TLR4/ERK1/2信号通路在不明原因自然流产蜕膜组织中的作用研究

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)和细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在不明原因自然流产患者蜕膜组织中的表达情况及二者的相关性。方法:分别采用免疫组织化学和Western blot技术检测32例不明原因自然流产患者(流产组)和32例正常妊娠者(对照组)蜕膜组织TLR4、ERK1/2和p-ERK1/2的表达差异及表达水平;采用Pearson等级相关性分析流产组TLR4与p-ERK1/2之间的相关性。结果:在免疫组织化学实验中,蜕膜细胞的胞质是TLR4、ERK1/2和p-ERK1/2的表达定位点,且3种蛋白表达有所差异,在流产组TLR4和p-ERK1/2的表达均明显高于对照组(P<0.01),ERK1/2的表达在两组中相较差异无统计学意义(P>0.05),流产组TLR4的蛋白水平高于对照组(P<0.05),p-ERK1/2的蛋白水平明显高于对照组(P<0.01),而ERK1/2的蛋白水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);在流产组TLR4与p-ERK1/2的表达呈正相关(r=0.890,P<0.01)。结论:TLR4/ERK1/2信号通路的异常激活可能是不明原因自然流产发生机制之一。

B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性研究

目的探究B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性。方法选取2017年10月至2019年10月于保定市第二中心医院妇产科分娩的孕妇100例,分为早产组27例和足月顺产组73例,取孕妇阴道拭子和蜕膜间质组织,检测B群链球菌阳性率、蜕膜间质细胞凋亡情况、血清炎性因子水平、NLRP3、Caspase-1、OX40、OX40L、PD-1和PD-L1 mRNA表达,分析B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性。结果2组孕妇B群链球菌阳性率、蜕膜间质细胞凋亡情况、血清炎性因子水平、NLRP3、Caspase-1、OX40、OX40L、PD-1和PD-L1 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。早产组孕妇的GBS阳性率和蜕膜组织细胞凋亡值分别为37.04%和(46.73±4.92),足月顺产组的GBS阳性率和蜕膜组织细胞凋亡值仅为9.59%和(6.03±2.04);早产组孕妇的血清炎性因子水平高于足月顺产组,蜕膜间质细胞凋亡的孕妇血清炎性因子水平高于未凋亡的孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。结论B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号存在相关性,蜕膜间质细胞死亡会引发炎性因子水平升高。

抗磷脂抗体损害子宫蜕膜血管内皮细胞血管形成的机制研究

目的:研究抗磷脂抗体(aPL)对蜕膜组织血管内皮细胞(DVEC)增殖、迁移与血管形成能力的影响。方法:采用细胞免疫荧光鉴定DVEC细胞;CCK-8法检测aPL对DVEC细胞增殖的影响;细胞划痕实验与血管形成实验检测aPL对DVEC细胞迁移与血管生成的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测aPL对DVEC细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响;Western blot检测aPL对DVEC细胞中p-ERK、t-ERK、VEGF与MMP-2蛋白表达的影响。结果:aPL能抑制DVEC细胞增殖、迁移与血管形成能力;aPL能抑制DVEC细胞中p-ERK、VEGF与MMP-2表达水平,加ERK激动剂后DVEC细胞中p-ERK、VEGF与MMP-2表达水平明显升高。结论:aPL可通过调控ERK通路减少DVEC细胞中VEGF与MMP-2表达,进而抑制DVEC的增殖、迁移与血管形成能力。

蜕膜自然杀伤细胞在胎盘形成过程中作用机制的研究进展

蜕膜自然杀伤(dNK)细胞占妊娠早期蜕膜免疫细胞的70%,是蜕膜中发现的最大的淋巴细胞亚群。在胎盘形成过程中,dNK细胞可以通过多种功能促进绒毛外滋养层细胞(EVTs)迁移到母体子宫并改变其血管,其中EVTs对子宫螺旋动脉的重塑对胎盘形成至关重要;dNK细胞还可以通过其细胞毒性作用防御胎盘感染,进而保证胎儿的健康生长和发育。本文就dNK细胞在胎盘形成过程中作用机制的最新研究进展进行简要总结,希望为日后的临床诊断和治疗提供理论依据。

孕早期增塑剂DEHP亚急性暴露影响蜕膜反应并增加流产风险

目的:探究邻苯二甲酸酯类增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)亚急性暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应和流产风险的影响。方法:分别选取300、1000、3000 mg·kg^(-1)·d^(-1)三个浓度梯度的DEHP对CD1小鼠进行经口亚急性暴露28 d。建立DEHP亚急性暴露小鼠早期自然妊娠模型和人工诱导假孕小鼠蜕膜反应模型,分别取自然妊娠第7天子宫组织和人工诱导蜕膜反应小鼠妊娠第8天诱导侧子宫组织,通过苏木精-伊红染色(HE染色)、Masson染色、TUNEL检测、蛋白质印迹法检测DEHP亚急性暴露对小鼠蜕膜反应的影响。构建300 mg·kg^(-1)·d^(-1) DEHP亚急性暴露小鼠自然流产模型,观察妊娠第10天的妊娠结局,探究蜕膜反应受损对小鼠妊娠的影响。结果:与空白对照组比较,DEHP大剂量组受孕率显著性降低(P<0.05);HE染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜基质细胞排列杂乱、细胞核形态不规则、胞浆染色不均、多核细胞数显著降低;Masson染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜组织的胶原纤维分布更多、数量增多、排列杂乱;TUNEL检测显示暴露组蜕膜组织细胞凋亡增加;蛋白质印迹法检测显示暴露组子宫内膜蜕膜反应标志分子BMP2蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);在米非司酮流产刺激下DEHP小剂量组小鼠流产率、胚胎吸收率显著升高,胚胎数、子宫湿重、子宫面积、胎盘湿重显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论:DEHP亚急性暴露导致小鼠子宫内膜蜕膜反应受损加重小鼠妊娠流产风险。

蜕膜自然杀伤细胞在人早孕期基蜕膜和壁蜕膜的分布比较

目的对比蜕膜自然杀伤(decidual natural killer,dNK)细胞在人早孕期同一个体基蜕膜和壁蜕膜中的分布,探讨其在早孕期的可能作用。方法采用HE染色和免疫组织化学方法标记细胞角蛋白7阳性细胞以区分壁蜕膜和基蜕膜,进而检测CD56的表达,从而显示壁蜕膜和基蜕膜中dNK细胞的数量。结果基质中有细胞角蛋白7阳性的绒毛外滋养层细胞的是基蜕膜标记;CD56呈阳性反应的dNK细胞在基蜕膜中的数量明显多于(P<0.01)壁蜕膜。结论蜕膜自然杀伤细胞在人正常早孕蜕膜中的分布不同,其可能与滋养层细胞的侵入有关。

妊娠早期蜕膜甲状腺激素受体信号异常对蜕膜化进程的影响及其与流产发生的关联

目的评估自然流产患者蜕膜血管生成情况,并探讨自然流产患者蜕膜中甲状腺激素受体信号的表达改变。方法收集行人流术的孕妇蜕膜。以自然流产患者作为实验组,以社会因素行人流术的健康孕妇作为对照组,收集两组人群蜕膜组织。采用Western blot方法,检测蜕膜组织中甲状腺激素受体-α(THR-α)和THR-β的核转位情况,同时使用免疫组化法定位蜕膜组织中THR-α和THR-β的分布。Western blot测定蜕膜组织中Ⅱ型脱碘酶(DIO2)的蛋白表达水平,免疫荧光法定位DIO2在蜕膜组织分布并测定荧光强度。使用免疫组化,以CD34作为内皮标志物测定蜕膜血管密度。Western blot检测血管内皮生长因子受体(VEGFR-1)的蛋白表达水平。结果对照组与流产组在年龄、妊娠天数、TSH、T3、T4等基本资料中,差异均无统计学意义。Western blot结果提示THR-α和THR-β蛋白核转位置下降,同时蜕膜组织免疫组化染色结果表明自然流产患者蜕膜甲状腺激素受体核转位减少(P<0.05)。Western blot结果表明流产组DIO2蛋白表达较对照组下降,提示自然流产孕妇蜕膜中,甲状腺激素代谢受到影响;免疫荧光实验结果显示流产组DIO2的荧光强度较对照组减弱(P<0.05)。免疫组化法CD34标记蜕膜小血管的结果显示,在流产组中,CD34^(+)血管数量下降,差异有统计学差异(P<0.05)。Western blot结果提示流产组和对照组中VEGFR-1无明显变化,差异无统计学意义。结论蜕膜局部甲状腺激素受体信号异常可能导致蜕膜血管生成减少,从而参与自然流产的发生。

母胎界面蜕膜巨噬细胞与滋养细胞串扰在自然流产中的研究进展

自然流产发病机制十分复杂,越来越多的研究认为不明原因自然流产与母胎界面免疫微环境有关。蜕膜巨噬细胞(DM)来自于母体,是母胎界面第2丰富的免疫细胞,在重塑螺旋动脉、维持母胎免疫耐受和调节滋养细胞生物学行为中发挥重要作用。滋养细胞是惟一与母体蜕膜直接接触的胚胎细胞,在母胎免疫耐受中起重要作用,具有类似于肿瘤细胞的迁移与侵袭行为。研究证明,DM与滋养细胞存在细胞间的串扰作用,一方面DM影响滋养细胞的迁移与侵袭能力,另一方面,滋养细胞调控DM极化,并且自然流产患者母胎界面DM和滋养细胞之间存在串扰异常。现系统阐述DM和滋养细胞的功能,以及两者间串扰异常对自然流产的影响,为研究母胎界面在自然流产中的发病机制,以及找寻新的治疗靶点提供理论依据。

氟苯尼考影响子宫内膜基质细胞蜕膜化的功能研究

目的:探究氟苯尼考(florfenicol,FLO)暴露对蜕膜化的影响及线粒体在其中发挥的作用。方法:构建FLO暴露的原代小鼠蜕膜基质细胞(mouse decidual stromal cells,mDSCs)模型,经FLO(1.56、6.25、25.00μg/mL)暴露后,采用鬼笔环肽染色法观察细胞形态变化,采用Western blot检测蜕膜化标志分子HOXA10表达以分析FLO对蜕膜化的影响;采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western blot检测细胞增殖标志分子PCNA表达以分析FLO对蜕膜化过程中细胞增殖、凋亡的影响;采用荧光探针Mito-tracker Red观察线粒体形态,采用免疫荧光检测线粒体外膜标志蛋白TOMM20表达并检测ATP水平以分析FLO对蜕膜基质细胞线粒体功能的影响。结果:25.00μg/mL FLO暴露导致细胞形态异常,蜕膜化标志分子HOXA10表达降低(P=0.002),细胞凋亡水平增加,细胞增殖能力降低;进一步发现FLO暴露后线粒体外膜标志蛋白TOMM20表达降低(P=0.010)、线粒体形态异常和ATP水平降低(P=0.003)。结论:25.00μg/mLFLO暴露可能与线粒体功能打破mDSCs的细胞增殖、凋亡平衡,损伤蜕膜化进程有关。

PD-1/PD-L1调控蜕膜巨噬细胞在复发性流产中的相关研究

目的:探讨程序性死亡受体-1(PD-1)及其配体(PD-L1)对蜕膜巨噬细胞(DMs)分化及胚胎发育的影响。方法:选取2021年3月至2024年1月就诊于四川省人民医院的复发性流产患者及正常妊娠人工流产患者各20例,分别作为复发性流产组(RSA组)和正常妊娠组(NP组)。取两组患者绒毛组织及蜕膜组织,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)及蛋白质免疫印迹试验(Western bolt)技术检测绒毛组织中PD-L1 mRNA及蛋白的表达情况;使用流式细胞技术检测DMs类型及其PD-1的表达情况。分组诱导人单核细胞白血病细胞系(THP-1)细胞分化,设立对照组和PD-1阻断组,加入不同试剂诱导分化,测定不同条件下分化后DMs类型占比。结果:两组患者绒毛组织中均表达PD-L1蛋白及mRNA,但RSA组中PD-L1蛋白及mRNA的表达较NP组减少(P<0.05)。两组患者蜕膜组织中均有M1和M2型巨噬细胞,RSA组中M2型/M1型DMs比值较NP组降低(P<0.05),即DMs向M1型极化;PD-1在两组表达差异无统计学意义(P>0.05)。人THP-1细胞经过刺激可分化出M1和M2型巨噬细胞,PD-1阻断后,M2型/M1型巨噬细胞比值降低(P<0.05),即巨噬细胞向M1型极化。结论:复发性流产患者中绒毛组织PD-L1表达下降,DMs向M1型方向极化;阻断PD-1/PD-L1通路可使巨噬细胞更多向M1型方向极化。PD-1/PD-L1通路对巨噬细胞极化方向的影响可能会给研究RSA的发生机制提供新的思路。

BMP4通过调控FOXO1影响RSA患者子宫内膜蜕膜化

目的 探讨骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)在复发性流产(recurrent spontaneous abortion, RSA)患者的人子宫内膜基质细胞(human endometrial stromal cells, hESCs)中的表达及对叉头盒转录因子1(forkhead transcription factors, FOXO1)的调控。方法 收集武汉大学人民医院RSA患者和健康对照(healthy control, HC)患者的蜕膜组织,通过免疫组化和RT-qPCR分析蜕膜中BMP4的表达。利用hESC进行体外细胞实验,通过转染慢病毒敲低BMP4,建立RSA细胞模型,蜕膜化后,通过CCK-8实验、倒置显微镜和Western blot法检测各组细胞的增殖、形态及蜕膜化标志基因的表达。验证BMP4敲低是否影响FOXO1表达,并使用FOXO1抑制剂(AS1842856)进行回复实验,CCK-8实验、倒置显微镜和Western blot法检测分析FOXO1与BMP4的上、下游关系。动物试验中,对孕鼠腹腔注射LPS诱导流产,检测BMP4在小鼠蜕膜中的表达,探究BMP4与小鼠流产的关系。结果 与HC组比较,RSA患者的蜕膜中BMP4表达量明显降低,敲低BMP4后,细胞蜕膜化异常,表现为增殖速度上升,细胞形态转变不明显,且蜕膜化标志基因表达下调。FOXO1为BMP4的下游调控分子,敲低BMP4抑制FOXO1表达,且BMP4可通过FOXO1调控蜕膜化,动物模型中,流产孕鼠蜕膜中BMP4表达量及胎盘重量显著降低。结论 BMP4在RSA患者和流产小鼠蜕膜中的表达下调,细胞实验中,BMP4可通过调控FOXO1的表达促进蜕膜化,BMP4异常低表达可能为RSA患者蜕膜化缺陷的原因之一。

养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产小鼠子宫内膜上皮细胞间质转化及蜕膜化的作用研究

目的探讨养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产(RSA)小鼠子宫内膜上皮细胞-间质转化(EMT)及蜕膜化的作用。方法构建肾虚血瘀型RSA小鼠以及正常妊娠小鼠,正常妊娠小鼠分别腹腔注射2 mg·kg^(-1)雷帕霉素(Rapa)溶液或15 mg·kg^(-1)3-甲基腺嘌呤(3-MA)溶液进行干预;另设置相同方法处理的RSA小鼠、Rapa及3-MA干预的小鼠组,并同时灌胃给药浓度为28.08 g·kg^(-1)的养血安胎溶液进行干预,收集小鼠子宫内膜。通过Western blot法测定小鼠子宫内膜EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和Fibronectin的表达,以及蜕膜化相关蛋白BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的表达。结果与正常妊娠组比较,RSA组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著增加,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著降低;Rapa组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著增加,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著降低;3-MA组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,HOXA10的蛋白表达显著增加。与RSA组比较,RSA+养血安胎组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著增加。与Rapa组比较,Rapa+养血安胎组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著增加。结论养血安胎方能够抑制自噬,从而促进妊娠小鼠子宫内膜的EMT及蜕膜化过程,降低流产率。

寿胎丸调控组蛋白修饰对复发性流产小鼠子宫内膜蜕膜化的影响

目的观察寿胎丸对复发性流产(RSA)小鼠子宫内膜蜕膜化的影响,基于组蛋白修饰探讨其治疗RSA的可能作用机制。方法将40只雌性CBA/J小鼠分为正常组、模型组、寿胎丸低剂量组(7.5 g/kg)、寿胎丸高剂量组(15 g/kg)和地屈孕酮组(3 mg/kg),正常组与BALB/C雄性小鼠合笼饲养,其余各组与DBA/2雄性小鼠合笼饲养建立RSA小鼠模型,造模后各给药组灌胃相应药液,正常组和模型组灌胃等体积纯水,连续10 d。观察胚胎情况,计算胚胎丢失率,ELISA检测血清泌乳素(PRL)含量,HE染色观察蜕膜组织形态,RT-PCR检测蜕膜组织PRL mRNA表达,Western blot检测蜕膜组织PRL、H4乙酰化(H4ac)、H3K27乙酰化(H3K27ac)、H3K27三甲基化(H3K27me3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠胚胎丢失率明显升高,血清PRL含量明显减少,蜕膜细胞排列紊乱,出现大面积出血坏死;蜕膜组织PRL mRNA和蛋白表达明显降低,H4ac、H3K27ac蛋白表达明显降低,H3K27me3蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,寿胎丸低、高剂量组和地屈孕酮组小鼠胚胎丢失率明显降低,血清PRL含量明显增加,蜕膜细胞排列紧密,坏死减少,腺体完整;寿胎丸高剂量组和地屈孕酮组小鼠蜕膜组织PRL mRNA和蛋白表达明显升高,H4ac、H3K27ac蛋白表达明显升高,H3K27me3蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论寿胎丸可促进RSA小鼠子宫内膜蜕膜化,其机制与调节子宫内膜基质细胞组蛋白修饰有关。

慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1沉默调控子宫内膜基质细胞蜕膜化与自噬

目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况。从正常妊娠者的子宫内膜组织中分离并鉴定hESCs,将hESCs分为对照组、雌二醇(E_(2))+孕酮(P4)组、短发夹RNA(shRNA,sh)-正常对照(NC)+E_(2)+P4组、sh-SF-1+E_(2)+P4组,进行对应处理后,倒置显微镜下观察hESCs形态变化,Real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、泌乳素(PRL)的mRNA表达水平和蛋白表达水平,流式细胞术测定细胞周期分布,免疫荧光染色观察细胞内自噬标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)表达情况,Western blotting测定细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平。结果EM患者子宫内膜组织中SF-1 mRNA相对表达量和SF-1蛋白阳性率均高于正常妊娠者子宫内膜组织(P<0.05)。与sh-NC+E_(2)+P4组比较,sh-SF-1+E_(2)+P4组细胞多为长梭形,未见明显蜕膜化,IGFBP1、PRL的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例显著减少而S期细胞比例显著增加(P<0.05),细胞内LC3荧光表达增强,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,Beclin-1蛋白相对表达量也显著上调(P<0.05)。结论EM患者子宫内膜组织内SF-1表达升高,通过慢病毒载体介导的SF-1沉默能够抑制hESCs蜕膜化过程,该作用可能与调控细胞自噬水平相关。

泰山磐石散对自然流产模型大鼠子宫蜕膜组织中T-bet/GATA-3的影响

目的 观察泰山磐石散对自然流产模型大鼠子宫蜕膜组织中T盒子转录因子(T-bet)/GATA结合蛋白3(GATA-3)表达量的影响。方法 将15只SPF级雌性妊娠SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组和治疗组,每组5只。空白组于妊娠的第1~11天灌服生理盐水,第6~8天皮下注射生理盐水;模型组于妊娠的第1~11天灌服生理盐水,第6~8天皮下注射0.4 mg/(kg·d)溴隐亭溶液;治疗组于妊娠的第1~11天灌服10 g/(kg·d)泰山磐石散药液,第6~8天皮下注射0.4 mg/(kg·d)溴隐亭溶液。实验期间分别记录3组大鼠妊娠第1天和第11天的体质量,计算3组大鼠体质量增长情况。实验结束次日取材,观察并记录胚胎总数和胚胎吸收数,并计算胚胎吸收率。HE染色观察子宫蜕膜组织形态学的改变;免疫组化法检测3组大鼠子宫蜕膜组织中T-bet和GATA-3蛋白表达水平;Western blot检测3组大鼠子宫蜕膜组织中T-bet和GATA-3的蛋白表达量。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量增加缓慢,胚胎吸收率明显升高,子宫蜕膜组织中T-bet的蛋白表达水平明显升高,GATA-3的蛋白表达水平明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠体质量明显增加,胚胎吸收率明显降低,子宫蜕膜组织中T-bet的蛋白表达水平明显降低,GATA-3的蛋白表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 泰山磐石散可能是通过下调Th1/Th2特异性转录因子T-bet/GATA-3的表达,从而改善胚胎流产情况。

妊娠期卵巢子宫内膜异位囊肿蜕膜化MRI表现2例

病例患者1,女,30岁,发现卵巢囊肿2年,孕17周,2年前发现卵巢巧克力囊肿,定期随访彩超提示卵巢囊肿逐渐增大。实验室检查:CA12587.68U/mL余(-)。

稽留流产患者血清、绒毛与蜕膜组织中SLIT2的表达及临床意义

目的:探讨稽留流产患者血清、绒毛与蜕膜组织中神经导向因子2(SLIT2)表达水平及临床意义。方法:收集2020年10月-2023年10月本院收治的196例稽留流产患者临床资料为稽留流产组,正常早孕终止妊娠者120例为对照组。酶联免疫吸附法检测血清SLIT2水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2 mRNA表达水平;采用Pearson相关分析探讨稽留流产不同标本中SLIT2表达与血清hCG、VEGF、IL-6水平的相关性,受试者工作特性(ROC)曲线评估不同标本中SLIT2对稽留流产的诊断价值。结果:稽留流产组血清SLIT2水平(6.04±1.12ng/ml)、绒毛(0.62±0.16)及蜕膜组织(0.45±0.14)SLIT2 mRNA表达均低于对照组(9.15±1.86ng/ml、1.86±0.33、1.54±0.27),血清绒毛膜促性腺激素(hCG)(41.16±5.23MIU/mD)、血管内皮生长因子(VEGF)(91.05±9.26pg/ml)水平低于对照组(86.54±8.39MIU/mD、124.26±12.73pg/ml),白细胞介素-6(IL-6)(47.51±5.08pg/ml)水平高于对照组(10.37±1.44pg/ml);血清、绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2水平与血清hCG、VEGF水平均呈正相关,与IL-6水平呈负相关(均P<0.05)。血清、绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2诊断稽留流产的曲线下面积(AUC)分别为0.771、0.903、0.865(0.814~0.916),截点值分别为7.59ng/ml、0.99、1.24,特异度分别为57.0%、87.0%、66.9%,灵敏度分别为92.6%、84.7%、92.6%。结论:稽留流产患者血清、绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2水平均降低,且与机体炎症反应、胎盘血管生成有关,有望作为诊断稽留流产的潜在标记物。

伴有慢性子宫内膜炎的不明原因复发性流产患者外周血及子宫蜕膜组织中淋巴细胞亚群变化

目的观察伴有慢性子宫内膜炎(chronic endometritis,CE)的不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)患者外周血及子宫蜕膜组织中淋巴细胞亚群变化。方法150例URSA患者根据是否伴有CE分为URSA伴有CE组36例、单纯URSA组114例,另选择健康早孕妇女30例为对照组,三组患者均行负压电吸清宫术,术前抽取外周静脉血2 mL,术中留取子宫蜕膜组织,采用免疫组化法检测子宫蜕膜组织中CD138、CD8及CD56,采用流式细胞术检测两组外周血B淋巴细胞亚群、T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)亚群。结果URSA伴有CE组、单纯URSA组及对照组外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞亚群及B淋巴细胞亚群比例间差异均无统计学意义。与对照组及单纯URSA组相比,URSA伴有CE组患者子宫蜕膜组织CD138^(+)浆细胞数、CD8^(+)T细胞比例高,CD56^(+)NK细胞比例低(P均<0.05)。结论伴有CE的URSA患者子宫蜕膜组织CD138^(+)浆细胞数量及CD8^(+)T细胞比例高,CD56^(+)NK细胞比例低。子宫蜕膜组织CD138^(+)浆细胞、CD8^(+)T细胞及CD56^(+)NK细胞变化可能在URSA的发生发展中发挥重要作用。

蜕膜组织NF-κB介导趋化因子与细胞因子调控子宫NK功能

目的 探讨人子宫内膜基质细胞(hESC)蜕膜化过程中核因子κB(NF-κB)介导调控趋化因子、细胞因子产生进而影响子宫自然杀伤细胞(uNK)功能。方法 选取2022年10月1日至2023年3月1日在空军军医大学唐都医院妇产科行人工流产术终止妊娠的20名健康孕妇,收集其蜕膜组织并分离纯化出人uNK。将hESC转染siRel A以抑制NF-κB的活性,随后体外诱导蜕膜化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测相关趋化因子、细胞因子的mRNA水平。再转染siRel A的hESC诱导蜕膜化后与人原代uNK共培养,分别收获uNK和细胞上清液,采用流式细胞术检测uNK细胞因子分泌水平,通过体外成管实验、侵袭和划痕实验评估uNK上清体外促血管形成和促滋养层细胞侵袭迁移的能力。结果 转染siRel A后诱导蜕膜化产生的蜕膜基质细胞(DSC)内干扰素γ(IFN-γ)、基质金属蛋白酶(MMP)9、趋化因子CCL2的mRNA表达水平均显著降低(t值分别为3.290、6.415、5.095,P<0.05)。抑制NF-κB活性并诱导蜕膜化产生的DSC与uNK共培养后,抑制了uNK相关因子血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)和IFN-γ的分泌(t值分别为6.641、7.743、8.886,P<0.05)。此外,共培养后产生的uNK上清体外促血管形成能力受损(t值分别为4.629、5.522,P<0.05),并且促滋养层细胞侵袭和迁移能力均显著下降(t值分别为8.329、7.190,P<0.05)。结论 NF-κB调控蜕膜基质细胞趋化因子、细胞因子的表达,进而影响子宫自然杀伤细胞功能。

剖宫产术后子宫瘢痕妊娠患者蜕膜组织中TGF-β1、 CTGF和VEGF表达的研究

目的 通过检测剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)的瘢痕蜕膜组织、宫腔蜕膜组织和剖宫产后正常妊娠的瘢痕蜕膜组织、宫腔蜕膜组织中的转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达,探索CSP的发病机制。方法 选取于贵州医科大学附属医院妇产科早孕行人工流产术后的CSP组蜕膜组织120例,同期行剖宫产的正常妊娠组蜕膜组织120例,用免疫组织化学法观察比较两组蜕膜组织中TGF-β1、CTGF和VEGF相对表达量。结果 CSP组剖宫产瘢痕蜕膜组织TGF-β1、CTGF相对表达量比CSP组宫腔蜕膜组织和正常妊娠组剖宫产瘢痕蜕膜组织更高,差异有统计学意义(P<0.05)。CSP组剖宫产瘢痕蜕膜组织VEGF相对表达量与CSP组宫腔蜕膜组织和正常妊娠组剖宫产瘢痕蜕膜组织比较,差异无统计学意义(P>0.05)。蜕膜组织TGF-β1与CTGF呈正相关(r=0.910,P<0.05),TGF-β1与VEGF无相关性(r=-0.032,P>0.05)。结论 TGF-β1、CTGF在CSP瘢痕部位蜕膜组织中的高表达可能是CSP发生的高危因素,采取措施抑制瘢痕部位TGF-β1、CTGF的产生,为预防CSP的发生开辟新的途径。