P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,血清DCN水平为T2DM患者发生DR的独立预测因素(P<0.05)。重度非增殖性DR及增殖性DR患者的血清DCN水平[5 811.91(3 815.93,10 613.32)ng·ml-1]显著高于轻度非增殖性DR[3 733.28(2 292.13,4 700.71)ng·ml-1]及中度非增殖性DR患者[4 071.26(2 815.29,6 487.09) ng·ml-1](F=10.861,P<0.001)。经受试者工作特征曲线分析,血清DCN水平诊断T2DM患者是否发生DR的曲线下面积(AUC)为0.732(95%CI:0.645~0.818),同样诊断重度非增殖性DR及增殖性DR的AUC为0.732(95%CI:0.617~0.846)。结论:血清和房水DCN水平与DR的发生和进展呈正相关,血清DCN可作为临床上预测DR发生和进展相关的生物标志物。

治疗关节炎症的新靶点——聚蛋白多糖酶Aggrecanase的研究进展

聚蛋白多糖酶 (aggrecanase)是新发现的降解软骨组织重要成分聚蛋白多糖 (aggrecan)的金属蛋白酶 ,是治疗关节炎的新靶点 .Aggrecanase的发现使得关节炎的治疗有望取得新的突破 ,为能从根本上治疗和预防关节炎提供了基础 .综述了aggrecanase从克隆到对其性质的研究 。

香菇蛋白多糖抗疲劳作用研究

目的 : 研究香菇蛋白多糖的抗疲劳作用。方法 : 香菇蛋白多糖分三个剂量组即 :1 0 mg/(kg·d) ,2 0 mg/(kg·d) ,5 0 mg/(kg·d)给小鼠灌胃 ,对照组为生理盐水。 7d后小鼠游泳造成疲劳 ,测定肌糖原、肝糖原、乳酸脱氢酶 (LDH)、血尿素氮 (BUN)等指标。结果 : 三个剂量组香菇蛋白多糖均能显著提高小鼠体内肌糖原和肝糖原的储备量 ;提高运动前后 LDH活力 ;降低运动后血 BUN的增量 ,加速体内 BUN的清除速率。结论 : 香菇蛋白多糖有抗疲劳作用。 2 0 mg/(kg· d)为最佳用量 ,高剂量无明显优势。

酵母蛋白多糖的分离纯化及鉴定

以热带假丝酵母和八孢裂殖酵母为材料 ,通过化学抽提法得到多糖粗取物 ,经DEAE 纤维素阴离子交换柱分离纯化得到组分Ma和Mb ,经SephadexG 2 0 0柱层析鉴定 ,它们为均一成分 ,分子量分别为 4 38kD和 6 6 7kD ;蛋白分析表明Ma和Mb为蛋白多糖 ;经薄层层析和高压液相分析 ,Ma主要含甘露糖 ,Mb则由甘露糖和半乳糖组成 ,其摩尔比为 1 3∶1 ;氨基酸组成分析表明Ma和Mb含有 4种极性氨基酸和 1 2种非极性氨基酸 ;经邻苯三酚自氧化法检测Ma与Mb均能抑制邻苯三酚自氧化 ,具有体外抗氧化能力。动物实验表明Ma和Mb具有抑制小白鼠肝癌H2 2实体瘤的作用。

桑叶酸性蛋白多糖(APFM)抗氧化作用的实验研究

目的:研究桑叶酸性蛋白多糖(APFM)的抗氧化作用。方法:在化学模拟实验中,测定APFM对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的清除作用,并测定APFM对·OH诱导的小鼠脏器中MDA形成和积累的影响,以及对小鼠肝线粒体肿胀的抑制作用。在小鼠模型实验中,观察和分析APFM对四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠脏器中MDA含量和SOD活性等生理指标的影响。结果表明APFM可以有效清除化学模拟体系中形成的·OH和O2·,抑制小鼠脏器在该体系和糖尿病模型中MDA的形成和积累,明显减轻·OH诱导的小鼠肝线粒体的肿胀和模型小鼠脏器中SOD活性的降低,并都存在明显的量效关系。结论:可以认为APFM具有良好的体外和体内的抗氧化作用,是一种有效的自由基淬灭剂。

骨关节炎SD大鼠关节软骨中蛋白多糖与YKL-40的相关性

目的通过检测骨关节炎(OA)关节软骨中蛋白多糖与YKL-40的表达,探讨OA关节软骨中蛋白多糖与YKL-40的相关性。方法将56只健康SD大鼠分为7组,每组8只。选取一侧膝关节行前交叉韧带离断,建立OA模型。分别于手术当天,术后2、4、8、12、16、20周随机处死1组大鼠,收集不同时间段手术侧关节软骨样本,行番红O/固绿染色和HE染色,根据改良Mankin评分对OA样本进行病理分期。免疫组织化学染色检测蛋白多糖、YKL-40在各期OA关节软骨中的表达,并分析蛋白多糖与YKL-40在OA发病过程中的相关性。结果随着OA病情加重,蛋白多糖表达逐渐减少,YKL-40表达均逐渐增多。在OA早、中、晚期,差异有统计学意义(P<0.05)。蛋白多糖与YKL-40表达呈负相关(P<0.05)。结论随着OA病情加重,软骨蛋白多糖水平进行性减少。蛋白多糖与YKL-40水平呈负相关,可在一定程度上反映关节软骨细胞的去分化程度。

野生松乳菇和野生红汁乳菇蛋白多糖的研究

选用合适的溶剂、方法、条件从野生松乳菇和野生红汁乳菇中提取蛋白多糖。粗多糖经Sevage法脱游离蛋白、DEAE-纤维素柱、SephadexG100柱层析分离、纯化,纯化的蛋白多糖进行紫外及红外光谱分析并测定蛋白质、多糖的含量及抗氧化能力。结果表明,松乳菇蛋白多糖中蛋白质和多糖含量分别为24.53%和68.83%;红汁乳菇中分别为15.53%和66.52%,两蛋白多糖均具有体外抗氧化的能力。经鉴定松乳菇蛋白多糖中单糖组成主要是葡萄糖、果糖和甘露糖,红汁乳菇蛋白多糖中单糖组成主要是葡萄糖、果糖和半乳糖。

颈椎动力平衡失调大鼠椎间盘蛋白多糖的观察

目的探明颈椎动力平衡失调对颈椎间盘退变的影响乃至在颈椎病发病机制中的作用。方法选择了２０只ＳＤ大鼠，通过手术直接损伤其颈背部浅层、深层及全层肌群，建立了大鼠颈椎动力平衡失调程度不同的动物模型，６月后观察各造模组颈椎间盘内蛋白多糖量的变化，并与对照组相比较。结果大鼠颈椎动力平衡失调可影响颈椎间盘内蛋白多糖的代谢，加速其降低，依颈椎动力平衡失调程度不同而有差异，影响程度由轻至重依次为深层、浅层、全层肌群损伤组。结论颈椎动力平衡失调可加速颈椎间盘退变。

软骨保护剂对Hartley豚鼠软骨组织和血清蛋白多糖的影响

目的观察软骨保护剂氨基葡萄糖(GS)和硫酸软骨素(CS)对原发性骨关节炎(OA)模型雌性Hartley豚鼠膝关节软骨组织结构、组织成分以及血清中蛋白多糖含量的影响。方法120只2月龄雌性Hartley豚鼠,随机分为三个试验组和一个空白对照组。三个试验组分别为:1g/kg bw GS组,0.5g/kg bw CS组,GS1g/kg bw+CS0.5g/kg bw联合使用组和蒸馏水对照组。自由饮水给予受试物,连续5个月。分别于给药前,给药1个月、2个月、3个月、4个月和5个月后,每组各取5只动物膝关节进行组织病理学(HE染色)和组织化学(PAS、Alcian Blue、和Mallory染色)检查以及血清蛋白多糖含量的检测。结果病理及组化检查:对照组在实验开始1个月后软骨组织病理积分即不断增高;GS组在给药三个月后才开始上升;CS组在给药的5个月中病理积分增高缓慢,仅第4个月上升较明显;联合使用组在给药的5个月中病理积分一直没有增高,并且给药5个月后的病理积分显著低于同组给药前期的积分。血清蛋白多糖含量:给药4个月后,GS组,CS组和联合使用组血清中蛋白多糖含量下降减少,与各自同期对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。结论氨基葡萄糖和硫酸软骨素对豚鼠原发性软骨组织退化的发生、发展,以及血清蛋白多糖含量的下降均有延缓及抑制作用。并且以两者的联合作用最强,显现出一定的修复作用。

黄附子中性多糖和酸性蛋白多糖的分离、纯化与鉴定

目的 :探讨黄附子中的糖复合物 ,为深入研究和开发利用附子提供有用资料。方法 :采用热水抽提、乙醇沉淀、DEAE C32及SephadexG75柱层析等方法分离黄附子中的糖复合物 ,用酚 硫酸法、Folin 酚法及硫酸 咔唑法测定其糖、蛋白质、葡萄糖醛酸的含量。结果 :从黄附子中得到两种糖复合物 ,一种为中性多糖 ,含量为 3% ;另一种为酸性蛋白多糖 ,含量为 1% (其中糖含量 97%、蛋白质含量 3%、葡萄糖醛酸含量 9% )。结论 :黄附子中两种糖复合物的获得有助于研究附子抗癌、抗衰老和增强免疫机能的作用。

香菇子实体蛋白多糖的分离纯化及组成结构分析

香菇〔Lentinusedodes (Berk .)Sing .〕子实体经热水提取 ,乙醇沉淀 ,得多糖粗品 (Le)。Le脱游离蛋白 ,脱色 ,经DEAE 纤维素柱及纤维素凝胶柱层析分离纯化得到Le 1、Le 2和Le 3 3个级分。经聚丙烯酰胺凝胶电泳和SepharoseCL 6B柱层析鉴定为分子量分布均一的蛋白多糖。凝胶渗透色谱法测得Le 1、Le 2和Le 3分子量分别为 95 40 0 0 ,90 0 0 0和 140 0 0。3个级分均由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸组成 ,气相色谱测得Le 1的阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖的摩尔比为 0 .39∶0 .46∶1.0 0∶0 .93∶14.13;Le 2为 0 .19∶0 .41∶1.0 0∶0 .93∶10 .72 ;Le 3为 0 .31∶0 .47∶1.0 0∶1.15∶8.92。Le 1、Le 2和Le 3葡萄糖醛酸含量 (% )分别为 2 4.10、34.77和 40 .0 5 ,蛋白质含量 (% )分别为 2 .0 1、7.38和 2 5 .31,红外扫描确定Le 1和Le 2的糖苷键为α型 ,Le 3为

香菇子实体蛋白多糖Le-Ⅲ的分离、纯化及其性质研究

香菇子实体经热水提取，乙醇沉淀，脱蛋白，ＤＥＡＥ纤维素柱及纤维素凝胶柱层析得到淡黄色纤维状疏松固体ＬｅⅢ。ＬｅⅢ经聚丙烯酰胺凝胶电泳和ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ柱层析，证明为分子量分布均一的多糖－蛋白质复合物。ＬｅⅢ红外扫描有典型的多糖吸收峰，气相色谱测单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖，摩尔比为０．３１∶０．４７∶１．００∶１．１５∶８．

FGF对兔关节软骨细胞基质胶原和蛋白多糖的影响

关节软骨的损伤与修复是目前骨科临床基础研究的一个重要课题。关节软骨损伤后的修复是极其有限的〔１〕。许多多肽生长因子在关节软骨损伤与修复中起着重要的调节作用，如成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对中胚层来源的细胞...

黄芪甲苷对人膝骨关节炎退变软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达的影响

目的：观察黄芪甲苷对原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞的Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达影响,初步探讨黄芪甲苷防治膝骨关节软骨退变的作用机制。方法：原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞,用第三代细胞进行试验。将5个不同浓度的黄芪甲苷,分别作用于关节软骨细胞4、8、24、48、72h后,采用Real Time-PCR法检测细胞中Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）、蛋白多糖基因（ACAN）的mRNA表达。结果：黄芪甲苷浓度为25~75mmol/L,作用于退变关节软骨细胞24~72h时,软骨细胞Col Ⅱ和ACAN mRNA的表达量均较对照组显著增加。结论：黄芪甲苷可延缓膝骨关节炎关节软骨细胞的退变,促进软骨细胞ColⅡ及ACAN mRNA的表达可能是其作用机制之一。

深层培养云芝菌丝体蛋白多糖的提取及性质

采用水、３％草酸和０．２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠为溶剂分别提取深层培养的云芝〔Ｐｏｌｙｓｔｉｃｔｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ（Ｌ．）Ｆｒ．〕菌丝体蛋白多糖，其得率分别为菌丝体干重的２０％、４９％和１９％。提取的粗多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析进一步分离、纯化，纯化的多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后呈现一个斑点，在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析中有一个对称峰，紫外及红外光谱分析和蛋白质含量测定表明该多糖为蛋白多糖，其蛋白质和多糖含量在水提多糖中分别为１３％和６２％、在酸提多糖中分别为５％和９１％。在碱提多糖中分别为３％和８１％。组成该多糖的主要单糖是葡萄糖和木糖。

大骨节病患者血清对培养软骨细胞蛋白多糖代谢的影响

观察了大骨节病（ＫＢＤ）患者血清对培养软骨细胞蛋白多糖（ＰＧ）合成代谢和分解代谢的影响。实验结果表明：（１）在１０％ＫＢＤ血清存在下培养的静止软骨细胞其ＰＧ合成明显低于非病区健康对照组（Ｐ＜０．０１）；（２）培养液中添加ＫＢＤ血清（５％）培养的肥大软骨细胞其释放到培养液中的ＰＧ含量显著高于非病区健康对照组（Ｐ＜０．０１），其中低分子量ＰＣ的含量增加，缺乏透明质酸结合区，不能与透明质酸结合形成ＰＧ聚合体，以上结果指出ＫＢＤ患者血清中存在干扰ＰＧ代谢的物质。